检索结果-内蒙古大学图书馆

肿瘤研究与临床 2016年第7期28卷 433-436页

作者：姚慧蒋泽生高毅器官衰竭防治国家重点实验室器官衰竭防治协同创新中心广东省人工器官与组织工程研究中心南方医科大学珠江医院肝胆二科广州510000

目的：研究不同浓度一氧化氮（NO）对肝癌细胞HepG2和外周血单个核细胞（PBMC）活性的影响。方法通过设置不同的PBMC、HepG2细胞密度及使用不同药物调节培养体系中NO的浓度，分别测量单独培养和间接共培养体系中两种细胞活性变化，并与... 详细信息

目的：研究不同浓度一氧化氮（NO）对肝癌细胞HepG2和外周血单个核细胞（PBMC）活性的影响。方法通过设置不同的PBMC、HepG2细胞密度及使用不同药物调节培养体系中NO的浓度，分别测量单独培养和间接共培养体系中两种细胞活性变化，并与不加药对照组进行统计分析。结果间接共培养的PBMC活性仅在NO浓度大于120μmol／L时受到影响，而与PBMC间接共培养的HepG2细胞在NO浓度小于对照组时和NO浓度大于241μmol／L时受到抑制。在不同的NO浓度条件下，间接共培养的HepG2细胞活性均高于单独培养的HepG2细胞。间接共培养体系中，随着PBMC与HepG2细胞数比值的升高，NO浓度降低，而HepG2细胞活性增加。结论培养液中过高或过低的NO浓度都对HepG2细胞有损害，过高浓度的NO对PBMC有损害，低浓度NO对PBMC无显著影响，间接接触PBMC对HepG2细胞的生长有促进作用。

关键词：肝肿瘤共培养一氧化氮免疫疗法

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抑制miR-140腺相关病毒载体的构建及鉴定

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广东医学 2016年第7期37卷 970-973页

作者：贺鹏段莉梁宇杰南方医科大学附属深圳恒生医院口腔科广东深圳518102 广东省深圳市第二人民医院中心实验室、深圳市组织工程重点实验室 518035 北京大学深圳研究生院化学生物学与生物技术学院广东深圳518055

目的构建一种抑制microRNA-140(miR-140)表达的腺相关病毒(AAV)载体系统,从而实现对细胞内miR-140表达水平的高效抑制。方法应用分子生物学方法将腺相关病毒载体与miRNA诱饵microRNA tough decoy RNAs(Tu D)相结合,构建p AAV-U6-miR-140... 详细信息

目的构建一种抑制microRNA-140(miR-140)表达的腺相关病毒(AAV)载体系统,从而实现对细胞内miR-140表达水平的高效抑制。方法应用分子生物学方法将腺相关病毒载体与miRNA诱饵microRNA tough decoy RNAs(Tu D)相结合,构建p AAV-U6-miR-140-Tu D-EGFP表达质粒;用脂质体转染法将p AAVU6-miR-140-Tu D-EGFP表达质粒和p AAV-RC、p AAV-Helper质粒共转染至AAV-293细胞中,包装生成携带miR-140-Tu D的重组腺相关病毒r AAV-U6-miR-140-Tu D-EGFP。进一步将病毒感染骨肉瘤细胞U2OS,定量RT-PCR检测miR-140-Tu D对细胞内miR-140基因的沉默效果,并测定病毒的感染滴度。结果DNA测序证明miR-140-Tu D已成功构建到表达质粒p AAV-U6-MCS-EGFP中;AAV-293细胞表达绿色荧光蛋白提示共转染成功;r AAV-U6-miR-140-Tu D-EGFP感染滴度约为4.1×1010·m L-1;包装的重组腺相关病毒r AAV-U6-miR-140-Tu D-EGFP感染U2OS细胞后,能显著下调U2OS细胞miR-140基因的表达水平。结论携带miR-140-Tu D重组腺相关病毒的包装成功,该病毒具有稳定沉默miR-140基因从而降低其表达水平的功能。

关键词：腺相关病毒 miR-140 tough decoy 骨肉瘤细胞

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c-Jun信号通路对周围神经脱髓鞘过程的调控研究进展

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中华神经医学杂志 2016年第10期15卷 1071-1075页

作者：许嘉玮文锦坤罗宇晨郭家松南方医科大学第一临床医学院2011级临床医学八年制专业广州510515 南方医科大学第一临床医学院2010级临床医学八年制专业广州510515 南方医科大学组织学与胚胎学教研室广州510515 广东省组织工程构建与检测重点实验室广州510515

周围神经损伤（PNI）可导致轴突退变和脱髓鞘。脱髓鞘后施万细胞将去分化并形成Bungner带，进而为轴突再生及其再髓鞘化创造条件，所以脱髓鞘对PNI修复具有重要意义。研究发现，转录因子c-Jun在施万细胞脱髓鞘过程中表达增高，而且许多... 详细信息

周围神经损伤（PNI）可导致轴突退变和脱髓鞘。脱髓鞘后施万细胞将去分化并形成Bungner带，进而为轴突再生及其再髓鞘化创造条件，所以脱髓鞘对PNI修复具有重要意义。研究发现，转录因子c-Jun在施万细胞脱髓鞘过程中表达增高，而且许多分子可通过调控c-Jun影响周围神经脱髓鞘。因此本文围绕c—Jun信号通路对PNI脱髓鞘的调控机制综述如下。

关键词： c.Jun 周围神经损伤脱髓鞘信号通路

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乙酰肝素酶、肝细胞生长因子和血管内皮生长因子在非小细胞肺癌组织中的表达及其相关性

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解剖学杂志 2016年第2期39卷 169-172,187页

作者：王锦阳黄文华李海滨曾宝真王亚陈佳丽何园尤长宣南方医科大学基础医学院人体解剖学教研室广东省组织构建与检测重点实验室广州510515 河北工程大学附属医院肿瘤科邯郸056002 南方医科大学南方医院肿瘤科广州510515

目的：研究乙酰肝素酶（HPA）、肝细胞生长因子（HGF）、血管内皮生长因子（ⅦGF）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其与临床特征之间的关系；并分析三者表达的相关性。方法：采用免疫组织化学检测45例非小细胞肺癌组织及10例正... 详细信息

目的：研究乙酰肝素酶（HPA）、肝细胞生长因子（HGF）、血管内皮生长因子（ⅦGF）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其与临床特征之间的关系；并分析三者表达的相关性。方法：采用免疫组织化学检测45例非小细胞肺癌组织及10例正常组织中HPA、HGF及VEGF的表达水平。结果：非小细胞肺癌组织中HPA、vEGF的表达与正常组织表达、TNM分期有关。HGF的表达与正常组织的表达有关。三者中任意两者间在非小细胞肺癌组织中的表达均呈正相关性。结论：HPA、HGF与VEGF参与了非小细胞肺癌的发生、发展、浸润与转移；在非小细胞肺癌的发展过程中，三者之间可能存在协同作用。

关键词：非小细胞肺癌乙酰肝素酶肝细胞生长因子血管内皮生长因子

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半乳糖凝集素-3联合HGF诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞

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重庆医学 2016年第15期45卷 2043-2047页

作者：吴增城康利民李阳郭斌冯磊彭青潘明新南方医科大学珠江医院肝胆二科/"器官衰竭防治"国家重点实验室/"器官衰竭防治"协同创新中心/广东省人工器官与组织工程研究中心广州510282 云南省普洱市人民医院肝胆外科 665000

目的探索半乳糖凝集素-3(Gal-3)联合肝细胞生长因子(HGF)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向肝样细胞分化的可行性及最佳诱导条件,并对诱导后的细胞进行鉴定。方法离心、贴壁培养分离大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定表面标志。取第3代细胞进... 详细信息

目的探索半乳糖凝集素-3(Gal-3)联合肝细胞生长因子(HGF)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向肝样细胞分化的可行性及最佳诱导条件,并对诱导后的细胞进行鉴定。方法离心、贴壁培养分离大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定表面标志。取第3代细胞进行分组诱导培养,A组:0μg/mL Gal-3+20ng/mL肝细胞生长因子(HGF);B组:0.1μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;C组:0.5μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;D组:1.0μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;E组:2.0μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;阳性对照组:SD大鼠肝脏细胞IAR20。分别于诱导后7、14、21、28d时段进行细胞形态学观察、免疫荧光染色检测、实时荧光定量核酸扩增检测(Q-PCR)鉴定其诱导分化情况。结果分组诱导培养后,各组BMSCs形态逐渐向肝样细胞转化,与大鼠原代肝脏细胞IAR20相似,其中28d时间段,C组转化成IAR20相似细胞比例最高;各组甲胎蛋白(AFP)、清蛋白(ALB)荧光染色阳性率明显增高,并且在28d时间点C组AFP、ALB的荧光染色阳性率最高;C组AFP、ALB mRNA表达明显增加,同时以28d时间点表达量达到峰值。结论 Gal-3联合HGF能有效诱导大鼠BMSCs分化为肝样细胞,分化后的肝样细胞能分泌肝细胞特异性产物AFP、ALB,且其诱导效率与诱导培养时间和Gal-3浓度有关。

关键词：间质干细胞甲胎蛋白类肝细胞生长因子骨髓间充质干细胞半乳糖凝集素-3 诱导肝样分化

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诱导型一氧化氮合酶对骨骼肌损伤再生的影响

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中国临床解剖学杂志 2015年第5期33卷 545-548页

作者：赖桂华余磊张翔蚌埠医学院人体解剖学教研室安徽蚌埠233030 南方医科大学人体解剖学教研室广东省组织构建与检测重点实验室广州510515 广州医科大学中华生物医学工程杂志编辑部广州511436

目的观察骨骼肌损伤再生中的细胞形态学变化和损伤后诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达水平;观察巨噬细胞上清液对iNOS表达水平和骨骼肌再生的影响。方法制备SD大鼠骨骼肌损伤模型,损伤3 d后获取骨骼肌,... 详细信息

目的观察骨骼肌损伤再生中的细胞形态学变化和损伤后诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达水平;观察巨噬细胞上清液对iNOS表达水平和骨骼肌再生的影响。方法制备SD大鼠骨骼肌损伤模型,损伤3 d后获取骨骼肌,进行HE染色、iNOS免疫组化分析;利用原代培养的巨噬细胞上清液处理小鼠C2C12成肌细胞株,RT-PCR技术探讨巨噬细胞和成肌细胞相互作用的分子机制。结果 HE染色可见,骨骼肌损伤处有新的血管产生并进入损伤的骨骼肌内;损伤部位iNOS表达强阳性,生发区iNOS表达呈阳性,正常与损伤细胞表达差异明显;巨噬细胞上清液处理小鼠C2C12成肌细胞株能够促进iNOS和成肌细胞因子Myo D的表达。结论骨骼肌损伤过程中,iNOS的表达增加能够促进骨骼肌的再生,加快骨骼肌的损伤修复。

关键词：骨骼肌损伤再生 iNOS 血管生成

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不同空间排列静电纺丝对RSC96细胞表达NGF及Laminin的研究

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中国临床解剖学杂志 2015年第1期33卷 60-63页

作者：曹欣赵利张贤祚秦建强李红吴刚南方医科大学附属小榄医院神经内科广东中山528415 南方医科大学解剖学教研室广东省组织构建与检测重点实验室广州510515 澳门科技大学中医药学院澳门999078 暨南大学理工学院材料科学与工程系广州510632 华南理工大学广州510641

目的研究不同空间排列静电纺丝对雪旺细胞株(RSC96)神经营养因子(NGF)及层粘连蛋白(Laminin,LN)的表达情况。方法根据培养条件不同分3组,即平行静电纺丝培养组(A)、随机静电纺丝培养组(B)及膜上培养组(C)培养3天后用Trizol法提取细胞总R... 详细信息

目的研究不同空间排列静电纺丝对雪旺细胞株(RSC96)神经营养因子(NGF)及层粘连蛋白(Laminin,LN)的表达情况。方法根据培养条件不同分3组,即平行静电纺丝培养组(A)、随机静电纺丝培养组(B)及膜上培养组(C)培养3天后用Trizol法提取细胞总RNA,用Oligo(d T)逆转录酶得到c DNA。经特定引物PCR扩增,取相同量的逆转录产物进行q PCR反应,检测NGF及LN的表达差异。结果平行静电纺丝组,随机静电纺丝组,膜上培养组上NGF基因表达依次递增,各组间差异明显;LN基因的表达依次递减,各组间差异明显。结论不同空间排列的静电纺丝对RSC96细胞表达NGF和Laminin影响不同,平行的静电纺丝有促进细胞向成熟分化的可能。

关键词： RSC96细胞静电纺丝 NGF Laminin

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携带低氧诱导因子1α慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞后成骨基因的表达

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中国组织工程研究 2014年第28期18卷 4455-4462页

作者：付志杰张巨峰王大平陈洁琳段莉何美建李庆庆李文翠熊建义汕头大学医学院深圳二院临床学院广东省深圳市518035 深圳市第二人民医院骨科广东省深圳市518035 深圳市组织工程重点实验室广东省深圳市518035

背景:人低氧诱导因子1α可调控其下游成骨及成血管基因的表达,具有提高成骨活性的作用。目的:观察携带人低氧诱导因子1α慢病毒感染的大鼠骨髓间充质干细胞中成骨基因表达情况。方法:通过RT-PCR方法从Hela细胞中获得低氧诱导因子1α,构... 详细信息

背景:人低氧诱导因子1α可调控其下游成骨及成血管基因的表达,具有提高成骨活性的作用。目的:观察携带人低氧诱导因子1α慢病毒感染的大鼠骨髓间充质干细胞中成骨基因表达情况。方法:通过RT-PCR方法从Hela细胞中获得低氧诱导因子1α,构建携带低氧诱导因子1α的慢病毒表达质粒Lenti-HIF-1α-eGFP,与LentiPac HIV混合包装质粒共包装293Ta细胞,获得病毒;采用全骨髓直接贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,使用流式细胞仪对骨髓间充质干细胞进行鉴定。分别在慢病毒感染骨髓间充质干细胞1,4,7,14 d后,用实时荧光定量PCR检测骨髓间充质干细胞中成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶的表达水平。结果与结论:Lenti-HIF-1α-eGFP有效地感染骨髓间充质干细胞,实时荧光定量PCR检测结果显示成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶在Lenti-HIF-1α-eGFP感染后第4天开始明显过表达,且持续至14 d。结果表明低氧诱导因子1α可以提高骨髓间充质干细胞的成骨活性。

关键词：干细胞骨髓干细胞低氧诱导因子1α 骨髓间充质干细胞基因转染骨缺损慢病毒载体骨组织工程成骨基因成骨活性广东省自然科学基金

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低温快速成型亲水改性复合人工骨支架的性能测定

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中国组织工程研究 2014年第12期18卷 1824-1830页

作者：何美健王大平黄江鸿张明安徽医科大学深圳二院临床学院广东省深圳市518035 深圳市第二人民医院骨科广东省深圳市518035 深圳市组织工程重点实验室广东省深圳市518035 中科院深圳先进技术研究院广东省深圳市518035

背景:低温快速成型技术具有支架成型可控性、保持材料生物学活性和易于实现支架材料的三维多孔立体结构等优势,被迅速用于骨组织工程支架的制备。目的:采用低温快速成型制备聚乙二醇改性聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石复合支架,并检测其... 详细信息

背景:低温快速成型技术具有支架成型可控性、保持材料生物学活性和易于实现支架材料的三维多孔立体结构等优势,被迅速用于骨组织工程支架的制备。目的:采用低温快速成型制备聚乙二醇改性聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石复合支架,并检测其性能。方法:采用低温快速成型设备分别制备聚乙二醇改性聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石与聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石复合支架,通过电镜观察支架超微结构,以介质(乙醇)浸泡法测定支架孔隙率,采用电子试验机检测支架力学性能;将两种支架材料分别与大鼠成骨细胞共培养,培养12 h采用沉淀法检测细胞黏附率,培养1,3,5,7,9,12 d采用CCK-8法检测细胞增殖。结果与结论:两组支架孔径均在理想范围内并具有较高孔隙率,但聚乙二醇改性聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石支架的孔径波动范围大,孔径均值较聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石支架小且部分有闭塞现象。聚乙二醇改性聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石支架的细胞黏附率及表面细胞增殖活性高于聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石支架(P<0.05),力学性能低于聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石支架(P<0.05)。表明聚乙二醇改性聚乳酸-乙醇酸/纳米羟基磷灰石复合支架具有良好的细胞相容性。

关键词：生物材料骨生物材料低温快速成型聚乳酸-乙醇酸聚乙二醇纳米羟基磷灰石骨组织工程复合支架骨缺损亲水改性广东省自然科学基金

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骨髓间充质干细胞联合可降解支架体外构建组织工程带瓣静脉（英文）

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中国组织工程研究 2014年第3期18卷 348-356页

作者：刘池拽殷恒讳吕伟明曾晨光刘畅王文见全大萍项鹏王深明中山大学附属第一医院血管外科广东省广州市510080 中山大学附属中山医院(中山市人民医院)血管外科广东省中山市528400 中山大学化学与化学工程学院高分子研究所广东省广州市510275 中山大学干细胞与组织工程研究中心中山大学教育部干细胞与组织工程重点实验室广东省广州市510080

背景:临床上治疗慢性静脉功能不全的主要方法是静脉瓣膜修复及带瓣静脉段移植,但这些方法创伤较大,且带瓣静脉来源有限。组织工程学和再生医学在修复病变血管方面取得的进步,而以自体来源的内皮细胞为种子细胞的组织工程带瓣静脉也见于... 详细信息

背景:临床上治疗慢性静脉功能不全的主要方法是静脉瓣膜修复及带瓣静脉段移植,但这些方法创伤较大,且带瓣静脉来源有限。组织工程学和再生医学在修复病变血管方面取得的进步,而以自体来源的内皮细胞为种子细胞的组织工程带瓣静脉也见于了报道,但存在排出反应。目的:构建一个有可自我更新、修复、类似天然瓣膜结构并具有功能的带瓣静脉。方法:麻醉取Beagle犬的骨髓获取骨髓间充质干细胞,采用密度梯度离心和贴壁法获取骨髓间充质干细胞,并进行细胞的传代、冻存复苏、流式细胞仪检测和定向诱导分化。采用热致相分离技术,以聚(乳酸-乙醇酸)共聚物为基材,利用自制带瓣静脉模具制备三维组织工程带瓣静脉支架,制备组织工程带瓣静脉支架,并研究其形态结构。将骨髓间充质干细胞种植在支架上构建可降解的带瓣静脉,在体外培养2周。结果与结论:扫描电镜观察显示支架孔隙率高。培养的细胞符合骨髓间充质干细胞的形态特征,培养的细胞大部分表达CD29和CD44,不表达CD34和CD45。细胞毒性实验显示支架无毒性,有利于细胞增殖和迁移。将细胞种植在支架表面上培养后可形成单层细胞层。体外实验验证细胞支架复合物的瓣膜有一定的开闭功能。利用三维聚(乳酸-乙醇酸)共聚物支架和骨髓间充质干细胞可成功构建组织工程带瓣静脉,组织工程带瓣静脉将有可能作为静脉瓣膜的的替代物治疗静脉瓣膜疾病。

关键词：生物材料材料相容性可降解吸收材料静脉瓣膜骨髓间充质干细胞聚(乳酸-乙醇酸)共聚物慢性静脉功能不全组织构建干细胞国家自然科学基金

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