[目的]旨在采用基因同源重组结合iTRAQ-LC-MS/MS技术探讨luxS基因在单增李斯特菌蛋白表达中调控作用。[方法]利用同源重组技术敲除单增李斯特菌luxS基因,提取单增李斯特菌野生株、△luxS缺失株对数期的菌体总蛋白进行iTRAQ-LC-MS/MS分析,通过MASCOT软件搜库,对鉴定蛋白质数据进行了COG(Cluster of Orthologous Groups of proteins)、差异蛋白的GO富集分析和KEGG分析。[结果]实验结果表明,共获得11,365个不同肽段,鉴定到1,857个蛋白质。与野生株相比,luxS基因缺失株中共有320个差异蛋白,其中上调表达蛋白质205个,下调表达蛋白质115个,主要涉及能量代谢,细胞膜/细胞壁再生,细胞运动、氨基酸转运和代谢、转录和信号转导等功能。其中,毒力因子InlA,InlB,sigma B和ActA等毒力因子表达水平上调,而自溶素(1m02558、lm02691、1m01076)、DltA和GroES等表达水平下调。[讨论]单增李斯特菌luxS基因可能调控了许多不同功能蛋白的表达,特别是在毒力因子、逆境胁迫方面起着重要的调控作用,为深入研究基于luxS/AI-2的群体感应系统调控机制奠定了基础。
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