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春砂仁内生真菌Letendraea helminthicola A696的次级代谢产物研究

天然产物研究与开发 2021年第5期33卷 773-778页

作者：张捷刘洪新刘昭明李赛妮陈玉婵章卫民郭波红广东药科大学药学院广州510006 广东省科学院微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070

研究春砂仁内生真菌Letendraea helminthicola A696的次级代谢产物,采用硅胶柱色谱、ODS反相柱色谱、凝胶柱色谱及高效液相色谱等方法从该菌株的发酵液中分离得到8个化合物,通过理化性质及谱学数据分析,分别鉴定为11-hydroxyl tricinono... 详细信息

研究春砂仁内生真菌Letendraea helminthicola A696的次级代谢产物,采用硅胶柱色谱、ODS反相柱色谱、凝胶柱色谱及高效液相色谱等方法从该菌株的发酵液中分离得到8个化合物,通过理化性质及谱学数据分析,分别鉴定为11-hydroxyl tricinonoic acid(1)、3-(3,5-二叔丁基-4-羟基苯基)丙酸甲酯(2)、gibepyrone F(3)、gibepyrone D(4)、对羟基苯甲醛(5)、对甲氧基苯乙酸(6)、间羟基苯乙酸(7)、麦角甾醇(8),其中化合物1为新化合物,化合物2~8均为首次从Letendraea属真菌中分离得到。选取化合物1~5进行了抗菌和抗肿瘤活性试验,结果表明化合物1~5在100μg/mL浓度下均无抗菌和抗肿瘤活性。

关键词：内生真菌春砂仁 Letendraea helminthicola 次级代谢产物

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华南四省食品中空肠弯曲菌分离株的毒力相关基因分析和ERIC-PCR分型

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微生物学报 2014年第1期54卷 14-23页

作者：郑扬云吴清平吴葵张菊梅郭伟鹏吴克刚广东省微生物研究所、广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地、广东省菌种保藏与应用重点实验室、广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 广东工业大学轻工化工学院广东广州510006 中国科学院南海海洋研究所广东广州510632

【目的】了解空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)在华南四省食品中的污染状况及其遗传多样性,为食源性病原菌的风险监测和控制提供基础数据。【方法】采用传统国标和MPN组合的方法对华南四省市售生鲜禽畜肉及其制品、生食蔬菜、熟食、水... 详细信息

【目的】了解空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)在华南四省食品中的污染状况及其遗传多样性,为食源性病原菌的风险监测和控制提供基础数据。【方法】采用传统国标和MPN组合的方法对华南四省市售生鲜禽畜肉及其制品、生食蔬菜、熟食、水产品、速冻食品、奶制品、食用菌7大类食品进行***污染调查,对分离到的***菌株进行12种毒力相关基因检测分析和ERIC-PCR分型。【结果】2011-2012年共检测样品558份,检出阳性样品14份,检出率2.51%,其中肉与肉制品的检出率达13.2%,污染量达8.77 MPN/g,获得***14株。毒力相关基因分析显示9种毒力相关基因的携带率超过50%,而pldA和wlaN的携带率均为14.3%,virB11的携带率为0。ERIC-PCR分析结果显示15株***可分为3簇共10种基因型,其中簇A中有4株的指纹图谱基本相同。【结论】华南四省中的生鲜禽肉类样品,存在不同程度的空肠弯曲菌污染,尤其是福州的鸭肉样品,其MPN值大于110 MPN/g,应加强生禽肉类的食品安全防控。

关键词：空肠弯曲菌 ERIC-PCR分型毒力相关基因

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中国华南及其周边地区分布的两种鬼笔学名订证

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食用菌学报 2020年第4期27卷 155-163页

作者：李挺李泰辉邓旺秋宋斌华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省微生物研究所广东省科学院广东广州510070

杂色竹荪Phallus multicolor和红鬼笔***一直被认为在中国华南及其周边地区有广泛分布,然而最近笔者利用形态分类学和分子系统学相结合的方法对其进行了研究,发现分布于中国华南及其周边地区所谓的"杂色竹荪***"和"红鬼... 详细信息

杂色竹荪Phallus multicolor和红鬼笔***一直被认为在中国华南及其周边地区有广泛分布,然而最近笔者利用形态分类学和分子系统学相结合的方法对其进行了研究,发现分布于中国华南及其周边地区所谓的"杂色竹荪***"和"红鬼笔***"实际上分别是纯黄竹荪***和细皱鬼笔***,原描述于大洋洲的杂色竹荪***、北美洲的红鬼笔***很可能在中国华南(甚至在全国)并没有自然分布。

关键词：纯黄竹荪细皱鬼笔形态分类分子系统学

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茯砖茶中冠突散囊菌的次级代谢产物及其生物活性研究

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中草药 2013年第14期44卷 1881-1886页

作者：彭晓赟梁法亮李冬利陈玉婵陶美华章卫民赵运林广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070 湖南城市学院化学与环境工程学院黑茶研究所湖南益阳413000

目的研究茯砖茶中冠突散囊菌Eurotium cristatum的次级代谢产物及其生物活性。方法采用正、反相硅胶柱、凝胶柱和薄层制备等色谱方法和重结晶技术进行分离纯化,通过各种波谱技术进行结构鉴定;以3种肿瘤细胞SF-268、MCF-7和NCI-H460为供... 详细信息

目的研究茯砖茶中冠突散囊菌Eurotium cristatum的次级代谢产物及其生物活性。方法采用正、反相硅胶柱、凝胶柱和薄层制备等色谱方法和重结晶技术进行分离纯化,通过各种波谱技术进行结构鉴定;以3种肿瘤细胞SF-268、MCF-7和NCI-H460为供试细胞株,采用SRB法对化合物进行细胞毒活性研究;以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肠炎沙门氏菌肠炎亚种、痢疾志贺氏菌和普通变形杆菌等肠道致病菌为供试细菌,采用MTT法对化合物进行抗菌活性研究。结果从茯砖茶中冠突散囊菌发酵液提取物中分离得到9个化合物,分别鉴定为大黄素甲醚(1)、1,5-二羟基-3-甲氧基-7-甲基蒽醌(2)、灰绿曲霉黄色素(3)、2-(2′,3-环氧基-1′,3′-庚二烯基)-6-羟基-5-(3-甲基-2-丁烯基)苯甲醛(4)、2-(2′,3-环氧基-1′,3′5′-庚三烯基)-6-羟基-5-(3-甲基-2-丁烯基)苯甲醛(5)、2-(3E,5E-庚二烯基)-3,6-二羟基-5-(3-甲基-2-丁烯基)苯甲醛(6)、酪醇(7)、对羟基苯甲酸(8)、苔黑酚(9)。活性测试结果显示化合物3～6对3种肿瘤细胞株有较好的细胞毒活性;除化合物1和6外,其他化合物对普通变形杆菌具有明显的抑制活性,其中化合物9还对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌表现出很好的抑菌效果。结论苯甲醛类化合物是冠突散囊菌的主要代谢产物,化合物7和9为首次从该属真菌中分离得到,化合物2、3、5、6和8均为首次从该真菌中分离得到。

关键词：茯砖茶冠突散囊菌次级代谢产物抗菌活性细胞毒活性苯甲醛苔黑酚

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巴戟天内生真菌Cytospora rhizophorae中ProL蛋白的表达纯化及性质分析

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华南农业大学学报 2020年第4期41卷 82-89页

作者：孔亚丽叶伟李赛妮朱牧孜钟国华章卫民华南农业大学农学院/农业农村部华南作物有害生物综合防治重点实验室/天然农药与化学生物学教育部重点实验室广东广州510642 广东省科学院广东省微生物研究所/华南应用微生物国家重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

【目的】从巴戟天内生真菌Cytospora rhizophorae中克隆proL基因,异源表达ProL蛋白并研究其理化性质,为解析ProL在合成Cytorhizins类新骨架活性化合物途径中的生物学功能奠定基础。【方法】利用PCR技术从***中克隆proL基因,通过同源重... 详细信息

【目的】从巴戟天内生真菌Cytospora rhizophorae中克隆proL基因,异源表达ProL蛋白并研究其理化性质,为解析ProL在合成Cytorhizins类新骨架活性化合物途径中的生物学功能奠定基础。【方法】利用PCR技术从***中克隆proL基因,通过同源重组的方法将proL基因片段插入到pET28a原核表达载体,在大肠埃希菌Escherichia coli中异源表达,使用尿素对ProL蛋白梯度复性,采用SDS-PAGE技术和质谱测序对ProL蛋白进行分析和鉴定,运用生物信息学方法对ProL蛋白的氨基酸序列相似性进行分析,推测其编码蛋白的结构和功能。【结果】克隆得到proL基因的编码序列,开放阅读框全长909 bp,编码303个氨基酸,ProL蛋白分子式为C1495H2320N424O444S13,相对分子质量为33754.22,原子数为4696,等电点为5.69,为酸性蛋白。ProL蛋白在大肠埃希菌中以包涵体的形式大量表达,尿素梯度复性获得了纯度为98.9%的ProL蛋白。生物信息学分析发现ProL氨基酸序列在已知蛋白中与Aspergillus ibericus XP025570169.1的酰胺水解酶2相似性最高,为59.40%,其三维结构模型中包含8个α-螺旋和8个β-折叠,保守氨基酸序列为207~216位。【结论】ProL蛋白属于酰胺水解酶超家族,预测其为一种新颖蛋白,该蛋白可能在生成高度氧化的二苯甲酮类化合物途径中起水解作用。

关键词：巴戟天 Cytospora rhizophorae proL基因克隆表达生物信息学

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防污漆活性物质敌草隆和辣椒素对大型溞的急性和慢性毒性效应

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生态毒理学报 2020年第3期15卷 90-99页

作者：陈进林许玉洁高亮蔡佳宏梁嘉慧余明喧肖亿金陈桂兰冯宝欣霍嘉维梅承芳曾国驱广东省微生物研究所广东省微生物分析检测中心广东省科学院广州510070 华南应用微生物国家重点实验室广州510070 广东省菌种保藏与应用重点实验室广州510070 广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070

敌草隆是一种典型的常用防污漆活性物质,辣椒素是一种新型的天然防污漆活性物质。为比较两者对水生甲壳动物的急性和慢性毒性,以大型溞(Daphnia magna)为受试生物,通过急性毒性实验和慢性毒性实验,研究敌草隆和辣椒素对大型溞的致死性... 详细信息

敌草隆是一种典型的常用防污漆活性物质,辣椒素是一种新型的天然防污漆活性物质。为比较两者对水生甲壳动物的急性和慢性毒性,以大型溞(Daphnia magna)为受试生物,通过急性毒性实验和慢性毒性实验,研究敌草隆和辣椒素对大型溞的致死性和对其初次生殖时间、总生殖胎数、体长和产幼溞数量等生物学指标的影响,建立浓度-效应关系,筛选最敏感的生物学指标。急性毒性实验结果表明,敌草隆对大型溞活动抑制的48 h半数效应浓度(EC50)为17.1 mg·L^-1,辣椒素对大型溞的48 h-EC50为12.4 mg·L^-1。慢性毒性实验结果表明,所有被观察的生物学指标均呈现显著的毒性响应,大型溞各项生物学指标对敌草隆的敏感性依次为幼溞数量>初次生殖时间>体长>总生殖胎数,大型溞各项生物学指标对辣椒素敏感性依次为幼溞数量>体长>总生殖胎数>初次生殖时间。计算敌草隆对大型溞繁殖抑制的21 d-EC10为0.830 mg·L^-1,辣椒素对大型溞繁殖抑制的21 d-EC10为1.63 mg·L^-1。辣椒素具有快速生物降解性,对大型溞繁殖抑制的EC10>1 mg·L^-1,根据《化学品分类和标签规范第28部分:对水生环境的危害》(GB 30000.28—2013)分类要求,可认为辣椒素没有长期水生危害,体现了较好的环境友好性潜力。

关键词：敌草隆辣椒素大型溞急性毒性慢性毒性环境友好性

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4,4’-二氨基二苯基甲烷对浮萍(Lemna minor L.)毒性作用

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生态毒理学报 2021年第5期16卷 358-363页

作者：柳燕贞罗凤娟梁燕珍梅承芳曾国驱广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心广州510070 华南应用微生物国家重点实验室广州510070 广东省菌种保藏与应用重点实验室广州510070 广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070

以浮萍(Lemna minor L.)为受试生物,通过研究不同浓度(0、0.6、1.8、5.4、16.2和48.6 mg·L^(-1))的4,4’-二氨基二苯基甲烷(4,4’-methylenedianiline,MDA)对浮萍生长、叶绿素含量、PSⅡ最大光化学效应(F_(v)/F_(m))、质膜透性及... 详细信息

以浮萍(Lemna minor L.)为受试生物,通过研究不同浓度(0、0.6、1.8、5.4、16.2和48.6 mg·L^(-1))的4,4’-二氨基二苯基甲烷(4,4’-methylenedianiline,MDA)对浮萍生长、叶绿素含量、PSⅡ最大光化学效应(F_(v)/F_(m))、质膜透性及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响,初步探讨MDA对水生植物浮萍的毒性作用。实验结果表明,在7 d暴露时间下,MDA对浮萍叶片数、叶片数生长率、叶片干质量和叶面积都有显著的抑制作用,且抑制程度与MDA的浓度呈正相关。其对浮萍叶片数生长抑制的7 d半数效应浓度(7 d-EC_(50))为26.7 mg·L^(-1),95%置信限为22.3~32.1 mg·L^(-1);对浮萍叶片数产量抑制的7 d-EC_(50)为0.62 mg·L^(-1),95%置信限为0.53~0.74 mg·L^(-1);对浮萍总叶面积及干质量产量抑制的7 d-EC_(50)<0.6 mg·L^(-1)。MDA处理导致浮萍总叶绿素含量和F_(v)/F_(m)下降,而浮萍质膜透性显著增加。低浓度MDA对浮萍SOD、POD和CAT酶活性无显著影响,但随着MDA浓度的升高SOD、POD和CAT酶活性显著升高,当MDA浓度达到48.6 mg·L^(-1)时,抑制POD和CAT酶活性。以上结果表明,MDA能够直接损伤质膜,干扰叶绿体功能并抑制光合活性,而氧化损伤是质膜损伤引起的继发性应激,继而引起膜脂质过氧化,加剧质膜损伤,从而进一步抑制浮萍的生长。

关键词： 4,4’-二氨基二苯基甲烷浮萍生长抑制抗氧化酶系统

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不同酸剂诱导人工沉香的分析与评价

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中国中药杂志 2017年第16期42卷 3159-3166页

作者：周欣陈丽燕陈晓东钟兆健李浩华章卫民高晓霞广东药科大学药学院广东广州510006 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 仙乐健康科技股份有限公司广东汕头515041

该研究按照《中国药典》(2015年版)要求测定样品醇溶性浸出物含量,同时建立GC-MS指纹图谱,使用《中药指纹图谱相似度评价(2012年版)》计算指纹图谱相似度,峰面积归一化法计算170~270 min与0~100 min 2区间总峰面积的比值,自动质谱退卷... 详细信息

该研究按照《中国药典》(2015年版)要求测定样品醇溶性浸出物含量,同时建立GC-MS指纹图谱,使用《中药指纹图谱相似度评价(2012年版)》计算指纹图谱相似度,峰面积归一化法计算170~270 min与0~100 min 2区间总峰面积的比值,自动质谱退卷积定性系统(AMDIS)结合保留指数(RI)鉴定共有组分和差异组分,OPLS-DA结合相关系数P(corr)和变量权重(VIP)筛选差异组分,灰色关联度和TOPSIS分析法综合评价人工沉香品质。结果显示18批人工沉香中15批浸出物含量符合要求,指纹图谱相似度在0.439~0.779,2区间总峰面积比值在0.307~13.254,共鉴定出9个共有组分和8个差异组分,综合上述20个指标进行灰色关联度和TOPSIS分析得到2%水杨酸诱导的人工沉香品质最优。建立的灰色关联度结合TOPSIS分析法可快速判断不同酸性诱导剂生产的人工沉香品质,为人工沉香的全面质量评价提供参考依据。

关键词：人工沉香酸性诱导剂气相-质谱灰色关联度 TOPSIS

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典型电器工业区河涌沉积物中有机污染物特征分析

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环境科学 2013年第3期34卷 1142-1149页

作者：刘近邓代永许玫英孙国萍中国科学院华南植物园广州510650 中国科学院大学北京100049 广东省微生物研究所广州510070 广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广州510070

为评估制造业对纳污水体有机物的污染影响,了解污染河道中有机物的种类、含量及赋存特性,采用极性和非极性逐步分离的方法对广东佛山市顺德区容桂街道内河涌沉积物中的有机物进行了综合的物理图谱解析研究.结果表明,污染沉积物中共检出... 详细信息

为评估制造业对纳污水体有机物的污染影响,了解污染河道中有机物的种类、含量及赋存特性,采用极性和非极性逐步分离的方法对广东佛山市顺德区容桂街道内河涌沉积物中的有机物进行了综合的物理图谱解析研究.结果表明,污染沉积物中共检出包括烷烃类、烯烃类、多环芳烃、苯系物、杂环类、邻苯二甲酸酯类、醛酮、极性化合物、含硅物质以及烷酸酯类等10大类有机污染物共171种.按检出污染物种类的数量分析,烷烃类>极性化合物>多环芳烃>醛酮类>杂环>苯系物、邻苯二甲酸酯类>烷酸酯类>含硅物质>烯烃.按照有机物相对丰度分析,烷烃类>极性化合物>烷酸酯类>烯烃类>多环芳烃>邻苯二甲酸酯类>含硅物质>醛酮>杂环类>苯系物.在相对含量最高的烷烃类有机污染物中,十九烷在同类物质中占比高达14.83%.毒害性持久性有机污染物多环芳烃的总有机物占比为2.33%,检测中还发现大量有机醇、酚等和涂料工业,邻苯二甲酸酯类等塑料工业以及和电子工业产业相关的有机硅类等物质.和同类研究相比,该区域检出51种、占总有机物55.5%丰度的烷烃类物质种类更丰富,含量更高.本研究对制造业纳污河涌沉积物的有机污染物分析研究,为同质污染河涌的污染治理提供参考.

关键词：制造业聚集区河涌沉积物有机污染物污染物指纹图谱气相色谱-质谱联用

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白木香倍半萜合成酶基因As-SesTPS的克隆及生物信息学与表达分析

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中草药 2014年第1期45卷 94-101页

作者：吴宏清王磊何欣白玲高晓霞严寒静章卫民广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 江西农业大学理学院江西南昌330045 广东药学院广东广州510006

目的从白木香Aquilaria sinensis总RNA中克隆倍半萜合成酶基因,并对其进行生物信息学及表达分析。方法对白木香总RNA进行反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE),获得完整的开放阅读框(ORF)。运用生物信息学的方法对该序列进行相似性比较和同源性分析,预测编码蛋白,并对其进行各种理化性质分析。通过半定量PCR检测该基因在白木香树干中不同部位的表达情况。结果获得As-SesTPS基因,ORF长1 629 bp,编码542个氨基酸,与葡萄Vitis vinifera的大根香叶烯-D合成酶[(-)-germacrene D synthas]相似性最高,且包含RRx8W和DDxxD的保守序列。As-SesTPS蛋白无跨膜区域,定位于细胞质中,且仅在白木香结香部位表达。结论首次从白木香中克隆得到可能编码大根香叶烯-D合成酶的基因,为白木香倍半萜生物合成代谢途径的研究提供参考。

关键词：白木香倍半萜合成酶基因克隆生物信息学基因表达分析

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