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现代食品科技 2014年第12期30卷 68-73,60页

作者：袁林吴清平吴克刚张菊梅莫树平柏建玲广东省微生物研究所广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 广东工业大学轻工化工学院食品科学与工程系广东广州510006

本研究在广东省及其周边地区共11个采样地点采集土壤样品156份,分离得到放线菌1026株。土壤预处理采用碳酸钙富集培养法,分离采用平板稀释法,选取高氏一号合成培养基作为分离培养基,添加50 mg/L重铬酸钾作为抑制剂。初筛采用琼脂块法,... 详细信息

本研究在广东省及其周边地区共11个采样地点采集土壤样品156份,分离得到放线菌1026株。土壤预处理采用碳酸钙富集培养法,分离采用平板稀释法,选取高氏一号合成培养基作为分离培养基,添加50 mg/L重铬酸钾作为抑制剂。初筛采用琼脂块法,选择金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希氏菌、白假丝酵母菌、黑曲霉共5种指示菌进行抑菌试验,共得到95株活性菌株。复筛选择初筛的5种指示菌加上副溶血性弧菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌共8种指示菌,分两级进行复筛:一级复筛仍采用琼脂块,得到19株活性菌株;二级复筛采用牛津杯定量扩散法,得到5株优良菌株。对优良菌株GX-21进行鉴定,通过形态特征观察、培养特性观察、生理生化试验和16S r DNA序列分析,确定菌株GX-21为多产色链霉菌(Streptomyces polychromogenes)。菌株GX-21具有抑菌谱广的特点,对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌均有抑制作用。

关键词：多产色链霉菌抑菌活性土壤放线菌筛选鉴定

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可过滤液体饮料中微生物学检验滤膜法和平板计数法的等效性比较分析

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现代食品科技 2018年第8期34卷 207-212页

作者：周锦祯刘婷婷陈鉴宇郭伟鹏华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省微生物分析检测中心广东省微生物研究所广东广州510070

比较分析滤膜法和平板计数法在检验可过滤饮料中菌落总数、霉菌和酵母计数以及大肠菌群计数微生物指标是否具有等效性。通过预实验结果,采集可过滤液体饮料样品分别加入定量的枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉以及大肠杆菌制备成样品,... 详细信息

比较分析滤膜法和平板计数法在检验可过滤饮料中菌落总数、霉菌和酵母计数以及大肠菌群计数微生物指标是否具有等效性。通过预实验结果,采集可过滤液体饮料样品分别加入定量的枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉以及大肠杆菌制备成样品,分别采用滤膜法与平板计数法分别检测菌落总数、霉菌计数、酵母计数以及大肠菌群计数,参照采用ISO 17994:2014《水质-用两种定量方法对比微生物回收率的基本要求》对滤膜法和平板计数法的检测结果,然后进行数据比较分析,以验证两种方法在可过滤液体饮料微生物学检验中的是否具有等效性。结果表明当取样量为100时,滤膜法和平板计数法在检测可过滤液体饮料微生物学检验中具有等效性。滤膜法与平板计数法应用于可过滤饮料中微生物学指标的检验可考虑相互取代。

关键词：滤膜法平板计数法等效性比较分析

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天然沉香和人工沉香的HPLC指纹图谱分析及比较

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中国药学杂志 2019年第23期54卷 1980-1987页

作者：许凌雯杨思惠陈晓颖周欣章卫民高晓霞广东药科大学药学院广州510006 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070

目的建立沉香HPLC指纹图谱分析方法,并结合醇溶性浸出物与沉香四醇的含量比较分析天然沉香与人工沉香,为科学评价沉香药材品质提供新方法。方法按《中国药典》(2015年版)进行醇溶性浸出物和沉香四醇的含量测定;采用Platisil ODS 98色谱... 详细信息

目的建立沉香HPLC指纹图谱分析方法,并结合醇溶性浸出物与沉香四醇的含量比较分析天然沉香与人工沉香,为科学评价沉香药材品质提供新方法。方法按《中国药典》(2015年版)进行醇溶性浸出物和沉香四醇的含量测定;采用Platisil ODS 98色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%甲酸溶液梯度洗脱,流速0.7 m L·min^-1,检测波长252 nm,柱温31℃,建立沉香HPLC指纹图谱。使用《中药指纹图谱相似度评价系统(2004 A版)》软件建立共有模式,计算图谱相似度,共有峰相对峰面积进行主成分分析。结果13批天然沉香的指纹图谱相似度为0.021~0.856,醇溶性浸出物含量为10.1%~31.0%,沉香四醇含量为0.04%~2.83%。11批人工沉香的指纹图谱相似度为0.079~0.453,醇溶性浸出物含量为10.3%~31.3%,沉香四醇含量为0.14%~1.02%。13批天然沉香和11批人工沉香分别各自聚为两组,对照药材聚在天然沉香组。天然沉香与人工沉香的指纹图谱相似度具有显著性差异(P<0.05),人工沉香指纹图谱相似度与醇溶性浸出物含量呈正相关(P<0.05)。结论HPLC指纹图谱结合主成分分析可简便、快速地区分天然沉香与人工沉香,为全面评价沉香药材品质提供参考。

关键词：沉香高效液相色谱法指纹图谱主成分分析

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食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌污染调查和ERIC-PCR分型研究

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现代食品科技 2014年第6期30卷 294-300页

作者：胡惠娟吴清平张菊梅潘力郭伟鹏王惠贤华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

通过调查全国17个城市中,七大类食品的小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yesinia enterocolitica)污染情况,了解其分布规律与遗传多样性,从而为我国食品中***污染的溯源和控制供相应的数据支持。本研究采用了稍作修改的《食品微生物学检验-小肠结... 详细信息

通过调查全国17个城市中,七大类食品的小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yesinia enterocolitica)污染情况,了解其分布规律与遗传多样性,从而为我国食品中***污染的溯源和控制供相应的数据支持。本研究采用了稍作修改的《食品微生物学检验-小肠结肠炎耶尔森氏菌检验(GB/T 4789.8-2008)》和GB/T4789.8-2003两种方法对食品中***进行检测,同时运用ERIC-PCR技术对分离菌株进行分型研究。研究显示在946份食品样品中检出共50份***阳性样品,总污染率为5.29%。在检出的阳性样品中包括肉与肉制品24份、速冻食品25份和食用菌1份,污染率分别为12.06%、16.89%和0.74%,速冻食品和肉与肉制品是目前我国***污染的主要食品类型。采用GB/T4789.8-2008检出阳性样品25份,检出率为2.64%;采用GB/T4789.8-2003检出34份,检出率为3.59%明显高于GB/T4789.8-2008法。ERIC-PCR指纹图谱进行聚类分析,结果显示72个分离株可分为四簇,主要污染基因型在C簇,初步建立了***的ERIC-PCR指纹图谱数据库。

关键词：食品小肠结肠炎耶尔森氏菌污染率

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我国市售食用菌中金黄色葡萄球菌污染调查、耐药性及其肠毒素基因检测

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食品科学技术学报 2018年第3期36卷 25-32,55页

作者：黄嘉慧吴诗张峰张菊梅吴清平广东省微生物研究所/省部共建华南应用微生物国家重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006

调查了2011—2016年我国市售食用菌中金黄色葡萄球菌的污染情况,并对分离到的相关菌株进行了肠毒素基因的检测和耐药性分析。收集全国39个城市699份市售食用菌,利用定性和定量检测方法,检出金黄色葡萄球菌阳性样品33份,平均污染率4.72%... 详细信息

调查了2011—2016年我国市售食用菌中金黄色葡萄球菌的污染情况,并对分离到的相关菌株进行了肠毒素基因的检测和耐药性分析。收集全国39个城市699份市售食用菌,利用定性和定量检测方法,检出金黄色葡萄球菌阳性样品33份,平均污染率4.72%,污染水平9.75MPN/g。24种抗生素的药敏结果显示,分离株耐药情况严重,对利奈唑胺、利福平敏感,对氨苄西林等22种抗生素都产生不同程度的耐药。7株分离株经表型和分子鉴定确定为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。运用聚合酶链式反应法对分离的39株金黄色葡萄球菌进行了18种肠毒素基因检测,约60%分离株携带4～6种肠毒素基因,携带率最高的肠毒素基因是sei,其次是sem、seg、seq、sec、seb、sen。本研究反映了我国市售食用菌金黄色葡萄球菌污染的潜在风险,相关分离株具毒性潜力,且耐药性严重,应引起重视。

关键词：金黄色葡萄球菌食用菌污染水平肠毒素基因耐药性

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活性炭的筛选及其吸附饮用水中低量溴化物的研究

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现代食品科技 2019年第3期35卷 201-206页

作者：容顺杨秀华郭伟鹏陈维魏琳婷华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省微生物分析检测中心广东省微生物研究所广东广州510070

本文通过研究星光K02活性炭、星光K04活性炭和太西活性炭等六种活性炭对饮用水中低量溴化物的吸附效率,筛选出了吸附效果最佳的太西活性炭。同时探讨了不同的活化方式、不同的吸附时间以及饮用水中不同的p H值对TAC(太西活性炭)吸附饮... 详细信息

本文通过研究星光K02活性炭、星光K04活性炭和太西活性炭等六种活性炭对饮用水中低量溴化物的吸附效率,筛选出了吸附效果最佳的太西活性炭。同时探讨了不同的活化方式、不同的吸附时间以及饮用水中不同的p H值对TAC(太西活性炭)吸附饮用水中低量溴化物(7.50μg/L)效率的影响。实验采用了蒸馏水浸泡和稀盐酸浸泡两种活化方式,用CO_2酸化的方式将饮用水中pH值分别调至6.00、7.00和7.68三个水平,在不同的时间点取样,用离子色谱仪检测其溴化物含量。不同条件下,TAC吸附溴化物效率不同。实验结果表明,用稀盐酸浸泡作为活化方式,同时将饮用水的p H值调至6.00,在实验开始后的两个小时内TAC吸附溴化物效果最佳,能达到85.35%,此时溴化物含量为1.10μg/L,即使在后续的臭氧灭菌阶段,溴离子全部被氧化成溴酸盐,溴酸盐的值会在5μg/L以内,远小于GB 5749-2006和GB 8537-2018中溴酸盐的规定限值(10μg/L),同时,TAC对饮用水中的常量元素钾钠钙镁、微量元素锶及偏硅酸等影响不大(小于10%)。因此,在实际生产中,可先将饮用水中p H值调至6.00,然后采用盐酸溶液预处理后的TAC对饮用水中低量溴离子进行去除。

关键词： TAC(太西活性炭) 溴化物吸附饮用水

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镰刀菌诱导结香对白木香叶内生真菌分布和群落构成的影响研究

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中国中药杂志 2014年第2期39卷 197-203页

作者：高晓霞周伟平王磊章卫民严寒静广东药学院广东广州510006 广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室一省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070

为了研究沉香形成前后白木香叶组织中内生真菌的分布和群落构成,采用石蜡永久制片法观察白木香叶组织显微结构,细胞化学法确定内生真菌的分布。通过改良的CTAB法对白木香进行总DNA提取,利用真核生物通用引物同时对植物和内生真菌rDNA IT... 详细信息

为了研究沉香形成前后白木香叶组织中内生真菌的分布和群落构成,采用石蜡永久制片法观察白木香叶组织显微结构,细胞化学法确定内生真菌的分布。通过改良的CTAB法对白木香进行总DNA提取,利用真核生物通用引物同时对植物和内生真菌rDNA ITS序列进行PCR扩增,构建内生真菌rDNA ITS文库,RFLP分析和序列测定,用PUAP软件进行系统发育分析,构建最大简约树。结果表明:镰刀菌诱导结香前后,白木香内生真菌菌丝主要分布于海绵组织和韧皮部,结香后韧皮部内生真菌菌丝相对丰度明显增大;茎点霉是未结香白木香叶内生真菌优势种群,刺盘孢菌是已结香白木香叶内生真菌优势种群;刺盘孢菌是未结香和已结香白木香唯一共有内生真菌,且丰度差异较大。不依赖分离培养的分子生物学方法可快速直观地用于植物组织内生真菌的鉴定。白木香叶内生真菌具有一定的遗传多样性,沉香形成前后白木香内生真菌群落构成差异较大。

关键词：白木香沉香形成人工造香内生真菌 rDNA ITS

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γ-聚谷氨酸/壳聚糖复合磷酸钙骨水泥制备、表征及性能

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中国组织工程研究 2017年第26期21卷 4185-4191页

作者：疏秀林施庆珊陈铭杰冯劲广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室和省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省广州市510070

背景:骨缺损修复是一个复杂的过程,将成骨因子施加于骨缺损区域以刺激成骨,已被证明有显著的效果。目的:制备γ-聚谷氨酸/壳聚糖复合磷酸钙骨水泥,并观察其理化性质,探索其作为生长因子载体的缓释功能。方法:通过喷雾冷冻干燥法制备γ-... 详细信息

背景:骨缺损修复是一个复杂的过程,将成骨因子施加于骨缺损区域以刺激成骨,已被证明有显著的效果。目的:制备γ-聚谷氨酸/壳聚糖复合磷酸钙骨水泥,并观察其理化性质,探索其作为生长因子载体的缓释功能。方法:通过喷雾冷冻干燥法制备γ-聚谷氨酸/壳聚糖凝胶颗粒,装载重组人骨形态发生蛋白2生长因子,与磷酸钙骨水泥的固相通过湿法预混、研磨和冷冻干燥,按比例添加固化液,注模按压成型,即制备复合磷酸钙骨水泥载体。以磷酸钙骨水泥为空白对照,对该复合载体凝固时间、抗压强度、物相分析、微观表征、体外释放性能及生物相容性等进行观察和分析。结果与结论:(1)γ-聚谷氨酸/壳聚糖的添加未改变磷酸钙骨水泥的理化性质,各组间初凝时间与终凝时间及抗压强度未见明显差异;(2)扫描电子显微镜观察改性后的磷酸钙骨水泥呈片状晶体形态,γ-聚谷氨酸/壳聚糖颗粒均匀分散其中;(3)γ-聚谷氨酸/壳聚糖复合磷酸钙骨水泥能明显促进骨细胞体外增殖;(4)体外模拟实验表明γ-聚谷氨酸/壳聚糖复合磷酸钙骨水泥具有较好的缓释功能。

关键词：生物材料骨生物材料 γ-聚谷氨酸/壳聚糖骨形态发生蛋白2 磷酸钙骨水泥骨组织工程广东省自然科学基金

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化妆品中耐热大肠菌群快速检测方法的研究

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日用化学工业 2019年第6期49卷 410-414页

作者：文霞李彩玲刘静霞杨秀茳张淑瑶谢小保广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室

研究化妆品中耐热大肠菌群快速检测方法。分别采用3M Petrifilm^TM大肠菌群测试片法和环介导等温扩增(Loopmediated isothermal amplification,LAMP)技术检测人工污染化妆品中耐热大肠菌群,并与传统平板检测法进行了比较。结果表明,3M P... 详细信息

研究化妆品中耐热大肠菌群快速检测方法。分别采用3M Petrifilm^TM大肠菌群测试片法和环介导等温扩增(Loopmediated isothermal amplification,LAMP)技术检测人工污染化妆品中耐热大肠菌群,并与传统平板检测法进行了比较。结果表明,3M Petrifilm^TM大肠菌群测试片法与传统平板检测法比较结果无统计学差异,且操作步骤简便;LAMP技术特异性强,灵敏度可达到2.03 μg/L,且耗时短。3M Petrifilm^TM大肠菌群测试片法和LAMP技术均可用于化妆品中耐热大肠菌群的快速检测。

关键词：化妆品大肠菌群测试片环介导等温扩增技术

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紫玉盘内生真菌节菱孢中1个新的异香豆素类化合物

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中草药 2016年第3期47卷 369-373页

作者：李浩华周燕燕陈玉婵孙章华严寒静郭晓玲章卫民广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 广东药学院广东广州510006

目的研究紫玉盘内生真菌节菱孢Arthrinium sp.A092发酵菌丝体的化学成分。方法采用硅胶柱、凝胶柱、HPLC等色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行化合物结构鉴定;以肝癌细胞Hep G-2、乳腺癌细胞MCF-7、大细胞肺癌细胞NCI-H46... 详细信息

目的研究紫玉盘内生真菌节菱孢Arthrinium sp.A092发酵菌丝体的化学成分。方法采用硅胶柱、凝胶柱、HPLC等色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行化合物结构鉴定;以肝癌细胞Hep G-2、乳腺癌细胞MCF-7、大细胞肺癌细胞NCI-H460和神经胶质瘤细胞SF-268为供试细胞株,采用SRB法对化合物进行细胞毒活性测试。结果从节菱孢菌丝体中分离得到10个化合物,分别鉴定为3,4,5-trimethyl-6-methoxy-8-hydroxyisocoumarin（1）、decarboxycitrinone（2）、4-hydroxy-17R-methylincisterol（3）、3-甲氧基-4-羟基苯甲酸（4）、邻苯二甲酸二丁酯（5）、flemingipanic acid（6）、吲哚-3-羧酸（7）、过氧化麦角甾醇（8）、对羟基苯甲酸（9）、4-羟基苯甲醛（10）;化合物3对SF-268和MCF-7的IC50值分别为63.8和57.2μmol/L,化合物8对SF-268、MCF-7和NCI-H460的IC50值分别为50.6、32.3、39.0μmol/L。结论化合物1为新化合物,命名为节菱孢异香豆素A,化合物3～5、7～10均为首次从该属真菌中分离得到;化合物3和8具有一定的细胞毒活性。

关键词：紫玉盘内生真菌节菱孢节菱孢异香豆素A 邻苯二甲酸二丁酯过氧化麦角甾醇 4-羟基苯甲醛细胞毒活性

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