检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2005年第3期21卷 379-381,389页

作者：杨志刚曾耀英何贤辉王通江逊唐德燊暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 广东医学院附属医院广东湛江524001

目的:建立小鼠NK细胞的分离及培养扩增的方法。方法:用两步黏附分离法和磁珠活化的细胞分选(MACS)法,从小鼠脾脏的单个核细胞(MNC)中分离NK细胞,计数所得细胞的总数,并用FITC抗小鼠CD3和PE抗小鼠NK1.1单克隆荧光抗体染色后,用流式细胞仪... 详细信息

目的:建立小鼠NK细胞的分离及培养扩增的方法。方法:用两步黏附分离法和磁珠活化的细胞分选(MACS)法,从小鼠脾脏的单个核细胞(MNC)中分离NK细胞,计数所得细胞的总数,并用FITC抗小鼠CD3和PE抗小鼠NK1.1单克隆荧光抗体染色后,用流式细胞仪(FACS)检测NK细胞的纯度。以YAC -1为靶细胞,用MTT比色法检测NK细胞的杀伤活性。结果:将两步黏附分离法分离的2×107个脾MNC培养5、10、15、20d,计数细胞的总数并检测CD3-NK1.1+细胞百分率,分别为0.5×107、1.4×107、2.6×107、3.0×107和18.36%、43.44%、55.68%、60.03%。效靶细胞25∶1时,NK细胞的杀伤率分别为54.38%、66.54%、79.38%和83.86%,明显高于脾MNC(41.93%)(P<0.01)。MACS法纯化前后细胞的总数和CD3-NK1.1+细胞的百分率,分别为1.0×108、1.5×106和2.54%、93.60%;但纯化后的细胞在体外培养20d时,只扩增到1.9×106个。结论:用两步黏附分离法分离的小鼠NK细胞,培养2～3wk可获得大量的NK细胞,纯度可达55%～60%;在效靶细胞为25∶1时,NK细胞对YAC1细胞的杀伤率约为80%。

关键词： NK细胞分离培养扩增增殖 IL-2

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免疫突触形成过程中T细胞受体的重定向运动:涡旋驱动模型

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中国免疫学杂志 2005年第11期21卷 818-821,825页

作者：刘顺会韩博平曾耀英何贤辉广东药学院广州510224 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510623

目的:建立T细胞受体(TCR)在免疫突触形成过程中作重定向(reorientation)运动的机制模型.方法:基于经典流体力学环境中的双分子反应传能原理,提出了T细胞受体的涡旋驱动模型,利用免疫突触内耦合的受体或配体分子作为涡源驱动T细胞受体分... 详细信息

目的:建立T细胞受体(TCR)在免疫突触形成过程中作重定向(reorientation)运动的机制模型.方法:基于经典流体力学环境中的双分子反应传能原理,提出了T细胞受体的涡旋驱动模型,利用免疫突触内耦合的受体或配体分子作为涡源驱动T细胞受体分子的募集.结果:模型计算的结果表明,在强度及作用频率同时具备一定范围的涡旋连续驱动下,TCR重定向运动速度可达到实验测定的范围(0.04～0.1 μm/s).结论:本模型证明突触内受体/配体对耦合时通过将其结合自由能转化为细胞内外流体涡旋运动的机械能可能直接提供了TCR重定向运动的驱动力.

关键词：免疫突触 T细胞受体重定向运动涡旋

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白藜芦醇对小鼠T细胞活化、增殖及细胞因子分泌的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第6期21卷 697-699,703页

作者：俞瑜曾耀英季煜华肇静娴刘良暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 香港浸会大学中医药学院

目的:研究白藜芦醇(RSV)对小鼠T淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响,为阐明其免疫抑制作用提供实验依据。方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的RSV预先孵育1h,用多克隆刺激剂佛波醇酯和离子霉素刺激T细胞活化增殖。采用3H-TdR掺... 详细信息

目的:研究白藜芦醇(RSV)对小鼠T淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响,为阐明其免疫抑制作用提供实验依据。方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的RSV预先孵育1h,用多克隆刺激剂佛波醇酯和离子霉素刺激T细胞活化增殖。采用3H-TdR掺入法检测RSV对T细胞增殖的影响;用RT-PCR检测IL-2及IFN-γmRNA的表达;用胞内细胞因子染色法分析IL-2和IFN-γ的分泌。结果:RSV能抑制T细胞增殖,也能在mRNA水平及蛋白水平上抑制IL-2及IFN-γ的分泌。结论:RSV对T细胞的免疫抑制作用,可能与其抑制T细胞的活化、增殖和细胞因子的分泌有关。

关键词：白藜芦醇活化增殖细胞因子

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喘可治注射液抑制小鼠变应性接触性皮炎的实验研究

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中国病理生理杂志 2005年第4期21卷 757-760页

作者：熊恺轩曾耀英蔡小嫦王通肇静娴易敏暨南大学附属第一医院皮肤科广东广州516032 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州516032

目的:探讨中药喘可治注射液抑制小鼠变应性接触性皮炎(Ⅳ型变态反应)的效果。方法:将小鼠按给药不同分为喘可治注射液高、中,低剂量组,地塞米松(DEX)组,苯海拉明及生理盐水组,利用2 ,4 -二硝基氟苯诱发的小鼠左耳变应性接触性皮炎的动... 详细信息

目的:探讨中药喘可治注射液抑制小鼠变应性接触性皮炎(Ⅳ型变态反应)的效果。方法:将小鼠按给药不同分为喘可治注射液高、中,低剂量组,地塞米松(DEX)组,苯海拉明及生理盐水组,利用2 ,4 -二硝基氟苯诱发的小鼠左耳变应性接触性皮炎的动物模型,各组于第0d、1d致敏前2h ,第2d和第5d诱发前2h及诱发后6h腹腔注射给药,通过测量左耳厚度差、左耳重量差,体重差及观察左耳病理改变,比较不同剂量喘可治注射液之间以及与对照组之间的疗效。结果:喘可治注射液高、中、低剂量和DEX组小鼠左耳厚度及重量的增加,浸润的单核细胞和中性粒细胞的数量均明显低于生理盐水组(P <0 . 0 1) ;DEX组小鼠左耳红肿的程度虽稍低于喘可治组,但小鼠体重差与其它组比较均有显著差异(P <0 . 0 1) ;苯海拉明组小鼠变应性接触性皮炎的程度与生理盐水组差异无显著。结论:喘可治注射液具有明显抑制小鼠变应性接触性皮炎的作用。

关键词：超敏反应,迟发型皮炎,变应性接触性喘可治

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氧化苦参碱抑制二硝基氟苯所致小鼠接触性皮炎及淋巴细胞增殖

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中国病理生理杂志 2005年第5期21卷 931-935页

作者：伍斌蔡小嫦曾耀英施军王通肇静娴黄秀艳暨南大学附属第一医院皮肤科广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫中心教育部重点实验室广东广州510632

目的探讨氧化苦参碱(OMT)对二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用及小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法①建立DNFB所致小鼠ACD模型,以不同剂量的OMT、PBS、氢化可的松(HCT)进行腹腔注射,检测小鼠耳廓肿胀度变化。②利用... 详细信息

目的探讨氧化苦参碱(OMT)对二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用及小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法①建立DNFB所致小鼠ACD模型,以不同剂量的OMT、PBS、氢化可的松(HCT)进行腹腔注射,检测小鼠耳廓肿胀度变化。②利用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色,流式细胞术检测OMT对小鼠淋巴细胞增殖的影响。结果①OMT对DNFB所致小鼠ACD呈剂量依赖性抑制作用,且与同等剂量HCT作用效果相似,但副作用明显减小。②体外实验证明,在500、125和31mg/L组,OMT对小鼠淋巴细胞增殖呈剂量依赖性抑制。结论OMT对DNFB所致小鼠ACD有显著的抑制作用,而且抑制小鼠淋巴细胞增殖;OMT是一种免疫抑制剂。

关键词：二硝基氟苯皮炎,变应性接触性苦参淋巴细胞

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PKCθ-EGFP融合蛋白在HeLa细胞中的表达及其对细胞形态的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2005年第4期26卷 470-474页

作者：杜丽蕊徐丽慧何贤辉暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学生物工程研究所广东广州510632

目的:分析增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与蛋白激酶C-θ(PKCθ)的融合蛋白(PKCθ-EGFP)在HeLa细胞中的表达、亚细胞定位及其对细胞形态的影响。方法:用脂质转染胺(Lipofec-tAMINE 2000)为载体分别以pPKCθ-EGFP和pEGFP-N1转染HeLa细胞,流式... 详细信息

目的:分析增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与蛋白激酶C-θ(PKCθ)的融合蛋白(PKCθ-EGFP)在HeLa细胞中的表达、亚细胞定位及其对细胞形态的影响。方法:用脂质转染胺(Lipofec-tAMINE 2000)为载体分别以pPKCθ-EGFP和pEGFP-N1转染HeLa细胞,流式细胞仪分析其表达率,激光共聚焦显微镜分析其亚细胞定位,同时分析二丁酸佛波醇酯(PDB)和小檗碱对其亚细胞定位和细胞形态的影响。结果:转染pEGFP-N1或pPKCθ-EGFP的HeLa细胞48 h后,表达绿色荧光的细胞百分率分别为(70.9±4.4)%和(45.8±2.3)%(P<0.05)。表达的PKCθ-EGFP融合蛋白均匀分布于细胞内,与EGFP蛋白在细胞内的分布相似。PDB刺激30 min后,表达PKCθ-EGFP的HeLa细胞的形态发生显著变化,即由原来的梭形变成圆形,荧光强度增强。但表达EGFP的HeLa细胞的形态及荧光分布均不受影响。小檗碱对PDB诱导的HeLa细胞的形态和EGFP-PKCθ融合蛋白的分布无明显影响。结论:表达PKCθ-EGFP融合蛋白的HeLa细胞在PDB作用下细胞形态发生显著变化。

关键词：蛋白激酶Cθ 绿色荧光蛋白融合蛋白小檗碱细胞转染

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MMP-2、TIMP-2和VEGF-C在肝细胞性肝癌中的表达及其与淋巴结转移关系的研究

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中国病理生理杂志 2005年第7期21卷 1336-1339页

作者：朱彩荣曾祥凤陈亚进陈积圣中山大学附属第二医院肝胆外科广东广州510120 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:本实验旨在探讨MMP-2、TIMP-2和VEGF-C与HCC淋巴结转移的关系,寻找诊断HCC淋巴结转移的指标,为HCC治疗方式选择提供有意义指导。方法:选取临床手术切除、病理确诊、石蜡包埋的HCC有/无淋巴结转移癌组织标本各22例,4μm厚连续切片,... 详细信息

目的:本实验旨在探讨MMP-2、TIMP-2和VEGF-C与HCC淋巴结转移的关系,寻找诊断HCC淋巴结转移的指标,为HCC治疗方式选择提供有意义指导。方法:选取临床手术切除、病理确诊、石蜡包埋的HCC有/无淋巴结转移癌组织标本各22例,4μm厚连续切片,用鼠抗人MMP-2单抗、TIMP-2单抗和兔抗人VEGF-C多抗,免疫组化SP法检测,并比较其在癌组织中的表达情况。结果:MMP-2、TIMP-2和VEGF-C在HCC有淋巴结转移组总阳性表达率分别为81.8%、13.6%和72.7%;在无淋巴结转移组则分别为54.5%、40.9%和36.4%。HCC有淋巴结转移组MMP-2和VEGF-C的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(P<0.05),而TIMP-2的阳性表达率则相反,低于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论:MMP-2和VEGF-C的过量表达及TIMP-2的低表达可能与HCC发生淋巴结转移有关;VEGF-C可能是促进HCC淋巴结转移的重要因素。联合检测MMP-2、TIMP-2和VEGF-C的表达情况可能对判断淋巴结转移和临床预后有重要价值。

关键词：癌,肝细胞明胶酶A 淋巴转移内皮生长因子

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氧化苦参碱对刀豆蛋白A刺激的小鼠淋巴细胞增殖影响的研究

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中国现代医学杂志 2005年第7期15卷 1005-1008页

作者：伍斌蔡小嫦曾耀英王通王希朝曾翔凤暨南大学附属第一医院皮肤科广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫中心教育部重点实验室广东广州510632

目的应用荧光染料C FD A-SE(C arboxyfluorescein diacetate,succinim idyl ester)染色检测氧化苦参碱(O xym atrine,O M T)对刀豆蛋白A(C on A)刺激的小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法利用C FD A-SE染色,流式细胞术检测小鼠T淋巴细胞在多... 详细信息

目的应用荧光染料C FD A-SE(C arboxyfluorescein diacetate,succinim idyl ester)染色检测氧化苦参碱(O xym atrine,O M T)对刀豆蛋白A(C on A)刺激的小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法利用C FD A-SE染色,流式细胞术检测小鼠T淋巴细胞在多克隆刺激剂C on A和O M T的共同作同下荧光强度的变化,并应用相关软件分析O M T对小鼠淋巴细胞增殖的影响程度。结果培养48h,流式细胞仪检测的淋巴细胞C FSE荧光强度,对照组未出现子代峰,即淋巴细胞没有增殖。C on A组明显的出现3个峰,说明C on A刺激后48h细胞出现了明显的细胞增殖,与对照组相比荧光强度减半明显。在C on A+O M T各剂量组中,高剂量组即O M T500μg/m L组,原代峰显著高于C on A组,各子代峰显著低于C on A组,但与对照组比较差异无显著性,说明O M T明显抑制了淋巴细胞的增殖,中剂量组即O M T125μg/m L组和高剂量组结果一致,说明这一剂量的O M T仍然明显抑制小鼠淋巴细胞的增值,O M T低剂量组即O M T31μg/m L组和C on A组比较差异没有显著性,和对照组比较,各代细胞荧光强度差异有显著性,即这一剂量的O M T对淋巴细胞增殖抑制作用不明显。培养72h后,各组之间荧光强度变化情况与48h的情况基本一致。经C ELLQ uest软件拟合后得到各项增殖指标显示,O M T在500?

关键词： CFDA—SE OMT 淋巴细胞增殖

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人EGF受体胞外域cDNA克隆及其序列分析

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2005年第2期26卷 168-173,179页

作者：徐丽慧洪岸何贤辉暨南大学生物工程研究所 .教育部基因组药物工程研究中心广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室

目的:克隆编码人表皮生长因子受体(EGFR)胞外域的cDNA ,构建可溶性EGFR(sEGFR)的哺乳动物细胞表达载体。方法:以RT -PCR方法从人胎盘中克隆编码EGFR胞外域的cDNA ,测定其序列,构建sEGFR真核表达载体。结果:从人胎盘绒毛组织中成功克隆编... 详细信息

目的:克隆编码人表皮生长因子受体(EGFR)胞外域的cDNA ,构建可溶性EGFR(sEGFR)的哺乳动物细胞表达载体。方法:以RT -PCR方法从人胎盘中克隆编码EGFR胞外域的cDNA ,测定其序列,构建sEGFR真核表达载体。结果:从人胎盘绒毛组织中成功克隆编码EGFR胞外域的cNDA ,通过PCR方法在起始位点前加入Kozak序列并添加终止密码,构建了sEGFR的真核表达载体。该基因编码的蛋白质包含信号肽以及L1、S1、L2和S2等4个结构域。序列分析表明该基因有3个碱基与以往报道的基因不同,即15 6 2G→A、16 2 0G→C、1887T→A ,前两个改变导致氨基酸Arg4 97Lys和Lys5 16Asn的改变,后一个为同义突变Thr6 0 5。结论:成功克隆编码EGFR胞外域的cD NA 。

关键词：表皮生长因子受体可溶性EGFR 单核苷酸多态性

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临床分离一株具有荚膜的白假丝酵母菌

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中山大学学报（医学科学版） 2005年第4期26卷 F002-F004页

作者：马廉兰钟有添曾祥凤李坊贞刘志春张文平江西赣南医学院微生物学教研室江西赣州341000 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

【目的】观察白假丝酵母菌临床菌株的荚膜结构并探讨其形成条件。【方法】临床标本直接涂片染色镜检和用沙保氏琼脂平板、琼脂斜面及沙保氏液体培养基培养、用涂片革兰染色和Hiss荚膜染色镜检、出芽试验、厚膜孢子形成试验、糖发酵试验... 详细信息

【目的】观察白假丝酵母菌临床菌株的荚膜结构并探讨其形成条件。【方法】临床标本直接涂片染色镜检和用沙保氏琼脂平板、琼脂斜面及沙保氏液体培养基培养、用涂片革兰染色和Hiss荚膜染色镜检、出芽试验、厚膜孢子形成试验、糖发酵试验、小白鼠与家兔试验、扫描电镜与透射电镜观察等进行鉴定。【结果】(1)该临床分离菌为革兰阳性、念珠状菌;能形成芽管、假菌丝、厚膜孢子;能发酵葡萄糖和麦芽糖产酸又产气;发酵蔗糖产酸不产气;不发酵乳糖。(2)人阴道分泌物涂片、感染小白鼠及家兔体内及沙保氏液体培养基培养均可形成荚膜,荚膜层的厚度可因不同环境及培养时间的长短而有差异,但均≥0.2滋m,边界明显。沙保氏液体培养物经离心(1500r/min,15min,3次)荚膜层仍然可见。【结论】该菌株可被鉴定为具有荚膜的白假丝酵母菌。

关键词：白假丝酵母菌阴道分泌物涂片液体培养基透射电镜观察染色镜检厚膜孢子糖发酵试验临床分离菌不发酵乳糖形成条件荚膜结构临床菌株琼脂平板直接涂片临床标本革兰染色家兔试验扫描电镜培养时间不同环境

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