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第六届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：薛冬赵国振姚青朱红惠广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州 510070 安徽农业大学生命科学学院安徽合肥 210095 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州 510070 华南农业大学园艺学院广东广州 510642

微生物对湿地生态系统中的物质转化和能量流动起着重要作用,是湿地生态系统中不可缺少的重要成员.我国华南地区分布着丰富的淡水湿地资源,然而有关淡水湿地环境放线菌资源开发、利用和生态学研究的报道较少.本研究,应用PCR-DGGE技术对...

微生物对湿地生态系统中的物质转化和能量流动起着重要作用,是湿地生态系统中不可缺少的重要成员.我国华南地区分布着丰富的淡水湿地资源,然而有关淡水湿地环境放线菌资源开发、利用和生态学研究的报道较少.本研究,应用PCR-DGGE技术对星湖湿地10个样点放线菌群落进行研究,根据DGGE图谱及克隆测序结果对其物种多样性进行分析.通过PCR-DGGE指纹图谱发现各样品放线菌物种丰富度(S)、多样性指数(H')和均匀度指数(J')均有所不同.其中,8号样品的多样性指数最高,指数为2.66,2号样品最低,指数为1.81;丰富度指数8号样品最高为24,6号样品最低为11;均匀度1号样品最高为0.97,2号样品均匀度最低为0.71.

关键词：

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10株白玉菇菌株的品比试验

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中国食用菌 2014年第4期33卷 40-42页

作者：黄浩邱成书宋斌叶运寿广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070 华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006 广东星河生物科技股份有限公司广东东莞523722

对10株白玉菇菌株进行了品比试验。结果显示,在本试验条件下,MYSYB菌株的菌丝生长速度最快、生物学效率最高、生长周期最短,综合性状良好。

关键词：白玉菇菌株栽培技术

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不同干燥方式对细菌纤维素物理性能的影响

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现代食品科技 2013年第9期29卷 2225-2229,2101页

作者：冯劲施庆珊冯静李文茹陈爱美欧阳友生广东省微生物研究所、广东省菌种保藏与应用重点实验室、广东省微生物应用新技术公共实验室、广东省华南应用微生物重点实验室一省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070

本文考察不同干燥方式对细菌纤维素的物理性能的影响。采取3种不同干燥的方法分别对细菌纤维素膜进行干燥,分别为:60℃烘箱中干燥(BC-DHT);在-20℃冷冻结实后冷冻干燥(BC-FDF);在液氮中迅速冷冻结实,然后冷冻干燥(BC-FDN)。通过扫描电... 详细信息

本文考察不同干燥方式对细菌纤维素的物理性能的影响。采取3种不同干燥的方法分别对细菌纤维素膜进行干燥,分别为:60℃烘箱中干燥(BC-DHT);在-20℃冷冻结实后冷冻干燥(BC-FDF);在液氮中迅速冷冻结实,然后冷冻干燥(BC-FDN)。通过扫描电子显微镜观察,BC-FDN的内部结构比BC-FDF和BC-DHT更松散。在吸水性能方面,BC-DHT、BC-FDF、BC-FDN每克纤维素吸水量分别为2.38 g、6.22 g、58.24 g。在透湿率方面,BC-FDN的透湿性能最好,其次为BC-FDF,而BC-DHT透湿性能最差。对BC-DHT、BC-FDF、BC-FDN进行X射线衍射分析,从其衍射图谱分析所得结晶指数分别为78.5%、64.2%、47.5%。热重分析结果分析所得,BC-DHT的热稳定性较好,其次为BC-FDF,而BC-FDN的热稳定性最差。由此可见,通过不同的干燥方法能改变细菌纤维素的物理性质。

关键词：细菌纤维素干燥物理性能

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分枝虫草菌丝体生物学特性研究

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中药材 2013年第6期36卷 861-863页

作者：林敏林群英宋斌黄浩李泰辉沈亚恒广东省微生物研究所/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室/广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070

目的:对分枝虫草菌丝体生长的生物学特性进行研究。方法:考察不同温度、pH值、碳源、氮源和碳氮比下分枝虫草菌丝体的生长情况。结果:分枝虫草菌丝体生长的最佳温度为25℃,初始pH为5.0～7.0,最佳碳源为可溶性淀粉,最佳氮源为酵母浸膏,... 详细信息

目的:对分枝虫草菌丝体生长的生物学特性进行研究。方法:考察不同温度、pH值、碳源、氮源和碳氮比下分枝虫草菌丝体的生长情况。结果:分枝虫草菌丝体生长的最佳温度为25℃,初始pH为5.0～7.0,最佳碳源为可溶性淀粉,最佳氮源为酵母浸膏,最佳碳氮比是24∶1。结论:通过本研究,得到分枝虫草菌丝体生长的最佳条件,为分枝虫草人工栽培提供参考。

关键词：分枝虫草生物学特性生长条件

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广东部分零售畜禽产品沙门菌生化型和血清型分析

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卫生研究 2013年第4期42卷 615-618页

作者：杨小鹃吴清平张菊梅董晓晖刘盛荣广东省微生物研究所广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070

目的研究分析畜禽产品中沙门菌的生化型和血清型,了解沙门菌在畜禽产品中的污染状况,为确保食品安全提供依据。方法依据GB 4789.4—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》,对样品进行检测,利用API 20E试剂条对菌株进行... 详细信息

目的研究分析畜禽产品中沙门菌的生化型和血清型,了解沙门菌在畜禽产品中的污染状况,为确保食品安全提供依据。方法依据GB 4789.4—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》,对样品进行检测,利用API 20E试剂条对菌株进行鉴定分析,采用玻片凝集法测定沙门菌的血清型。结果畜禽产品209份,检出沙门菌阳性样品42份,总检出率为20.10%,污染样品多来自于生鸭肉(检出率为69.23%),生鸡肉(37.14%)、生牛肉(20.00%)、生猪肉(16.67%)。API鉴定出46株沙门菌,分为7种不同生化谱的沙门菌API生化型,主要的2种为6704752和6704552。畜禽肉中沙门菌主要血清型为德尔卑沙门菌(21.74%)、鼠伤寒沙门菌(10.87%)、肠炎沙门菌(8.70%)、茨昂威沙门菌(8.70%)、印地安纳沙门菌(8.70%)、韦太夫雷登沙门菌(8.70%)。结论广东畜禽产品沙门菌污染情况较为严重,沙门菌菌株生化型和血清型表现为多样性的特征。

关键词：畜禽产品沙门菌鉴定 API20E 血清型

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蜡样芽孢杆菌ERIC-PCR分子分型方法的建立

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现代食品科技 2013年第7期29卷 1696-1701页

作者：王君吴清平吴克刚陈谋通张菊梅郭伟鹏广东工业大学轻工化工学院广东广州510006 广东省微生物研究所广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

为建立简单快速的蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)基因间重复共有序列PCR(ERIC-PCR)的分子分型方法,该研究以*** 63303的基因组DNA为模板,并采用正交设计L16(45)对影响ERIC-PCR反应体系的五个因素(模板DNA、Mg2+、dNTP、TaqDNA聚合酶、引... 详细信息

为建立简单快速的蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)基因间重复共有序列PCR(ERIC-PCR)的分子分型方法,该研究以*** 63303的基因组DNA为模板,并采用正交设计L16(45)对影响ERIC-PCR反应体系的五个因素(模板DNA、Mg2+、dNTP、TaqDNA聚合酶、引物)在四个浓度水平上进行优化,并通过单因素试验确定最佳退火温度,最后以优化后的反应体系对50株***分离株进行ERIC-PCR分子分型和聚类分析验证其稳定性和分型效果。结果显示应用建立的ERIC-PCR反应体系对50株分离株扩增均得到了9-17条、大小在200-4000 bp之间的条带,并可将其分为47个型,且分辨力达到0.996,具有较高稳定性和分辨能力。表明ERIC-PCR技术对***分型,具有简便和分辨力高等优点,可用于食源性***分离株的多样性研究。

关键词：蜡样芽孢杆菌 ERIC-PCR 分子分型遗传多样性分析

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生物滴滤池对BTEX的去除及相应细菌群落分析

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环境科学 2013年第7期34卷 2552-2559页

作者：李建军廖东奇许玫英孙国萍广东省微生物研究所广州510070 广东省菌种保藏与应用重点实验室广州510070 广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广州510070

以预先驯化的菌群和活性污泥作为起始接种物用于生物滴滤池(BTF)中,研究评估了BTF去除苯、甲苯、乙苯和二甲苯混合气体(BTEX)的性能,并利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术分析了微生物群落结构的变化.结果表明,BTF能在短时间内得到驯化,填... 详细信息

以预先驯化的菌群和活性污泥作为起始接种物用于生物滴滤池(BTF)中,研究评估了BTF去除苯、甲苯、乙苯和二甲苯混合气体(BTEX)的性能,并利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术分析了微生物群落结构的变化.结果表明,BTF能在短时间内得到驯化,填料附着的生物量从第10 d的5.7 mg.g-1迅速增加至第30 d的112 ***能同时有效去除混合BTEX中的各组分,在进气负荷和停留时间分别为269.7 g.(m3.h)-1和39 s时,可获得的最大去除能力为216.6 g.(m3.h)-***图谱表明,BTF中优势微生物种群主要来源于富集菌群,微生物群落结构随着运行时间发生变化,但在BTF上下空间分布较为均匀.

关键词：生物滴滤池 BTEX DGGE 群落结构菌群

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一个硫链丝菌素抗性基因标记、用于DNA导入链霉菌的pSET152衍生载体(英文)

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微生物学通报 2013年第7期40卷 1241-1248页

作者：邓名荣郭俊冯广达朱红惠广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

【目的】在链霉菌PCR-targeting系统中,安普霉素是使用最普遍的选择标记。然而在基因敲除阶段利用安普霉素选择标记后,在遗传补偿时就不能使用相同选择标记的许多重要载体,如pSET152。这常给研究带来不便,特别是当研究对象基因如一些调... 详细信息

【目的】在链霉菌PCR-targeting系统中,安普霉素是使用最普遍的选择标记。然而在基因敲除阶段利用安普霉素选择标记后,在遗传补偿时就不能使用相同选择标记的许多重要载体,如pSET152。这常给研究带来不便,特别是当研究对象基因如一些调控基因,其生理功能对剂量敏感时更是如此。基于此,拟以pSET152为基础构建一个不以安普霉素为抗性标记的通用整合型载体。【方法】利用融合PCR和λRed重组等方法构建载体。【结果】来自pHZ1358上的硫链丝菌素抗性基因tsr和来自pCR2.1的氨苄抗性基因bla以"tsr在前bla在后"的次序融合。融合后的抗性片段替换pSET152上的安普霉素抗性基因aac(3)-IV,从而获得新载体pGIM6626。利用该载体将删除的榴菌素最小聚酮合酶基因重新导入到Streptomyces vietnamensis突变株中,该突变株恢复了产榴菌素的能力,证实了该载体的有效性。【结论】构建了一个新的pSET152衍生载体pGIM6626。该载体包含氨苄和硫链丝菌素抗性基因,分别在大肠杆菌和链霉菌中作为选择标记。pGIM6626与pSET152用途相似,但前者由于与PCR-targeting系统不存在选择标记的冲突而与该系统更兼容。

关键词：链霉菌整合型载体 pSET152 硫链丝菌素抗性基因 PCR—targeting系统

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南方食品中沙门氏菌污染调查及分型

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微生物学报 2013年第12期53卷 1326-1333页

作者：陈玲张菊梅杨小鹃吴清平徐明芳广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 暨南大学生命科学技术学院广州510632

【目的】系统调查我国南方代表性地区食品中沙门氏菌污染情况,并对分离株进行血清分型和肠杆菌基因间重复共有序列聚合酶链式反应(Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus Polymerase Chain Reaction,ERIC-PCR)分型研究,为溯... 详细信息

【目的】系统调查我国南方代表性地区食品中沙门氏菌污染情况,并对分离株进行血清分型和肠杆菌基因间重复共有序列聚合酶链式反应(Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus Polymerase Chain Reaction,ERIC-PCR)分型研究,为溯源和控制食品中沙门氏菌的污染提供数据。【方法】采用定性法和最大可能数(Most Probable Number,MPN)法对七大类食品(肉与肉制品、水产品、速冻食品、熟食、蔬菜、乳制品和食用菌)中的沙门氏菌进行检测。利用血清分型和分子分型确定南方沙门氏菌血清型的分布和优势血清型,研究分离株的遗传多样性。【结果】从400份食品样品共检出75份沙门氏菌阳性样品,污染率为18.8%(75/400)。其中,97.3%(73/75)的阳性样品污染水平均低于10 MPN/g。对93株分离株进行血清分型,分属9个群、29种血清型。优势血清型为德尔卑沙门氏菌(Salmonella Derby)和鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella Typhimurium)。利用ERIC-PCR对96株沙门氏菌(包括93株分离株和3株标准株)进行分型研究发现,在相似系数为0.75时可分为15个聚类簇,56种型别,分离株的基因型别呈现多样性。【结论】南方食品中沙门氏菌的污染率较高,但污染水平低。***和***为优势血清型。初步建立了沙门氏菌ERIC-PCR指纹图谱数据库,南方食品中沙门氏菌的血清型和基因型呈现多样性。

关键词：沙门氏菌污染调查血清分型肠杆菌基因间重复共有序列聚合酶链式反应

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假鹰爪茎、叶组织内生真菌的分布和rDNA ITS序列系统发育分析

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中国药学杂志 2013年第24期48卷 2102-2106页

作者：高晓霞王磊周伟平严寒静李浩华章卫民广东药学院广州510006 广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广州510070

目的研究假鹰爪(Desmos chinensis Lour.)茎、叶组织中内生真菌的分布及其rDNA ITS序列系统发育。方法采用石蜡永久制片法观察鹰爪茎、叶组织显微结构,细胞化学法确定内生真菌的分布,平板分离法分离培养内生真菌,对分离菌株进行rDNA ITS... 详细信息

目的研究假鹰爪(Desmos chinensis Lour.)茎、叶组织中内生真菌的分布及其rDNA ITS序列系统发育。方法采用石蜡永久制片法观察鹰爪茎、叶组织显微结构,细胞化学法确定内生真菌的分布,平板分离法分离培养内生真菌,对分离菌株进行rDNA ITS区PCR扩增和测序,通过rDNA ITS序列进行内生真菌的分类鉴定及系统发育分析。结果假鹰爪茎中的内生真菌主要分布在韧皮部薄壁细胞,叶中主要分布主脉上方厚角细胞以内的薄壁细胞、栅栏组织、海绵组织。共分离14株内生真菌,分属于拟茎点霉属(Phomopsis)、刺盘孢属(Colletotrichum)和球座菌属(Guignardia),其中拟茎点霉(***.)占总菌株数的57.1%,其次为胶孢刺盘孢(***)和芒果球座菌(***)。结论内生真菌在假鹰爪茎、叶组织中均有分布,无明显组织特异性;rDNA ITS序列系统发育较好的揭示了假鹰爪内生真菌的系统进化关系。

关键词：假鹰爪内生真菌系统发育 rDNA ITS

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