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现代食品科技 2025年第1期41卷 343-358页

作者：黄嘉慧吴诗李滢吴毓薇吴清平陕西科技大学食品科学与工程学院陕西西安710000 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台广东广州510070

金黄色葡萄球菌是一种重要的食源性致病菌,可产生多种肠毒素,容易引起食物中毒事件。近年来,随着抗生素广泛使用,食品源金黄色葡萄球菌的耐药性问题十分严重,耐药率持续升高,多重耐药菌株出现(如MRSA),尤其是在畜禽以及水产等养殖业中,... 详细信息

金黄色葡萄球菌是一种重要的食源性致病菌,可产生多种肠毒素,容易引起食物中毒事件。近年来,随着抗生素广泛使用,食品源金黄色葡萄球菌的耐药性问题十分严重,耐药率持续升高,多重耐药菌株出现(如MRSA),尤其是在畜禽以及水产等养殖业中,倍受全球关注。理清金黄色葡萄球菌耐药机制,针对性开发相应的耐药性检测方法,成为了科学研究中的“重中之重”。目前,金黄色葡萄球菌的耐药机制研究较为深入,大部分抗生素的耐药机制基本明确,主要分为三大类:抗生素灭活、抗生素外排作用及核糖体保护作用。为能快速准确获得其耐药表型及耐药性相关分子特征等,更好地挖掘耐药新基因,探索金黄色葡萄球菌耐药新机制,开发了传统检测耐药表型、靶向检测相关基因及其表达水平以及基于生物信息学分析技术结合菌株的组学信息预测菌株耐药性等多种耐药性检测或预测方法。该综述将针对金黄色葡萄球菌现普遍存在的耐药机制及其耐药性检测方法等进行详细阐述。

关键词：金黄色葡萄球菌耐药机制检测方法研究进展

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噬菌体分类学技术进展

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现代食品科技 2024年第9期40卷 346-358页

作者：黄士轩朱斌何嘉欣李滢薛亮周星佑伍君权陈谋通张菊梅吴清平杨美艳华南农业大学农学院&食品学院广东省食品质量安全重点实验室广东广州510642 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台广东广州510070

噬菌体是一类细菌病毒,能特异性识别并杀灭细菌,具有替代抗生素的潜力,特别是在食品安全领域中,以解决“人-环-食”生态链中泛耐药病原微生物的威胁。噬菌体分类学是阐明噬菌体间物种进化和发展规律的重要学科。近年来,随着新一代测序... 详细信息

噬菌体是一类细菌病毒,能特异性识别并杀灭细菌,具有替代抗生素的潜力,特别是在食品安全领域中,以解决“人-环-食”生态链中泛耐药病原微生物的威胁。噬菌体分类学是阐明噬菌体间物种进化和发展规律的重要学科。近年来,随着新一代测序、培养组学等技术发展,噬菌体分类出现了许多新的技术进展与挑战。该文通过回顾噬菌体分类学的发展历程,阐明目前常用分类技术的优缺点;同时,该文系统总结了噬菌体进化分类的具体方案,重点探讨了分类学标尺及系统发育构建的前沿进展;最后,该文归纳了目前噬菌体分类技术的新进展,重点推荐了纯培养噬菌体分类的可靠流程,并讨论了培养组学、宏病毒组及原噬菌体分析手段对噬菌体分类学技术的挑战与要求。该文为噬菌体分类学技术的进一步发展提供参考。

关键词：噬菌体分类学进化分类法系统发育宏病毒组

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食药用菌蛋白质研究现状及应用

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食用菌学报 2024年第2期31卷 113-126页

作者：陈亭菊刘远超蔡曼君郭慧阳陈少丹吴清平胡惠萍广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台广东广州510070

食药用菌是优质的蛋白质来源,介绍食药用菌蛋白质的提取、含量测定方法,探讨食药用菌蛋白质的氨基酸组成、营养评价及其来源、种类、功能,总结食药用菌蛋白质在医药、食品及生物防治方面的应用,并对食药用菌蛋白质的发展前景进行展望。

关键词：食药用菌蛋白质凯氏定氮法抗肿瘤蛋白质组学

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人源札幌病毒抗原多样性及遗传进化研究进展

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微生物学报 2023年第9期63卷 3350-3359页

作者：孟洛冰薛亮高珺珊张菊梅吴清平广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070 华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510641

人源札幌病毒(human sapovirus,HuSaV)是全球范围内引起散发性急性胃肠炎和相关疫情的重要病原,尤其对婴幼儿及免疫缺陷患者等高危人群存有致死的危险,人源札幌病毒具有丰富的抗原和遗传多样性,其抗原多样性及免疫原性主要位于P2亚结构... 详细信息

人源札幌病毒(human sapovirus,HuSaV)是全球范围内引起散发性急性胃肠炎和相关疫情的重要病原,尤其对婴幼儿及免疫缺陷患者等高危人群存有致死的危险,人源札幌病毒具有丰富的抗原和遗传多样性,其抗原多样性及免疫原性主要位于P2亚结构域,并且衣壳蛋白免疫原性是人源札幌病毒疫苗研发的理论基础。由于人源札幌病毒可以耐受高衣壳突变而不失去病毒功能使它得以迅速进化,其在宿主体内进化过程中存在连续的氨基酸突变,且突变主要在VP1的P结构域内积累,少见于非结构蛋白和VP2中。序列和结构的改变使得人源札幌病毒逃脱先前存在的群体免疫,有必要进一步探索人源札幌病毒的免疫逃逸机制及其拮抗宿主的免疫应答。因此,本文针对人源札幌病毒在基因组特征、抗原多样性特点、遗传进化机制等领域的研究进展进行了系统综述,并对未来研究中亟待解决的科学问题进行了展望。

关键词：人源札幌病毒急性胃肠炎抗原多样性遗传进化

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基于数值鉴定法的肠杆菌科生化试剂盒的研制及效果评价

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微生物学报 2024年第5期64卷 1668-1682页

作者：金乐萱万强曹璐璐叶青华王迅张菊梅蔡芷荷吴清平合肥工业大学食品与生物工程学院安徽合肥230601 广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台广东广州510070 广东环凯生物科技有限公司广东肇庆526238

【背景】肠杆菌科细菌是食源性和临床感染的主要病原菌,对人类和动物健康有重要影响,以API 20E为“金标准”的数值鉴定法是其主要的鉴定方法之一,但现有的数值鉴定方法存在手工单个加样或/和准确率低、价格贵的问题。【目的】研制出半... 详细信息

【背景】肠杆菌科细菌是食源性和临床感染的主要病原菌,对人类和动物健康有重要影响,以API 20E为“金标准”的数值鉴定法是其主要的鉴定方法之一,但现有的数值鉴定方法存在手工单个加样或/和准确率低、价格贵的问题。【目的】研制出半自动化、准确性高及价格低的肠杆菌科细菌数值鉴定生化试剂盒。【方法】在本团队前期建立的肠杆菌科数值鉴定系统理论模型与配套软件的基础上,设计并优化筛选出的24种生化基质微量化配方,在此基础上,研制半自动冻干鉴定条;以现行商品化的数值鉴定条API 20E、MALDI-TOF MS及16S rRNA基因测序为对照,对研制的集半自动生化鉴定条与在线分析软件于一体的生化试剂盒进行效果评价。【结果】共获得458株肠杆菌科细菌的生化谱,在属水平总体鉴定准确率达到98.5%,在种水平总体鉴定准确率达到96.5%;仅需两次加样即可获得鉴定结果,且价格仅为API 20E的4.46%;产品保质期为7 d,生化试验具有稳定可重复性。【结论】本研究研制出的半自动化肠杆菌科细菌数值鉴定生化试剂盒简便经济、准确率高,为肠杆菌科细菌的鉴定提供技术支撑,并为其他科属细菌的数值鉴定生化产品的开发提供技术指引。

关键词：肠杆菌科数值鉴定生化试剂盒效果评价

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互补交配型配对诱导蛹虫草有性子实体形成

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菌物学报 2023年第1期42卷 344-352页

作者：冯德龙胡惠萍雍天乔刘远超肖春黄龙花谢意珍吴清平黄山风景区管理委员会园林局安徽黄山245800 广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室、农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070

前期我们获得了优良性状蛹虫草Cordyceps militaris野生菌株W141436,其子实体虫草素含量高达3.72 mg/kg干重,子实体多糖高达6.7 g/100 g干重,但在大规模应用中发现它发生退化。针对蛹虫草人工栽培退化问题,我们提出蛹虫草子实体形成是... 详细信息

前期我们获得了优良性状蛹虫草Cordyceps militaris野生菌株W141436,其子实体虫草素含量高达3.72 mg/kg干重,子实体多糖高达6.7 g/100 g干重,但在大规模应用中发现它发生退化。针对蛹虫草人工栽培退化问题,我们提出蛹虫草子实体形成是有性生殖过程,其两种交配型发生交配是蛹虫草子实体形成的必要条件。本文基于交配型基因分子标记研究了优良性状蛹虫草野生菌株W141436的退化机制。具体地,采用单孢子分离的方法对蛹虫草野生分离株W141436的子囊孢子进行分离,得到了72个单孢菌株。进一步采用PCR方法对单孢菌株及亲本菌株进行了交配型基因类型鉴定。在72个单孢菌株中,28株为Mat1-1类型交配基因型,31株为Mat1-2类型交配基因型,13株含有与亲本相同的交配型基因。根据鉴定结果,对2株Mat1-1型(SP28、SP33)和2株Mat1-2型(SP15、SP32)菌株进行了栽培实验。结果表明,形成子实体的栽培用亲本菌株同时含有Mat1-1和Mat1-2两种交配类型基因,即只有含不同交配型基因的菌株具有发育为子实体的能力,而含同种交配型基因的菌株则不能发育为子实体。本研究为防止蛹虫草在大规模种植中退化提供了理论依据。

关键词：蛹虫草交配型基因分子标记退化机制

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基于代谢活性的ε-聚赖氨酸杀菌动力学

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现代食品科技 2023年第11期39卷 94-100页

作者：刘振杰黄培豪陈述容顺彭飞艇陈玲郭伟鹏广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室国家卫健委微生物食品营养与安全科技创新平台广东广州510070

ε-聚赖氨酸是一种高安全性天然食品防腐剂,具有抑菌谱广、抑菌活性强的特点。该研究以大肠杆菌(Escherichia coli)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为指标菌,利用荧光探针5-氰基-2,3-二甲苯基氯化四唑检测菌体细胞在ε-聚赖氨酸处理... 详细信息

ε-聚赖氨酸是一种高安全性天然食品防腐剂,具有抑菌谱广、抑菌活性强的特点。该研究以大肠杆菌(Escherichia coli)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为指标菌,利用荧光探针5-氰基-2,3-二甲苯基氯化四唑检测菌体细胞在ε-聚赖氨酸处理前后的代谢活性,计算相对活性,考察ε-聚赖氨酸的杀菌效果,利用Linear和Weibull模型拟合杀菌动力学过程。结果表明:液体体系条件下低质量分数(0.005%)ε-聚赖氨酸与大肠杆菌作用15 min,活性下降至起始活性的86.33%,120 min时为73.44%;ε-聚赖氨酸作用质量分数为0.025%时,处理15 min时活性为起始活性的21.06%,120 min时仅为3.61%。ε-聚赖氨酸杀灭枯草芽孢杆菌的效果与大肠杆菌相近。动力学分析显示ε-聚赖氨酸杀菌效果的Linear模型拟合度低,R2值低于0.70,Weibull模型在测试质量分数范围可精确拟合杀菌动力学过程,R2值大于0.97。该研究表明基于细胞代谢活性指标,Weibull模型可准确拟合ε-聚赖氨酸杀菌动力学过程。

关键词： ε-聚赖氨酸天然食品防腐剂抑菌活性代谢活性 Weibull模型

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植物乳杆菌拮抗致病大肠杆菌机制与应用研究进展

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现代食品科技 2023年第12期39卷 310-319页

作者：杨广珠张淑红李滢刘鸣陈维张菊梅王涓吴清平华南农业大学食品学院广东广州510642 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070

大肠杆菌(Escherichia coli)是最为常见的食源性病原菌之一,随着致病大肠杆菌严峻的耐药性形势出现,防控致病大肠杆菌成为一个难题。植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)是一种具有良好的抑菌效果及提升机体免疫功能作用的益生菌... 详细信息

大肠杆菌(Escherichia coli)是最为常见的食源性病原菌之一,随着致病大肠杆菌严峻的耐药性形势出现,防控致病大肠杆菌成为一个难题。植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)是一种具有良好的抑菌效果及提升机体免疫功能作用的益生菌,其可通过多种不同的作用机制拮抗致病大肠杆菌,是一种极具开发潜力的新型抗菌物质。该研究系统综述了植物乳杆菌拮抗致病大肠杆菌的研究进展,从代谢活性物质、增强黏膜屏障、竞争粘附和肠道免疫调节多角度剖析植物乳杆菌在体内外拮抗大肠杆菌的作用机制,进而总结植物乳杆菌在畜禽/水产养殖业、食品加工制造业及临床治疗中的应用模式,以期对益生菌在食品安全防控应用提供参考。

关键词：植物乳杆菌致病大肠杆菌抑制应用

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基于响应面法的高抗原活性禽多杀性巴氏杆菌疫苗培养基的研制与效果评价

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微生物学通报 2023年第8期50卷 3515-3525页

作者：刘翔万强苗森牛得权张阳阳蒋富凤曲晓莹张菊梅蔡芷荷陈博吴清平合肥工业大学食品与生物工程学院安徽合肥 230601 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070 广东环凯生物科技有限公司广东肇庆 526238 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070

[背景]禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)引发的禽霍乱疫情造成了巨大的危害,而现有培养基存在培养菌密度较低的问题.[目的]研制高抗原活性的禽多杀性巴氏杆菌疫苗培养基.[方法]通过单因素试验、Plackett-Burman试验和响应面分... 详细信息

[背景]禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)引发的禽霍乱疫情造成了巨大的危害,而现有培养基存在培养菌密度较低的问题.[目的]研制高抗原活性的禽多杀性巴氏杆菌疫苗培养基.[方法]通过单因素试验、Plackett-Burman试验和响应面分析方法对禽多杀性巴氏杆菌培养基的成分进行调整,并对不同发酵阶段的菌体进行免疫原性测定.最后使用该培养基培养细菌后制备疫苗并通过动物攻毒试验评价其保护效果.[结果]使用研制的培养基培养禽多杀性巴氏杆菌,活菌密度能够在 6 h达到约 1.84×1010 CFU/mL,增菌效果是对照培养基的 2.6 倍;免疫原性测定结果显示在生长平台期菌体的抗原活性最高;攻毒试验表明制备的疫苗能够很好地抵抗禽多杀性巴氏杆菌的侵袭.[结论]研制出了高抗原活性的禽多杀性巴氏杆菌疫苗培养基,为疫苗的生产奠定了基础.

关键词：禽多杀性巴氏杆菌高抗原活性疫苗培养基响应面法

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基于响应面分析的高抗原活性猪水肿病大肠杆菌疫苗培养基的研制及效果评价

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微生物学通报 2023年第9期50卷 4141-4153页

作者：张阳阳万强牛得权苗森蒋富凤刘翔曲晓莹张菊梅蔡芷荷陈博吴清平陕西科技大学食品与生物工程学院陕西西安 710021 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070 广东环凯生物科技有限公司广东肇庆 526238 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070

[背景]猪水肿病大肠杆菌引发的疾病造成了很大的危害,但现有培养基存在培养密度低的问题.[目的]研制出高抗原活性猪水肿病大肠杆菌疫苗培养基.[方法]以常用的市售猪水肿培养基为对照,通过单因素试验、爬坡试验(Plackett-Burman,PB)、响... 详细信息

[背景]猪水肿病大肠杆菌引发的疾病造成了很大的危害,但现有培养基存在培养密度低的问题.[目的]研制出高抗原活性猪水肿病大肠杆菌疫苗培养基.[方法]以常用的市售猪水肿培养基为对照,通过单因素试验、爬坡试验(Plackett-Burman,PB)、响应面(Box-Behnken,BB)试验对猪水肿培养基进行响应面优化,得到猪水肿培养基最优配方.以响应面试验得到的培养基培养猪水肿病大肠杆菌,评价不同培养时间点菌株的抗原活性,制作灭活疫苗,进行动物免疫保护试验.[结果]对研制的培养基进行扩大培养验证,发现扩大培养得到的菌株活菌数可达 5×109 CFU/mL以上,约为对照组的 2 倍.制备的灭活疫苗效价可达 1:140 000,并在 9 h时抗原蛋白效价达到最高.[结论]本研究研制出的疫苗培养基显著提高了猪大肠杆菌菌体密度,并可提高菌体抗原活性,为猪水肿病灭活疫苗的制备提供了技术指引.

关键词：猪水肿病响应面法疫苗培养基高抗原活性

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