检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验方剂学杂志 2015年第2期21卷 7-11页

作者：刘少烽陈晓东朱爽陈晓颖钟兆健章卫民高晓霞广东药学院药科学院广州510006 广东药学院生命科学与生物制药学院广州510006 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070

目的:建立沉香的总DNA提取方法及r DNA第二内转录间隔区序列(ITS2)聚合酶链式反应(PCR)扩增体系。方法:分别采用改良的CTAB法、改良的CTAB法联合DNA提取试剂盒法及DNA提取试剂盒法提取沉香总DNA,利用通用引物ITS2P1/ITS2P2扩增r DNA ITS... 详细信息

目的:建立沉香的总DNA提取方法及r DNA第二内转录间隔区序列(ITS2)聚合酶链式反应(PCR)扩增体系。方法:分别采用改良的CTAB法、改良的CTAB法联合DNA提取试剂盒法及DNA提取试剂盒法提取沉香总DNA,利用通用引物ITS2P1/ITS2P2扩增r DNA ITS2目的片段,通过正交试验优选沉香的PCR扩增条件并对目的片段进行测序。结果:改良的CTAB法联合DNA提取试剂盒法提取总DNA的A260 nm/A280 nm1.79,质量浓度350 mg·L-1,PCR扩增目的片段产率最高。不同因素水平对沉香ITS2-PCR反应的影响顺序为模板DNA>引物>Taq DNA聚合酶>d NTP。最佳反应体系为20μL体系,DNA模板40 ng,引物0.2 mmol·L-1,d NTP 0.5 mmol·L-1,Taq DNA聚合酶1.5 U。测序获得的目前片段长度230 bp,与Gen Bank中瑞香科沉香属白木香序列相似性100%。结论:CTAB法联合DNA试剂盒法可简单、快速获得高质量沉香总DNA,正交试验可快速获得ITS2目的片段,为沉香的分子鉴定和系统发育分析提供参考。

关键词：沉香 DNA提取 ITS2 聚合酶链式反应

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副溶血性弧菌群体感应蛋白CqsA的原核表达

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生物技术通报 2012年第1期28卷 89-93页

作者：李强吴葵张菊梅吴清平徐明芳广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东省微生物研究所广州510070 暨南大学生命科学技术学院广州510632 中国科学院南海海洋研究所广州510301

副溶血性弧菌CqsA是一种推测的信号分子合成酶,其合成的信号分子在群体感应系统中可能具有重要的调控作用。从副溶血性弧菌ATCC17802中克隆cqsA基因,构建重组质粒pET22b-cqsA。测序后转化大肠杆菌BL21进行IPTG诱导表达,使用SDS-PAGE分... 详细信息

副溶血性弧菌CqsA是一种推测的信号分子合成酶,其合成的信号分子在群体感应系统中可能具有重要的调控作用。从副溶血性弧菌ATCC17802中克隆cqsA基因,构建重组质粒pET22b-cqsA。测序后转化大肠杆菌BL21进行IPTG诱导表达,使用SDS-PAGE分析融合蛋白的表达状况,并通过6×His-Tag进行Western blotting检测。结果显示,经0.6 mmol/L IPTG诱导4h,目的基因以包涵体形式高效表达,表达的融合蛋白大小约为49 kD,与理论值相符(437 aa)。表明副溶血性弧菌群体感应蛋白CqsA在大肠杆菌中成功表达,为后续寻找副溶血性弧菌群体感应信号分子,进一步探索副溶血性弧菌群体感应系统提供参考。

关键词：副溶血性弧菌群体感应 CqsA 原核表达

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草鱼与团头鲂肠道菌群结构比较分析

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水生生物学报 2014年第5期38卷 868-875页

作者：王纯倪加加颜庆云李金金李星浩余育和中国科学院水生生物研究所中国科学院水生生物多样性与保护重点实验室武汉430072 中国科学院大学北京100049 广东省微生物研究所广州510070 省部共建华南应用微生物国家重点实验室广州510070 广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070

选取湖泊养殖的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)和团头鲂(Megalobrama amblycephala)为研究对象,通过对其消化道细菌群落16S rDNA进行细菌群落聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)分析,比较了其消化道微生物群落结构。在两种草... 详细信息

选取湖泊养殖的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)和团头鲂(Megalobrama amblycephala)为研究对象,通过对其消化道细菌群落16S rDNA进行细菌群落聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)分析,比较了其消化道微生物群落结构。在两种草食性鱼类消化道中分别检测到不同的谱带,其中草鱼的平均谱带数为(33.3±2.8)条,团头鲂的平均谱带数为(38.0±2.5)条。基于所得PCR-DGGE指纹图谱谱带丰度值数据的UPGMA聚类分析和PCA排序均显示草鱼消化道微生物群落并没有与团头鲂消化道微生物群落分开;相比于草鱼和团头鲂消化道微生物群落之间的差异,草鱼和团头鲂个体间差异更加明显,而且草鱼消化道微生物群落的个体分化更为明显。对特定条带的切胶回收测序结果显示,草鱼和团头鲂消化道内检测到的菌群都主要来自γ-变形菌门、梭杆菌门和厚壁菌门,另外草鱼消化道中还检出少量拟杆菌门细菌。以上结果表明同一生境中食性相同的野生草鱼与团头鲂消化道微生物群落组成不存在显著差异,条带回收测序检测到相似的微生物种类。研究结果补充了人们在食性对消化道微生物群落结构影响方面的认识,同时也暗示草鱼和团头鲂消化道内微生物群落对营养物质的代谢方式类似,这为深入研究草食性鱼类消化道微生物菌群参与营养物质代谢积累了资料。

关键词：草鱼团头鲂消化道细菌群落 PCR-DGGE

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铅锌尾矿中耐重金属镉的丝状真菌的分离鉴定

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微生物学通报 2013年第12期40卷 2203-2216页

作者：隆美容谢小林冯广达姚青朱红惠塔里木大学生命科学学院新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室新疆阿拉尔843300 广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室一省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070 华南农业大学园艺学院广东广州510642

【目的】旨在从重金属污染地分离出耐重金属镉真菌,获得耐受重金属镉污染的高效菌株,为重金属污染微生物修复提供菌种资源。【方法】利用稀释平板涂布法,采用4种培养基对粤东北梅州市梅县铅锌尾矿废弃地9个样品进行分离,并结合形态学和I... 详细信息

【目的】旨在从重金属污染地分离出耐重金属镉真菌,获得耐受重金属镉污染的高效菌株,为重金属污染微生物修复提供菌种资源。【方法】利用稀释平板涂布法,采用4种培养基对粤东北梅州市梅县铅锌尾矿废弃地9个样品进行分离,并结合形态学和ITS rDNA基因序列分析,鉴定分离到的耐镉真菌,最后对分离到的耐镉真菌进行最小抑制浓度(MIC)检测。【结果】从粤东北梅州市梅县铅锌尾矿废弃地分离出72株丝状真菌,经形态学和分子技术鉴定,它们主要属于曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、枝孢属(Cladosporium)、油瓶霉属(Lecythophora)、拟青霉属(Paecilomyces)、镰刀孢属(Fusarium)等。MIC检测发现有4株丝状真菌耐镉浓度较高,Paecilomyces lilacinus(Thom)Samson(6-20p),Penicillium pinophilum Hedgcock(6-16p),Penicillium rolfsii Thom(6-16m)和Fusarium oxysporum Schlecht.(8-11p)分别为200、40、25和15 mmol/L。【结论】从粤东北梅州市梅县铅锌尾矿废弃地分离到的72株丝状真菌,不同程度耐受重金属镉,在重金属污染的治理中有可能发挥作用。本研究为镉污染环境的微生物修复提供了重要菌株。

关键词：镉丝状真菌鉴定最小抑菌浓度

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臭氧对矿泉水中致病菌的杀灭效果

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湖北农业科学 2014年第7期53卷 1543-1545,1550页

作者：张永清吴清平张菊梅郭伟鹏彭飞艇杨秀华广东省微生物研究所/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室/广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广州510070 中国科学院武汉病毒研究所武汉430071 中国科学院研究生院北京100049 许昌学院食品科学与工程学院河南许昌461000

采用悬液定量杀菌和流动杀菌的方法，对铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、粪链球菌（Strep-tococcus faecium）和大肠杆菌（Escherichia coli）的臭氧消毒效果进行了研究。结果表明，悬液定量杀菌试验中，臭氧浓度0.36 mg/L，作... 详细信息

采用悬液定量杀菌和流动杀菌的方法，对铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、粪链球菌（Strep-tococcus faecium）和大肠杆菌（Escherichia coli）的臭氧消毒效果进行了研究。结果表明，悬液定量杀菌试验中，臭氧浓度0.36 mg/L，作用10 min后，铜绿假单胞菌存活率小于1.0%；臭氧浓度0.31 mg/L，作用3 min后，粪链球菌存活率小于0.1%；臭氧浓度在0.45 mg/L及以上，作用10 min后，大肠杆菌存活率在2.0%以下。流动杀菌试验中，臭氧浓度0.20~0.60 mg/L，作用3 min后，大肠杆菌、铜绿假单胞菌和粪链球菌的存活率在0.01%以下，即杀灭率在99.99%以上。

关键词：臭氧消毒铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) 粪链球菌(Streptococcus faecium) 大肠杆菌(Escherichia coli)

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实时荧光环介导等温扩增技术检测猪肉中的假单胞菌

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现代食品科技 2019年第6期35卷 264-272页

作者：李宁张友雄吴清平古其会张银志王加生孙秀兰张菊梅江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室国家功能食品工程技术研究中心食品安全协同创新中心食品安全国际联合研究实验室江苏无锡214122 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 佐治亚大学公共卫生学院环境健康科学系美国佐治亚州雅典30602

根据假单胞菌16S rDNA基因序列设计引物,并向反应体系中加入饱和型核酸染料Eva Green,利用实时荧光检测仪,建立假单胞菌属实时荧光环介导等温扩增技术(LAMP)。研究中对62株假单胞菌的16SrDNA基因通过DNAMAN软件进行序列比对后,针对共有... 详细信息

根据假单胞菌16S rDNA基因序列设计引物,并向反应体系中加入饱和型核酸染料Eva Green,利用实时荧光检测仪,建立假单胞菌属实时荧光环介导等温扩增技术(LAMP)。研究中对62株假单胞菌的16SrDNA基因通过DNAMAN软件进行序列比对后,针对共有片段设计扩增引物。对扩增体系进行了优化,优化结果经电泳鉴定。通过12株假单胞菌和23株非假单胞菌进行特异性验证,并比较了实时荧光LAMP与普通LAMP的灵敏度,对人工污染样品的检出限进行了测定。结果表明,特异性验证中12株假单胞菌为阳性,23株非假单胞菌为阴性。实时荧光LAMP检测纯菌的灵敏度为36 CFU/mL,是普通LAMP灵敏度的10倍。人工污染样品的检出限为1.73×10^3 CFU/g。本研究中建立了一种检测冷鲜猪肉中假单胞菌属的方法,实现了多个菌种的同时检测,避免了单一菌种检测的局限性,该方法快速、准确、灵敏度高,可在2h内完成冷鲜猪肉中假单胞菌的检测。

关键词：实时荧光环介导等温扩增假单胞菌检测猪肉

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双酶混合水解玉米皮渣制备阿魏酰低聚糖研究

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食品工业科技 2017年第8期38卷 193-198页

作者：杜娟游雪娇解春艳侯晓强乔洁郭红珍吴智艳廊坊师范学院生命科学院河北廊坊065000 广东省微生物研究所广东广州510000 省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东广州510000 广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510000 河北省高校食药用真菌应用技术研发中心河北廊坊065000

以玉米皮渣为原料,采用酶解方法制备阿魏酰低聚糖(Feruloyl oligosaccharides,FOs),通过比较不同酶解条件下阿魏酰低聚糖产量的差异及不同酶解方式下玉米皮渣细胞壁结构的变化,确定酶解阿魏酰低聚糖生成的方法,并优化获得玉米皮渣中阿... 详细信息

以玉米皮渣为原料,采用酶解方法制备阿魏酰低聚糖(Feruloyl oligosaccharides,FOs),通过比较不同酶解条件下阿魏酰低聚糖产量的差异及不同酶解方式下玉米皮渣细胞壁结构的变化,确定酶解阿魏酰低聚糖生成的方法,并优化获得玉米皮渣中阿魏酰低聚糖的最佳酶解条件。结果表明:纤维素酶和木聚糖酶混合酶解可使玉米皮渣细胞壁出现溶洞,可有效提高阿魏酰低聚糖产量;经单因素和响应面实验确定双酶混合酶解的最佳条件为混合酶的添加量为15.7 g/L,混合酶中纤维素酶添加比例为70%,酶解1 h,玉米皮渣底物添加量为100 g/L,在此条件下FOs产量最高,为1008.43μmol/L。本研究为双酶混合酶解制备玉米皮渣FOs提供理论依据。

关键词：玉米皮渣阿魏酰低聚糖混合酶解酶解条件

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不同植被根际土壤中可培养与未培养黏细菌的多样性研究

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江苏农业科学 2020年第7期48卷 264-269页

作者：原红娟朱红惠运城学院生命科学系山西运城044000 广东省微生物研究所/省部共建华南应用微生物国家重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

为探索不同植被根际可培养黏细菌与未培养黏细菌的多样性,采用传统的辅助菌诱导方法,对样品的黏细菌进行分离纯化,通过形态特征结合16S rDNA基因的序列分析,确定黏细菌菌株的系统分类地位;利用基于黏细菌特异性引物的变性梯度凝胶电泳(d... 详细信息

为探索不同植被根际可培养黏细菌与未培养黏细菌的多样性,采用传统的辅助菌诱导方法,对样品的黏细菌进行分离纯化,通过形态特征结合16S rDNA基因的序列分析,确定黏细菌菌株的系统分类地位;利用基于黏细菌特异性引物的变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)分析黏细菌的多样性。结果显示,从不同植被根际土壤中共分离得到19株,初步鉴定为黏球菌属(Myxococcus)11株,珊瑚球菌属(Corallococcus)13株,孢囊杆菌属(Cystobacter)2株,多囊菌属(Polyangium)1株,其中,红树林分离得到的黏细菌种类最多,共7株;樟木最少,为2株。PCR-DGGE分子指纹图谱技术对其黏细菌多样性结果显示,花梨木、铁木、亚热带常绿阔叶林、针叶林、红树林、樟木根际土壤中黏细菌的物种丰度分别为16、24、34、26、30、24,多样性指数分别为2.10、2.53、3.49、2.62、2.77、2.73。DGGE指纹图谱显示,越南不同植被根际土壤存在大量的未培养黏细菌,其技术研究黏细菌多样性比传统分离纯化的方法方便、快速。本研究为黏细菌开发利用和多样性研究提供理论与技术参考依据。

关键词： PCR-DGGE(聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳) 根际土壤黏细菌多样性

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一株诱导粘细菌子实体形成的被捕食菌的筛选及分子鉴定

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生态科学 2021年第4期40卷 113-120页

作者：原红娟朱红惠运城学院生命科学系山西运城044000 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室、广东省菌种保藏与应用重点实验室、广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070

为筛选适宜于诱导粘细菌子实体形成的被捕食菌,利用诱导分离的方法,从酵母菌、革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌共30株菌中进行筛选,利用扫描电镜观察形态特征,通过16S rRNA确定系统分类地位,并对其分离培养基进行优化。获得一株被捕食菌GIM1... 详细信息

为筛选适宜于诱导粘细菌子实体形成的被捕食菌,利用诱导分离的方法,从酵母菌、革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌共30株菌中进行筛选,利用扫描电镜观察形态特征,通过16S rRNA确定系统分类地位,并对其分离培养基进行优化。获得一株被捕食菌GIM1.767,经透射电子显微镜观察长约为1.2—1.24μm,宽度约为0.6—0.65μm,无鞭毛,分子鉴定为Advenella kashmirensis;对分离培养基进行优化,发现添加1%酵母粉的WCX培养基,对粘球菌属能更好的分离诱导。分离得到菌株Advenella kashmirensis,对挖掘粘细菌资源提供一些参考价值。

关键词：被捕食菌分离纯化粘细菌

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废弃铅锌矿石和钨矿砂中可培养细菌多样性分析

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生物技术进展 2018年第5期8卷 450-458页

作者：邹卫玲冯广达李华平朱红惠广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 华南农业大学农学院广州510642

为了了解废弃铅锌矿石和钨矿砂中可培养细菌的多样性,发掘其中的微生物新资源,采用3种培养基(R2A、无磷R2A、无磷R2A+Cd^(2+))分别对其中的可培养细菌进行分离纯化和培养。再通过16S rRNA基因测序获取相关的分类学信息,并进行系统进化... 详细信息

为了了解废弃铅锌矿石和钨矿砂中可培养细菌的多样性,发掘其中的微生物新资源,采用3种培养基(R2A、无磷R2A、无磷R2A+Cd^(2+))分别对其中的可培养细菌进行分离纯化和培养。再通过16S rRNA基因测序获取相关的分类学信息,并进行系统进化分析。从2种材料中共分离到可培养细菌152株。其中,废弃铅锌矿石中的可培养细菌涵盖了5个门、7个分支,分属于Alphaproteobacteria、Betaproteobacteria、Gammaproteobacteria、Deinococcus-Thermus、Actinobacteria、Bacteroidetes和Firmicutes,以Massilia、Methylobacterium、Deinococcus和Sphingomonas为主要类群;而钨矿砂中的可培养细菌涵盖了3个门、4个分支,分属于Alphaproteobacteria、Betaproteobacteria、Actinobacteria和Firmicutes,以Methylobacterium、Massilia、Ralstonia和Microbacterium为主要类群。废弃铅锌矿石中可培养细菌的多样性和新分类单元发现率均大于钨矿砂,且两者的可培养细菌类群组成存在较大差异。此外,向培养基中添加重金属Cd^(2+)降低了可培养细菌的多样性。研究分离到的Cd^(2+)耐受菌株主要属于3个属:Methylobacterium、Herbaspirillum和Ralstonia,其能耐受2 mmol/L Cd^(2+),是金属尾矿中重金属耐受菌的优势种群。研究结果为金属尾矿中微生物新资源的深入发掘提供了依据。

关键词：废弃铅锌矿石钨矿砂 R2A 可培养细菌 16S rRNA基因

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