检索结果-内蒙古大学图书馆

国际病毒学杂志 2024年第1期31卷 1-7页

作者：曹颖雯薛亮徐锐权高珺珊寇晓霞广州市传染性疾病临床快速诊断与预警重点实验室、广州医科大学金域检验学院 510180 广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室、农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广州510070

目的诺如病毒(norovirus,NoV)是导致人类急性胃肠炎的主要病原体之一,目前仍没有获批上市的NoV疫苗,开发安全有效且便于推广的NoV疫苗具有重要意义.本研究基于乳酸菌表达系统构建在体外表达GⅡ.2型人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)主... 详细信息

目的诺如病毒(norovirus,NoV)是导致人类急性胃肠炎的主要病原体之一,目前仍没有获批上市的NoV疫苗,开发安全有效且便于推广的NoV疫苗具有重要意义.本研究基于乳酸菌表达系统构建在体外表达GⅡ.2型人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)主要衣壳蛋白(viral protein 1,VP1)的重组乳酸乳球菌,并评价其诱导机体产生黏膜免疫和体液免疫的能力.方法将HuNoV GⅡ.2型VP1基因片段无缝克隆至乳酸菌表达系统中,体外诱导表达目的蛋白VP1,并通过正交试验优化蛋白表达条件.对小鼠进行口服免疫后通过ELISA方法测定其血清和组织中的免疫因子水平.结果构建了一株针对HuNoV GⅡ.2型的新型重组乳酸乳球菌疫苗,口服免疫后可诱导小鼠产生NoV特异性IgG和IgA,并诱导产生黏膜免疫系统的主要效应分子sIgA.结论本研究构建的口服乳酸菌疫苗能够诱导小鼠产生针对NoV的先天性和获得性免疫,并产生对应的免疫分子.与被广泛用于研究的病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)疫苗相比,此口服疫苗还具有制备快捷、成本更低、运输方便的优势.

关键词：人诺如病毒口服疫苗乳酸菌 VP1

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我国诺如病毒易重组基因型GII.P12/GII.3毒株RNA聚合酶的表达与功能表征

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微生物学通报 2022年第3期49卷 964-974页

作者：蔡淑珍高珺珊薛亮程彤王林平梁燕惠张菊梅吴清平广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070

【背景】诺如病毒是引起人类急性胃肠炎的主要食源性病原体。目前尚无获批的诺如病毒疫苗和药物,诺如病毒RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)是当前抗诺如病毒药物开发的主要靶点。【目的】表达我国诺如病毒易重组基因型GII.P12/GII.3毒株的RdRp... 详细信息

【背景】诺如病毒是引起人类急性胃肠炎的主要食源性病原体。目前尚无获批的诺如病毒疫苗和药物,诺如病毒RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)是当前抗诺如病毒药物开发的主要靶点。【目的】表达我国诺如病毒易重组基因型GII.P12/GII.3毒株的RdRp并系统地表征其复制特征。【方法】基于大肠杆菌系统表达并纯化得到高纯度可溶性的GII.P12/GII.3诺如病毒RdRp蛋白,通过体外RNA合成实验确定温度、模板、底物和盐浓度对RdRp功能的影响。【结果】GII.P12/GII.3诺如病毒的RdRp在30℃、1mmol/L氯化锰条件下酶活性最佳。酶动力学实验表明底物GTP和模板polyC的Km值分别为79.0μmol/L和10.6μg/mL。体外抑制试验表明,RdRp在微摩尔范围内可被利巴韦林、法维拉韦和NF023有效抑制,半数最大抑制浓度分别为23、59和11μmol/L。【结论】首次表征了诺如病毒易重组基因型GII.P12/GII.3毒株RdRp的酶学特性。基于荧光的酶活性测试表明,RdRp在体外具有催化活性,这为诺如病毒RdRp抑制剂的筛选及诺如病毒感染的治疗提供了良好的技术和理论支持。

关键词：诺如病毒 RNA依赖性RNA聚合酶 GII.P12/GII.3 抑制剂

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屎肠球菌132胆盐水解酶基因的克隆表达与酶学特性

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现代食品科技 2022年第8期38卷 35-43页

作者：杨玲双谢新强李滢张菊梅丁郁吴清平王涓华南农业大学食品学院广东广州510642 广东省科学院微生物研究所广东省微生物安全与健康重点实验室华南应用微生物国家重点实验室广东广州510075

该研究旨在探究降胆固醇潜在菌株屎肠球菌132胆盐水解酶(bile salt hydrolase,BSH)的活性,通过PCR技术克隆目的基因并在大肠杆菌BL21中表达,同时探讨其酶学特性。利用茚三酮法对其菌体破碎液BSH活性进行测定,比酶活达0.55 U/mg。通过克... 详细信息

该研究旨在探究降胆固醇潜在菌株屎肠球菌132胆盐水解酶(bile salt hydrolase,BSH)的活性,通过PCR技术克隆目的基因并在大肠杆菌BL21中表达,同时探讨其酶学特性。利用茚三酮法对其菌体破碎液BSH活性进行测定,比酶活达0.55 U/mg。通过克隆其目的基因,连接pET-28a(+)的表达载体并进行异源表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)实验显示,该酶分子量约37 ku。当底物为甘氨胆酸钠(glycocholic acid,GCA)、pH 5.50时,BSH酶活达4.93 U/mg。酶学特性结果表明,GCA为底物、pH 5.50、温度为30℃时达最适条件,BSH水解能力最强,酶活达6.59 U/mg,温度在4-30℃时,pH为5-7有较好的热稳定和pH稳定性。不同离子对酶活的影响实验表明Na^(+)、Ca^(2+)、Mg^(2+)均对酶活有激活作用;Mn^(2+)、Fe^(2+)对酶活影响不大,但Ni^(2+)、Al^(3+)、Li^(2+)、Co^(2+)、Zn^(2+)均对酶活有强抑制作用,比酶活降到10%以下,几乎丧失活性。通过酶反应动力学得出该酶的V_(max)为6.44μmol/(min·mg),K_(m)值为3.16 mmol/L。因此,通过bsh基因克隆并异源表达,提高了屎肠球菌132BSH活性,并且BSH水解各类胆盐能力较强,为降胆固醇功能食品的开发与应用奠定基础。

关键词：屎肠球菌132 胆盐水解酶基因克隆异源表达酶学特性

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基于代谢组学的抗生素与细菌间作用研究进展

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微生物学报 2022年第2期62卷 403-413页

作者：陈敏玲韦献虎张菊梅丁郁吴清平广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室广东广州5100702 华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006

抗生素杀菌是一个复杂的生理过程,杀菌抗生素与靶点作用后的下游代谢变化与抗生素作用效果紧密联系,其通过干扰细菌代谢状态加速死亡进程,而细菌改变代谢状态也能影响抗生素的有效性。代谢组学通过监测细菌在抗生素作用下的变化提供全... 详细信息

抗生素杀菌是一个复杂的生理过程,杀菌抗生素与靶点作用后的下游代谢变化与抗生素作用效果紧密联系,其通过干扰细菌代谢状态加速死亡进程,而细菌改变代谢状态也能影响抗生素的有效性。代谢组学通过监测细菌在抗生素作用下的变化提供全面代谢信息,我们回顾近年来基于代谢组学对抗生素与细菌间作用的研究进展,以期为开发抗生素佐剂提高抗生素效果提供参考。

关键词：代谢组学细菌代谢细菌耐药抗生素佐剂

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益生菌对皮肤光老化的修复作用及其机制研究进展

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微生物学报 2022年第3期62卷 882-894页

作者：陈慧贞李滢谢新强张菊梅吴清平广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070 华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006

皮肤是人体最大的器官,也是机体防御外界各种物理、化学及病原微生物侵害的重要组织。皮肤系统若出现老化,则导致其功能衰退、防御功能下降,危害机体健康。日常生活中,各类光照时刻侵害着我们的皮肤,加速其老化的速度。研究指出,光照尤... 详细信息

皮肤是人体最大的器官,也是机体防御外界各种物理、化学及病原微生物侵害的重要组织。皮肤系统若出现老化,则导致其功能衰退、防御功能下降,危害机体健康。日常生活中,各类光照时刻侵害着我们的皮肤,加速其老化的速度。研究指出,光照尤其是日光中的紫外辐射可通过直接损伤DNA、产生活性氧、降解细胞外基质和诱发炎症等多种方式损伤皮肤细胞,导致皮肤功能的下降。近年来,越来越多的研究发现微生态对于皮肤健康有重要影响,而益生菌作为调节皮肤微生态平衡的手段,通过抗氧化、减少细胞外基质降解和抑制炎症因子的表达,延缓皮肤光老化。本文系统综述了皮肤光老化的机制与益生菌抵抗光老化的研究进展,进而探讨益生菌改善皮肤健康的应用模式,以期对益生菌在皮肤抗光老化应用提供参考。

关键词：皮肤光老化益生菌氧化损伤抗氧化

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家庭厨房环境细菌和真菌群落及多样性调查

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环境与健康杂志 2023年第3期40卷 244-250页

作者：刘欣琪陈玲陆永成蔡芷荷黄晓铃陈辉邓梅清郭伟鹏广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台广东广州510070 广东环凯微生物科技有限公司欧派家居集团股份有限公司

目的了解家庭厨房细菌和真菌污染状况和菌群结构。方法本研究采集6个家庭厨房的水槽、台面、墙面、砧板、刀具、柜门、碗柜把手和抹布8个位点的样本,基于可培养技术分析细菌和真菌负载量,同时分离鉴定优势菌,另外采用高通量测序技术分... 详细信息

目的了解家庭厨房细菌和真菌污染状况和菌群结构。方法本研究采集6个家庭厨房的水槽、台面、墙面、砧板、刀具、柜门、碗柜把手和抹布8个位点的样本,基于可培养技术分析细菌和真菌负载量,同时分离鉴定优势菌,另外采用高通量测序技术分析细菌和真菌多样性及组成。结果样本细菌负载水平普遍高于真菌,砧板表面可培养微生物检出值最高达2.0×10^(4)CFU/cm^(2),蜡样芽胞杆菌、黑曲霉和近平滑假丝酵母3种条件致病菌在家庭厨房中高频出现。高通量测序结果显示家庭厨房优势细菌有金黄杆菌、不动杆菌、栖水菌、副球菌,优势真菌有假丝酵母、Apiotrichum、镰刀菌和枝孢。墙面和台面等干燥表面的细菌和真菌物种丰度较高,而可形成生物膜细菌和潜在致病菌主要负载在水槽和抹布等潮湿表面。结论家庭厨房接触表面细菌和真菌污染具有多样性,提示厨房接触表面存在微生物污染风险。

关键词：家庭厨房微生物污染分离鉴定高通量测序

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中药饮片有害微生物负载及鉴定技术研究进展

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微生物学通报 2022年第7期49卷 2838-2848页

作者：陈玲陈维刘振杰曾嘉辉郭伟鹏吴清平张菊梅广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室广东广州510070 华南农业大学食品学院广东广州510642

中药饮片在种植、采收、加工和储藏等过程中均有可能受到多种微生物的污染,特别是有害微生物如致病细菌、产毒真菌等的存在会影响中药饮片的安全性。本文综述了近年来中药饮片有害微生物的污染情况,比较不同国家药典对中药饮片微生物限... 详细信息

中药饮片在种植、采收、加工和储藏等过程中均有可能受到多种微生物的污染,特别是有害微生物如致病细菌、产毒真菌等的存在会影响中药饮片的安全性。本文综述了近年来中药饮片有害微生物的污染情况,比较不同国家药典对中药饮片微生物限度和真菌毒素限量的差异,归纳当前用于不同微生物鉴定方法的适用性,以期为中药饮片质量安全研究工作提供参考。

关键词：中药饮片有害微生物污染微生物鉴定

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唐菖蒲伯克霍尔德菌椰毒致病变种污染调查及其生长与产毒特性分析

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现代食品科技 2022年第10期38卷 283-289页

作者：李兵叶青华赵美平陈维黄乙卿吴清平张菊梅华南农业大学食品学院广东广州510642 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070 广东省微生物分析检测中心广东广州510070

唐菖蒲伯克霍尔德菌椰毒致病种(Burkholderia gladioli pathovar cocovenenans,BGC)是迄今我国发现的发病率和死亡率最高的食源性致病菌。为调查广州市市售湿米面制品、银耳及木耳中BGC的污染状况,同时掌握在不同培养条件下BGC的生长与... 详细信息

唐菖蒲伯克霍尔德菌椰毒致病种(Burkholderia gladioli pathovar cocovenenans,BGC)是迄今我国发现的发病率和死亡率最高的食源性致病菌。为调查广州市市售湿米面制品、银耳及木耳中BGC的污染状况,同时掌握在不同培养条件下BGC的生长与产毒规律,依据GB 4789.29-2020对100份食品样品进行定性分析;通过测定BGC菌株在各培养条件下菌液的OD600值和毒素含量,分析了不同的温度、时间、pH及NaCl浓度下BGC的生长状况与产毒能力。结果表明,100份食品样品中共检出1份(湿木耳)BGC阳性样品,污染率为1%(1/100);BGC的生长与产毒受培养基的影响较大,碱性(pH值为9.5~10.5)与一定渗透压(NaCl质量浓度为0.02~0.04 g/mL)环境下,BGC在马铃薯葡萄糖水中能生长,而在脑心浸液肉汤中几乎不生长,BGC在马铃薯半固体琼脂中的产毒量(231.24μg/mL)远大于BHI半固体琼脂和LB半固体琼脂;BGC适宜生长和产毒的温度为20~37℃、适宜pH值为4~8.5,其中最适生长温度与pH值分别为37℃、6.0,最佳产毒温度与pH值为30℃、7.0;BGC在低温(4~15℃)下仍能存活,且有少量的毒素产生(2.11μg/mL);当NaCl质量浓度为0.005 g/mL时,产毒量从未添加前的139.80降至52.27μg/mL,达到0.04 g/mL时,产毒为0。结果提示,广州市市售木耳中存在BGC污染的风险,在食品加工或贮存过程中添加一定浓度的NaCl可减少由BGC引起的食物中毒。

关键词：唐菖蒲伯克霍尔德菌椰毒致病变种污染调查生长特性产毒能力

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短尾噬菌体识别宿主机制的研究进展

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微生物学报 2022年第11期62卷 4324-4335页

作者：李娜袁晓鸣王涓吴清平丁郁广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验广东省微生物安全与健康重点实验室广东广州510070 暨南大学食品科学与工程系广东广州510632 华南农业大学食品学院广东广州510642

噬菌体可以作为抗生素的替代物,用于致病菌的防控和治疗。有尾噬菌体是最常见的噬菌体类型,可以根据尾部形态的不同分为短尾噬菌体、肌尾噬菌体和长尾噬菌体3类。不同噬菌体间不仅具有明显的形态差异,其对宿主细菌的识别机制也不相同。... 详细信息

噬菌体可以作为抗生素的替代物,用于致病菌的防控和治疗。有尾噬菌体是最常见的噬菌体类型,可以根据尾部形态的不同分为短尾噬菌体、肌尾噬菌体和长尾噬菌体3类。不同噬菌体间不仅具有明显的形态差异,其对宿主细菌的识别机制也不相同。短尾噬菌体由于其较小的基因组长度和相对简单的结构组成,成为研究宿主与噬菌体的共进化关系、以及通过基因工程改造噬菌体的良好模型。本文综述了短尾噬菌体的分类特征及不同短尾噬菌体识别宿主受体的分子机制。通过明确短尾噬菌体的识别宿主机制,有助于对相应噬菌体进行工程化改造,解决噬菌体应用中存在的关键问题,使噬菌体更广泛地应用于生物、医学与食品工业等领域中。

关键词：短尾噬菌体受体受体结合蛋白识别机制

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2020~2021年广州市售牡蛎中GII型诺如病毒污染情况调查

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食品工业科技 2022年第10期43卷 271-278页

作者：杨家乐薛亮蔡伟程李贻静高珺珊陈谋通叶青华吴诗张菊梅别小妹吴清平广东省科学院微生物研究所广东省科学院华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室广东广州510070 南京农业大学食品科技学院江苏南京210095

滤食性牡蛎是食源性诺如病毒传播的重要食品媒介。为了解广州市售牡蛎中的诺如病毒污染水平与遗传多样性特点,合理评估消费风险,本研究于2020年6月至2021年5月期间,每月从当地水产市场随机采集牡蛎样本,采用实验室前期建立的蛋白酶K处... 详细信息

滤食性牡蛎是食源性诺如病毒传播的重要食品媒介。为了解广州市售牡蛎中的诺如病毒污染水平与遗传多样性特点,合理评估消费风险,本研究于2020年6月至2021年5月期间,每月从当地水产市场随机采集牡蛎样本,采用实验室前期建立的蛋白酶K处理偶联聚乙二醇沉淀小体系法,包括荧光定量RT-PCR和巢式RT-PCR技术检测贝类中病毒的污染量以及基因型分布特点。结果共检测牡蛎110只,GII型诺如病毒阳性检出率为52.7%(58/110),病毒污染含量范围为1.56×10^(3)~1.09×10^(6) copies/g(消化腺)。其中,春夏季节(3~8月)牡蛎中诺如病毒的阳性率为35.7%(20/56),低于在秋冬季节(9~2月)的阳性率70.4%(38/54);但不同季节中检出的病毒含量无显著差异,分别为春季(2.69±1.46)×10^(5) copies/g(消化腺),夏季(1.97±2.16)×10^(5) copies/g(消化腺),秋季(6.91±6.16)×10^(4) copies/g(消化腺),冬季为(4.83±2.99)×10^(4) copies/g(消化腺)。部分阳性样本测序分析后显示,除1份为GII.17基因型外,其余均为GII.4基因型(n=13),与当地的临床流行基因型呈现一致性。本研究显示广州市售牡蛎中仍存在较高的诺如病毒污染水平,需要进一步加强病毒防控工作,尤其提醒消费者在食用牡蛎时需加工充分。

关键词：食源性诺如病毒市售牡蛎污染调查序列分析广州

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