检索结果-内蒙古大学图书馆

中成药 2018年第1期40卷 224-227页

作者：陈晓颖黄跃前陈玉婵周欣高晓霞章卫民广东药科大学药学院广东广州510006 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

目的对沉香挥发性成分与其体外抗肿瘤活性进行灰色关联度分析。方法 GC-MS法分析4种沉香三氯甲烷提取物的挥发性成分,磺酰罗丹明B(SRB)比色法测定其对Hep G-2、SF-268、MCF-7、NCI-H460细胞株的IC50,再通过灰色关联度分析成分峰面积相... 详细信息

目的对沉香挥发性成分与其体外抗肿瘤活性进行灰色关联度分析。方法 GC-MS法分析4种沉香三氯甲烷提取物的挥发性成分,磺酰罗丹明B(SRB)比色法测定其对Hep G-2、SF-268、MCF-7、NCI-H460细胞株的IC50,再通过灰色关联度分析成分峰面积相对含有量与相应IC50的相关性。结果沉香挥发性成分主要有倍半萜、色酮、甾体,对4种肿瘤细胞株的IC50在11.11~58.55μg/m L之间。与抗肿瘤活性关联度大于0.70的18个挥发性成分中,有6个2-(2-苯乙基)色酮、3个甾体、8个倍半萜。保留时间202.3 min的2-(2-苯乙基)色酮和豆固酮表现出较强的抗肿瘤活性,与4种肿瘤细胞株的IC50关联度均在0.8以上。结论沉香挥发性成分中的2-(2-苯乙基)色酮化合物在其抗肿瘤活性方面具有重要的作用。

关键词：沉香挥发性成分抗肿瘤活性灰色关联度分析 GC-MS SRB比色法

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荧光素酶表达载体构建及其在巴斯德毕赤酵母的表达

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现代食品科技 2018年第6期34卷 88-96页

作者：罗展浩吴清平张菊梅丁郁李程思潘力吴慧清华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 暨南大学理工学院食品科学与工程系广东广州510632

萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase,FL)是ATP快速检测技术的核心组件,通过荧光强度与ATP浓度的对应关系,在食品行业检测微生物数量发挥着重大作用。本文为实现荧光素酶在重组毕赤酵母GS115中的异源表达,通过从载体pGL2-control中扩增... 详细信息

萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase,FL)是ATP快速检测技术的核心组件,通过荧光强度与ATP浓度的对应关系,在食品行业检测微生物数量发挥着重大作用。本文为实现荧光素酶在重组毕赤酵母GS115中的异源表达,通过从载体pGL2-control中扩增荧光素酶基因luc,克隆到真核表达载体p PIC9K中,线性化后电击转化毕赤酵母GS115菌株,筛选阳性重组菌株。在甲醇的诱导下进行酶的表达,对粗酶液进行生物活性发光分析,然后对粗酶进行超滤、阴离子层析和分子筛凝胶层析三步纯化。甲醇诱导表达96 h发现胞外和胞内粗酶液均有相对较高的酶发光活性,酶活分别为1.45×10~6 RLU/mL和1.58×10~9 RLU/mL。SDS-PAGE与Western blot分析重组荧光蛋白大小约为70 ku,最终纯化得到的荧光素酶,其比活为7.0×10~8 RLU/mg,纯化倍数达到19.3倍,产量为48 mg/L。以上结果表明,荧光素酶能够在毕赤酵母表达系统获得较好的表达和纯化效果。

关键词： ATP生物发光真核表达荧光素酶毕赤酵母纯化

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深海真菌Dichotomomyces cejpii胶霉毒素生物合成基因启动子的克隆和功能鉴定

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生物技术通报 2018年第4期34卷 144-150页

作者：黄自磊章卫民叶伟李赛妮李浩华朱牧孜中国科学院南海海洋研究所广州510301 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 中国科学院大学北京100049

利用染色体步移技术对深海真菌Dichotomomyces cejpii中胶霉毒素的生物合成基因Gli G、Gli I和Gli O启动子进行克隆,并将其核心区域导入p GL3-basic荧光素酶报告基因载体,通过荧光强度分析发现Gli G的启动子转录活性最强。进一步将Gli ... 详细信息

利用染色体步移技术对深海真菌Dichotomomyces cejpii中胶霉毒素的生物合成基因Gli G、Gli I和Gli O启动子进行克隆,并将其核心区域导入p GL3-basic荧光素酶报告基因载体,通过荧光强度分析发现Gli G的启动子转录活性最强。进一步将Gli G启动子核心区域导入含潮霉素抗性标记的p AN7-1载体,以替换原有启动子pgpd A,并将重组质粒导入酿酒酵母,用潮霉素抗性平板进行筛选,发现Gli G启动子能在酿酒酵母中启动潮霉素抗性基因的表达。

关键词： Dichotomomyces cejpii 胶霉毒素启动子克隆鉴定海洋真菌

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不同来源异戊烯基焦磷酸异构酶(IDI)和脱氧木酮糖磷酸合成酶(DXS)对重组大肠杆菌番茄红素产量的影响

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食品工业科技 2018年第18期39卷 131-136页

作者：杨帆苏卜利姚青李华平朱红惠广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东广州510070 华南农业大学农学院广东广州510642 华南农业大学园艺学院广东广州510642

为获得更多异戊烯基焦磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase,IDI)和脱氧木酮糖磷酸合成酶(1-deoxyxylulose-5-phosphate synthase,DXS)相关功能基因资源,本研究选取来源于大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、粘细菌(Myxococcus stipitatus)、戈壁奇球菌(Deinococcus gobiensis)的4种IDI和DXS,分别克隆到表达载体,将其与含有合成番茄红素基因的p Trc99a EBI质粒共同在大肠杆菌中进行异源表达。结果表明,来源于粘细菌的IDI和DXS可以获得最高的番茄红素产量,分别达到了10.86、7.94 mg/g DCW。协同表达经过密码子优化的IDI、DXS,番茄红素产量达到了15.26 mg/g DCW。本研究通过比较不同来源的IDI和DXS,获得了新的基因资源。

关键词：番茄红素异戊烯基焦磷酸异构酶(IDI) 脱氧木酮糖磷酸合成酶(DXS) 大肠杆菌代谢工程

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深红虫草次级代谢产物的分离与鉴定

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中国药房 2018年第3期29卷 353-356页

作者：卢梦梦李义勇刘洪新郝再彬章卫民桂林理工大学化学与生物工程学院广西桂林541006 广东省微生物研究所/省部共建华南应用微生物国家重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070

目的:对深红虫草的次级谢产物进行分离、鉴定,为进一步发掘深红虫草活性物质和丰富虫草类真菌天然产物库提供参考。方法:采用正相硅胶柱层析、C_(18)反相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、薄层色谱等色谱技术对深红虫草发酵液中... 详细信息

目的:对深红虫草的次级谢产物进行分离、鉴定,为进一步发掘深红虫草活性物质和丰富虫草类真菌天然产物库提供参考。方法:采用正相硅胶柱层析、C_(18)反相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、薄层色谱等色谱技术对深红虫草发酵液中的化合物进行分离;通过核磁共振氢谱、核磁共振碳谱和质谱分析对分离的化合物进行结构鉴定。结果:从深红虫草发酵液的乙酸乙酯萃取部分共分离得到6个化合物,分别鉴定为5-甲基-1,3-苯二酚(化合物1)、4-hydroxy-17R-methylincisterol(化合物2)、5α,8α-氧桥-(22E,24R)-麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(化合物3)、3β,5α,6β-三羟基-(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯(化合物4)、尿嘧啶核苷(化合物5)、卵孢菌素(化合物6)。结论:本研究从该属真菌中分离得到了6个化合物,其中化合物1和化合物2为首次分离得到。

关键词：深红虫草次级代谢产物分离鉴定

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废弃铅锌矿石和钨矿砂中可培养细菌多样性分析

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生物技术进展 2018年第5期8卷 450-458页

作者：邹卫玲冯广达李华平朱红惠广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广州510070 华南农业大学农学院广州510642

为了了解废弃铅锌矿石和钨矿砂中可培养细菌的多样性,发掘其中的微生物新资源,采用3种培养基(R2A、无磷R2A、无磷R2A+Cd^(2+))分别对其中的可培养细菌进行分离纯化和培养。再通过16S rRNA基因测序获取相关的分类学信息,并进行系统进化... 详细信息

为了了解废弃铅锌矿石和钨矿砂中可培养细菌的多样性,发掘其中的微生物新资源,采用3种培养基(R2A、无磷R2A、无磷R2A+Cd^(2+))分别对其中的可培养细菌进行分离纯化和培养。再通过16S rRNA基因测序获取相关的分类学信息,并进行系统进化分析。从2种材料中共分离到可培养细菌152株。其中,废弃铅锌矿石中的可培养细菌涵盖了5个门、7个分支,分属于Alphaproteobacteria、Betaproteobacteria、Gammaproteobacteria、Deinococcus-Thermus、Actinobacteria、Bacteroidetes和Firmicutes,以Massilia、Methylobacterium、Deinococcus和Sphingomonas为主要类群;而钨矿砂中的可培养细菌涵盖了3个门、4个分支,分属于Alphaproteobacteria、Betaproteobacteria、Actinobacteria和Firmicutes,以Methylobacterium、Massilia、Ralstonia和Microbacterium为主要类群。废弃铅锌矿石中可培养细菌的多样性和新分类单元发现率均大于钨矿砂,且两者的可培养细菌类群组成存在较大差异。此外,向培养基中添加重金属Cd^(2+)降低了可培养细菌的多样性。研究分离到的Cd^(2+)耐受菌株主要属于3个属:Methylobacterium、Herbaspirillum和Ralstonia,其能耐受2 mmol/L Cd^(2+),是金属尾矿中重金属耐受菌的优势种群。研究结果为金属尾矿中微生物新资源的深入发掘提供了依据。

关键词：废弃铅锌矿石钨矿砂 R2A 可培养细菌 16S rRNA基因

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高压脉冲电场灭菌对木瓜果酒中维生素C损失的影响

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酿酒科技 2018年第9期 22-25页

作者：王惠惠莫树平柏建玲罗金棠吴清平丘明泉任鹏荣广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 广州市果树科学研究所广东广州510405

研究了高压脉冲电场在不同电场强度和处理时间对木瓜果酒Vc损失的影响,还进一步比较了高压脉冲电场和热处理灭菌后的木瓜果酒的菌落总数和Vc含量的变化。结果表明,随着高压脉冲电场的电场强度的增大和处理时间的延长,木瓜果酒的Vc损失... 详细信息

研究了高压脉冲电场在不同电场强度和处理时间对木瓜果酒Vc损失的影响,还进一步比较了高压脉冲电场和热处理灭菌后的木瓜果酒的菌落总数和Vc含量的变化。结果表明,随着高压脉冲电场的电场强度的增大和处理时间的延长,木瓜果酒的Vc损失越来越大,35 k V/cm、400μs处理时,混合木瓜果酒的Vc含量下降了18.75%,而100℃热处理的Vc含量降低了79%;高压脉冲电场灭菌效果良好,与传统热处理相比,高压脉冲电场处理的木瓜果酒中Vc损失程度更小。

关键词：木瓜果酒高压脉冲电场热杀菌

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海洋真菌Westerdykella dispersa FS350次级代谢产物的分离纯化与鉴定

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广东药科大学学报 2018年第2期34卷 132-136页

作者：许建林刘洪新陈玉婵李赛妮郭珩李浩华章卫民高晓霞广东药科大学药学院广东广州510006 广东省微生物研究所/省部共建华南应用微生物国家重点实验室/广东省菌种保藏与应用重点实验室/广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

目的研究海洋真菌Westerdykella dispersa FS350的次级代谢产物。方法利用正相硅胶柱、反相硅胶柱、凝胶柱和高效液相色谱等多种色谱方法对菌株FS350的液体发酵产物进行分离纯化,采用NMR、MS等波谱方法鉴定化合物结构,采用SRB法和DPPH... 详细信息

目的研究海洋真菌Westerdykella dispersa FS350的次级代谢产物。方法利用正相硅胶柱、反相硅胶柱、凝胶柱和高效液相色谱等多种色谱方法对菌株FS350的液体发酵产物进行分离纯化,采用NMR、MS等波谱方法鉴定化合物结构,采用SRB法和DPPH法测定化合物的生物活性。结果从发酵产物中分离得到了8个成分,分别鉴定为:2-(4-羟苯基)乙酸乙酯(1)、3-hydroxy-1-(2,6-dihydroxyphenyl)butan-1-one(2)、4-epiradicinol(3)、2-糠酸(4)、2-(4-羟苯基)-乙醇(5)、对羟基苯乙醇α-羟基丙酸酯(6)、(R)-甲羟戊酸内酯(7)和asterric acid(8)。结论化合物1~8均是首次从Westerdykella属真菌中分离得到,这些化合物均无明显的细胞毒和抗氧化活性。

关键词：海洋真菌 Westerdykella dispersa 次级代谢产物分离纯化鉴定

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广藿香内生真菌类群分析及其抗菌活性研究

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中国中药杂志 2017年第4期42卷 657-662页

作者：王营李浩华谭国慧李赛妮严明理章卫民湖南科技大学化学化工学院湖南湘潭411201 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070

从广藿香的根、茎、叶中共分离得到72株内生真菌,根据ITS序列分析鉴定为25属40个种,其中拟茎点霉属Phomopsis、刺盘孢属Colletotrichum、镰刀菌属Fusarium为优势种群;广藿香内生真菌的分布存在明显的组织特异性,以茎中内生真菌的分布最... 详细信息

从广藿香的根、茎、叶中共分离得到72株内生真菌,根据ITS序列分析鉴定为25属40个种,其中拟茎点霉属Phomopsis、刺盘孢属Colletotrichum、镰刀菌属Fusarium为优势种群;广藿香内生真菌的分布存在明显的组织特异性,以茎中内生真菌的分布最多,占分离菌株总数的78%;活性测试结果显示共有15个属34株内生真菌至少对1种供试菌具有抗菌活性。结果表明广藿香内生真菌多样性丰富,部分菌株具有明显的抑菌活性,值得进一步深入研究。

关键词：内生真菌多样性广藿香抗菌活性

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不同酸剂诱导人工沉香的分析与评价

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中国中药杂志 2017年第16期42卷 3159-3166页

作者：周欣陈丽燕陈晓东钟兆健李浩华章卫民高晓霞广东药科大学药学院广东广州510006 广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070 仙乐健康科技股份有限公司广东汕头515041

该研究按照《中国药典》(2015年版)要求测定样品醇溶性浸出物含量,同时建立GC-MS指纹图谱,使用《中药指纹图谱相似度评价(2012年版)》计算指纹图谱相似度,峰面积归一化法计算170~270 min与0~100 min 2区间总峰面积的比值,自动质谱退卷... 详细信息

该研究按照《中国药典》(2015年版)要求测定样品醇溶性浸出物含量,同时建立GC-MS指纹图谱,使用《中药指纹图谱相似度评价(2012年版)》计算指纹图谱相似度,峰面积归一化法计算170~270 min与0~100 min 2区间总峰面积的比值,自动质谱退卷积定性系统(AMDIS)结合保留指数(RI)鉴定共有组分和差异组分,OPLS-DA结合相关系数P(corr)和变量权重(VIP)筛选差异组分,灰色关联度和TOPSIS分析法综合评价人工沉香品质。结果显示18批人工沉香中15批浸出物含量符合要求,指纹图谱相似度在0.439~0.779,2区间总峰面积比值在0.307~13.254,共鉴定出9个共有组分和8个差异组分,综合上述20个指标进行灰色关联度和TOPSIS分析得到2%水杨酸诱导的人工沉香品质最优。建立的灰色关联度结合TOPSIS分析法可快速判断不同酸性诱导剂生产的人工沉香品质,为人工沉香的全面质量评价提供参考依据。

关键词：人工沉香酸性诱导剂气相-质谱灰色关联度 TOPSIS

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