检索结果-内蒙古大学图书馆

广东海洋大学学报 2019年第6期39卷 1-8页

作者：邹子鸿郑琦黄瑜汤菊芬王蓓鲁义善简纪常蔡佳广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨水产经济动物病害控制广东省普通高等学校重点实验室

【目的】克隆尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)淋巴毒素α基因(lymphotoxin alpha, LTα),分析该基因的组织分布,探讨该基因在抗菌抗病毒免疫过程中的重要作用。【方法】通过RACE技术获得尼罗罗非鱼淋巴毒素α基因(On-LTα)的cDNA全长... 详细信息

【目的】克隆尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)淋巴毒素α基因(lymphotoxin alpha, LTα),分析该基因的组织分布,探讨该基因在抗菌抗病毒免疫过程中的重要作用。【方法】通过RACE技术获得尼罗罗非鱼淋巴毒素α基因(On-LTα)的cDNA全长,通过生物信息学分析其序列结构特征;利用实时荧光定量PCR检测基因的组织分布特征,以及健康尼罗罗非鱼感染无乳链球菌后该基因的表达变化,并进一步分离出尼罗罗非鱼非特异性毒性细胞(NCC),检测脂多糖(LPS)和聚肌胞苷酸(Poly I:C)刺激后,On-LTα在NCC中的表达变化。【结果】On-LTα基因序列全长为2769 bp,包含705 bp开放阅读框(ORF),编码234个氨基酸(GenBank登录号:MK770358)。该蛋白属于跨膜蛋白,具有肿瘤坏死因子(TNF)家族保守结构域。实时荧光定量结果表明,On-LTα在健康尼罗罗非鱼11种组织中均有表达,在脾脏中的表达量最高;无乳链球菌刺激后,该基因在脾脏中的表达量显著升高;LPS与PolyI:C刺激后,On-LTα在NCC中表达量也显著上调。【结论】On-LTα参与了尼罗罗非鱼抗菌抗病毒的免疫应答过程。

关键词：尼罗罗非鱼淋巴毒素α基因基因克隆基因表达非特异性细胞毒性细胞(NCC)

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罗湖病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

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广东海洋大学学报 2019年第5期39卷 31-37页

作者：吴凤雷黄瑜黄郁葱蔡双虎简纪常汤菊芬广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨水产经济动物病害控制广东省普通高等学校重点实验室

【目的】建立一种快速、灵敏、特异的罗非鱼(Oreochromis spp)罗湖病毒定量检测方法。【方法】根据罗湖病毒节段8保守区设计一对特异性引物,建立检测罗湖病毒的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性... 详细信息

【目的】建立一种快速、灵敏、特异的罗非鱼(Oreochromis spp)罗湖病毒定量检测方法。【方法】根据罗湖病毒节段8保守区设计一对特异性引物,建立检测罗湖病毒的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行了评价。【结果】标准曲线在2.5×10^8~2.5×10^0拷贝数之间有良好的线性关系(相关系数R2=0.999),检测限为2.5×100个拷贝。试验内及试验间变异系数分别为0.11%~0.43%与0.54%~1.13%,重复性强;对水生动物其他病毒和细菌均无扩增反应,有很好的特异性。【结论】新建立的罗湖病毒实时荧光定量PCR检测方法特异性好、灵敏度高、重复性强,可用于TiLV的早期的快速诊断、流行病学调查和防控。

关键词：罗非鱼罗湖病毒检测实时荧光定量RT-PCR 标准曲线

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斜带石斑鱼肠道乳酸菌的分离、鉴定及特性研究

斜带石斑鱼肠道乳酸菌的分离、鉴定及特性研究

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广东水产学会首届青年科技论坛

作者：伍元植广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨水产经济动物病害控制广东省普通高等学校重点实验室广东湛江524088

从健康斜带石斑鱼肠道中分离出3株形态特征不同的菌株,经革兰氏染色、氧化酶及触酶反应筛选出3株革兰氏阳性球菌,通过生化鉴定和16S rRNA测序结果发现他们分别为粪肠球菌、乳酸片球菌和乳酸乳球菌,命名为WYZ-1、WYZ-2和WYZ-3.选取嗜水... 详细信息

从健康斜带石斑鱼肠道中分离出3株形态特征不同的菌株,经革兰氏染色、氧化酶及触酶反应筛选出3株革兰氏阳性球菌,通过生化鉴定和16S rRNA测序结果发现他们分别为粪肠球菌、乳酸片球菌和乳酸乳球菌,命名为WYZ-1、WYZ-2和WYZ-3.选取嗜水气单胞菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈氏弧菌以及大肠杆菌以琼脂扩散法测定WYZ-1、WYZ-2和WYZ-3的抑菌活性,结果表明WYZ-3对大肠杆菌无抑制作用,对溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈氏弧菌和嗜水气单胞菌都有较显著的抑制作用,其中对溶藻弧菌和副溶血弧菌抑菌效果最好,抑菌直径为21.5-23.5mm;粪肠球菌和乳酸片球菌均对5种致病菌有抑制作用,抑菌直径为9.5-22.5mm.利用药敏纸片琼脂扩散法检测WYZ-1、WYZ-2和WYZ-3对34种常用抗生素的药敏性,结果表明3株乳酸菌均对氨基糖类、喹诺酮类多数、复方新诺明、多念菌素B和氨曲南表现为耐药,对青霉素类多数、四环素类、大环内脂类及克林霉素和氯霉素敏感;WYZ-3对头孢类抗生素表现为敏感,WYZ-1和WYZ-2则对大部分头孢类抗生素表现为耐药.

关键词：乳酸菌斜带石斑鱼生物特性抑菌谱药敏性

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乌鳢出血病的病原及组织病理学研究

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广东海洋大学学报 2017年第4期37卷 41-45页

作者：伍元植简纪常蔡双虎广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨水产经济动物病害控制广东省普通高等学校重点实验室广东湛江524088

对广东顺德勒流镇某水产养殖场患出血病的乌鳢进行病原分离,对分离菌进行形态学分析、生化鉴定、PCR鉴定和人工感染。经鉴定,分离菌为温和气单胞菌,其半致死温度LD50为1.645×105 CFU/g。组织病理学观察表明,鳃小片毛细血管严重充血... 详细信息

对广东顺德勒流镇某水产养殖场患出血病的乌鳢进行病原分离,对分离菌进行形态学分析、生化鉴定、PCR鉴定和人工感染。经鉴定,分离菌为温和气单胞菌,其半致死温度LD50为1.645×105 CFU/g。组织病理学观察表明,鳃小片毛细血管严重充血,基部细胞增生,部分鳃小片相互融合成肉芽肿结构;肝细胞出现空泡,部分区域肝细胞坏死、溶解和脂肪变性;肾小体血管球充血破裂,部分肾小管上皮细胞玻璃样变,细胞质中出现大量空泡;脾脏中血细胞明显增多,淋巴细胞减少;肠黏膜下层和固有膜可见结缔组织增生、水肿现象。温和气单胞菌可引起乌鳢的肝、脾和肾等重要器官出现典型的病理变化并引起死亡。

关键词：乌鳢出血病病原温和气单胞菌病理观察

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乌鳢出血病的病原及组织病理学研究

乌鳢出血病的病原及组织病理学研究

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中国水产学会鱼病专业委员会2017年学术讨论会

对广东顺德勒流镇某水产养殖场患出血病的乌鳢进行病原分离，对分离菌进行形态学分析、生化鉴定、PCR鉴定和人工感染.经鉴定，分离菌为温和气单胞菌，其半致死温度LD50为1.645×105CFU/g.组织病理学观察表明，鳃小片毛细血管严重充... 详细信息

对广东顺德勒流镇某水产养殖场患出血病的乌鳢进行病原分离，对分离菌进行形态学分析、生化鉴定、PCR鉴定和人工感染.经鉴定，分离菌为温和气单胞菌，其半致死温度LD50为1.645×105CFU/g.组织病理学观察表明，鳃小片毛细血管严重充血，基部细胞增生，部分鳃小片相互融合成肉芽肿结构;肝细胞出现空泡，部分区域肝细胞坏死、溶解和脂肪变性;肾小体血管球充血破裂，部分肾小管上皮细胞玻璃样变，细胞质中出现大量空泡;脾脏中血细胞明显增多，淋巴细胞减少;肠黏膜下层和固有膜可见结缔组织增生、水肿现象.温和气单胞菌可引起乌鳢的肝、脾和肾等重要器官出现典型的病理变化并引起死亡.

关键词：乌鳢出血病病原温和气单胞菌病理观察

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南美白对虾养成期间病害防治技术的调查

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河北渔业 2017年第12期 34-37页

作者：韦光本唐黎广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨水产经济动物病害控制广东省普通高等学校重点实验室广东湛江524088 贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025

随着南美白对虾(Penaeus vannamei)种质质量下降、养殖水体污染及养殖技术落后等问题的出现,制约了南美白对虾养殖业的发展。笔者调查海南省南美白对虾养成过程中常见病害及其防治技术,记录各种疾病的病原、发病症状及防治技术等,并研... 详细信息

随着南美白对虾(Penaeus vannamei)种质质量下降、养殖水体污染及养殖技术落后等问题的出现,制约了南美白对虾养殖业的发展。笔者调查海南省南美白对虾养成过程中常见病害及其防治技术,记录各种疾病的病原、发病症状及防治技术等,并研讨南美白对虾、水体、病原菌三者之间的影响关系,确定致病机理。调查发现,病害的发生与对虾体质下降和养殖水体的恶化程度有直接与间接关系,而病害防治的基本要求是增强对虾体质,促进养殖环境的物质转换和物质能量流动,提高水体的自净能力和减少有害物质的长期积累,从而减少病害发生,提高养成率和生产收益。

关键词：南美白对虾(Penaeus vannamei) 病害防治调查海南

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无乳链球菌phoB基因缺失株构建及其作为金鲳减毒活疫苗潜力的评估

无乳链球菌phoB基因缺失株构建及其作为金鲳减毒活疫苗潜力的评估

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2017广西海上丝绸之路建设·钦州论坛

作者：蔡小辉王蓓彭银辉黎源鲁义善黄郁葱简纪常吴灶和钦州学院海洋学院海洋生命科学与技术研究中心北部湾海洋生物多样性养护重点实验室中国钦州536011 广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨水产经济动物病害控制广东广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨水产经济动物病害控制广东省普通高等学校重点实验室中国湛江524025 钦州学院海洋学院海洋生命科学与技术研究中心北部湾海洋生物多样性养护重点实验室中国钦州536011

无乳链球菌可以在吞噬细胞和非吞噬细胞中存活从而引起鱼类的败血症和脑膜炎。目前无乳链球菌的疫苗是基于胞外产物(extracellular,products,ECP)、亚单位和灭活全菌制备,然而无乳链球菌多种血清型的存在导致其免疫保护率大大降低。

关键词：无乳链球菌 phoB基因敲除减毒活疫苗金鲳

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无乳链球菌sodA基因的克隆、序列分析及原核表达载体构建

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广东海洋大学学报 2016年第3期36卷 15-19页

作者：王松艳蔡双虎鲁义善简纪常吴灶和广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨水产经济动物病害控制广东省普通高等学校重点实验室广东湛江524088

无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)是引起我国南方罗非鱼链球菌病的主要病原之一,SodA是无乳链球菌重要的毒力因子之一。根据链球菌sod A基因保守区设计引物,采用PCR扩增sod A基因部分序列,反向PCR和巢式PCR扩增其侧翼序列,成功获... 详细信息

无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)是引起我国南方罗非鱼链球菌病的主要病原之一,SodA是无乳链球菌重要的毒力因子之一。根据链球菌sod A基因保守区设计引物,采用PCR扩增sod A基因部分序列,反向PCR和巢式PCR扩增其侧翼序列,成功获得无乳链球菌sod A基因。无乳链球菌sod A基因序列全长为699 bp,含开放阅读框609 bp,可编码202个氨基酸,演绎的SodA蛋白主要由α螺旋和不规则卷曲构成。BLAST分析表明,该蛋白氨基酸序列与犬链球菌(***)及副乳房链球菌(***)相应蛋白的氨基酸序列相似性分别高达80%和79%。将sodA基因克隆至原核表达载体pET28a上成功构建了重组质粒p ET28a-sod A,导入Escherichia coli BL21(DE3),诱导表达的重组蛋白质分子质量约为24 ku,主要以包涵体形式存在于表达菌中。

关键词：无乳链球菌 sodA基因克隆原核表达

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草鱼出血病分子流行病学及GCRV多样性研究

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安徽农业科学 2016年第11期44卷 120-125,153页

作者：黄毅昌雷燕杨玉滔闫秀英简纪常吴灶和广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室/水产经济动物病害控制广东普通高校重点实验室广东湛江524088 广州利洋水产科技股份有限公司广东广州510515

[目的]分析不同基因型GCRV分离株与患草鱼出血病草鱼症状的相关性。[方法]采用RT-PCR检测患病草鱼,应用生物信息学方法分析基因型内和基因型间不同分离株间的差异。[结果]对近3年来草鱼出血病分子流行病学分析发现,患草鱼出血病病鱼多为... 详细信息

[目的]分析不同基因型GCRV分离株与患草鱼出血病草鱼症状的相关性。[方法]采用RT-PCR检测患病草鱼,应用生物信息学方法分析基因型内和基因型间不同分离株间的差异。[结果]对近3年来草鱼出血病分子流行病学分析发现,患草鱼出血病病鱼多为"肠炎型"症状,且检测发现其病原多属于GCRV基因型Ⅲ型。对GCRV的多样性分析表明,不同分离株同源蛋白的同源率高达93%以上,却被给予完全不同的名称,给GCRV多样性研究带来一定的困难;同一基因型不同分离株同源蛋白间的变异位点较少,且功能位点发生变异的更少;不同基因型不同分离株同源蛋白间的保守位点较少,且这些保守位点中只有极少数位点为功能位点;不同基因型分离株同源结构蛋白间存在较大的差异,且同源非结构蛋白间的差异更为显著。[结论]草鱼出血病不同临床症状可能与其病原基因型不同有关。

关键词：草鱼呼肠孤病毒草鱼出血病分子流行病学多样性

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石斑鱼遗传多样性及其系统发育分析

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安徽农业科学 2015年第29期43卷 75-79页

作者：李庆黄毅昌闫秀英简纪常吴灶和广东海洋大学广东湛江524088 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室水产经济动物病害控制广东普通高校重点实验室广东湛江524088

石斑鱼不仅是重要的海水经济鱼类,而且具有重要的生态地位。但是,石斑鱼的分类、物种多样性、资源保护及其合理开发等需要对石斑鱼系统发育的分析与研究。线粒体基因是研究石斑鱼系统进化的理想分子标记,因此获得了青石斑鱼***长度为1 0... 详细信息

石斑鱼不仅是重要的海水经济鱼类,而且具有重要的生态地位。但是,石斑鱼的分类、物种多样性、资源保护及其合理开发等需要对石斑鱼系统发育的分析与研究。线粒体基因是研究石斑鱼系统进化的理想分子标记,因此获得了青石斑鱼***长度为1 039bp的16S r DNA、tRNA-Leu和NA1部分序列,基于其及ND2、cyt b对石斑鱼系统发育进行了分析,结果表明石斑鱼遗传多样性与地域分布关系不大,不同系统树分析都表明同一石斑鱼物种的系统发生关系基本一致,石斑鱼种间亲缘关系较近。此外,也发现某些异种间亲缘关系比同种间亲缘关系近的现象。

关键词：石斑鱼遗传多样性系统发育

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