检索结果-内蒙古大学图书馆

现代食品科技 2015年第5期31卷 43-48 123,123页

作者：吴葵吴清平张菊梅乐贤松中国科学院南海海洋研究所广东广州510301 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070 中国科学院大学北京100049

研究乙醇对副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)直接耐热溶血素(thermostable direct hemolysin,TDH)产生和它的编码基因tdh表达的影响。以0.5%、1.0%、2.0%、4.0%、8.0%乙醇处理2株带有tdh副溶血性弧菌ATCC33847和SZ32,研究对副溶血性弧菌有氧或者无氧生长的影响。选取1.0%乙醇处理来研究TDH产量和tdh表达变化。使用TDH抗血清试剂盒测定副溶血性弧菌培养液上清中TDH水平;使用荧光定量PCR方法分析tdh基因表达状况。低浓度(0.5%、1.0%、2.0%)乙醇存在时,副溶血弧菌菌株的生长未受到显著影响,乙醇浓度4.0%时副溶血性弧菌生长受到明显抑制,8%时未见有细菌生长。1.0%乙醇处理副溶血性弧菌培养液上清中TDH水平较未处理显著上升。胞内tdh表达水平升高,ATCC33847在有氧和无氧时分别升高到6.6倍和5.7倍,SZ32在有氧和无氧时分别升高到5.9倍和8.6倍。乙醇能够促进tdh基因表达从而使得TDH蛋白产量升高。本研究还比较了甲醇、乙醇、正丙醇对tdh表达的影响,发现它们对tdh表达均具有促进作用但相互之间没有明显差异。

关键词：乙醇副溶血性弧菌直接耐热溶血素

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噬菌体作为指示病毒的应用研究进展

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微生物学报 2023年第7期63卷 2511-2522页

作者：孙廷丽韩玉茹王青柏黎玉莲谢小保广东省科学院微生物研究所、广东省微生物分析检测中心、华南应用微生物国家重点实验室、农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室、农业农村部农业微生物组学重点实验室、广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070 中纺标检验认证股份有限公司北京100025

噬菌体是一类专性侵染细菌的病毒,在形态大小、结构组成等生物特性上与高等生物病毒具有相似性,同时噬菌体实验室操作技术简单,安全性高,在培养、计数、稳定性和灵敏度等方面具有非常大的优势。因此,将噬菌体作为指示生物模拟或替代高... 详细信息

噬菌体是一类专性侵染细菌的病毒,在形态大小、结构组成等生物特性上与高等生物病毒具有相似性,同时噬菌体实验室操作技术简单,安全性高,在培养、计数、稳定性和灵敏度等方面具有非常大的优势。因此,将噬菌体作为指示生物模拟或替代高等生物病毒的研究和应用已开始受到国内外研究人员的关注,并取得一定进展。本文论述了噬菌体作为指示病毒的优势,并对噬菌体在病毒过滤去除效果评价、消毒效果评价、病毒传播规律研究、环境及水质监测等领域的研究和应用进行了总结分析,综述了噬菌体在各领域应用的可行性证据、应用案例及难点问题,并结合噬菌体作为指示病毒的不足之处,对进一步以噬菌体作为指示病毒的研究和应用提出建议和展望。

关键词：噬菌体指示病毒消毒效果评价病毒去除评价病毒传播规律研究环境及水质监测

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Phomopsis tersa FS441聚酮杂萜类化合物生物合成基因启动子的鉴定

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生物技术通报 2024年第12期40卷 248-255页

作者：刘玉萍张维阳章卫民叶伟李冬利五邑大学药学与食品工程学院江门529020 广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省菌种保藏与应用重点实验室广州510070

【目的】Phomeroids为分离自海洋真菌Phomopsis tersa FS441的聚酮杂萜类新骨架化合物,具有良好的抗肿瘤活性。为便于后期对phomeroids生物合成关键基因萜类环化酶编码基因ctg1509和P450单加氧酶编码基因ctg1511进行转录调控,对其启动... 详细信息

【目的】Phomeroids为分离自海洋真菌Phomopsis tersa FS441的聚酮杂萜类新骨架化合物,具有良好的抗肿瘤活性。为便于后期对phomeroids生物合成关键基因萜类环化酶编码基因ctg1509和P450单加氧酶编码基因ctg1511进行转录调控,对其启动子功能进行鉴定。【方法】对海洋真菌*** FS441中ctg1509、ctg1511基因启动子p1509、p1511进行克隆,用荧光素酶报告基因载体分析启动子的转录活性,并进一步采用点板实验和生长曲线鉴定其在大肠杆菌中启动氨苄青霉素抗性基因转录的功能,采用PlantCARE数据库分析启动子的调控元件。【结果】p1509的启动子转录活性最强,其活性远强于阳性对照PgpdA启动子,p1509和p1511能在大肠杆菌中启动氨苄青霉素抗性基因的转录。p1509、p1511启动子区域除了含有CAAT-box、TATA-box核心元件,还有参与低温响应、光响应等顺式调控元件。【结论】验证了启动子p1509和p1511的功能。发掘了一个转录活性强于阳性对照的新型强启动子p1509,该启动子含有丰富的调控元件。

关键词：生物合成基因启动子转录活性 Phomopsis tersa 聚酮杂萜元件分析

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椰壳生物炭对多种重金属在广东水稻土中的吸附解吸特性影响

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生态毒理学报 2021年第4期16卷 342-350页

作者：刘桃妹叶伟肖亿金梁秋曾国驱广东省科学院广东省微生物研究所广东省微生物分析检测中心华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广州510070

土壤中有毒有害重金属会造成环境污染并危害人体健康。本文基于OECD 106实验准则,采用批量平衡实验方法,研究了多种有效态重金属镉(Cd^(2+))、钴(Co^(2+))和铜(Cu^(2+))在广东省水稻土中的吸附解吸行为特征以及添加椰壳生物炭对吸附解... 详细信息

土壤中有毒有害重金属会造成环境污染并危害人体健康。本文基于OECD 106实验准则,采用批量平衡实验方法,研究了多种有效态重金属镉(Cd^(2+))、钴(Co^(2+))和铜(Cu^(2+))在广东省水稻土中的吸附解吸行为特征以及添加椰壳生物炭对吸附解吸行为的影响,并探讨了pH值、温度和添加炭含量对吸附率的影响。结果表明,3种重金属在土壤中的吸附平衡时间为25 h,解吸平衡时间为30 h,添加质量浓度5%椰壳生物炭可使土壤对3种重金属的吸附率提高11.6%~20.0%,重金属离子在土壤中的吸附为不可逆吸附,具有明显滞后效应,Cd^(2+)、Co^(2+)和Cu^(2+)的解吸滞后系数分别为33.838、1.347和0.972。在本试验条件下,土壤溶液的pH值随椰壳生物炭含量的增加而增大,温度和含炭量对吸附率的影响呈良好的线性关系(r^(2)>0.951)。这表明,在土壤中施用椰壳生物炭能有效缓解土壤中的重金属污染。

关键词：有效重金属广东省水稻土吸附解吸阳离子交换能力

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副溶血性弧菌vanM基因原核表达及酰基高丝氨酸内酯信号分子鉴定研究

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现代食品科技 2015年第6期31卷 29-35 128,128页

作者：吴葵吴清平张菊梅徐晓可中国科学院南海海洋研究所广东广州510301 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070 中国科学院大学北京100049

从副溶血性弧菌ATCC33847扩增van M基因,连接到p MD19-T载体进行克隆测序和序列比对;将测序正确的van M序列经Nde I和Eco RI酶切后连接到p ET22b;以IPTG诱导van M基因在BL21(DE3)中表达;利用acyl-HSL报告菌株KYC55检测ATCC33847和带有va... 详细信息

从副溶血性弧菌ATCC33847扩增van M基因,连接到p MD19-T载体进行克隆测序和序列比对;将测序正确的van M序列经Nde I和Eco RI酶切后连接到p ET22b;以IPTG诱导van M基因在BL21(DE3)中表达;利用acyl-HSL报告菌株KYC55检测ATCC33847和带有van M基因的大肠杆菌的acyl-HSL活性;萃取Van M合成的acyl-HSL信号分子,经HPLC-MS测试后与标准品进行对比分析。成功测序了ATCC33847 van M基因,与鳗弧菌van M基因序列相似性达到57%;并构建了p ET22b-van M表达质粒,以0.6 mmol/L IPTG诱导BL21(DE3)表达系统时Van M融合蛋白表达量最大;经过KYC55检测ATCC33847和带有p ET22b-van M的大肠杆菌能够产生acyl-HSL活性;HPLC-MS分析显示,ATCC33847和携带p ET22b-van M的BL21(DE3)萃取物中含有3-Hydroxybutanoyl-HSL(3-OH-C4-HSL)和3-Hydroxydecanoyl-HSL(3-OH-C10-HSL)信号分子。本研究克隆表达了副溶血性弧菌van M,首次证明了副溶血性弧菌利用Van M信号分子合成酶合成acyl-HSL信号分子3-OH-C4-HSL和3-OH-C10-HSL。

关键词：副溶血性弧菌 van M 原核表达酰基高丝氨酸内酯

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扩增型和非扩增型CRISPR/Cas系统在食源性致病菌快速检测领域应用的研究进展

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食品科学 2023年第5期44卷 257-265页

作者：徐文星邵艳娜吴清平王涓张菊梅丁郁广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070 暨南大学理工学院广东广州510632 华南农业大学食品学院广东广州510642

食源性致病菌引起的食品安全事件频发已对公众健康和社会经济造成巨大的影响,构建针对其快速、高效的检测方法是保障食品安全的重要手段。成簇的间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR... 详细信息

食源性致病菌引起的食品安全事件频发已对公众健康和社会经济造成巨大的影响,构建针对其快速、高效的检测方法是保障食品安全的重要手段。成簇的间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)及其相关蛋白(CRISPR-associated protein,Cas)组成的CRISPR/Cas是广泛存在于细菌和古细菌中的一种免疫系统,可以有效地识别并切割外源核酸。因此,可以利用CRISPR/Cas系统这一对外源核酸的识别及切割活性实现对食源性致病菌的快速高效检测。本文详细介绍基于核酸扩增和免核酸扩增的两种CRISPR/Cas系统,综述其在对各种食源性致病菌检测中的应用,讨论它们的优势、局限性以及未来的发展趋势,旨在为建立更高效的食源性致病菌检测方法提供技术参考,以期更有效地减少食源性致病菌造成的食品安全问题。

关键词： CRISPR/Cas 食源性致病菌等温扩增非扩增核酸检测

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珠江三角洲地区副溶血性弧菌遗传多样性和致病性相关研究

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现代食品科技 2015年第7期31卷 283-292页

作者：吴葵吴清平张菊梅郭伟鹏中国科学院南海海洋研究所广东广州510301 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070 中国科学院大学北京100049

副溶血性弧菌(Vibiro parahaemolyticus)是一种常见的食源性致病菌,本文研究了珠江三角洲地区副溶血性弧菌的遗传多样性。从54株副溶血性弧菌出发,研究了它们的API20E生化反应、抗生素耐药性、O抗原血清型,进行了ERIC-PCR分子分型,并检... 详细信息

副溶血性弧菌(Vibiro parahaemolyticus)是一种常见的食源性致病菌,本文研究了珠江三角洲地区副溶血性弧菌的遗传多样性。从54株副溶血性弧菌出发,研究了它们的API20E生化反应、抗生素耐药性、O抗原血清型,进行了ERIC-PCR分子分型,并检测了两种毒力基因tdh和trh的分布。54株副溶血性弧菌可被分为6个生化反应类群,主要类群为Biochem-A;菌株对萘啶酮酸、环丙沙星、氯霉素均不耐药,而对氨苄青霉素耐药率最高,耐药率0.88;O抗原血清型分别为O1、O2、O3、O4、O5、O6、O8、O10、O11,O2为主要血清型,O3为临床主要血清型;ERIC-PCR分子分型将54株菌分成47个型别,ERIC-PCR图谱相似性大于0.80的类群有12个,没有明显的优势类群;有12株副溶血性弧菌为tdh阳性,阳性率为0.22,其中10株为临床来源菌株;有2株副溶血性弧菌为trh阳性,阳性率为0.04,均为食品分离株。珠三角地区食品和临床来源的副溶血性弧菌具有丰富的遗传多样性。

关键词：副溶血性弧菌遗传多样性生化分型抗生素耐药性 O-血清型分子分型毒力基因

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热裂解气相色谱质谱法分析聚合物中红磷

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分析试验室 2020年第2期39卷 231-235页

作者：刘桃妹叶伟肖亿金梅承芳曾国驱华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省微生物研究所广东省科学院广州510070

采用单击热裂解(PY)模式和逸出气体分析(EGA)程序升温两种热裂解模式对红磷样品进行定性分析,利用气相色谱分离技术对红磷进行分离,根据红磷的特征质谱31,62,93,124及特征丰度比,质谱法分析不同材料中的红磷含量。单击热裂解模式下,材... 详细信息

采用单击热裂解(PY)模式和逸出气体分析(EGA)程序升温两种热裂解模式对红磷样品进行定性分析,利用气相色谱分离技术对红磷进行分离,根据红磷的特征质谱31,62,93,124及特征丰度比,质谱法分析不同材料中的红磷含量。单击热裂解模式下,材质和添加剂有可能对红磷造成干扰,改进后的EGA热裂解模式能排除红磷检测中材质和添加剂的干扰,并采用改进后的EGA裂解程序测定自制阳性样品中红磷的含量。结果表明:通过优化裂解温度和气相色谱条件可以有效改善红磷的分析结果,红磷质量浓度在100~500 mg/kg范围内具有良好线性,加标回收率在90.7%~97.7%,相对标准偏差(RSD)为1.6%~2.3%,定量限为81.27 mg/kg。

关键词：红磷阻燃剂热裂解气相色谱-质谱

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利用果胶培养基分离番茄根际细菌

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应用与环境生物学报 2012年第1期18卷 147-152页

作者：黎志坤姚青陈美标朱红惠广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验拳省部共建国家重点实验室培育基地广州510070 华南农业大学园艺学院广州510642

采用平板稀释和PCR-DGGE相结合的方法,比较了4种培养基(果胶富营养培养基PM,只含果胶一种营养的培养基PA,添加果胶的寡营养培养基YPP以及与YPP营养成分一致但不添加果胶的寡营养培养基YPG)分离番茄根际细菌的能力.结果显示:PA培养基能... 详细信息

采用平板稀释和PCR-DGGE相结合的方法,比较了4种培养基(果胶富营养培养基PM,只含果胶一种营养的培养基PA,添加果胶的寡营养培养基YPP以及与YPP营养成分一致但不添加果胶的寡营养培养基YPG)分离番茄根际细菌的能力.结果显示:PA培养基能够分离到42种形态的细菌;YPP培养基可以分离到最高的细菌菌落数,分离获得的种类比PA少;YPP培养基分离获得细菌的种类和菌落数量比YPG培养基要多.聚类分析也显示只有果胶一种营养的PA培养基能分离到最多种类,分离获得的菌群与自然环境中微生物群落最相似.研究结果表明添加番茄根际主要分泌物——果胶到培养基中可以提高培养基分离细菌的能力.

关键词：果胶培养基番茄根际细菌微生物分离相似性系数平板分离 DGGE

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药用植物根系土壤可培养粘细菌的分离鉴定

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微生物学报 2013年第7期53卷 657-668页

作者：赵智颖张鲜姣谭志远郭俊朱红惠广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东华南微生物应用重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广州510070 华南农业大学农学院广东省植物分子育种重点实验室广州510642

【目的】对药用植物根系土壤可培养粘细菌进行分离与鉴定,探讨药用植物根系土壤粘细菌资源多样性。【方法】采集华南植物园和南岭国家森林公园22种药用植物根系土,利用辅助菌诱导分离技术分离样品中可培养粘细菌;通过菌株显微形态和菌... 详细信息

【目的】对药用植物根系土壤可培养粘细菌进行分离与鉴定,探讨药用植物根系土壤粘细菌资源多样性。【方法】采集华南植物园和南岭国家森林公园22种药用植物根系土,利用辅助菌诱导分离技术分离样品中可培养粘细菌;通过菌株显微形态和菌落形态观察,结合16S rDNA基因序列分析,确定分离粘细菌菌株的系统发育地位。【结果】分离获得50株粘细菌,分属于3个科,7个属,其中粘球菌属(Myxococcus)18株,珊瑚球菌属(Corallococcus)11株,孢囊杆菌属(Cystobacter)7株,原囊菌属(Archangium)8株,标桩菌属(Stigmatella)1株,软骨霉状菌属(Chondromyces)4株,匣状球菌属(Pyxidicoccus)1株。粘球菌属和珊瑚球菌属分布最为广泛。【结论】研究发现药用植物根系土壤可培养粘细菌与土壤pH和有机碳含量等环境因子有一定的相关性。粘细菌更适宜在有机质丰富、pH近中性的环境中生长;粘球菌属和珊瑚球菌属的菌株对pH适应性较强,而粘球菌属和孢囊杆菌属的菌株对土壤有机碳含量依赖性不强,在贫瘠土壤中仍有分布。本研究对后续粘细菌资源的开发和利用提供良好的实验材料和理论基础。

关键词：药用植物土壤粘细菌多样性

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