检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农业科学 2007年第3期40卷 518-523页

作者：杨金易吴青王弘潘科雷红涛肖治理郑晓锋孙远明广东省教育厅食品质量与安全重点实验室/华南农业大学食品质量安全研究所广东省教育厅食品质量与安全重点实验室/华南农业大学食品质量安全研究所广州510642

目的制备高亲和力农药克百威单克隆抗体,建立克百威残留免疫检测方法,控制克百威残留,保障人民身体健康与保护环境。方法合成克百威半抗原BFNB,用人工抗原BFNB-BSA免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞在PEG4000作用下融合,经间接ELISA... 详细信息

目的制备高亲和力农药克百威单克隆抗体,建立克百威残留免疫检测方法,控制克百威残留,保障人民身体健康与保护环境。方法合成克百威半抗原BFNB,用人工抗原BFNB-BSA免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞在PEG4000作用下融合,经间接ELISA筛选及显微克隆法亚克隆,分离出阳性细胞株,腹水诱导法及辛酸-硫酸铵沉淀法大量制备及纯化单克隆抗体,间接ELISA法测定抗体滴度及亲和力,间接竞争ELISA法测定抗体特异性。结果获得1株稳定分泌抗克百威单克隆抗体的杂交瘤细胞株5D3,其培养上清和腹水抗体滴度分别为1﹕2.048×103和1:1.024×106,其抗体亚类为IgG1,亲和力常数为2.54×109 ***-1,IC50为1.18 ***-1,最低检测限为***-1。与克百威降解产物呋喃酚的交叉反应率为4.59×10-4%,另外几种结构类似的氨基甲酸酯类农药的交叉反应率均小于3.0×10-4%。结论此抗克百威的单克隆抗体亲合力高、特异性强,为建立克百威简便、快速、特异的免疫检测方法奠定了基础。

关键词：克百威单克隆抗体免疫化学分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

沙丁胺醇人工抗原合成及鉴定研究

引用

食品科学 2006年第12期27卷 276-280页

作者：袁利鹏孙远明雷红涛沈玉栋黄晓钰潘科黄杰华南农业大学食品质量安全研究所广东省教育厅食品质量安全重点实验室广东广州510642

用琥珀酸酐将沙丁胺醇活化后制备出半抗原沙丁胺醇半琥珀酸,经电喷雾电离质谱(ESI-MS)、红外光谱(IR)和核磁共振(1H-NMR)鉴定合成成功,同时证实琥珀酸酐连结在沙丁胺醇乙醇胺的羟基处,且半抗原以内胺盐形式存在。用混合酸酐、活泼酯方... 详细信息

用琥珀酸酐将沙丁胺醇活化后制备出半抗原沙丁胺醇半琥珀酸,经电喷雾电离质谱(ESI-MS)、红外光谱(IR)和核磁共振(1H-NMR)鉴定合成成功,同时证实琥珀酸酐连结在沙丁胺醇乙醇胺的羟基处,且半抗原以内胺盐形式存在。用混合酸酐、活泼酯方法将沙丁胺醇琥珀半酸分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原和包被抗原,经紫外吸收法鉴定偶联成功,偶联比分别为12.8:1、23:1。本研究为进一步制备沙丁胺醇抗体奠定了基础。

关键词：沙丁胺醇半抗原鉴定

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

除草剂丁草胺直接竞争ELISA检测方法研究

引用

农业环境科学学报 2006年第4期25卷 1018-1023页

作者：雷红涛冯伟雯沈玉栋杨金易王弘方坚生孙远明广东省教育厅食品质量安全重点实验室华南农业大学食品安全研究所广东广州510642

制备出3种不同结合比的酶标抗体,对检测条件进行了优化,建立了标记抗体固相抗原直接竞争ELISA(cdELISA)检测丁草胺的方法。结果表明,酶标抗体克分子比为1.55时偶合物活性最高,包被浓度1μg·mL-1,酶标抗体800倍稀释,稀释液采用2... 详细信息

制备出3种不同结合比的酶标抗体,对检测条件进行了优化,建立了标记抗体固相抗原直接竞争ELISA(cdELISA)检测丁草胺的方法。结果表明,酶标抗体克分子比为1.55时偶合物活性最高,包被浓度1μg·mL-1,酶标抗体800倍稀释,稀释液采用2×PBS,不含BSA、甲醇,建立的标准曲线IC50=1.7ng·mL-1,检测限为0.006ng·mL-1,检测范围0.06～2616.7ng·mL-1,批内变系数9.25%,批间变异系数23.55%。蒸馏水以及稀释10倍后的矿泉水、池塘水、稻田水添加1ng·mL-1和10ng·mL-1的丁草胺,用所建立的方法检测,平均回收率分别为93.27%、158.50%、119.75%、124.51%。本研究为进一步开发丁草胺免疫分析试剂盒奠定了基础。

关键词：丁草胺酶标抗体直接竞争ELISA 除草剂

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

丁草胺人工抗原及抗体制备研究

引用

食品科学 2007年第10期28卷 67-71页

作者：雷红涛肖治理方坚生沈玉栋刘文字孙远明冯伟雯广东省教育厅食品质量安全重点实验室华南农业大学食品安全研究所广东广州510642

以除草剂丁草胺、巯基丙酸为原料,合成丁草胺半抗原,用氢核磁共振、电喷雾质谱、红外光谱方法进行鉴定;通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备丁草胺人工抗原,用紫外光谱法对其鉴定;免疫动物后,间接竞争ELISA检测鉴定抗体。结果表明,... 详细信息

以除草剂丁草胺、巯基丙酸为原料,合成丁草胺半抗原,用氢核磁共振、电喷雾质谱、红外光谱方法进行鉴定;通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备丁草胺人工抗原,用紫外光谱法对其鉴定;免疫动物后,间接竞争ELISA检测鉴定抗体。结果表明,巯基丙酸与丁草胺连接生成半抗原,半抗原被连接到载体蛋白上,丁草胺人工抗原合成成功,获得了丁草胺小鼠抗血清。棋盘滴定法确定包被抗原工作浓度为3μg/ml,抗血清稀释倍数为32000倍。建立了间接竞争ELISA标准曲线,丁草胺IC50为1.44μg/ml,检测限为0.47μg/ml。

关键词：丁草胺人工抗原抗血清

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗克伦特罗单链抗体可溶性表达及特性鉴定

引用

食品科学 2007年第12期28卷 332-335页

作者：王弘潘科杨金易张宏斌王捷武婕雷红涛孙远明广东省教育厅食品质量安全重点实验室华南农业大学食品质量与安全研究所广东广州510640 广州军区广州总医院医学试验科广东广州510010

目的:表达抗克伦特罗(CBL)可溶性单链抗体(scFv)并进行抗原结合活性鉴定。方法:利用呈现scFv的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2151,IPTG诱导可溶性scFv表达。渗透休克法提取菌体细胞周质腔中scFv。经SDS-PAGE、Western-Blotting以及间接ELIS... 详细信息

目的:表达抗克伦特罗(CBL)可溶性单链抗体(scFv)并进行抗原结合活性鉴定。方法:利用呈现scFv的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2151,IPTG诱导可溶性scFv表达。渗透休克法提取菌体细胞周质腔中scFv。经SDS-PAGE、Western-Blotting以及间接ELISA法分析检测可溶性scFv的表达,并采用间接竞争ELISA法鉴定scFv的抗原结合活性。结果:细菌培养上清及周质腔中均有抗CBL可溶性scFv表达,其分子量约为29kD;上清液及周质腔中scFv效价分别为1:80,1:1600,能够被CBL竞争性抑制,IC50分别为0.78、0.95ng/ml。结论:可溶性抗CBLscFv在大肠杆菌HB2151中获得成功表达,表达的scFv与CBL具有很好的结合活性,可用于进一步建立CBL相应的免疫学检测方法。

关键词：克伦特罗单链抗体可溶性表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

脂质运载蛋白突变文库的应用及研究现状

引用

生命的化学 2007年第5期27卷 416-418页

作者：武婕王捷王弘广州军区广州总医院医学实验科广州510010 广东省教育厅食品质量安全重点实验室/华南农业大学食品质量与安全研究所广州510640

脂质运载蛋白(lipocalin)蛋白家族是一类广泛存在于生物界、与体内小分子物质运输和贮存相关的蛋白质家族。由于其高级结构具有与抗体高级结构类似的特点:由保守区和超变区组成,因此,以脂质运载蛋白为骨架构建的突变文库也成为一个新的... 详细信息

脂质运载蛋白(lipocalin)蛋白家族是一类广泛存在于生物界、与体内小分子物质运输和贮存相关的蛋白质家族。由于其高级结构具有与抗体高级结构类似的特点:由保守区和超变区组成,因此,以脂质运载蛋白为骨架构建的突变文库也成为一个新的研究领域,该文介绍脂质运载蛋白家族的结构特点、脂质运载蛋白突变文库的应用及研究现状。

关键词：脂质运载蛋白文库抗体结构

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

利用SD大鼠抗血清建立瘦肉精ciELISA检测方法的研究

引用

中国粮油学报 2006年第4期21卷 142-145页

作者：雷红涛高秀洁薛花黄丽潘科孙远明王弘肖治理广东省教育厅食品质量安全重点实验室华南农业大学食品安全研究所广州510642 广东农工商职业技术学院广州510507

以克伦特罗（CL）为竞争半抗原,人工合成的克伦特罗-卵清白蛋白（CL-OVA）为包被抗原,两者与一定量的SD大鼠抗CL血清反应,建立快速定量测定CL含量的间接竞争酶联免疫吸附检测（ciELISA）方法.结果表明,理想的包被抗原质量浓度为3μg/mL,... 详细信息

以克伦特罗（CL）为竞争半抗原,人工合成的克伦特罗-卵清白蛋白（CL-OVA）为包被抗原,两者与一定量的SD大鼠抗CL血清反应,建立快速定量测定CL含量的间接竞争酶联免疫吸附检测（ciELISA）方法.结果表明,理想的包被抗原质量浓度为3μg/mL,抗CL血清稀释倍数为1∶1.6×10^5.绘制出标准曲线,线性检测范围为4.88～5 000ng/mL,线性回归方程为y=-0.295 2x＋1.160 6,r^2=0.990 2,加标平均回收率为95.45%.该方法敏感性高,特异性强,操作简便,对于研制瘦肉精残留检测试剂盒有重要意义.

关键词：瘦肉精抗血清 ciELISA SD-大鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗克伦特罗单链抗体噬菌体展示文库的构建初步筛选及鉴定

引用

农产品加工（下） 2005年第9期 124-127页

作者：王弘潘科雷红涛杨金易孙远明广东省教育厅食品质量安全重点实验室华南农业大学食品质量安全研究所广州510642

构建抗克伦特罗(CBL)单链抗体噬菌体展示文库(scFv phage displaylibraries),从中筛选CBL特异性噬菌体单链抗体(phage scFv).提取经CBL免疫的小鼠的脾脏总RNA,RT-PCR扩增全套抗体轻链可变区(VL)及重链可变区(VH)基因,重叠延伸法将VL、V... 详细信息

构建抗克伦特罗(CBL)单链抗体噬菌体展示文库(scFv phage displaylibraries),从中筛选CBL特异性噬菌体单链抗体(phage scFv).提取经CBL免疫的小鼠的脾脏总RNA,RT-PCR扩增全套抗体轻链可变区(VL)及重链可变区(VH)基因,重叠延伸法将VL、VH片段拼接为单链抗体(scFv)基因片段.将scFv克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,转化感受态大肠杆菌TG1,用辅助噬菌体M13KO7进行超感染,构建噬菌体单链抗体库.对抗体库进行亲合富集后,ELISA法筛选阳性克隆.扩增出抗CBL的VL、VH基因片段并拼接为全长的scFv,抗体库库容约为1.6×104,经4轮"吸附-洗脱-扩增"的富集,ELISA筛选到6个具有CBL结合活性的phage-scFv.成功构建抗CBL单链抗体噬菌体展示库,并初步筛选到具有CBL结合活性的噬菌体scFv,特异性好,为进一步大量表达CBL单链抗体奠定了基础.

关键词：克伦特罗单链抗体噬菌体展示文库

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

有机磷农药三唑磷半抗原合成与鉴定

引用

中国食品学报 2006年第1期6卷 20-24页

作者：雷红涛孙远明邓礼舜肖治理王弘沈玉栋广东省教育厅食品质量安全重点实验室华南农业大学食品质量安全研究所广州510642

以三氯硫磷、苯唑醇、6-氨基己酸为原料,采用3步反应合成三唑磷半抗原6-[O-乙基-O-(1-苯基-1H-1,2,4-三唑-3-基)硫代磷酰胺基]己酸,经质谱和1H-NMR鉴定表明,合成成功,为进一步制备三唑磷抗体奠定了基础。

关键词：三唑磷芈抗原合成鉴定

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗克伦特罗单链抗体噬菌体展示文库的构建、初步筛选及鉴定

抗克伦特罗单链抗体噬菌体展示文库的构建、初步筛选及鉴定

引用

食品安全监督与法制建设国际研讨会暨第二届中国食品研究生论坛

作者：潘科王弘张宏斌王捷雷红涛杨金易孙远明广东省教育厅食品质量安全重点实验室／华南农业大学食品质量安全研究所广东省教育厅食品质量安全重点实验室／华南农业大学食品质量安全研究所广州军区广州总医院医学试验科广州军区广州总医院医学试验科广东省教育厅食品质量安全重点实验室／华南农业大学食品质量安全研究所广东省教育厅食品质量安全重点实验室／华南农业大学食品质量安全研究所广东省教育厅食品质量安全重点实验室／华南农业大学食品质量安全研究所

目的构建抗克伦特罗(CBL)单链抗体噬菌体展示文库(scFv phage display libraries),从中筛选CBL特异性噬菌体单链抗体(phage scFv)．方法提取经CBL免疫的小鼠的脾脏总RNA,RT-PCR 扩增全套抗体轻链可变区(VL)及重链可变区(VH)基因,重叠延... 详细信息

目的构建抗克伦特罗(CBL)单链抗体噬菌体展示文库(scFv phage display libraries),从中筛选CBL特异性噬菌体单链抗体(phage scFv)．方法提取经CBL免疫的小鼠的脾脏总RNA,RT-PCR 扩增全套抗体轻链可变区(VL)及重链可变区(VH)基因,重叠延伸法将VL、VH片段拼接为单链抗体 (scFv)基因片段．将scFv克隆到噬菌粒载体pCANTABSE中,转化感受态大肠杆菌TGI,用辅助噬菌体M13KO7进行超感染,构建噬菌体单链抗体库．对抗体库进行亲合富集后,ELISA法筛选阳性克隆．结果扩增出抗CBL的VL、VH基因片段并拼接为全长的scFv,抗体库库容约为1．6×104,经4 轮“吸附-洗脱-扩增”的富集,ELISA筛选到6个具有CBL结合活性的phage-scFv．结论成功构建抗CBL单链抗体噬菌体展示库,并初步筛选到具有CBL结合活性的噬菌体scFv,特异性好,为进一步大量表达CBL单链抗体奠定了基础．

关键词：克伦特罗单链抗体噬菌体展示文库

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：