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AMP-AMPK-AS160信号通路在黄芪多糖刺激L6成肌细胞葡萄糖摄取中的作用

中国病理生理杂志 2015年第10期 1869-1870页

作者：鲍芳吴胜英欧阳静萍刘坚湖北医药学院心血管生物研究室基础医学院病理生理学教研室武汉大学基础医学院病理生理学教研室

目的:探讨黄芪多糖(APS)对L6成肌细胞葡萄糖摄取的刺激作用及其机制。方法:培养L6成肌细胞,采用2-脱氧-[3H]-D-葡萄糖法检测细胞的葡萄糖摄取,高效液相色谱法检测细胞内的AMP含量,Western blotting法检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和160... 详细信息

目的:探讨黄芪多糖(APS)对L6成肌细胞葡萄糖摄取的刺激作用及其机制。方法:培养L6成肌细胞,采用2-脱氧-[3H]-D-葡萄糖法检测细胞的葡萄糖摄取,高效液相色谱法检测细胞内的AMP含量,Western blotting法检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和160 kD的Akt底物(AS160)的磷酸化水平;脂质体法瞬时转染4P突变型AS160(AS160-4P)质粒。结果:APS呈时

关键词：黄芪多糖 L6 黄氏多糖成肌细胞信号通路葡萄糖右旋糖己糖 AMPK AS

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丹参酮ⅡA定向诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的研究

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中国病理生理杂志 2003年第7期19卷 865-869,T001页

作者：夏文杰项鹏张丽蓉陈振光余伟华张秀明李艳李树浓中山大学中山医学院病理生理学教研室广东广州510080 广东药学院病理生理学教研室广东广州510224 中山大学附属第一医院心胸外科广东广州510080

目的 :丹参酮ⅡA体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞。方法 :采用Fi coll-Paque液离心和贴壁法分离成人MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达 ,FGF - 2对MSC增殖和分化的影响。采用含丹参酮ⅡA的无血清... 详细信息

目的 :丹参酮ⅡA体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞。方法 :采用Fi coll-Paque液离心和贴壁法分离成人MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达 ,FGF - 2对MSC增殖和分化的影响。采用含丹参酮ⅡA的无血清达乐伯克改良必需基本培养基 (DMEM)诱导MSC分化为神经元样细胞 ,免疫组化鉴定神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF -M)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、巢蛋白 (nestin)的表达。结果 :成人骨髓间质干细胞在体外扩增原代可获得 0 5× 10 6,15代可获得 ( 2 - 3)× 10 12 个细胞 ,流式细胞仪检测结果显示CD2 9、CD4 4、CD90、CD10 5、CD16 6表达阳性 ,CD11a、CD14、CD34、CD38、CD4 5、CD80、CD86为阴性。FGF - 2促进hMSC生长 ,并且对MSC的分化能力基本没有影响。丹参酮ⅡA诱导后 ,MSC胞体收缩 ,突起伸出 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF -M、nestin表达阳性 ,GFAP阴性。结论

关键词：骨髓间质干细胞神经元丹参酮ⅡA 成纤维细胞生长因子细胞分化

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穿心莲内酯联合甲氨蝶呤对类风湿关节炎大鼠抗炎及保肝效果观察

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郑州大学学报（医学版） 2020年第4期55卷 472-475页

作者：罗沙沙李芬芬谢小倩王亚乐赵则月李晓天郑州大学药学院郑州450001 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001

目的:评价穿心莲内酯与甲氨蝶呤联用对类风湿关节炎大鼠抗炎及保肝的效果。方法:将32只Wistar大鼠随机分为4组,每组8只。甲氨蝶呤组,每周2次腹腔注射甲氨蝶呤溶液5 mL/kg(0.2 g/L甲氨蝶呤给药剂量为2 mg/kg);穿心莲内酯组,每天灌胃穿心... 详细信息

目的:评价穿心莲内酯与甲氨蝶呤联用对类风湿关节炎大鼠抗炎及保肝的效果。方法:将32只Wistar大鼠随机分为4组,每组8只。甲氨蝶呤组,每周2次腹腔注射甲氨蝶呤溶液5 mL/kg(0.2 g/L甲氨蝶呤给药剂量为2 mg/kg);穿心莲内酯组,每天灌胃穿心莲内酯溶液10 mL/kg(5 g/L穿心莲内酯溶液给药剂量为50 mg/kg);联合组,除每周2次腹腔注射甲氨蝶呤溶液外,每天灌胃给予穿心莲内酯溶液10 mL/kg;对照组,每天灌胃等体积的5 g/L羧甲基纤维素钠。第38天测量大鼠足厚度、足周长、关节炎指数(AI)、热板实验耐受时间;第39天,检测大鼠血清中AST、ALT含量;HE染色观察右后肢踝关节组织学表现。结果:甲氨蝶呤及穿心莲内酯均可改善大鼠足厚度、足周长、AI及耐受时间(P<0.001),其中两药联用对大鼠足周长、耐受时间的影响表现出协同作用(P<0.05)。甲氨蝶呤单独使用升高大鼠血清中AST、ALT含量,穿心莲内酯单独使用降低大鼠血清中AST、ALT含量,两药联用存在拮抗作用(P<0.001)。HE染色结果显示,穿心莲内酯与甲氨蝶呤单独使用,均可减轻大鼠踝关节软骨侵蚀情况;而两药联用,大鼠踝关节边缘清晰,炎性细胞明显减少,且未见滑膜增厚及软骨侵蚀现象。结论:穿心莲内酯联合甲氨蝶呤可改善大鼠类风湿关节炎,减弱甲氨蝶呤的肝毒性。

关键词：穿心莲内酯类风湿关节炎甲氨蝶呤肝损伤大鼠

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附子多糖保护缺氧/复氧乳鼠心肌细胞及其抗内质网应激的机制研究

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中国病理生理杂志 2012年第3期28卷 459-463页

作者：刘颖纪超吴伟康广东药学院基础学院病理生理学教研室广东广州510006 中山大学中西医结合研究所广东广州510089

目的:观察附子多糖对缺氧/复氧后心肌细胞的保护,并探讨附子多糖的保护机制是否与其抑制内质网应激反应有关。方法:建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,将乳鼠心肌细胞分为正常对照组、缺氧/复氧组(缺氧3 h后复氧6 h)和不同浓度附子多糖(0.1... 详细信息

目的:观察附子多糖对缺氧/复氧后心肌细胞的保护,并探讨附子多糖的保护机制是否与其抑制内质网应激反应有关。方法:建立乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,将乳鼠心肌细胞分为正常对照组、缺氧/复氧组(缺氧3 h后复氧6 h)和不同浓度附子多糖(0.1g/L、1g/L、10g/L、20g/L)+缺氧/复氧组。MTT法测定心肌细胞存活率,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,Western blotting分析葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及caspase-12的表达,荧光定量。PCR进一步检测CHOP及caspase-12 mRNA表达。结果:缺氧复氧后,心肌细胞中内质网应激反应标志蛋白GRP78表达增加,内质网应激凋亡相关蛋白CHOP及caspase-12蛋白和mRNA表达亦明显升高。与缺氧/复氧组相比较,附子多糖预处理24 h后可以有效抑制缺氧/复氧引起的GRP78、CHOP和caspase-12的表达上调,增加心肌细胞的存活率,抑制心肌细胞凋亡的发生。附子多糖的保护效应呈剂量依赖形式,10 g/L剂量时达到峰值。结论:附子多糖保护缺氧/复氧后心肌细胞的可能机制与其抑制内质网应激所介导的细胞凋亡途径相关。

关键词：附子多糖内质网应激缺氧/复氧损伤心肌细胞

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病理生理学“三段式理论课”新授课模式的研究

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2009年第4期11卷 405-407页

作者：陈伟强古宏标广东药学院基础学院病理生理学教研室

在病理生理学理论教学中采用“三段式”教学改革，并采用学生问卷调查法和成绩分析法，对“三段式”教学效果进行研究，收集反馈意见进行综合分析。研究发现“三段式”教学已被学生接受，并收到良好的效果。

关键词： “三段式”教学病理生理学教学改革

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芹菜素对人急性髓性白血病细胞化疗敏感性的增强作用

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郑州大学学报（医学版） 2007年第3期42卷 515-517页

作者：胡太平陈伟强曹建国广东药学院病理生理学教研室广州510006 南华大学肿瘤研究所衡阳421001

目的观察芹菜素(API)能否增强人急性髓性白血病(HL-60)细胞系细胞对顺铂(DDP)的化疗敏感性。方法取对数生长期的HL-60细胞,分为API组、DDP组、API+DDP组与空白对照组。API组加入API,终浓度为1.0μmol·L-1,DDP组加入DDP,终浓度分别... 详细信息

目的观察芹菜素(API)能否增强人急性髓性白血病(HL-60)细胞系细胞对顺铂(DDP)的化疗敏感性。方法取对数生长期的HL-60细胞,分为API组、DDP组、API+DDP组与空白对照组。API组加入API,终浓度为1.0μmol·L-1,DDP组加入DDP,终浓度分别为1.0mg·L-1,2.0mg·L-1,4.0mg·L-1,API+DDP组API终浓度为1.0μmol·L-1,DDP分别为1.0mg·L-1,2.0mg·L-1和4.0mg·L-1,空白对照组仅加入等量完全培养基。采用MTT比色法测定细胞生长抑制率。另取对数生长期的HL-60细胞,分组同上,采用流式细胞术测定细胞凋亡率。另取对数生长期的HL-60细胞,分为3组,前2组加入1.0μmol·L-1API,分别培养24h,48h,对照组仅加入等量完全培养基,采用间接免疫荧光标记流式细胞术观察API对HL-60细胞NF-κB和Bcl-2表达的影响。结果1.0μmol·L-1API无细胞毒作用,不能有效诱导HL-60细胞的凋亡,但它与不同浓度的DDP合用,可增强DDP对HL-60细胞增殖的抑制作用,并使细胞凋亡率明显增加。1.0μmol·L-1API可抑制HL-60细胞NF-κB和Bcl-2的表达(P均<0.01)。结论API可增强DDP对HL-60细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用,其机制可能与下调NF-κB和Bcl-2的表达有关。

关键词：人急性髓性白血病芹菜素顺铂凋亡

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15-F2t-isoprostane在大鼠肠缺血再灌注损伤中的作用

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中华麻醉学杂志 2011年第7期31卷 850-853页

作者：温仕宏李毅李偲李云胜刘颖黄文起刘克玄中山大学附属第一医院麻醉科广州市510080 广东药学院病理生理学教研室

目的评价异构前列腺素15-F21-isoprostane在大鼠肠缺血再灌注损伤中的作用。方法健康雄性SD大鼠32只，体重230～255g，采用随机数字表法，将其随机分为4组（n=8）：假手术组（S组）、肠缺血再灌注组（I／R组）、血栓烷A2（TXA2）受体拮... 详细信息

目的评价异构前列腺素15-F21-isoprostane在大鼠肠缺血再灌注损伤中的作用。方法健康雄性SD大鼠32只，体重230～255g，采用随机数字表法，将其随机分为4组（n=8）：假手术组（S组）、肠缺血再灌注组（I／R组）、血栓烷A2（TXA2）受体拮抗剂SQ-29548组（SQ组）和二甲基亚砜组（DMSO组）。采用阻断肠系膜上动脉60min，再灌注120min的方法制备肠缺血再灌注损伤模型。SO组及DMSO组分别于夹闭肠系膜上动脉前30in腹部皮下注射SQ-29548或二甲基亚砜2μmol／kg。于再灌注120min时取肠段，观察肠粘膜形态学，并行Chiu评分，取肠粘膜组织，检测髓过氧化物酶（MPO）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）、乳酸（LD）含量；采集动脉血样，检测血清二胺氧化酶（DAO）活性及15-F21-isoprostane、内皮素-1（ET-1）和血栓烷B2（TXB2）浓度。结果与S组比较，其余各组Chiu评分、DAO活性、15-F21-isoprostane及TXB2浓度均升高（P〈0．05），SQ组LD和MDA含量、MPO和SOD活性及ET-1浓度差异无统计学意义（P〉0．05）；与I／R组比较，SO组Chiu评分、LD含量、DAO和MPO活性及ET-1浓度降低，SOD活性升高（P〈0．05）。结论15-F21-isoprostane可通过激活TXA2受体，增加ET-1生成及促进中性粒细胞在肠粘膜聚集参与大鼠肠缺血再灌注损伤过程。

关键词：类地诺前列素再灌注损伤小肠

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Sonic hedgehog促1型糖尿病小鼠的伤口愈合

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国际病理科学与临床杂志 2007年第3期27卷 192-197页

作者：胡太平广东药学院病理生理学教研室广州510006

目的:研究sonic hedgehog(Shh)及其受体Ptc1在糖尿病小鼠伤口愈合中的作用。方法:分别在正常和链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠建立皮肤损伤模型,Western印迹检测Shh和Ptc1的蛋白水平;观察外源性Shh或Ptc1抑制剂cyclopamine对伤口愈合... 详细信息

目的:研究sonic hedgehog(Shh)及其受体Ptc1在糖尿病小鼠伤口愈合中的作用。方法:分别在正常和链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠建立皮肤损伤模型,Western印迹检测Shh和Ptc1的蛋白水平;观察外源性Shh或Ptc1抑制剂cyclopamine对伤口愈合的影响。结果:(1)正常小鼠损伤后皮肤组织中的Shh和Ptcl蛋白质表达明显升高;外源性Shh对伤口愈合无明显促进作用,但cyclopamine可以明显地抑制伤口愈合;(2)STZ诱导的糖尿病小鼠,其皮肤组织中内源性的Shh和Ptcl蛋白水平明显下调;(3)外源性Shh可显著促进糖尿病小鼠伤口的愈合,且呈浓度依赖性;Cyclopamine则明显地抑制糖尿病小鼠的伤口愈合。结论:Shh-Ptc1通路参与了皮肤伤口愈合,糖尿病伤口愈合延迟与Shh-Ptc1表达下调有关。

关键词： Sonic hedgehog 糖尿病伤口愈合

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PKC的活化和Smac释放的改变在四逆汤预处理抑制心肌细胞凋亡中的作用

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中药材 2008年第11期31卷 1675-1678页

作者：刘颖聂咏梅吴伟康广东药学院病理生理学教研室广东广州510006 广州市血液中心广东广州510095 中山大学中西医研究所广东广州510080

目的:观察四逆汤预处理24h后对心肌缺血再灌注(MI/R)后心肌细胞凋亡的影响,并以PKC和Smac为着眼点,探讨其可能的机制。方法:SD大鼠分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组、四逆汤预处理组,缺血再灌注组采用经典大鼠冠脉结扎,缺血1 h,... 详细信息

目的:观察四逆汤预处理24h后对心肌缺血再灌注(MI/R)后心肌细胞凋亡的影响,并以PKC和Smac为着眼点,探讨其可能的机制。方法:SD大鼠分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组、四逆汤预处理组,缺血再灌注组采用经典大鼠冠脉结扎,缺血1 h,再灌1 h;四逆汤预处理组给予四逆汤灌胃(5 g/kg.d)连续3d,末次灌药24h后心肌缺血1h,再灌1h。流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率,免疫组织化学方法检测心肌PKC的表达,进行Smac的Western blotting分析并检测Caspase-3的活性。结果:四逆汤预处理24 h后可以减少MI/R后心肌细胞凋亡率,PKC发生转位且蛋白表达升高,Smac自线粒体的释放减少,Caspase-3的活性下降。结论:四逆汤预处理24 h后可以减少MI/R造成的细胞凋亡,机制可能与其活化PKC,保护线粒体,抑制Smac的释放,阻碍细胞凋亡的信号转导有关。

关键词：四逆汤细胞凋亡 PKC Smac Caspase-3

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胞内cAMP浓度的增加可诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞

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中国病理生理杂志 2002年第11期18卷 1324-1327,I001页

作者：项鹏夏文杰张丽蓉陈振光张秀明李艳李树浓中山医科大学病理生理学教研室广东广州510080 广东药学院病理生理学教研室广东广州510224 中山医科大学附属第一医院心胸外科广东广州510089

目的 :探讨胞内cAMP浓度的增加与骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞的关系。方法 :采用Ficoll-Paque液 (1 0 77g/L)离心分离成人MSC ,体外扩增 ,采用含腺苷酸环化酶激动剂Forskolin及磷脂酶抑制剂 3-异丁基 - 1 -甲基黄嘌呤 (IBMX... 详细信息

目的 :探讨胞内cAMP浓度的增加与骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经元样细胞的关系。方法 :采用Ficoll-Paque液 (1 0 77g/L)离心分离成人MSC ,体外扩增 ,采用含腺苷酸环化酶激动剂Forskolin及磷脂酶抑制剂 3-异丁基 - 1 -甲基黄嘌呤 (IBMX)的无血清DMEM诱导MSC分化为神经元。免疫组化鉴定神经元烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果 :成人骨髓间质干细胞在体外扩增原代可获得 5× 1 0 5,1 0代可获得 2× 1 0 1 0 个细胞。加入Forskolin、IBMX以及两者联用诱导后 ,MSC胞体收缩 ,突起伸出 ,呈典型神经元样形态 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF -M表达阳性 ,GFAP阴性。结论

关键词：胞内cAMP浓度骨髓间质干细胞神经元样细胞腺苷环-磷酸福司柯林诱导分化

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