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微生物学报 2009年第9期49卷 1190-1195页

作者：张培培任随周许玫英孙国萍广东省微生物研究所广州510070 中国科学院南海海洋研究所广州510301 广东省菌种保藏与应用重点实验室广州510070 广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 中国科学院研究生院北京100049

【目的】本文在利用毕赤酵母成功分泌表达高活性三苯基甲烷类染料降解酶TpmD的基础上,研究不同有机溶剂和常见酶抑制剂对纯化后的重组脱色酶TpmD活性的影响。【方法】将毕赤酵母分泌表达的重组酶TpmD经超滤浓缩及镍离子亲和层析柱纯化... 详细信息

【目的】本文在利用毕赤酵母成功分泌表达高活性三苯基甲烷类染料降解酶TpmD的基础上,研究不同有机溶剂和常见酶抑制剂对纯化后的重组脱色酶TpmD活性的影响。【方法】将毕赤酵母分泌表达的重组酶TpmD经超滤浓缩及镍离子亲和层析柱纯化后得到纯化的重组TpmD酶。利用分光光度计法测定其对孔雀石绿脱色活性,并研究了各种有机溶剂和抑制剂对TpmD酶脱色活性的影响。通过脱色过程溶氧测定和全波长扫描分析反映了DTT与NADH作为TpmD辅因子时对孔雀石绿脱色反应的表观区别。【结果】甲醇对酶活性抑制作用较弱,重组酶在甲醇中能维持约90%的活性,乙醇和丙酮则使重组酶活性则迅速丧失。低浓度二甲基亚砜有利于重组酶活性的维持,30%的二甲基亚砜可抑制一半以上酶活性。L-半胱氨酸、叠氮化钠及低浓度的EDTA对重组酶活性影响较小,较高浓度的EDTA才显示较强抑制作用;表面活性剂SDS有强烈的抑制作用,极低的浓度也能完全抑制重组酶活性。抗氧化剂二硫苏糖醇(DTT)对重组脱色酶的作用十分独特,它可替代NADH辅助脱色反应并增加脱色速率,但在反应终点脱色总效率约为NADH作为辅酶时的92%。DTT辅助TpmD脱色孔雀石绿过程中的耗氧情况及脱色产物与NADH作为辅酶时明显不相同。【结论】发现不同有机溶剂和常见抑制剂对重组酶活性的影响存在较大差异,首次证实DTT能辅助TpmD脱色反应,这一脱色反应过程的作用机理与NADH为辅酶催化的反应原理完全不同。

关键词：三苯基甲烷类染料脱色酶TpmD 有机溶剂抑制剂二硫苏糖醇

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脱色希瓦氏菌S12非特异性偶氮还原酶基因表达及特性

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微生物学报 2009年第10期49卷 1323-1331页

作者：陈杏娟许玫英李光飞孙国萍中国科学院南海海洋研究所广州510301 广东省微生物研究所广州510070 广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 中国科学院研究生院北京100049

【目的】对脱色希瓦氏菌S12(Shewanella decolorationisS12)的acpD基因(登录号EF198254)及其表达活性进行研究。【方法】采用DNAMAN软件对该基因进行序列分析。利用PCR技术克隆含原有启动子的目的基因,与pGM-T载体连接后转化仅有微弱偶... 详细信息

【目的】对脱色希瓦氏菌S12(Shewanella decolorationisS12)的acpD基因(登录号EF198254)及其表达活性进行研究。【方法】采用DNAMAN软件对该基因进行序列分析。利用PCR技术克隆含原有启动子的目的基因,与pGM-T载体连接后转化仅有微弱偶氮还原活性的大肠杆菌TOP10(Escherichia coliTOP10)中进行表达。通过分光光度法测定偶氮染料的还原活性。【结果】序列分析表明,该基因编码198个氨基酸残基组成的多肽,与希瓦氏菌ANA-3(***-3)的NAD(P)H-醌氧化还原酶基因(登录号CP000469)、奥柰达希瓦氏菌MR-1(Shewanella oneidensisMR-1)的acpD基因(登录号AE014299)编码多肽的氨基酸序列同源性分别高达97%和96%,与***109中FMN依赖的NADH-偶氮还原酶(登录号NP-415930)氨基酸序列同源性为61%。它们在蛋白质二级结构排列上非常相似,尤其在活性中心FMN的结合位点(L7、L11环和L3环)上十分保守。同时,acpD基因在*** TOP10中的表达赋予了重组菌高效的偶氮还原活性。重组菌完整细胞能快速还原低极性无磺酸基团的甲基红,却不能对强极性多磺酸基团的苋菜红脱色;而当使用细胞粗酶液排除细胞膜屏障以后,强极性多磺酸基团的苋菜红亦能被高效还原。实验中还发现,该酶需要以NADH为电子供体,FMN的添加可显著提高其偶氮还原活性,而氧气的存在则明显抑制其活性。【结论】在***10中表达的偶氮还原酶定位在重组菌胞内,在体内或体外条件下都具有很强的还原不同极性偶氮染料的活性。脱色希瓦氏菌S12的acpD基因表达产物是一种非特异性的FMN依赖型的NADH-偶氮还原酶。该酶以NADH为电子供体,通过FMN结合位点的活性中心把电子传递给偶氮染料,最终实现染料的还原脱色。

关键词：非特异性偶氮还原酶 FMN依赖的NADH-偶氮还原酶脱色希瓦氏菌S12 偶氮还原

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丛枝菌根真菌珠状巨孢囊霉孢子伴生细菌的绿色荧光蛋白标记及定殖分析

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微生物学报 2009年第5期49卷 617-623页

作者：龙良鲲姚青艾云灿朱红惠广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 华南农业大学园艺学院广州510642 中山大学生命科学院广州510275

【目的】分析丛枝菌根(Arbuscualr Mycorrhizal,AM)真菌珠状巨孢囊霉(Gigaspora margarita)MAFF520054孢子伴生细菌的定殖情况,明确其生态位点,以及为进一步分析其种群生态或功能提供信息。【方法】以载体pNF8(gfp-mut1)对6株珠状巨孢囊... 详细信息

【目的】分析丛枝菌根(Arbuscualr Mycorrhizal,AM)真菌珠状巨孢囊霉(Gigaspora margarita)MAFF520054孢子伴生细菌的定殖情况,明确其生态位点,以及为进一步分析其种群生态或功能提供信息。【方法】以载体pNF8(gfp-mut1)对6株珠状巨孢囊霉MAFF520054孢子伴生细菌进行绿色荧光蛋白(GFP)标记,并通过荧光显微镜和平板计数的方法研究标记菌株对真菌宿主的定殖位点和不同条件下的定殖数量动态。【结果】对粘状芽孢杆菌(Peanibacillusspp.)M060106-1和M061122-6、芽孢杆菌(Bacillussp.)M061122-10和短小芽孢杆菌(Brevibacillussp.)M061122-12成功进行了GFP标记,其均具有较好的质粒稳定性,且与出发株的基本性状一致,适合短期内进行环境定殖研究。所有菌株均能定殖珠状巨孢囊霉MAFF520054孢子壁,而M061122-6和M061122-12还能够定殖其菌丝;不同pH值条件下,各菌株定殖珠状巨孢囊霉MAFF520054孢子的数量动态均为先上升后下降,pH值对各菌株的定殖数量有不同的影响;各GFP菌株对低活力的珠状巨孢囊霉孢子定殖数量高于高活力的孢子,且对高活力孢子的定殖数量动态不同。【结论】分离的珠状巨孢囊霉孢子伴生细菌能够重新定殖其孢子,菌株的定殖能力受其特性及外界因子的影响,为进一步分析AM真菌伴生细菌的种群生态及功能提供了信息。

关键词：珠状巨孢囊霉伴生细菌绿色荧光蛋白标记定殖

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鸡粉调味料工业化生产抗结块试验研究

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食品与机械 2009年第5期25卷 157-159,184页

作者：莫树平张菊梅柏建玲吴清平广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 广东环凯微生物科技有限公司广东广州510663

采用静止角度测试法,在工业化条件下进行鸡粉调味料抗结块性能试验。考察了干燥温度、产品粒度、抗结剂添加量及蔗糖粉末添加量对鸡粉调味料抗结块性能的影响,并在单因素试验的基础上进行抗结块正交试验。结果表明,影响产品抗结块性能... 详细信息

采用静止角度测试法,在工业化条件下进行鸡粉调味料抗结块性能试验。考察了干燥温度、产品粒度、抗结剂添加量及蔗糖粉末添加量对鸡粉调味料抗结块性能的影响,并在单因素试验的基础上进行抗结块正交试验。结果表明,影响产品抗结块性能的因素从大到小依此为:蔗糖粉末添加量>产品粒度>干燥温度>抗结剂添加量;最佳条件为:蔗糖粉末添加量4%(W∶W),干燥温度90℃,产品粒度50目,抗结剂添加量0.50%(W∶W)。

关键词：鸡粉调味料抗结块抗结剂蔗糖粉末

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粤北大宝山重金属污染土壤中AM真菌的研究

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华南农业大学学报 2009年第2期30卷 117-120页

作者：龙良鲲姚青黄永恒王燕朱红惠广东省微生物研究所、广东省菌种保藏与应用重点实验室、广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 华南农业大学园艺学院广东广州510642 广东省科技图书馆广东广州510070

从粤北大宝山采集了30份土壤样品及对应的植物根系样品,分析发现,取自污染区的27份土壤样品中,Cu、Zn、Pb和Cd含量不同程度超过国家(二级)标准.对植物根系样品进行染色,观察丛枝菌根(AM)真菌侵染,发现81.5%的污染区根系样品中存在AM真... 详细信息

从粤北大宝山采集了30份土壤样品及对应的植物根系样品,分析发现,取自污染区的27份土壤样品中,Cu、Zn、Pb和Cd含量不同程度超过国家(二级)标准.对植物根系样品进行染色,观察丛枝菌根(AM)真菌侵染,发现81.5%的污染区根系样品中存在AM真菌侵染;土壤样品中含有一定数量的各种AM真菌孢子和AM真菌菌丝.调查结果表明,大宝山重金属污染的土壤中存在着多样性的AM真菌.

关键词：大宝山重金属污染土壤丛枝菌根(AM)真菌

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微生物对三苯基甲烷类染料脱色的研究进展

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微生物学通报 2009年第9期36卷 1410-1417页

作者：张培培任随周许玫英孙国萍中国科学院南海海洋研究所广东广州510301 广东省微生物研究所广东广州510070 广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070 广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 中国科学院研究生院北京100049

三苯基甲烷染料广泛应用于纺织印染、医药、生物染色、造纸、皮革、食品及化妆品等领域,常见的有作为抗菌剂的孔雀石绿和结晶紫等。由于其特殊的化学结构,在环境中较稳定且难以降解脱色,因此其生物脱色降解的研究可为印染废水处理和染... 详细信息

三苯基甲烷染料广泛应用于纺织印染、医药、生物染色、造纸、皮革、食品及化妆品等领域,常见的有作为抗菌剂的孔雀石绿和结晶紫等。由于其特殊的化学结构,在环境中较稳定且难以降解脱色,因此其生物脱色降解的研究可为印染废水处理和染料污染环境的生物修复提供理论依据。本文从细菌、放线菌、真菌及藻类等微生物对三苯基甲烷类染料降解脱色研究新进展做综述。通过分析不同微生物脱色三苯基甲烷类染料的中间产物来探讨其降解机理和降解途径,同时论及功能酶的分离纯化、酶学特性及其编码基因的克隆表达新进展,并分别从基础理论和应用两方面对微生物降解三苯基甲烷类染料未来的研究方向进行了展望。

关键词：三苯基甲烷类染料微生物脱色降解

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番茄菌根化育苗及对青枯病的防治试验

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中国蔬菜 2009年第4期 52-55页

作者：龙良鲲黎志坤姚青王燕朱红惠广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 华南农业大学园艺学院广州510642 广东省科技图书馆广州510070

以丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizal Fungi,AMF)单一菌剂Glomus versiforme(AM-1)和混合菌剂Glomusspp.(AM-2)分别对番茄进行菌根化育苗试验,分析不同基质和接种时期对菌根形成率的影响。结果表明,以果园土与蛭石体积比为3∶1的混... 详细信息

以丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizal Fungi,AMF)单一菌剂Glomus versiforme(AM-1)和混合菌剂Glomusspp.(AM-2)分别对番茄进行菌根化育苗试验,分析不同基质和接种时期对菌根形成率的影响。结果表明,以果园土与蛭石体积比为3∶1的混合物为基质,菌根形成率最高;播种期和一叶期接种对菌根化效果的影响不显著,二叶期接种的菌根形成率显著降低。温室盆栽条件下,菌根化程度高的番茄苗具有较好的延缓青枯病发生的能力,但后期病情仍会加重。

关键词：丛枝菌根真菌番茄菌根化苗青枯病

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食(药)用菌多糖类物质降血糖作用及其机理研究进展

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食用菌学报 2009年第3期16卷 80-86页

作者：吴清平肖春杨小兵张菊梅广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 中国科学院南海海洋研究所广东广州510301 中国科学院研究生院北京100049

综述了食（药）用菌来源的多糖类降血糖活性物质的种类和作用机理,比较了降血糖活性成分对糖尿病模型小鼠的作用。食（药）用菌多糖类物质对糖尿病小鼠的血糖降低率多在20%-65%之间;这些活性物质可以通过升高胰岛素的含量,也可通过调节... 详细信息

综述了食（药）用菌来源的多糖类降血糖活性物质的种类和作用机理,比较了降血糖活性成分对糖尿病模型小鼠的作用。食（药）用菌多糖类物质对糖尿病小鼠的血糖降低率多在20%-65%之间;这些活性物质可以通过升高胰岛素的含量,也可通过调节与糖代谢相关酶的活性而促进葡萄糖的氧化利用,还可通过改善胰岛素抵抗等降低血糖。笔者认为深入研究降血糖活性物质的结构以及构效关系,将有助于食（药）用菌降血糖活性物质的开发应用。

关键词：食(药)用菌多糖降血糖活性降血糖机理

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珠状巨孢囊霉孢子的扫描和透射电镜观察

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华南农业大学学报 2009年第3期30卷 45-48页

作者：龙良鲲姚青艾云灿朱红惠广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 中山大学生命科学学院广东广州510275 华南农业大学园艺学院广东广州510642

对珠状巨孢囊霉Gigaspora margarita孢子壁进行了扫描电镜（SEM）和透射电镜（TEM）观察．SEM观察到孢子外壁有不规则的侵蚀状小孔，且表面附着有多种形态的微生物．TEM观察到整个孢子壁由4层组成．最外层孢壁（I层）厚1．5—1．8μm；... 详细信息

对珠状巨孢囊霉Gigaspora margarita孢子壁进行了扫描电镜（SEM）和透射电镜（TEM）观察．SEM观察到孢子外壁有不规则的侵蚀状小孔，且表面附着有多种形态的微生物．TEM观察到整个孢子壁由4层组成．最外层孢壁（I层）厚1．5—1．8μm；次外层孢壁（Ⅱ层）为条纹状的刚性层，厚0．6～0．8μm；第Ⅲ层孢壁约占整个孢子壁的80％，该层孢壁存在隐约的亚层结构，部分第Ⅲ层孢壁出现侵蚀层，侵蚀层中分布着大量由微小颗粒状生物体聚集成的细胞团；最内层孢壁（Ⅳ层）非常薄，仅0．15～0．20μm，其内侧间隔分布有因内壁加厚形成的乳凸状结构．观察到的与珠状巨孢囊霉孢子壁紧密联系的微生物可能具有特殊的生态功能，值得深入研究．

关键词：丛枝菌根真菌珠状巨孢囊霉超微结构伴生微生物

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饮用水微生物安全风险控制

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食品研究与开发 2009年第11期30卷 188-191页

作者：吴清平张永清张菊梅广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430071 中国科学院研究生院北京100049

归纳国内外饮用水中微生物污染状况及种类,相关饮用水标准中的微生物指标情况,饮用水中污染的微生物及其对人体的危害,以及控制饮用水中微生物污染的方法等方面的研究进展,提出了饮用水微生物安全所面临的挑战与建议,对于保障饮用水微... 详细信息

归纳国内外饮用水中微生物污染状况及种类,相关饮用水标准中的微生物指标情况,饮用水中污染的微生物及其对人体的危害,以及控制饮用水中微生物污染的方法等方面的研究进展,提出了饮用水微生物安全所面临的挑战与建议,对于保障饮用水微生物安全具有重要的现实意义。

关键词：饮用水微生物安全风险控制

来源：评论

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