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中国菌物学会第七届全国会员代表大会暨2017年学术年会

作者：叶伟陈玉婵章卫民刘桃妹李浩华朱牧孜李赛妮黄自磊广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室

白色念珠菌(Candida albicans)是人体皮肤、粘膜的正常寄生菌,也是临床上重要的条件致病性真菌。免疫力低下者可引起浅表性或侵袭性感染,严重的患者可引起深部组织感染和真菌血症,甚至会危及生命,已成为真菌感染的主要病原体之一。白色... 详细信息

白色念珠菌(Candida albicans)是人体皮肤、粘膜的正常寄生菌,也是临床上重要的条件致病性真菌。免疫力低下者可引起浅表性或侵袭性感染,严重的患者可引起深部组织感染和真菌血症,甚至会危及生命,已成为真菌感染的主要病原体之一。白色念珠菌的耐药性问题日趋严重,对人体健康造成的威胁也不断增加。因此,亟需寻找高效、作用机制新颖的抗白色念珠菌先导化合物,并研究其作用机制,为新型抗白色念珠菌药物的开发奠定基础。本课题组前期从白木香内生真菌螺旋木霉(Trichoderma spirale)中分离获得了一种对白色念珠菌有显著抑制活性的新颖先导化合物木霉酸,它对白色念珠菌的MIC50与MIC80值分别为4.46μg/mL和9.21μg/mL,低于阳性对照制霉菌素(MIC50=5.18μg/mL, MIC80=14.14μg/mL)。本项目组还发现20μg/mL木霉酸(相当于摩尔浓度为65.7μM)对人源细胞株MCF-7抑制率为53.4%,说明木霉酸对人源细胞株MCF-7的细胞毒性低。木霉酸的化学结构中具有一个六六并环骨架和一条独特的共轭戊二烯酸脂肪长链,与现有的抗真菌药物明显不同,预示着木霉酸有独特的抗白色念珠菌作用机制。对未经处理和经不同浓度木霉酸处理后的白色念株菌提取总RNA,进行转录组测序。转录组测序结果表明,所得unigenes的平均长度为913 bp,Q20大于95%,共得到16,876个unigenes,GC含量为37.75%。转录组测序的unigenes分布如图所示。对所得转录组数据进行KOG分类。CK和MA-4相比共有1,518个unigenes上调,1,071个unigenes下调。CK和TA-8相比有5,156个unigenes下调,1,524个unigenes上调,TA-4和TA-8相比有6,129个unigenes下调,768个unigenes上调。CK和TA-8的差异基因主要富集在核糖体生成途径,内质网蛋白质处理,N-多糖生物合成,GPI锚定蛋白生物合成,细胞内吞途径相关基因。i TRAQ蛋白质组测序结果也表明主要差异蛋白集中在内质网蛋白质加工、蛋白转运、氨基酸糖、核苷酸糖、蛋白酶体、糖酵解、碳代谢和甘油酯代谢途径。这说明木霉酸可能主要破坏白色念珠菌的初级代谢及其细胞膜内质网以及细胞壁的功能,从而导致白色念珠菌的死亡。以上研究结果为开发木霉酸作为新型抗白色念珠菌药物奠定了基础。

关键词：木霉酸白色念珠菌转录组测序作用机制内质网

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巴戟天内生真菌多样性及抗菌活性研究

巴戟天内生真菌多样性及抗菌活性研究

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中国菌物学会第七届全国会员代表大会暨2017年学术年会

作者：李浩华李赛妮叶伟刘洪新章卫民广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室

本研究以分析巴戟天内生真菌多样性和筛选出抗菌活性菌株为目标,对其内生真菌进行分离纯化,根据ITS序列分析鉴定方法分析巴戟天内生真菌的菌群分布及物种多样性,并对其内生真菌提取物进行抗菌活性筛选。结果表明,从巴戟天各组织器官中... 详细信息

本研究以分析巴戟天内生真菌多样性和筛选出抗菌活性菌株为目标,对其内生真菌进行分离纯化,根据ITS序列分析鉴定方法分析巴戟天内生真菌的菌群分布及物种多样性,并对其内生真菌提取物进行抗菌活性筛选。结果表明,从巴戟天各组织器官中共分离获得75株内生真菌,分属于20个属31个分类单元,其中刺盘孢属Colletotrichum、间座壳属Diaporthe、拟茎点霉属Phomopsis为优势菌群,分别占13.3%、10.1%、9.0%,Cytospora、Mortierella、Acremmonium、Lasiodiplodia、Arthrinium为较为少见的类群。巴戟天受到内生真菌侵染的程度较高,约有77.8%的组织有内生真菌存在,以叶中内生真菌的定植率(99.4%)、分离率(1.61)高于根(72.2%、1.11)、茎(66.7%、1.61),而根部的多样性指数(0.83)则高于叶(0.03)和茎(0.47),相似度系数则表现出茎与叶(0.07))、根与茎(0.26)、根与叶(0.07)之间的内生真菌为极为不相似;活性测试结果显示共11个属15株内生真菌至少对1种供试菌有抗菌活性,其中菌株Alternaria sp. A744提取物抗菌效果最为明显并具有广谱性。该研究结果为进一步发掘巴戟天内生真菌的活性代谢产物奠定了基础。

关键词：巴戟天内生真菌多样性活性菌株

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一氧化氮在细菌抗药性和生物膜形成中的分子作用

一氧化氮在细菌抗药性和生物膜形成中的分子作用

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2017年第十五届全国防霉防菌技术研讨及产品交流会

作者：王颖思周刚彭红谢小保黄小茉施庆珊广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

一氧化氮(NO)是一种气体信号分子,具有调节血管张力、引起肿瘤细胞凋亡和减缓植物成熟等功能.最新研究发现,N0可以通过限制菌体对抗生素药物的摄入等保护细菌,但高浓度的NO对细菌又具有杀灭作用;与此同时N0通过双分子系统、c-di-GMP和... 详细信息

一氧化氮(NO)是一种气体信号分子,具有调节血管张力、引起肿瘤细胞凋亡和减缓植物成熟等功能.最新研究发现,N0可以通过限制菌体对抗生素药物的摄入等保护细菌,但高浓度的NO对细菌又具有杀灭作用;与此同时N0通过双分子系统、c-di-GMP和群体感应等影响细菌生物膜的形成,但细菌种类不同NO的影响效果也不同.本文主要对N0在细菌抗菌机理和生物膜形成的分子作用等进行综述,同时,也对N0研究发展的新方向进行了展望.

关键词：一氧化氮细菌抗药性生物膜形成分子作用

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药用真菌蛹虫草遗传多样性的SCoT分析

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中药材 2016年第7期39卷 1488-1492页

作者：李挺宋斌林敏广东省微生物研究所/省部共建华南应用微生物国家重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

目的：研究药用真菌蛹虫草的种质资源遗传多样性。方法：采用非加权平均距离聚类法（UPGMA）结合主坐标分析法（PCoA）对27株不同来源的蛹虫草菌株的SCoT分子标记条带进行研究。结果：从36个引物中筛选出8条重复性好、条带清晰的引物进... 详细信息

目的：研究药用真菌蛹虫草的种质资源遗传多样性。方法：采用非加权平均距离聚类法（UPGMA）结合主坐标分析法（PCoA）对27株不同来源的蛹虫草菌株的SCoT分子标记条带进行研究。结果：从36个引物中筛选出8条重复性好、条带清晰的引物进行PCR扩增,共扩增出59条条带,其中55条具有多态性,多态性比率为94.33%,平均多态性条带数为6.875。经NTSYSpc软件分析,27株蛹虫草菌株间的遗传相似系数在0.383～0.933之间,说明SCoT标记能够揭示蛹虫草种质间较高的遗传多样性。通过UPGMA法和PCoA法分析,27株蛹虫草分别分成6组和3组,菌株的遗传多样性与其来源有一定的相关性。结论：SCoT分子标记适用于药用真菌蛹虫草种质资源的多样性研究。

关键词：蛹虫草聚类分析主坐标分析

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产细菌素的细菌筛选鉴定及其产物抑菌性能研究

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工业微生物 2017年第5期47卷 31-35页

作者：冯劲周少璐顾振东陈铭杰谢畅丰施庆珊广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司肇庆526040

从水体改善制剂样品中筛选出一株产细菌素的芽孢杆菌XDF-2,经生理生化分析和分子生物学鉴定,确定为短小芽孢杆菌。发现该菌产细菌素受发酵时间和培养的影响。对该粗提的细菌素进行特性研究,发现该细菌素只对金黄色葡萄球菌和藤黄微球菌... 详细信息

从水体改善制剂样品中筛选出一株产细菌素的芽孢杆菌XDF-2,经生理生化分析和分子生物学鉴定,确定为短小芽孢杆菌。发现该菌产细菌素受发酵时间和培养的影响。对该粗提的细菌素进行特性研究,发现该细菌素只对金黄色葡萄球菌和藤黄微球菌具有抑菌活性。但是该细菌素在不同pH、100℃以下的温度、表面活性剂和有机溶剂的环境下稳定。经酶解试验所得,推测该细菌素具有多肽结构和羧基酯的结构。

关键词：短小芽孢杆菌细菌素鉴定抑菌

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广藿香内生真菌Diaporthe longicolla A616细胞毒活性次级代谢产物研究

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中国中药杂志 2016年第11期41卷 2112-2117页

作者：王沫陈玉婵孙章华谭国慧李浩华刘洪新严寒静郭晓玲章卫民广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 广东药学院广东广州510006

为了研究广藿香内生真菌Diaporthe longicolla A616的活性次级代谢产物。采用正相硅胶、C18反相、Sephadex LH-20凝胶、HPLC等色谱技术从该菌株的发酵产物中分离得到了10个化合物,经波谱数据分析和文献比对,分别鉴定为1,3-diamino-1,3-d... 详细信息

为了研究广藿香内生真菌Diaporthe longicolla A616的活性次级代谢产物。采用正相硅胶、C18反相、Sephadex LH-20凝胶、HPLC等色谱技术从该菌株的发酵产物中分离得到了10个化合物,经波谱数据分析和文献比对,分别鉴定为1,3-diamino-1,3-dimethylurea（1）,（7R,9R）-7-hydroxy-9-propyl-5-nonen-9-olide（2）,ergosta-5,7,22-trien-3β-ol（3）,（22E,24R）-ergosta-4,6,8（14）-22-tetraen-3-one（4）,（22E,24R）-3β,5α-dihydroxy-6β-ergosta-7,22-diene（5）,citreoisocoumarin（6）,glycerol monolinoleate（7）,1-（2-hydroxyethoxy）ethyl（E）-octadec-9-enoate（8）,cyclo-（L-Pro-L-Ala）（9）,cyclo（L）-Pro-（L）-Val（10）,其中,化合物6~10为首次从Diaporthe属真菌中分离得到。体外细胞毒活性结果显示化合物4和5对肿瘤细胞株SF-268,MCF-7,NCIH460和Hep G-2具有显著的抑制活性,IC50分别为5.3,6.5,12.2,6.1μmol·L-1和8.2,5.2,6.1,9.4μmol·L-1。

关键词： Diaporthe longicolla 内生真菌广藿香细胞毒活性

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白肉灵芝菌丝体生物学特性的初步研究

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中国食用菌 2017年第6期36卷 33-38页

作者：莫伟鹏刘远超胡惠萍黄龙花梁晓薇谢意珍旦真次仁广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 广东粤微食用菌技术有限公司广东广州510663 林芝市科技开发交流服务中心西藏林芝860000

研究了不同培养条件对白肉灵芝(Ganoderma leucocontextum)菌丝体生长速度的影响。结果表明,白肉灵芝菌丝体培养的最适培养温度是25℃,最适pH是3.0,适宜的碳源是蔗糖和淀粉,适宜的氮源是酵母粉和牛肉膏,最佳碳氮源浓度组合是淀粉3%、蔗... 详细信息

研究了不同培养条件对白肉灵芝(Ganoderma leucocontextum)菌丝体生长速度的影响。结果表明,白肉灵芝菌丝体培养的最适培养温度是25℃,最适pH是3.0,适宜的碳源是蔗糖和淀粉,适宜的氮源是酵母粉和牛肉膏,最佳碳氮源浓度组合是淀粉3%、蔗糖1.5%、酵母粉0.2%、牛肉膏0.2%。

关键词：白肉灵芝生物学特性温度 pH 碳源氮源

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4种农林废弃物代替木屑工厂化栽培白玉菇研究

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中国食用菌 2017年第4期36卷 18-22页

作者：邹俊平李挺宋斌许喜佳黄浩郑永发贝淑琴韦曼华梅亮添广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 韶关市星河生物科技有限公司广东韶关512136 广东富阳生物科技有限公司广东河源517000

以4种农林废弃物(谷壳、互叶白千层树渣、金针菇菌糠、白玉菇菌糠)按不同的比例替代木屑栽培白玉菇,通过对白玉菇菌丝体的生长速度、子实体特性和生物学效率等进行评价,筛选出最佳的可替代木屑的白玉菇栽培原料。结果显示,在含有互叶白... 详细信息

以4种农林废弃物(谷壳、互叶白千层树渣、金针菇菌糠、白玉菇菌糠)按不同的比例替代木屑栽培白玉菇,通过对白玉菇菌丝体的生长速度、子实体特性和生物学效率等进行评价,筛选出最佳的可替代木屑的白玉菇栽培原料。结果显示,在含有互叶白千层树渣的培养料中,白玉菇的菌丝体生长速度较快,白玉菇子实体朵形较好,菌盖直径、菌柄长度、单株平均鲜重和生物学效率均优于其他3种农林废弃物。当以互叶白千层树渣全部代替木屑时,白玉菇菌丝体的生长速度最快,29 d长满培养瓶,子实体菌柄长度、菌盖直径及单株平均鲜重达到最大值,分别为9.75 cm、2.78 cm和167.2 g。本研究结果表明互叶白千层树渣为木屑的最佳替代物,且当全部代替木屑时,白玉菇产量最高;谷壳和白玉菇菌糠次之,金针菇菌糠的效果最差。

关键词：白玉菇生物学效率互叶白千层树渣栽培技术

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广藿香内生真菌索氏平脐蠕孢中1个新旋孢腔菌醌类化合物及其生物活性

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中草药 2016年第15期47卷 2601-2605页

作者：王沫陈玉婵李浩华孙章华刘洪新谭国慧严寒静郭晓玲章卫民广东省微生物研究所/省部共建华南应用微生物国家重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 广东药学院广东广州510006

目的研究分离自广藿香内生真菌索氏平脐蠕孢Bipolaris sorokiniana A606的活性次级代谢产物的化学结构及其活性。方法运用正相硅胶、C18反相硅胶、Sephadex LH-20凝胶和HPLC等色谱技术对菌株*** A606发酵液的醋酸乙酯萃取物进行分离纯化... 详细信息

目的研究分离自广藿香内生真菌索氏平脐蠕孢Bipolaris sorokiniana A606的活性次级代谢产物的化学结构及其活性。方法运用正相硅胶、C18反相硅胶、Sephadex LH-20凝胶和HPLC等色谱技术对菌株*** A606发酵液的醋酸乙酯萃取物进行分离纯化,并通过各种谱学分析方法进行结构鉴定;采用SRB染色法和滤纸片法分别测定化合物的细胞毒和抗菌活性。结果从*** A606发酵液的醋酸乙酯萃取物中分离得到2个化合物,分别鉴定为(3S*,4a S*,6a S*,12b S*)-3-(2-羟基-2-丙烷基)-6a,12b-二甲基-9-[(2R*,4R*)-2-(4-甲基-3-己酮基)]-1,2,3,4a,5,6-六氢吡喃并[3,2-a]氧杂蒽-8,11-二酮(1)和precochlioquinol D(2)。结论化合物1为新化合物,命名为11-羟基-12,13-去氢旋孢腔菌醌B。化合物2为首次从该属真菌中分离得到。其中化合物1具有细胞毒和抗菌活性。

关键词：索氏平脐蠕孢内生真菌广藿香旋孢腔菌醌 11-羟基-12,13-去氢旋孢腔菌醌B 细胞毒性抗菌活性

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紫玉盘内生真菌节菱孢中1个新的异香豆素类化合物

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中草药 2016年第3期47卷 369-373页

作者：李浩华周燕燕陈玉婵孙章华严寒静郭晓玲章卫民广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 广东药学院广东广州510006

目的研究紫玉盘内生真菌节菱孢Arthrinium sp.A092发酵菌丝体的化学成分。方法采用硅胶柱、凝胶柱、HPLC等色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行化合物结构鉴定;以肝癌细胞Hep G-2、乳腺癌细胞MCF-7、大细胞肺癌细胞NCI-H46... 详细信息

目的研究紫玉盘内生真菌节菱孢Arthrinium sp.A092发酵菌丝体的化学成分。方法采用硅胶柱、凝胶柱、HPLC等色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行化合物结构鉴定;以肝癌细胞Hep G-2、乳腺癌细胞MCF-7、大细胞肺癌细胞NCI-H460和神经胶质瘤细胞SF-268为供试细胞株,采用SRB法对化合物进行细胞毒活性测试。结果从节菱孢菌丝体中分离得到10个化合物,分别鉴定为3,4,5-trimethyl-6-methoxy-8-hydroxyisocoumarin（1）、decarboxycitrinone（2）、4-hydroxy-17R-methylincisterol（3）、3-甲氧基-4-羟基苯甲酸（4）、邻苯二甲酸二丁酯（5）、flemingipanic acid（6）、吲哚-3-羧酸（7）、过氧化麦角甾醇（8）、对羟基苯甲酸（9）、4-羟基苯甲醛（10）;化合物3对SF-268和MCF-7的IC50值分别为63.8和57.2μmol/L,化合物8对SF-268、MCF-7和NCI-H460的IC50值分别为50.6、32.3、39.0μmol/L。结论化合物1为新化合物,命名为节菱孢异香豆素A,化合物3～5、7～10均为首次从该属真菌中分离得到;化合物3和8具有一定的细胞毒活性。

关键词：紫玉盘内生真菌节菱孢节菱孢异香豆素A 邻苯二甲酸二丁酯过氧化麦角甾醇 4-羟基苯甲醛细胞毒活性

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