检索结果-内蒙古大学图书馆

精细化工 2012年第5期29卷 453-457页

作者：李琳吴清平张菊梅莫翠云郭伟鹏中国科学院广州化学研究所广东广州510650 广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070 中国科学院研究生院北京100049

采用化学方法制备单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)显色培养基底物磷脂酰肌醇(l-α-phosphatidylinositol,PI)。PI提纯过程中纯度和回收率是一对难以同时提高的矛盾因素,实验采用单一及复合溶剂萃取相结合的方法,考察... 详细信息

采用化学方法制备单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)显色培养基底物磷脂酰肌醇(l-α-phosphatidylinositol,PI)。PI提纯过程中纯度和回收率是一对难以同时提高的矛盾因素,实验采用单一及复合溶剂萃取相结合的方法,考察了溶剂比、溶剂体积、碱性物质种类等条件对该矛盾因素的影响。经过优化研究,以氨水为碱性物质配制pH=8.0的甲醇溶液预处理后,采用V(正己烷)∶V(乙醇溶液)=1∶1.5时分离效果最佳。比较了纯化前后产物与标准品的微生物显色效果,结果证实了产品具有较好的应用价值。

关键词：显色底物单核增生性李斯特菌磷脂酰肌醇高效液相色谱溶剂法提纯技术

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赤眼鳟的耗氧量、耗氧率与窒息点研究

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广东农业科学 2012年第13期39卷 164-165,169页

作者：杨曦李桂峰广东省微生物研究所/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省华南应用微生物重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地/广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 华南农业大学动物科学学院广东广州510642

按体重将试验鱼分为4组,测定赤眼鳟的耗氧量、耗氧率和窒息点。结果表明,采用封闭静水式测量方法在28～32℃条件下,赤眼鳟的窒息点和耗氧率随体重的增加而降低,耗氧量随体重增加而升高。耗氧率(R0)与体重(W)的线性回归方程为R0=0.0011W2... 详细信息

按体重将试验鱼分为4组,测定赤眼鳟的耗氧量、耗氧率和窒息点。结果表明,采用封闭静水式测量方法在28～32℃条件下,赤眼鳟的窒息点和耗氧率随体重的增加而降低,耗氧量随体重增加而升高。耗氧率(R0)与体重(W)的线性回归方程为R0=0.0011W2-0.0945W+2.0724,且赤眼鳟的耗氧率与体重之间有显著相关关系。相同年龄阶段的群体和个体比较,其窒息点、耗氧量、耗氧率三者相近;不同年龄阶段的群体和个体比较,其窒息点、耗氧量和耗氧率三者无相关性。对赤眼鳟呼吸耗氧的研究表明,赤眼鳟个体耐低氧能力较高,对水中溶氧要求不高。

关键词：赤眼鳟窒息点耗氧量耗氧率

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副溶血性弧菌群体感应蛋白CqsA的原核表达

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生物技术通报 2012年第1期28卷 89-93页

作者：李强吴葵张菊梅吴清平徐明芳广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东省微生物研究所广州510070 暨南大学生命科学技术学院广州510632 中国科学院南海海洋研究所广州510301

副溶血性弧菌CqsA是一种推测的信号分子合成酶,其合成的信号分子在群体感应系统中可能具有重要的调控作用。从副溶血性弧菌ATCC17802中克隆cqsA基因,构建重组质粒pET22b-cqsA。测序后转化大肠杆菌BL21进行IPTG诱导表达,使用SDS-PAGE分... 详细信息

副溶血性弧菌CqsA是一种推测的信号分子合成酶,其合成的信号分子在群体感应系统中可能具有重要的调控作用。从副溶血性弧菌ATCC17802中克隆cqsA基因,构建重组质粒pET22b-cqsA。测序后转化大肠杆菌BL21进行IPTG诱导表达,使用SDS-PAGE分析融合蛋白的表达状况,并通过6×His-Tag进行Western blotting检测。结果显示,经0.6 mmol/L IPTG诱导4h,目的基因以包涵体形式高效表达,表达的融合蛋白大小约为49 kD,与理论值相符(437 aa)。表明副溶血性弧菌群体感应蛋白CqsA在大肠杆菌中成功表达,为后续寻找副溶血性弧菌群体感应信号分子,进一步探索副溶血性弧菌群体感应系统提供参考。

关键词：副溶血性弧菌群体感应 CqsA 原核表达

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溶藻弧菌Ⅲ型分泌系统vscC基因缺失株的构建

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安徽农业科学 2012年第6期40卷 3222-3225,3257页

作者：王青柏胡超群陈偿徐鹏广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070 中国科学院南海海洋研究所广东广州510301

[目的]构建未引入任何遗传标记物的溶藻弧菌vscC基因框内缺失突变株。[方法]首先以溶藻弧菌ZJ51-O基因组DNA为模板,用重叠延伸PCR(gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR)扩增法构建体外vscC基因缺失片段;扩增产物经酶切后连... 详细信息

[目的]构建未引入任何遗传标记物的溶藻弧菌vscC基因框内缺失突变株。[方法]首先以溶藻弧菌ZJ51-O基因组DNA为模板,用重叠延伸PCR(gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR)扩增法构建体外vscC基因缺失片段;扩增产物经酶切后连接至自杀质粒pDM4,再转化入大肠杆菌SY327进行克隆,筛选阳性克隆子并进行PCR分析鉴定;提取阳性克隆子的自杀重组质粒pDM4-△vscC,用热休克法将其转入到大肠杆菌S17-1中,再经接合生殖的方式将自杀重组质粒导入溶藻弧菌ZJ51-O菌株中,利用抗生素筛选策略与蔗糖反向筛选系统,挑选疑似目的突变菌株,最后利用PCR鉴定与测序分析进行确证。[结果]溶藻弧菌ZJ51-O的vscC基因框内缺失突变株构建成功。[结论]该研究为进一步研究vscC基因的功能和T3SS在溶藻弧菌致病过程中所起的作用奠定基础,同时也为溶藻弧菌的其他基因突变株的构建和研究提供了参考和试验经验。

关键词：溶藻弧菌 vscC基因自杀质粒同源重组

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Construction of a vscC in-frame Deletion Mutant of Vibrio alginolyticus

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Agricultural Science & Technology 2012年第3期13卷 492-496页

作者：王青柏胡超群陈偿徐鹏广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070 中国科学院南海海洋研究所广东广州510301

[Objective] The purpose of this study was to construct a vscC in-frame deletion mutant of Vibrio alginolyticus with no antibiotic resistance marker. [Method] The first vscC mutant molecules in vitro were generated by SOE-PCR and then lig- ated to a suicide vector pDM4 to construct a suicide recombinant vector pDM4- A vscC. To clone the recombinant vector, it was transformed to E. coli SY327 strain, and then positive clones were selected and proved by PCR analysis. After that, the pDM4-AvscC DNA was extracted in large numbers and transformed to the E. coil S17-1 strain that acted as a donor in bacterial conjugation using the heat shock method. The recombinant E. coli S17-1 strains then transferred the pDM4-AvscC to V. alginolyticus ZJ51-O by conjugation method; transconjugants were screened and selected sequentially using antibiotic selection strategy and sucrose based counter-selection system to find the suspected mutants wanted. Finally the putative mutants were identified by PCR and confirmed by sequencing analysis. [Result] ZJ51-OAvscC was successfully constructed. [Conclusion] This study laid foundation for further research on the function of vscC gene and molecular mechanism of type Ⅲ secretion system in V. alginolyticus. Simultaneously, by the effective method other unknown functional genes in V. alginolyticus genome would be researched.

关键词： Vibrio alginolyticus vscC gene Suicide plasmid Homologous recombination

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微囊藻毒素生物合成及其检测的分子生物学研究进展

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生物技术进展 2012年第5期2卷 328-334页

作者：袁志勇朱红惠霍光华冯广达广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广州510070 江西农业大学生物科学与工程学院南昌330045

随着世界各地水体富营养化的日益加剧,蓝藻水华的爆发频率越来越高,爆发范围也越来越广,已经成为国内外学者高度关注的重大环境问题。微囊藻水华是淡水水体中危害最严重的一类,特别是在我国巢湖、太湖和滇池等大型湖泊,经常爆发微囊藻水... 详细信息

随着世界各地水体富营养化的日益加剧,蓝藻水华的爆发频率越来越高,爆发范围也越来越广,已经成为国内外学者高度关注的重大环境问题。微囊藻水华是淡水水体中危害最严重的一类,特别是在我国巢湖、太湖和滇池等大型湖泊,经常爆发微囊藻水华,给水体生态系统和人类健康带来了巨大的危害。本文简介了微囊藻毒素的化学结构与危害,综述了微囊藻毒素mcy基因簇、Adda生物活性结构以及肽链合成与环化等关键生物合成过程,并重点归纳了聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、实时定量PCR(real-time quantitative PCR detecting system,QPCR)、基因芯片(gene microarray)和变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)等用于藻毒素检测的分子生物学技术方法,最后对相关研究进行了展望。

关键词：蓝藻水华微囊藻毒素生物合成 mcy基因簇分子生物学

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生物降解技术用碱渣粉煤灰陶粒制备研究

生物降解技术用碱渣粉煤灰陶粒制备研究

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2012中国环境科学学会学术年会

作者：孙端方李建军许玫英郭俊孙国萍广东省微生物研究所生物科学与工程学院华南理工大学广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室—省部共建国家重点实验室培育基地广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地

(目的)使用碱渣(白泥)、粉煤灰、淤泥和木屑等废料烧制微涨高强陶粒作为生物降解工艺填料。(方法)探索该陶粒料球中碱渣、粉煤灰、淤泥和木屑之配比,优化该料球中的发泡剂种类及掺量、煅烧温度和保温时间,并测定该陶粒的废水、废气处理... 详细信息

(目的)使用碱渣(白泥)、粉煤灰、淤泥和木屑等废料烧制微涨高强陶粒作为生物降解工艺填料。(方法)探索该陶粒料球中碱渣、粉煤灰、淤泥和木屑之配比,优化该料球中的发泡剂种类及掺量、煅烧温度和保温时间,并测定该陶粒的废水、废气处理工艺参数。(结果)碱渣、粉煤灰、淤泥、木屑和水以质量比3.5:6:0.5:0.35:3.5湿法混合后造粒,干燥后1220℃C,12 min焙烧,自然冷却后,表面形成细密釉层。该陶粒球径20.01±1.05 mm,堆积密度633.7±19.31 g L-1,筒压强度8.21±0.03 MPa,持水率14.04±0.42%;其余各项废水、废气处理工艺参数达到或高于市售陶粒。(结论)该陶粒达到高强轻集料标准,可作为生物降解工艺填料。

关键词：碱渣(白泥) 粉煤灰 PEI涂层微涨陶粒

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废弃铅锌矿石和钨矿矿砂中可培养细菌多样性

废弃铅锌矿石和钨矿矿砂中可培养细菌多样性

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2012年鄂粤微生物学学术年会——湖北省暨武汉微生物学会成立六十年庆祝大会

作者：冯广达旷远文朱红惠邓名荣中国科学院华南植物园广东省微生物研究所广东省华南应用微生物重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地广东省微生物菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室

【目的】了解废弃铅锌矿石和钨矿矿砂中的可培养细菌的多样性,发掘新的微生物资源。【方法】采用R2A、无磷R2A和无磷R2A+2mM Cd三种培养基分离可培养的细菌,并进行了16S rRNA基因测序和多样性分析,构建了菌株的系统发育树。【结果】从... 详细信息

【目的】了解废弃铅锌矿石和钨矿矿砂中的可培养细菌的多样性,发掘新的微生物资源。【方法】采用R2A、无磷R2A和无磷R2A+2mM Cd三种培养基分离可培养的细菌,并进行了16S rRNA基因测序和多样性分析,构建了菌株的系统发育树。【结果】从废弃铅锌矿石中的分离到可培养细菌98株,分别属于Alphaproteobacteria(37%)、Betaproteobacteria(29%)、Gammaproteobacteria(11%)、Deinococcus-Thermus(13%),Actinobacteria(5%)、Bacteroidetes(3%)和Firmicutes(2%)。发现疑似新种或新属14株。多样性指数(Simpson,Shannon-Wiener,Pielou)分别为0.943,3.182和0.888。钨矿矿砂中分离细菌54株,分别属于Alphaproteobacteria(40%)、Betaproteobactena(41%)、Actinobacteria(17%)和Firmicutes(2%)。发现疑似新种2株。多样性指数(Simpson,Shannon-Wiener,Pielou)分别为0.800,1.864和0.750。R2A、无磷R2A和无磷R2A+Cd培养基分离的细菌分别涵盖了5、4和1个门。无磷R2A+2mM Cd培养基分离的耐镉细菌仅来自3个属(Methylobacterium、Herbaspirillum和Ralstonia),均能够耐受2 mmol/L Cd。【结论】废弃铅锌矿石中的可培养细菌在多样性和新种发现率上均显著大于钨矿矿砂。在可培养细菌结构组成上也存在较大差异。培养基中添加2mM Cd显著降低了可培养细菌的多样性,铅锌矿石和钨矿矿砂中的耐镉细菌主要分布在Methylobacterium、Herbaspirillum和Ralstonia 3个属。研究结果为废弃铅锌矿石和钨矿矿砂中微生物资源的发掘提供理论依据。

关键词：废弃铅锌矿石钨矿矿砂 R2A 可培养细菌 16S rRNA基因

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显色底物大豆磷脂酰肌醇的分离纯化与检测方法研究进展

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化学与生物工程 2012年第6期29卷 6-9页

作者：吴清平李琳张菊梅郭伟鹏广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070 中国科学院广州化学研究所广东广州510301 中国科学院研究生院北京100049

综述了大豆磷脂酰肌醇的分离纯化与检测方法研究进展,并介绍了其在单核细胞增生性李斯特菌显色培养基方面的应用,指出了该领域存在的问题和今后的研究方向。

关键词：磷脂酰肌醇分离显色培养基单核细胞增生性李斯特菌高效液相色谱

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硝酸还原对沉积物中有机物减量及微生物群落结构的影响

硝酸还原对沉积物中有机物减量及微生物群落结构的影响

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2012年鄂粤微生物学学术年会——湖北省暨武汉微生物学会成立六十年庆祝大会

作者：刘近邓代永孙国萍刘永定许玫英广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室中国科学院华南植物园广东省微生物应用新技术公共实验室广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地中国科学院大学中国科学院水生生物研究所

通过投加硝酸钙为电子受体,促进厌氧环境中有机污染物降解转化的方式已被广泛应用于沉积物的污染修复,然而目前有关硝酸盐对复合污染沉积物中有机污染物的减量特点及其微生物响应的了解极少。本研究通过在实验室模拟条件下添加硝酸盐到... 详细信息

通过投加硝酸钙为电子受体,促进厌氧环境中有机污染物降解转化的方式已被广泛应用于沉积物的污染修复,然而目前有关硝酸盐对复合污染沉积物中有机污染物的减量特点及其微生物响应的了解极少。本研究通过在实验室模拟条件下添加硝酸盐到河涌沉积物中,采用极性和非极性逐步分离萃取、GC-MS相对含量测定,以及PCR-DGGE分子生态学分析手段相结合,研究硝酸盐对河涌沉积物中有机污染物降解转化和微生物菌群结构特点的影响。结果表明,硝酸钙的投加可有效提高有机物的去除效果。沉积物TOC、TC以及总有机物的去除率比未添加硝酸盐的对照组分别高出47.25%、49.63%、29.55%。各类有机物的去除效果由高到低

关键词：沉积物生物修复硝酸还原有机物减量微生物菌群

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