目的基于HPLC特征图谱,建立同时测定桑黄中原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、紫萁酮和牛奶树碱5种成分含量的一测多评方法(quantitative analysis of multi-components with a single-marker,QAMS),对不同来源的桑黄药材进行品质评价研究。...
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目的基于HPLC特征图谱,建立同时测定桑黄中原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、紫萁酮和牛奶树碱5种成分含量的一测多评方法(quantitative analysis of multi-components with a single-marker,QAMS),对不同来源的桑黄药材进行品质评价研究。方法收集了3个种源地共10个批次的桑黄药材样品,采用Wondasil C_(18)Superb色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^(-1),柱温25℃,进样量20μL,采用变波长程序,建立内参物原儿茶醛与原儿茶酸、咖啡酸、紫萁酮、牛奶树碱的相对校正因子并进行了相对校正因子的耐用性考察。采用外标法(external standard method,ESM)和QAMS法分别测定不同来源共10批桑黄药材中该5种成分的含量以验证QAMS法的准确性。结果采用SPSS与Origin Pro进行主成分分析、相似度分析和聚类分析。结果显示,5种成分专属性、精密度、重复性、稳定性、线性范围(r2>0.9990)均良好、平均加样回收率99.74%~102.78%,RSD 1.34%~2.92%。以原儿茶醛为内参物,原儿茶酸、咖啡酸、紫萁酮、牛奶树碱的平均相对校正因子分别为0.8519、1.4469、1.6157、0.7747;t检验结果表明,ESM法与QAMS法测定结果差异不显著。通过统计学分析实现了数据集的可视化,聚类分析发现西藏和广东产地的桑黄样品呈现一定的地域差异,但也发现了源于广东和长白山的个别桑黄样品与源于西藏的桑黄样品聚为一类的现象,意味着不能仅仅依据产地评价桑黄品质优劣,因为可能存在基源不清或品种混淆的状况。不同桑黄样品中牛奶树碱、原儿茶醛、紫萁酮的含量差异较大,且此3类成分对主成分的贡献较多,可能为桑黄的主要质量标志物。结论该研究基于HPLC指纹图谱建立的QAMS法简单、经济、实用,可以实现对桑黄中主要成分的快速、科学分析,也为其种质资源的品质评价提供了一定的科学依据。
目的基于大承气汤治疗大肠癌的药效,探究大承气汤干预大肠癌的代谢物靶点,明确大承气汤干预大肠癌的体内药效物质基础并揭示其作用机制。方法以APCMin/+转基因小鼠构建大肠癌模型,通过一般体征指标、生理生化指标及组织病理学评价动物模型及大承气汤的干预作用;利用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(ultra-performance liquid chromatography-quadrupole-time of flight-tandem mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术,表征大肠癌的代谢轮廓及生物标记物,并以此揭示大承气汤在代谢层面上干预大肠癌的作用机制;借助UPLC-Q-TOF-MSE技术结合多种数据库表征大肠癌小鼠经大承气汤有效干预后的体内直接作用物质,通过相关性分析,挖掘与药效生物标记物高度关联的入血成分作为大承气汤干预大肠癌的药效物质基础。结果大承气汤显著抑制了模型小鼠的肠道腺瘤数量和体积(P<0.01),显著回调血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平(P<0.05、0.01),对血清中γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)水平具有回调趋势,能够有效干预模型小鼠的组织病变。表征了47个有效状态下的体内直接作用物质,其中厚朴木脂素C、没食子酸、芦荟大黄素、芹菜素、木犀草素、橙皮素、川陈皮素等14个成分是大承气汤干预大肠癌的潜在药效物质基础。大承气汤通过改善花生四烯酸、吲哚衍生物及多种磷脂类内源性代谢物调节模型小鼠的色氨酸代谢、亚油酸代谢、花生四烯酸代谢、甘油磷脂代谢等代谢途径,从而干预大肠癌的发生发展。结论利用方证代谢组学的理论和方法,确定了大承气汤干预大肠癌的药效物质基础,揭示了大承气汤干预大肠癌的作用机制,为大承气汤的临床精准用药及新药创制提供科学依据。
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