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广藿香内生真菌Bipolaris sorokiniana的次级代谢产物及其抗肿瘤活性研究

广东药学院学报 2015年第5期31卷 576-580页

作者：王沫陈玉婵李浩华孙章华谭国慧严寒静章卫民郭晓玲广东药学院中心实验室广东广州510006 广东省微生物研究所/省部共建华南应用微生物国家重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

目的研究分离自广藿香中的内生真菌索氏平脐蠕孢（Bipolaris sorokiniana,A606）的活性次级代谢产物,并初步考察其抗肿瘤活性。方法采用正相硅胶柱层析、C18反相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、高效液相色谱法以及薄层层析等色... 详细信息

目的研究分离自广藿香中的内生真菌索氏平脐蠕孢（Bipolaris sorokiniana,A606）的活性次级代谢产物,并初步考察其抗肿瘤活性。方法采用正相硅胶柱层析、C18反相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、高效液相色谱法以及薄层层析等色谱技术对菌株A606发酵液的乙酸乙酯萃取物进行分离纯化,并通过各种波谱分析进行结构鉴定;采用SRB染色法对化合物进行细胞毒活性研究。结果从发酵液的乙酸乙酯萃取物中分离鉴定出8个化合物,分别为麦角甾-4,6,8（14）,22-四烯-3-酮（1）、2-[4-（2-aminoethoxy）phenyl]ethanol（2）、邻苯二甲酸-二（2-乙基-己基）酯（3）、5-羟甲基糠醛（4）、3,5-二羟基甲苯（5）、对羟基苯乙醇（6）、5-甲基-2-呋喃甲醇（7）、3,4,6-trimethylcyclohex-3-en-1-ol（8）;化合物1对4种肿瘤细胞株SF-268、MCF-7、NCI-H460和Hep G-2的IC50值分别为20.84、15.31、13.62、25.45μmol/L。结论化合物1~4、7~8均为首次从该属真菌中分离得到,其中化合物1对4种肿瘤细胞具有显著的抑制作用。

关键词：索氏平脐蠕孢内生真菌广藿香细胞毒活性

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杆孢菌素E异构体(MR4)诱导HepG-2细胞凋亡机制研究

杆孢菌素E异构体(MR4)诱导HepG-2细胞凋亡机制研究

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中国菌物学会2015年学术年会

作者：陈玉婵叶伟潘清灵章卫民广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室、广东省微生物应用新技术公共实验室

单端孢霉烯族化合物是一类由真菌产生的倍半萜类环氧化物,据报道这类化合物具有很强的抗肿瘤活性。具有开发作为抗肿瘤药物的前景。作者前期从广藿香内生真菌露湿漆斑菌(Myrothecium roridum)中分离获得单端孢霉烯族化合物杆孢菌素E异构... 详细信息

单端孢霉烯族化合物是一类由真菌产生的倍半萜类环氧化物,据报道这类化合物具有很强的抗肿瘤活性。具有开发作为抗肿瘤药物的前景。作者前期从广藿香内生真菌露湿漆斑菌(Myrothecium roridum)中分离获得单端孢霉烯族化合物杆孢菌素E异构体(MR4),本研究对该化合物进行体外抗肿瘤活性及其诱导人肝癌细胞(HepG-2)凋亡的机制研究。通过SRB法检测MR4对HepG-2的生长抑制作用;AnnexinⅤ-PI双染流式细胞术检测MR4作用后不同时间细胞凋亡的变化;PI染色流式细胞术检测细胞凋亡时细胞周期的变化;JC-1染色流式细胞术检测细胞线粒体膜电位的变化;Western Blot检测Caspase-3,caspase-9,Bcl-2,Bax,P53等基因的表达及活化情况。结果表明MR4对HepG-2的增殖有明显的抑制活性,其IC50值为0.004μmol/L;用0.1μmol/L MR4处理HepG-2细胞6h,12h,24h凋亡率比阴性对照组分别升高了3.6%,22.6%,24.0%;0.1μmol/L MR4处理HepG-2细胞6h,12h,24h二倍体亚峰的比例比对照组明显增多,分别为25.8%,34.2%,46.5%,且随着时间的推移细胞被抑制停留在S期;0.1μmol/L MR4处理HepG-2细胞24h后细胞线粒体膜电位明显下降,膜电位从4.63 mV降到1.01 mV;Western Blot实验发现MR4诱导HepG-2细胞凋亡的过程中活化了Caspase-3和caspase-9的表达,降低Bcl-2蛋白的表达量,但对Bax和P53蛋白的表达没影响。因此,杆孢菌素E异构体(MR4)对HepG-2细胞的增殖有明显的抑制作用,可诱导肿瘤细胞的凋亡,推断其诱导HepG-2细胞凋亡的机制是降低Bcl-2蛋白的表达从而降低线粒体膜电位,激活caspase级联反应,最终导致caspase-3和caspase-9的活化。本研究结果对于单端孢霉烯族化合物诱导肿瘤细胞凋亡机制的阐明具有重要的学术价值,并为开发单端孢霉烯族抗肿瘤药物奠定理论基础。

关键词：杆孢菌素E异构体(MR4) 人肝癌细胞HepG-2 抗肿瘤活性凋亡机制

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利用OECD 301方法对致癌性芳香胺4,4'-二氨基二苯甲烷快速生物降解性的比较研究

利用OECD 301方法对致癌性芳香胺4,4'-二氨基二苯甲烷快速生物降...

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：梅承芳柳燕贞龙伟年孙国萍许玫英曾国驱广州省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室

致癌性芳香胺4,4'-二氨基二苯甲烷(MDA)是REACH法规中规定的首批高关注物质之一,其快速生物降解性直接影响在环境中的归趋,是鉴别其环境危害性和持久性的基本指标。本研究分别在2012年6月、8月和12月开展了3批MDA快速生物降解性试验... 详细信息

致癌性芳香胺4,4'-二氨基二苯甲烷(MDA)是REACH法规中规定的首批高关注物质之一,其快速生物降解性直接影响在环境中的归趋,是鉴别其环境危害性和持久性的基本指标。本研究分别在2012年6月、8月和12月开展了3批MDA快速生物降解性试验,每批试验同时采用4种OECD标准方法(OECD 301A、301B、301D和301F),采用了来自广州某生活污水处理厂曝气池的活性污泥为接种物。试验结果表明,MDA在301A、301B、301D和301F试验中的快速生物降解率(试验结束时)分别为94.8%±0.5%、29.5%±8.9%、0%±0%和100%±0%,根据301A、F的试验结果可判定MDA属于可快速生物降解性物质,而根据301B、D的试验结果MDA为不可快速生物降解性物质。3批试验中同一方法得到的MDA快速生物降解性结论较为一致,表明在不同季节采自同一污水处理厂曝气池的活性污泥中微生物的活性比较稳定。而不同方法之间的差异主要是由于试验条件及生物降解率表征指标的不同引起的。如,301D中MDA未发生生物降解是由于其试验条件较为严苛,接种物浓度和受试物浓度较低,试验过程供氧不充分等;301B试验结果与301A、301F差异较大是因为采用了不同的评价指标。301A和301F分别以溶解性有机碳和溶解氧的消耗率来评价化合物的快速生物降解性,而301B测定试验体系二氧化碳的产生量,忽视了被生物利用及降解为中间产物的那部分受试物中碳的流向,导致其生物降解率结果显著偏低。综合以上分析,我们认为MDA.具有快速生物降解性,301A、B和F试验中MDA发生了生物降解,可能产生新的有色中间产物。以往的研究结果均表明MDA为不可快速生物降解物质,本文首次报道了MDA的可快速生物降解性,为该物质的风险评估和管理提供了新的数据和参考依据。同时,我们推测对于适用所有301方法进行试验的化合物,采用301A或F有可能获得更高的生物降解率。

关键词： 4,4'-二氨基二苯甲烷快速生物降解性 OECD 301试验方法

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TALEN技术在提高啤酒酵母乙醇产量中的应用

TALEN技术在提高啤酒酵母乙醇产量中的应用

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中国菌物学会2015年学术年会

作者：叶伟章卫民刘桃妹谭国慧黄自磊广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室

生物乙醇是一种绿色可再生新能源,为了实现乙醇的高效转化,有不少研究者通过敲除乙醇脱氢酶2（ADH2）基因以提高微生物发酵生产乙醇的产量。TALEN是一种具有高度特异性的基因组编辑技术,本研究利用TALEN技术提高啤酒酵母乙醇产量,通过... 详细信息

生物乙醇是一种绿色可再生新能源,为了实现乙醇的高效转化,有不少研究者通过敲除乙醇脱氢酶2（ADH2）基因以提高微生物发酵生产乙醇的产量。TALEN是一种具有高度特异性的基因组编辑技术,本研究利用TALEN技术提高啤酒酵母乙醇产量,通过双酶切将靶向ADH2基因的TALEN左右臂载体插入至亚克隆载体中,然后将重组载体电转化至啤酒酵母AS2.4中,采用潮霉素B筛选阳性克隆。通过荧光定量PCR和测序证明ADH2基因被成功敲除。发酵啤酒酵母As2.4野生菌和基因敲除菌,采用LC-MS和GC检测发酵液中乙醇的产量,证明通过TALEN技术敲除啤酒酵母As2.4基因能使乙醇产量提高50%左右。本研究扩大了TALEN技术的应用范围,在促进酿酒酵母基因工程改造技术发展的同时促进生物乙醇的进一步发展。

关键词： TAELN 技术啤酒酵母乙醇产量

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基于高通量测序的巴戟天内生真菌多样性分析

基于高通量测序的巴戟天内生真菌多样性分析

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中国菌物学会2015年学术年会

作者：李挺邓旺秋李泰辉宋斌章卫民广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室

巴戟天(Morinda officinalis How.)属茜草科植物,是我国四大南药之一,具有补肾壮阳、增强免疫力和抗抑郁等功效。巴戟天与其内生真菌在长期的生态系统演化过程中形成了互惠共生关系,但相关研究报道甚少。现有实验条件下,环境中绝大多数... 详细信息

巴戟天(Morinda officinalis How.)属茜草科植物,是我国四大南药之一,具有补肾壮阳、增强免疫力和抗抑郁等功效。巴戟天与其内生真菌在长期的生态系统演化过程中形成了互惠共生关系,但相关研究报道甚少。现有实验条件下,环境中绝大多数的微生物不能培养,高通量测序是认识环境中微生物多样性的重要手段。本研究采用高通量测序技术对巴戟天根、茎、叶等不同部位的内生真菌进行了分析,根据97%的序列相似性水平划分OTU,分别获得的OTU为根307,茎219,叶220,其中根部内生真菌包含3门,9纲,15目,22科,25属,27种;茎部内生真菌包含3门,7纲,10目,14科,18属,18种;叶部内生真菌包含2门,8纲,15目,17科,18属,18种。结果显示,巴戟天根部内生真菌多样性程度明显高于茎和叶。根与茎的优势菌群均为篮状菌属(Talaromyces)但比例有所差别,叶为短梗霉属(Aureobasidium)。高通量测序还包含了多数的弱势菌群,能更好地反映出内生真菌的多样性水平。

关键词：南药内生真菌高通量测序

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一种新型TALEN重组载体在纤维堆囊菌中的应用

一种新型TALEN重组载体在纤维堆囊菌中的应用

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2015年中国微生物学会学术年会

作者：叶伟刘桃妹章卫民谭国慧黄自磊李赛妮广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州 510070

纤维堆囊菌是一种能产生广谱高效抗肿瘤化合物埃博霉素的粘细菌,但目前其遗传操作手段的匮乏了埃博霉素的广泛应用.TALEN是一种具有高度特异性的基因组编辑技术,但目前在微生物中的应用比较有限.本研究采用适用于纤维堆囊菌的启动子P43...

纤维堆囊菌是一种能产生广谱高效抗肿瘤化合物埃博霉素的粘细菌,但目前其遗传操作手段的匮乏了埃博霉素的广泛应用.TALEN是一种具有高度特异性的基因组编辑技术,但目前在微生物中的应用比较有限.本研究采用适用于纤维堆囊菌的启动子P43替换TALEN左臂和TALEN右臂上的真核启动子pGPD,然双酶切和测序筛选阳性克隆.提取啤酒酵母AS2.4的基因组,设计上下游引物扩增ADH2基因并将其插入至pET22b载体中,将重组载体pET22b-ADH2单独电转至纤维堆囊菌,同时将pET22b-ADH2和TALEN左右臂三种重组质粒同时转化至纤维堆囊菌中,用卡那霉素和氨苄青霉素筛选阳性克隆,测序和Western blot验证ADH2基因的敲除,实现适用于纤维堆囊菌TALEN载体的构建及其应用.

关键词：

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4种珍稀食用菌水提物的抗氧化活性研究

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微生物学杂志 2015年第4期35卷 106-109页

作者：梁慧嘉焦春伟杨咏善张命龙谢意珍广东粤微食用菌技术有限公司广东广州510070 广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

用DPPH自由基清除法、羟基自由基清除法和超氧阴离子自由基清除法对4种珍稀食用菌灵芝、云芝、茶树菇、松茸的水提物进行抗氧化活性评价,为更好评价其抗氧化活性,以维生素C作为阳性对照。实验结果显示:4种食用菌水提物具有不同程度的抗... 详细信息

用DPPH自由基清除法、羟基自由基清除法和超氧阴离子自由基清除法对4种珍稀食用菌灵芝、云芝、茶树菇、松茸的水提物进行抗氧化活性评价,为更好评价其抗氧化活性,以维生素C作为阳性对照。实验结果显示:4种食用菌水提物具有不同程度的抗氧化活性。云芝对DPPH自由基的清除能力最强,其IC50值为1.46 mg/m L,维生素C清除DPPH自由基的IC50为0.046 mg/m L;茶树菇对清除羟基自由基的清除能力最强,其IC50值为1.41 mg/m L,云芝和松茸也有较强清除羟自由基能力,其IC50值分别为1.56、1.57 mg/m L,三者的清除能力均明显优于阳性对照样品,维生素C清除羟自由基的IC50为2.41 mg/m L;灵芝和云芝有较强清除超氧阴离子自由基能力,其IC50值分别为124.48、138.28 mg/m L。

关键词：食用菌水提物 DPPH自由基羟基自由基超氧阴离子自由基

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全热交换器在食用菌工厂化栽培中节能研究

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微生物学杂志 2015年第1期35卷 105-108页

作者：胡惠萍刘远超谢意珍曹仁润周振辉杨小兵张智广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东广州510070 广东粤微食用菌技术有限公司广东广州510663

在一间工厂化栽培蟹味菇的菇房,进行空调系统全热交换器节能实验。结果显示,全热交换器热回收率可达33%~46%,1 a可节省运行电费2 044元,大大地节省新风处理的能量,是废气利用、节约能源的有效措施。

关键词：食用菌工厂化栽培节能全热交换器

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番茄沙司和烧烤汁中腐败菌的分离鉴定与性质研究

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工业微生物 2015年第5期45卷 50-54页

作者：冯劲陶宏兵孙廷丽施庆珊胡文峰广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 华南农业大学食品学院广东广州510642

为了分离鉴定变质的番茄沙司和烧烤汁中的腐败菌,测定了番茄沙司和烧烤汁的污染细菌,总数分别达108cfu/g和106cfu/g。通过涂平板分离,得到4株乳酸菌。再经生理生化分析和分子生物学鉴定,确定2株为布氏乳杆菌(从变质的番茄沙司和烧烤汁... 详细信息

为了分离鉴定变质的番茄沙司和烧烤汁中的腐败菌,测定了番茄沙司和烧烤汁的污染细菌,总数分别达108cfu/g和106cfu/g。通过涂平板分离,得到4株乳酸菌。再经生理生化分析和分子生物学鉴定,确定2株为布氏乳杆菌(从变质的番茄沙司和烧烤汁分离到)、1株为类布氏乳杆菌(从变质的番茄沙司分离到)和1株为鼠李糖乳杆菌(从变质的烧烤汁分离到)。进一步研究表明,分离所得的4株乳酸菌都具有很高的葡萄糖耐受能力,并且对苯甲酸钠和山梨酸钾均具有一定的耐药性。该研究为调味品生产企业在番茄沙司和烧烤汁生产过程的微生物控制提供了理论基础。

关键词：番茄沙司烧烤汁腐败菌乳酸菌

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灵芝水提物活性成分抗皮肤衰老功效研究

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安徽农业科学 2015年第6期43卷 27-29页

作者：黄守耀焦春伟梁慧嘉杨咏善陈家明张命龙洪雅琪谢意珍广东粤微食用菌技术有限公司广东广州510070 广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

[目的]用灵芝水提物研制抗衰老面膜,并进行延缓皮肤衰老功效的临床研究。[方法]采用感官评价、安全性评估、仪器测定等方法,评价灵芝水提物的抗衰功效。[结果]感官评估结果显示,受试者连续使用试验样品12周后,在皮肤干燥度、皮肤弹性、... 详细信息

[目的]用灵芝水提物研制抗衰老面膜,并进行延缓皮肤衰老功效的临床研究。[方法]采用感官评价、安全性评估、仪器测定等方法,评价灵芝水提物的抗衰功效。[结果]感官评估结果显示,受试者连续使用试验样品12周后,在皮肤干燥度、皮肤弹性、皮肤光泽度、细小皱纹以及皮肤光滑度等均达到较好的改善,改善率分别为91.17%、91.17%、94.12%、11.76%、91.18%;专业仪器测定结果显示,面部靶部位皮肤含水量随着使用时间的延长,均有逐渐升高的趋势,各时间点与产品使用前比较,差异均有显著性;皮肤弹性指标R2、R5较使用前无显著差异;面部靶部位细小皱纹随着使用时间的延长,平均长度、深度有逐渐变小的趋势,在使用后第12周,与使用前比较有显著差异。[结论]临床数据显示,灵芝水提物活性成分具有一定的延缓皮肤衰老的作用。

关键词：灵芝水提物活性成分抗皮肤衰老临床研究

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