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微生物学通报 2023年第8期50卷 3515-3525页

作者：刘翔万强苗森牛得权张阳阳蒋富凤曲晓莹张菊梅蔡芷荷陈博吴清平合肥工业大学食品与生物工程学院安徽合肥 230601 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070 广东环凯生物科技有限公司广东肇庆 526238 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070

[背景]禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)引发的禽霍乱疫情造成了巨大的危害,而现有培养基存在培养菌密度较低的问题.[目的]研制高抗原活性的禽多杀性巴氏杆菌疫苗培养基.[方法]通过单因素试验、Plackett-Burman试验和响应面分... 详细信息

[背景]禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)引发的禽霍乱疫情造成了巨大的危害,而现有培养基存在培养菌密度较低的问题.[目的]研制高抗原活性的禽多杀性巴氏杆菌疫苗培养基.[方法]通过单因素试验、Plackett-Burman试验和响应面分析方法对禽多杀性巴氏杆菌培养基的成分进行调整,并对不同发酵阶段的菌体进行免疫原性测定.最后使用该培养基培养细菌后制备疫苗并通过动物攻毒试验评价其保护效果.[结果]使用研制的培养基培养禽多杀性巴氏杆菌,活菌密度能够在 6 h达到约 1.84×1010 CFU/mL,增菌效果是对照培养基的 2.6 倍;免疫原性测定结果显示在生长平台期菌体的抗原活性最高;攻毒试验表明制备的疫苗能够很好地抵抗禽多杀性巴氏杆菌的侵袭.[结论]研制出了高抗原活性的禽多杀性巴氏杆菌疫苗培养基,为疫苗的生产奠定了基础.

关键词：禽多杀性巴氏杆菌高抗原活性疫苗培养基响应面法

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基于响应面分析的高抗原活性猪水肿病大肠杆菌疫苗培养基的研制及效果评价

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微生物学通报 2023年第9期50卷 4141-4153页

作者：张阳阳万强牛得权苗森蒋富凤刘翔曲晓莹张菊梅蔡芷荷陈博吴清平陕西科技大学食品与生物工程学院陕西西安 710021 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070 广东环凯生物科技有限公司广东肇庆 526238 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070

[背景]猪水肿病大肠杆菌引发的疾病造成了很大的危害,但现有培养基存在培养密度低的问题.[目的]研制出高抗原活性猪水肿病大肠杆菌疫苗培养基.[方法]以常用的市售猪水肿培养基为对照,通过单因素试验、爬坡试验(Plackett-Burman,PB)、响... 详细信息

[背景]猪水肿病大肠杆菌引发的疾病造成了很大的危害,但现有培养基存在培养密度低的问题.[目的]研制出高抗原活性猪水肿病大肠杆菌疫苗培养基.[方法]以常用的市售猪水肿培养基为对照,通过单因素试验、爬坡试验(Plackett-Burman,PB)、响应面(Box-Behnken,BB)试验对猪水肿培养基进行响应面优化,得到猪水肿培养基最优配方.以响应面试验得到的培养基培养猪水肿病大肠杆菌,评价不同培养时间点菌株的抗原活性,制作灭活疫苗,进行动物免疫保护试验.[结果]对研制的培养基进行扩大培养验证,发现扩大培养得到的菌株活菌数可达 5×109 CFU/mL以上,约为对照组的 2 倍.制备的灭活疫苗效价可达 1:140 000,并在 9 h时抗原蛋白效价达到最高.[结论]本研究研制出的疫苗培养基显著提高了猪大肠杆菌菌体密度,并可提高菌体抗原活性,为猪水肿病灭活疫苗的制备提供了技术指引.

关键词：猪水肿病响应面法疫苗培养基高抗原活性

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基于响应面分析的高抗原活性鸭疫里默氏杆菌疫苗培养基的研制及其效果评价

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微生物学通报 2023年第8期50卷 3526-3537页

作者：牛得权万强苗森刘翔张阳阳蒋富凤曲晓莹张菊梅蔡芷荷陈博吴清平合肥工业大学食品与生物工程学院安徽合肥 230601 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070 广东环凯生物科技有限公司广东肇庆 526238 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070

[背景]鸭疫里默氏杆菌广泛存在于养殖场,引起雏鸭发生传染性浆膜炎,严重危害养鸭业的发展.[目的]提高鸭疫里默氏杆菌发酵培养水平和抗原活性,为鸭疫里默氏杆菌灭活疫苗的研制提供技术指引.[方法]利用单因素及响应面的试验设计方法,针对... 详细信息

[背景]鸭疫里默氏杆菌广泛存在于养殖场,引起雏鸭发生传染性浆膜炎,严重危害养鸭业的发展.[目的]提高鸭疫里默氏杆菌发酵培养水平和抗原活性,为鸭疫里默氏杆菌灭活疫苗的研制提供技术指引.[方法]利用单因素及响应面的试验设计方法,针对鸭疫里默氏杆菌进行疫苗培养基的研制,并探究不同发酵时间点该菌的抗原活性,选择抗原活性最高点时制备灭活疫苗,通过动物免疫保护试验评价疫苗免疫效果.[结果]使用研制的疫苗培养基发酵培养鸭疫里默氏杆菌,其活菌数能够达到 4.68×1010 CFU/mL,较市面上该菌专用的培养基提高 2.29 倍.该菌发酵 12 h后抗原活性达到最高,在此时制备的灭活疫苗诱导小鼠产生的抗体水平显著高于商品化灭活疫苗,攻毒保护率达到了 100%.[结论]本研究研制的培养基具有优异的增菌效果,可作为生产鸭疫里默氏杆菌灭活疫苗抗原的发酵培养基,疫苗生产过程中可选择菌株抗原活性达到最高时收集菌体.

关键词：鸭疫里默氏杆菌疫苗培养基抗原活性响应面

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人肠道细菌CAZymes对中药多糖利用位点的研究进展

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中国中药杂志 2025年

作者：郭龙明白光剑田馨胡惠萍王雅琪陈少丹江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室广东省科学院微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台华南农业大学食品学院

多糖作为中药的重要活性成分，其生物利用度与健康效应高度依赖于人肠道菌群中碳水化合物活性酶（carbohydrate-active enzymes， CAZymes）的代谢调控。该文系统总结了CAZymes的分类和在肠道菌群中的功能分布，以及其编码的多糖利用位... 详细信息

多糖作为中药的重要活性成分，其生物利用度与健康效应高度依赖于人肠道菌群中碳水化合物活性酶（carbohydrate-active enzymes， CAZymes）的代谢调控。该文系统总结了CAZymes的分类和在肠道菌群中的功能分布，以及其编码的多糖利用位点（polysaccharide utilization loci， PULs）通过动态调控机制识别并降解中药多糖的过程。肠道细菌CAZymes通过底物结合模块（CBMs）和催化域的协同作用，精准识别多糖的糖苷键类型及空间构象，将复杂多糖转化为寡糖和短链脂肪酸（SCFAs）等代谢产物，进而通过免疫调节、代谢稳态和肠道屏障修复等途径影响宿主健康。在此基础上进一步提出，解析CAZymes-多糖复合物的三维结构、探索跨菌门协同代谢机制及开发菌群导向型中药多糖递送系统，是未来研究的重点方向。该文系统揭示了肠道CAZymes介导中药多糖代谢的核心机制，为阐明中药药效物质基础及中药多糖创新药物开发提供理论依据。

关键词：肠道细菌中药多糖碳水化合物活性酶多糖利用位点拟杆菌

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葡萄球菌属细菌数值鉴定系统的研制与效果评价

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微生物学通报 2025年

作者：孙健赵昕宇万强吴清平郑晓峥魏文杰叶应旺吴毓薇叶青华合肥工业大学食品与生物工程学院广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫生健康委微生物食品营养与安全科技创新平台国家市场监督管理总局重点实验室(食品微生物安全大数据技术) 广东环凯生物科技有限公司

【背景】葡萄球菌属（Staphylococcus）细菌是临床感染中的重要病原体，不同种的葡萄球菌对人体危害程度有所不同，因此对葡萄球菌属分型是临床医学中精准治疗的理论基础。现有的不同葡萄球菌种间分型技术存在成本高、操作烦琐、准确性... 详细信息

【背景】葡萄球菌属（Staphylococcus）细菌是临床感染中的重要病原体，不同种的葡萄球菌对人体危害程度有所不同，因此对葡萄球菌属分型是临床医学中精准治疗的理论基础。现有的不同葡萄球菌种间分型技术存在成本高、操作烦琐、准确性低等缺点，因此目前仍以常规分离鉴定技术为主。【目的】开发一种简便、可靠的葡萄球菌属生化分型鉴定方法，建立葡萄球菌属细菌数值鉴定系统并对其鉴定性能进行评价。【方法】将鉴定系统所需的生化反应配方浓缩整合到一组注塑件中制得鉴定条，结合数值鉴定软件构建葡萄球菌属细菌数值鉴定系统；以基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）法为参考标准，利用从农贸样品中选择性分离的葡萄球菌对其鉴定准确度进行验证。【结果】对训练集的370株葡萄球菌进行生化试验，创建了用于鉴别葡萄球菌属内26个种/亚种的生化反应阳性概率数据库。将结果导入Identax软件构建葡萄球菌属细菌数值鉴定系统，并制定相关标准对鉴定结果进行评价。通过对测试集的422株葡萄球菌属分离株进行生化数值鉴定，其结果与MALDI-TOF MS方法的总鉴定一致率为91%。【结论】本研究开发的葡萄球菌属细菌数值鉴定系统操作简便、价格低廉、准确率高，可为基层实验室和食品安全检测提供实验依据，具有良好的临床应用推广前景。

关键词：葡萄球菌属生化鉴定分型技术基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱

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超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用检测饮用水中N-亚硝胺类消毒副产物

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食品科学 2022年第2期43卷 310-315页

作者：孙铭古其会张菊梅郭伟鹏吴慧清张友雄韦献虎吴清平中国科学院广州化学研究所广东广州510650 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室广东广州510070 中国科学院大学北京100049

为评估饮用水中新型消毒副产物N-亚硝胺对食品饮料行业带来的潜在风险,建立一种基于超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪同时检测饮用水中9种N-亚硝胺类消毒副产物的方法。样品通过固相萃取,进入超高效液相色谱-质谱检测系统,经RRHD-C1... 详细信息

为评估饮用水中新型消毒副产物N-亚硝胺对食品饮料行业带来的潜在风险,建立一种基于超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪同时检测饮用水中9种N-亚硝胺类消毒副产物的方法。样品通过固相萃取,进入超高效液相色谱-质谱检测系统,经RRHD-C18色谱柱分离,以含有0.2%甲酸的10 mmol/L碳酸氢铵溶液和甲醇作为流动相梯度洗脱,采用大气压化学电离正离子多反应监测扫描模式检测。在优化条件下9种N-亚硝胺在一定质量浓度范围内线性关系良好,相关系数大于0.996,方法检出限为0.10~0.33 ng/L,方法的回收率为62.1%~118.2%,相对标准偏差为2.2%~10.0%,分析时间为6 min。与现有方法比较,本方法灵敏度高、检测速度快、适用性强,能满足食品饮料生产中饮用水N-亚硝胺类消毒副产物的检测需求。

关键词：超高效液相色谱-三重四极杆质谱 N-亚硝胺类消毒副产物固相萃取饮用水

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灵芝孢子粉脂质成分HPLC-ELSD指纹图谱构建及含量测定

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食用菌学报 2023年第6期30卷 52-59页

作者：夏凤娜关小莺陈少丹陈秋颜张一帆杨小兵广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070

以16批(S1~S16)不同来源的灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉为材料,构建灵芝孢子粉脂质成分高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)指纹图谱,将S1~S16的HPLC-ELSD指纹图谱数据导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版),指认共有峰和... 详细信息

以16批(S1~S16)不同来源的灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉为材料,构建灵芝孢子粉脂质成分高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)指纹图谱,将S1~S16的HPLC-ELSD指纹图谱数据导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版),指认共有峰和评价相似度,采用HPLC-ELSD测定S1~S16中亚油酸、棕榈酸、油酸和麦角甾醇含量。结果表明:共指认4个共有峰,分别为亚油酸、棕榈酸、油酸和麦角甾醇;除S14外,其他15批灵芝孢子粉中脂质成分HPLC-ELSD指纹图谱相似度高,较为稳定;不同来源的灵芝孢子粉中亚油酸、棕榈酸和油酸的含量差异较大,麦角甾醇含量较为稳定。

关键词：灵芝孢子粉高效液相色谱-蒸发光散射检测脂质成分指纹图谱

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基于肠道微生态改善的益生菌抗糖尿病作用机制研究进展

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微生物学报 2023年第1期63卷 59-75页

作者：蔡淑珍梁婷婷张菊梅陈惠元吴清平广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室、农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070 广东省人民医院广东省医学科学院广东省心血管病研究所广东广州510080 广东环凯生物科技有限公司广东肇庆510663 广东科环生物科技有限公司广东广州510525

2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)会引起糖脂代谢紊乱,严重危害人类健康,为了防治这一流行病,急需寻找安全和无副作用的抗糖尿病的方法,其中,基于微生物方法治疗T2D最常见的策略是补充益生菌,其可通过对不同组织和代谢通路的调节来实现... 详细信息

2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)会引起糖脂代谢紊乱,严重危害人类健康,为了防治这一流行病,急需寻找安全和无副作用的抗糖尿病的方法,其中,基于微生物方法治疗T2D最常见的策略是补充益生菌,其可通过对不同组织和代谢通路的调节来实现抗糖尿病的功效。益生菌摄入可通过降低慢性低度炎症,减少氧化应激,调节肠道菌群,增加短链脂肪酸含量来达到调控血糖的目的;通过增加胆固醇与胆盐的共沉淀作用,胆固醇在胃肠道内转化为粪甾醇,降低肝脏中3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶活性,降低胆固醇转运体的表达及对脂肪细胞的调节来达到降脂的目的。本综述系统总结了益生菌抗糖尿病现状和基于肠道微生态的抗糖尿病分子机制,以期为益生菌作为降糖降脂等保健产品的开发利用提供理论依据。

关键词： 2型糖尿病肠道微生态益生菌降血脂降血糖

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肠道微生物群在人类健康衰老中的作用机制研究进展

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微生物学报 2023年第1期63卷 85-105页

作者：蔡淑珍吴磊谢新强陈惠元吴清平广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室、农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070 广东药科大学附属第一医院广东广州510080 广东环凯生物科技有限公司广东肇庆510663 广东科环生物科技有限公司广东广州510525

衰老的特征是组织器官的功能衰退以及衰老相关疾病风险的增加,这给维护和促进健康长寿带来一系列新的挑战。尽管进行了广泛的衰老相关研究,但进展有限。人们越来越意识到肠道微生物群的结构和功能积极参与了衰老过程。肠道微生物群紊乱... 详细信息

衰老的特征是组织器官的功能衰退以及衰老相关疾病风险的增加,这给维护和促进健康长寿带来一系列新的挑战。尽管进行了广泛的衰老相关研究,但进展有限。人们越来越意识到肠道微生物群的结构和功能积极参与了衰老过程。肠道微生物群紊乱表现为许多与年龄相关的肠外器官轴的衰老。肠道微生物群可以被调节,这暗示了通过肠道微生物群抗衰老是一个可以实现的重要目标。本综述总结了肠道微生物群在不同年龄段中的动态演替,这种动态的肠道微生物群从胎儿到出生和婴儿期开始迅速发展,从断奶期到幼儿期迅速变化,然后建立稳定的成年人菌群,直到随着年龄增长最后发生衰退;肠道微生物群与肠外器官轴(大脑、心脏、肝脏、胰腺、肌肉、皮肤和骨骼)衰老相关疾病,以及通过饮食、粪菌移植和微生态制剂调节肠道微生物群靶向抗衰老的研究进展,以期为调控肠道微生物群抗衰老研究提供参考。

关键词：肠道微生物群健康衰老肠外器官轴衰老疾病抗衰老

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人星状病毒和人札幌病毒双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

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微生物学通报 2025年第4期52卷 1810-1829页

作者：林鹏吴毓薇赵昕宇蒋富凤万强薛亮徐环蔡芷荷吴清平广东环凯微生物科技有限公司广东广州510663 广东环凯生物科技有限公司广东肇庆526238 华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510000 广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室、国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台广东广州510070

【背景】人星状病毒(human Astrovirus,HAstV)和人札幌病毒(human Sapovirus,HuSaV)是引起人类急性胃肠炎的重要病原体,尤其对婴幼儿、老年人和免疫力低下等人群造成严重的威胁。目前尚无疫苗和特异性手段防控病毒的感染与传播,因此加... 详细信息

【背景】人星状病毒(human Astrovirus,HAstV)和人札幌病毒(human Sapovirus,HuSaV)是引起人类急性胃肠炎的重要病原体,尤其对婴幼儿、老年人和免疫力低下等人群造成严重的威胁。目前尚无疫苗和特异性手段防控病毒的感染与传播,因此加强检测对防控病毒的传播具有重要的意义。【目的】建立能同时检测HAstV和HuSaV的双重荧光定量RT-PCR方法,为HAstV和HuSaV的快速检测和流行病学调查提供技术支持。【方法】针对HAstV和HuSaV保守区域基因序列,设计特异性检测引物和探针并优化反应体系,建立HAstV和HuSaV双重荧光定量RT-PCR检测方法,并分析其特异性、敏感性和重复性。【结果】HAstV和HuSaV双重荧光定量RT-PCR检测方法针对HAstV和HuSaV最低检测线分别为15 copies/μL和2.1 copies/μL;与其他常见的食源性病毒、致病菌和乳酸菌无交叉反应;批内和批间重复性试验变异系数均小于3.5%。采用人工模拟不同浓度的病毒污染牡蛎样品,结果显示HAstV和HuSaV双重荧光定量RT-PCR检测方法能检测出所有受污染的牡蛎样品,与阳性对照组检测结果差异不显著(P>0.05);利用所建立的HAstV和HuSaV双重荧光定量RT-PCR检测方法检测不同食品样品的HAstV和HuSaV,其阳性率分别为10.83%和0%。【结论】本研究建立的HAstV和HuSaV双重荧光定量RT-PCR检测方法具有较好的敏感性、特异性和重复性,适用于食品样品中HAstV和HuSaV的快速检测及大规模流行病学调查。

关键词：人星状病毒人札幌病毒双重荧光定量RT-PCR检测方法

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