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第十八届全国防霉抗菌技术研讨会

作者：李金玲李文茹谢小保张建设广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广州510070 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广州510070

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)作为引起医院感染的常见条件致病菌,常引起免疫力低下及重症患者发生感染,致死率高.PA易发生变异,可对多种抗生素产生耐药,包括固有耐药、获得性耐药和适应性耐药,给临床工作带来了极大挑战.近... 详细信息

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)作为引起医院感染的常见条件致病菌,常引起免疫力低下及重症患者发生感染,致死率高.PA易发生变异,可对多种抗生素产生耐药,包括固有耐药、获得性耐药和适应性耐药,给临床工作带来了极大挑战.近年来,关于PA异质性耐药的报道也越来越多,异质性耐药是指在体外的药敏实验中,大部分细菌亚群对抗生素表现为敏感,而有一小部分亚群表现为耐药,甚至有极少数的亚群表现出高水平耐药的现象.不同于完全耐药,异质性耐药在临床上不易及时检出,因此会影响选择合适的抗生素实现成功治疗,导致临床应用抗生素的失效,这极大地增加了临床治疗的难度.因此,研究铜绿假单胞菌的耐药以及异质性耐药对于临床治疗细菌感染性疾病具有指导意义,本文就铜绿假单胞菌的耐药与异质性耐药研究的进展进行了综述.

关键词：铜绿假单胞菌耐药异质性耐药机制

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贝类中诺如病毒核酸提取方法的建立

贝类中诺如病毒核酸提取方法的建立

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中国食品科学技术学会第二十一届年会

作者：周立芹林鹏菅露露于萌张德福李学鹏励建荣渤海大学食品科学与工程学院生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心国家鱼糜及鱼糜制品加工技术研发分中心广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台

诺如病毒（Norovirus,NoV）是导致全球非细菌性肠胃炎暴发的主要病原体之一,贝类是其传播的重要载体之一。然而因其病毒含量较低、贝类成分干扰等因素,使得检测贝类中NoV出现假阴性现象。为更好地监测贝类水产品中NoV流行情况,选取可体... 详细信息

诺如病毒（Norovirus,NoV）是导致全球非细菌性肠胃炎暴发的主要病原体之一,贝类是其传播的重要载体之一。然而因其病毒含量较低、贝类成分干扰等因素,使得检测贝类中NoV出现假阴性现象。为更好地监测贝类水产品中NoV流行情况,选取可体外培养的鼠诺如病毒（Murine Norovirus,MNoV）为研究对象,建立提取效率更高的病毒核酸提取方法——FeO磁珠法。首先通过人工污染牡蛎建立贝类污染模型,分别使用磁珠法、TRIzol方法、二氧化硅介质法（ISO 15216-2:2019）及商品化试剂盒提取病毒核酸,并使用实时荧光定量PCR检测方法分析、计算4种方法的病毒回收率。结果表明:磁珠法病毒回收率最高（为56%）,而TRIzol方法病毒回收率为30.5%,二氧化硅介质法病毒回收率为28.5%,商品化试剂盒病毒回收率为48.02%。磁珠法提取病毒核酸耗时最短,减少了有毒溶剂的使用,无毒无害且成本低廉。磁珠法更适用于从贝类水产品中提取微量诺如病毒核酸,且能够有效避免贝类成分的干扰。本研究为诺如病毒核酸的提取提供了新的方法,为今后提取水产品中病毒提供新的研究技术。

关键词：贝类水产品诺如病毒核酸提取磁珠法

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热裂解处理样品-气相色谱-质谱法应用于聚苯乙烯中聚氯乙烯的定性和定量检测

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理化检验（化学分册） 2020年第8期56卷 902-905页

作者：刘桃妹梅承芳曾国驱高亮叶伟广东省微生物研究所广东省微生物分析检测中心广东省科学院华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广州510070

为了间接减少聚氯乙烯(PVC)中添加剂对环境和人体健康的危害,采用热裂解处理样品-气相色谱-质谱法对聚苯乙烯(PS)中的PVC进行了定性和定量检测。称取聚苯乙烯样品1.0mg置于样品舟中,按单击裂解模式在500℃条件下裂解。在裂解过程中,样... 详细信息

为了间接减少聚氯乙烯(PVC)中添加剂对环境和人体健康的危害,采用热裂解处理样品-气相色谱-质谱法对聚苯乙烯(PS)中的PVC进行了定性和定量检测。称取聚苯乙烯样品1.0mg置于样品舟中,按单击裂解模式在500℃条件下裂解。在裂解过程中,样品中的PVC首先脱掉其主链上的HCl,然后主链断裂并环化形成苯、苯乙烯、甲苯、茚、萘、苊、芴、蒽等芳香族化合物,裂解产物通过DB-5MS色谱柱分离,并进入质谱分析,得到各裂解产物的指纹谱图。在PVC阳性样品谱图中所得到的样品的裂解峰以及保留时间与PVC标准品所得的相同,可定性判定样品中存在PVC,且PVC的特征裂解峰的丰度比与PVC标准品的裂解峰的丰度比一致,说明样品中不存在干扰PVC测定的物质,此时,可通过测定裂解产物苯对PVC进行定量测定。用自行配制的工作曲线用样品制作工作曲线,测得PVC裂解产物中苯的峰面积与PVC质量在0.5~50μg之间呈线性关系,其检出限(3S/N)为106mg·kg^-1。对含PVC 20μg的工作曲线用样品测定6次,计算得相对标准偏差(n=6)为3.6%。对9个PVC阳性样品进行回收试验,测得其回收率在84.0%以上。

关键词：热裂解气相色谱-质谱法聚氯乙烯聚苯乙烯

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皱盖假芝多糖抑制乳腺癌细胞功能的研究

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中国食用菌 2020年第12期39卷 92-97,105页

作者：雷苏炜蔡超谢意珍潘鸿辉广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室广东广州510000

为研究皱盖假芝(Amauroderma rude)多糖抑制乳腺癌细胞的效果。用热水浸提法提取皱盖假芝多糖,并进行醇沉和除蛋白,对纯化后的皱盖假芝多糖抗肿瘤活性进行研究,采用MTT法检测皱盖假芝多糖抑制肿瘤细胞增殖能力,Transwell试验观察对肿瘤... 详细信息

为研究皱盖假芝(Amauroderma rude)多糖抑制乳腺癌细胞的效果。用热水浸提法提取皱盖假芝多糖,并进行醇沉和除蛋白,对纯化后的皱盖假芝多糖抗肿瘤活性进行研究,采用MTT法检测皱盖假芝多糖抑制肿瘤细胞增殖能力,Transwell试验观察对肿瘤细胞侵袭影响,利用流式细胞术检测皱盖假芝多糖对细胞周期和凋亡的影响。结果表明,皱盖假芝多糖能显著抑制鼠乳腺癌(4T-1)细胞和人乳腺癌(MDA-MB-231,MB-231)细胞的增殖,并显著抑制4T-1细胞的侵袭和诱导MDA-MB-231细胞凋亡。旨在为皱盖假芝抑制乳腺癌功能提供科学验证,并为抗乳腺癌药物的开发提供参考依据。

关键词：皱盖假芝多糖乳腺癌

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巴戟天内生真菌Diaporthe lithocarpus的次级代谢产物及其细胞毒活性研究

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中药材 2020年第10期43卷 2439-2444页

作者：刘慧波陈玉婵李赛妮刘昭明刘洪新章卫民李冬利五邑大学生物科技与大健康学院广东江门529020 广东省微生物研究所/华南应用微生物国家重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

目的:研究巴戟天内生真菌Diaporthe lithocarpus A740的次级代谢产物及其细胞毒活性。方法:采用正、反相硅胶柱、凝胶柱和高效液相等多种色谱技术对菌株A740的固体发酵产物进行分离纯化,并通过NMR、MS等波谱方法鉴定化合物结构,采用SRB... 详细信息

目的:研究巴戟天内生真菌Diaporthe lithocarpus A740的次级代谢产物及其细胞毒活性。方法:采用正、反相硅胶柱、凝胶柱和高效液相等多种色谱技术对菌株A740的固体发酵产物进行分离纯化,并通过NMR、MS等波谱方法鉴定化合物结构,采用SRB法对得到的单体化合物进行细胞毒活性测试。结果:从菌株A740的发酵产物中分离纯化得到13个化合物,分别鉴定为:2⁃羟基苯乙酸乙酯(1)、4⁃(2⁃羟乙基)苯甲酸(2)、4⁃羟基苯乙酸乙酯(3)、4⁃甲基⁃5,6⁃二氢吡啶⁃2⁃酮(4)、(3R,4R)⁃cis⁃4⁃hydroxy⁃5⁃methylmellein(5)、viridianol 1(6)、5⁃羟基⁃7⁃甲氧基⁃4,6⁃二甲基⁃1⁃(3H)异苯并呋喃酮(7)、phomopene(8)、diaporisoindole B(9)、diaporisoindole A(10)、p⁃苯三醇(11)、异戊二烯基异苯并呋喃A(12)、lithocarin A(13)。结论:其中,化合物1~7为首次从Diaporthe属真菌中分离得到。化合物10、12和13对神经癌细胞(SF⁃268)、人乳腺癌细胞(MCF⁃7)、人肝癌细胞(HepG2)和人肺癌细胞株(A549)四株肿瘤细胞株具有细胞毒活性,其中化合物10对这四种肿瘤细胞株的IC50为23.96~35.19μmol/L。

关键词：巴戟天内生真菌 Diaporthe lithocarpus 次级代谢产物细胞毒活性

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黄美乳菇(红菇目,红菇科),中国首个乳菇属变红乳菇亚属中乳汁变黄的物种(英文)

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菌物学报 2021年第7期40卷 1591-1604页

作者：王振王向华秦位强陈作红邓旺秋张家辉图力古尔吉林农业大学菌物研究所吉林长春130118 中国科学院昆明植物研究所东亚植物多样性与生物地理学重点实验室云南昆明650201 吉首大学张家界校区湖南张家界427000 湖南师范大学生命科学学院湖南长沙411081 广东省微生物培养物收藏与应用重点实验室广东省微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省科学院广东广州510070 西南大学生命科学学院重庆400715

红菇属变红乳菇亚属的乳汁常变为红色,变黄的乳汁较为少见。在中国中南部亚热带壳斗科林下发现了一个乳汁迅速变黄色的物种。这是首次在中国发现的变红乳菇亚属中乳汁变黄的物种,其独特的乳汁、褐色的菌盖、稀疏的菌褶和大的具极高翼状... 详细信息

红菇属变红乳菇亚属的乳汁常变为红色,变黄的乳汁较为少见。在中国中南部亚热带壳斗科林下发现了一个乳汁迅速变黄色的物种。这是首次在中国发现的变红乳菇亚属中乳汁变黄的物种,其独特的乳汁、褐色的菌盖、稀疏的菌褶和大的具极高翼状纹饰的孢子能将其与其他已知种区分开来,在此将其描述为新种,黄美乳菇***。本研究提供了该新种的DNA条形码ITS-LSU区域和形态特征描述,并将其与其他乳汁变黄的物种如马来西亚的***和***进行了对比。这一发现为证实中国乳菇属的亚热带-热带地区与亚洲热带地区的亲缘增加了新的证据。

关键词：物种划分壳斗科林亚热带-热带分类地理分布

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负载ZnO的羧甲基纤维素原位修饰细菌纤维素的合成及其抗菌活性

负载ZnO的羧甲基纤维素原位修饰细菌纤维素的合成及其抗菌活性

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第十八届全国防霉抗菌技术研讨会

作者：冯劲施庆珊谢小保广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070

为了使细菌纤维素(BC)具有抗菌活性,在细菌纤维素(BC)负载了氧化锌(ZnO)纳米颗粒.本研究在发酵培养基中加入羧甲基纤维素(CMC),使发酵得到的BC具有羧基(BC/CMC).将BC/CMC浸渍在醋酸锌溶液中,然后与NaOH和乙二胺溶液反应生成锌盐,制成细... 详细信息

为了使细菌纤维素(BC)具有抗菌活性,在细菌纤维素(BC)负载了氧化锌(ZnO)纳米颗粒.本研究在发酵培养基中加入羧甲基纤维素(CMC),使发酵得到的BC具有羧基(BC/CMC).将BC/CMC浸渍在醋酸锌溶液中,然后与NaOH和乙二胺溶液反应生成锌盐,制成细菌纤维素(BC/CMC)负载氧化锌纳米颗粒(ZnO-BC/CMC).BC/CMC分析的FTIR光谱表明BC/CMC具有羧基.CMC的高取代度(DS)可导致BC/CMC的羧酸盐含量增加.BC/CMC的XRD和SEM结果表明添加的CMC的分子量和DS会影响BC/CMC的结构形貌.X射线衍射分析和紫外-可见吸收光谱证实了BC/CMC(ZnO-BC/CMC)中存在***/CMC中羧基含量越大,ZnO负载量越大,BC/CMC中的分布越分散.然而,BC/CMC中的羧基含量不影响负载的ZnO纳米颗粒的粒径.通过圆盘扩散法,ZnO-BC/CMC具有很强的杀菌作用.该研究为进一步提高BC的抗菌效率及BC的应用提供新思路.

关键词：细菌纤维素氧化锌纳米颗粒羧甲基纤维素抗菌活性

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植物精油的抗菌性能及其应用研究进展

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工业微生物 2021年第5期51卷 53-57页

作者：刘德赞李文茹谢小保仲恺农业工程学院广东广州510225 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070

植物精油是提取于芳香植物不同部位的挥发性油状混合物,其中多种植物精油具有显著而广泛的抑菌作用。随着社会不断发展,植物精油在抑菌领域的研究及其开发利用受到了越来越多的关注,人们越来越倾向于选择绿色、天然的精油类产品。本文... 详细信息

植物精油是提取于芳香植物不同部位的挥发性油状混合物,其中多种植物精油具有显著而广泛的抑菌作用。随着社会不断发展,植物精油在抑菌领域的研究及其开发利用受到了越来越多的关注,人们越来越倾向于选择绿色、天然的精油类产品。本文从植物精油的提取、抗菌优势、抗菌机理、精油应用及其应用展望方面对植物精油进行了综述。

关键词：植物精油防霉机理新型防霉技术

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不同人为干扰下广东和江西地区大型真菌多样性特征研究

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生态科学 2022年第3期41卷 62-71页

作者：李健容裴男才陈言柳胡小康王义平尹小阳何继红武瑞琛宋斌中国科学院华南植物园广州510650 中国林业科学研究院热带林业研究所广州510520 赣南树木园赣州341212 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室菌种保藏与应用重点实验室广州510070

为了进一步掌握我国热带亚热带地区森林微生物资源多样性、区系特征以及与生态环境的响应,拓展森林生物学研究内涵,以广东和江西两个具有不同社会经济发展状况的省份,各选取2个具有不同人为干扰程度的保护区,结合野外调查、标本馆记录... 详细信息

为了进一步掌握我国热带亚热带地区森林微生物资源多样性、区系特征以及与生态环境的响应,拓展森林生物学研究内涵,以广东和江西两个具有不同社会经济发展状况的省份,各选取2个具有不同人为干扰程度的保护区,结合野外调查、标本馆记录和文献统计,分析了大型真菌多样性、区系特征和群落结构特征。结果表明:大型真菌物种多样性随着人为干扰的增强而降低。广东鼎湖山国家级自然保护区407种,其中,食用菌66种,药用菌47种,木腐菌96种,外生菌根菌121种;广东南岭国家级自然保护区574种,其中食用菌206种,药用菌94种,木腐菌180种,外生菌根菌134种;江西九连山国家级自然保护区249种,其中食用菌53种,药用菌52种,外生菌根菌56种,木腐菌104种;江西庐山国家级自然保护区192种,其中食用菌70种,药用菌67种,外生菌根菌64种,木腐菌47种。南岭保护区有优势科19个,鼎湖山保护区有优势科13个,九连山保护区有优势科5个,庐山保护区有优势科5个;四个保护区有相同科的数量为27,约占总科数的36%。大型真菌群落结构也随着人为干扰的增加发生变化,共生菌呈现下降的趋势,木生菌则呈现上升的趋势。在属级区系成分分析中,4个保护区均具有从泛热带向北温带过渡的地理区系特征。经多元线性回归分析,发现大型真菌丰富度与年平均温度、相对湿度的相关性不显著。人为干扰强度对大型真菌物种组成与群落结构具有一定的影响,虽然能够增加木腐真菌的种类和数量,但总体上对大型真菌物种多样性水平会产生负面影响。

关键词：森林微生物非木质林产品区系乡村林业森林保护

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基于环介导等温扩增技术的产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌特异性检测

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现代食品科技 2021年第1期37卷 223-228页

作者：徐晓可郭卉邓梅清张菊梅吴清平丁郁广东岭南职业技术学院健康管理学院广东广州510663 暨南大学理工学院食品科学与工程系广东广州510632 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东广州510070

本研究旨在建立食品中产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌的快速检测方法。基于产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌合成酶基因cesB靶基因,设计4条特异性引物(2条内引物、2条外引物),建立环介导等温扩增技术(LAMP)。然后采用2株产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌、19株蜡... 详细信息

本研究旨在建立食品中产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌的快速检测方法。基于产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌合成酶基因cesB靶基因,设计4条特异性引物(2条内引物、2条外引物),建立环介导等温扩增技术(LAMP)。然后采用2株产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌、19株蜡样芽胞杆菌和41株非蜡样芽胞杆菌验证了该LAMP具有很好的特异性。LAMP检测的灵敏度在DNA水平上达到1.49 pg/μL,纯菌的灵敏度为5×10~3 cfu/mL。人工污染米饭样品,当起始污染量为2 cfu/g时,37℃增菌培养6 h,用试剂盒法和煮沸法提取的DNA,都可以检出产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌。采用此LAMP方法进行了72份实际样品的检测,检出2份产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌阳性样品,与传统方法一致。因此,本研究建立的LAMP检测方法可应用于食品中产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌的快速特异检测。

关键词：产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌 cesB基因 LAMP 食品

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