检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2021年第20期46卷 5247-5252页

作者：刘长征姜晓琳蔡启忠周良云杨全广东药科大学中药学院国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室国家中药材产业技术体系广州综合试验站广东省南药规范化种植与综合开发工程技术研究中心广东广州510006

该研究以何首乌根际细菌和放线菌为实验对象,采用Salkowski法筛选具有产吲哚乙酸(IAA)能力的菌株,铬天青S(CAS)平板法筛选具有产铁载体能力的菌株,PKO无机磷培养基筛选具有溶解无机磷能力的菌株,从形态学、生理生化以及16S rDNA序列分... 详细信息

该研究以何首乌根际细菌和放线菌为实验对象,采用Salkowski法筛选具有产吲哚乙酸(IAA)能力的菌株,铬天青S(CAS)平板法筛选具有产铁载体能力的菌株,PKO无机磷培养基筛选具有溶解无机磷能力的菌株,从形态学、生理生化以及16S rDNA序列分析等方法来确定菌株的分类学地位,并研究促生菌株对何首乌种子发芽和生长的影响。结果从196株菌株中得到2株同时具有产IAA、产铁载体和溶解无机磷的菌株F17、F42。菌株F17、F42产IAA的能力分别为38.65、33.64 mg·L-1;产铁载体的能力(As/Ar)分别为0.85、0.49;溶解无机磷的能力(D/d)分别为1.35、1.70。综合分析结果显示,菌株F17、F42分别鉴定为不解糖假苍白杆菌Pseudochrobactrum asaccharolyticum和阿氏芽孢杆菌Bacillus aryabhattai,并且发现2种菌株均对何首乌种子的萌发具有显著的促进作用。

关键词：根际促生菌促生特性菌株鉴定何首乌

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何首乌实时荧光定量PCR内参基因筛选

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中国中药杂志 2021年第1期46卷 80-85页

作者：王浩蔡启忠刘露杨全周良云广东药科大学中药学院国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室国家中药材产业技术体系广州综合试验站广东省南药规范化种植与综合开发工程技术研究中心广东广州510006

为筛选适宜何首乌Polygonum multiflorum不同组织基因表达分析的内参基因,从何首乌转录组数据中选取Actin,GAPDH,SAND,PP2A,TIP41常用的5个候选内参基因,设计特异性引物。通过实时荧光定量PCR,利用geNorm,NormFinder,Best-Keeper,Delta CT以及RefFinder等方法对5个候选内参基因在何首乌不同组织中的表达稳定性进行分析,为何首乌基因差异表达研究提供可靠的内参基因,以确保分析结果的可靠性。结果表明,各候选内参基因在何首乌不同组织中表达水平和稳定性有较大差异,其中对各候选内参基因的表达水平(Ct)的分布分析显示,以Actin和GAPDH基因在各组织中表达水平相对较高,而SAND,PP2A,TIP41表达水平较低;通过不同方法对各候选内参基因稳定性进行分析,geNorm分析结果以PP2A,GAPDH表达最为稳定,SAND表达稳定性最差,NormFinder和Delta CT法均以PP2A稳定性最高,SAND稳定性最低,而BestKeeper分析以Actin最稳定。通过RefFinder对候选基因稳定性进行综合评价分析得出以PP2A基因稳定性最高,其后依次为GAPDH,Actin,TIP41,SAND,以SAND基因稳定性最差。因此,PP2A基因为何首乌不同组织基因表达分析比较理想的内参基因。

关键词：何首乌内参基因实时荧光定量PCR

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何首乌糖基转移酶基因的克隆、生物信息学及表达分析

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中草药 2021年第19期52卷 6013-6022页

作者：蔡启忠周良云刘露刘长征王浩钟磊杨全广东药科大学中药学院国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室国家中药材产业技术体系广州综合试验站广东省南药规范化种植与综合开发工程技术研究中心广东广州510006

目的克隆何首乌Polygonummultiflorum糖基转移酶基因PmUGTs,并对其进行生物信息学以及差异表达分析。方法基于何首乌转录组数据,利用PCR扩增Pm UGTs全长cDNA并进行生物信息学分析;使用autodock4软件进行分子模拟对接;运用q RT-PCR检测... 详细信息

目的克隆何首乌Polygonummultiflorum糖基转移酶基因PmUGTs,并对其进行生物信息学以及差异表达分析。方法基于何首乌转录组数据,利用PCR扩增Pm UGTs全长cDNA并进行生物信息学分析;使用autodock4软件进行分子模拟对接;运用q RT-PCR检测基因在不同器官中的表达差异。结果克隆得到4条Pm UGTs,分别命名为Pm UGT1、Pm UGT2、PmUGT3、PmUGT4基因,开放阅读框(ORF)长度分别为1509、1506、1464和1476 bp;编码503、502、488与492个氨基酸;蛋白相对分子质量分别为56 940、54 780、54 350和54 620。Pm UGTs氨基酸序列中含有UGT高度保守的PSPG盒结构域,其二级结构主要由无规则卷曲与α-螺旋组成。进化树分析表明,Pm UGT1、PmUGT2、PmUGT3与拟南芥的UGT蛋白距离较近,Pm UGT4则与蒺藜苜蓿UGT亲缘关系最近。根据autodock4结果可知Pm UGT1、Pm UGT3、Pm UGT2与Pm UGT4蛋白上的残基分别可以与鹰嘴豆芽素A、罗汉果醇、白藜芦醇通过氢键连接。q RT-PCR结果表明,Pm UGTs表达量均在叶中最高。结论为进一步研究何首乌糖基转移酶基因的功能及何首乌中糖苷类化合物的生物合成途径奠定基础。

关键词：何首乌糖基转移酶基因克隆原核表达 qRT-PCR

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何首乌-穿心莲间作对何首乌根际土壤放线菌群落结构和多样性的影响

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中国中药杂志 2020年第22期45卷 5452-5458页

作者：刘长征周良云廖沛然钟磊蔡启忠姜晓琳杨全广东药科大学中药学院国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室国家中药材产业技术体系广州综合试验站广东省南药规范化种植与综合开发工程技术研究中心广东广州510006

为探索何首乌-穿心莲间作对何首乌根际土壤放线菌的影响,该研究以原始土壤为对照,何首乌在单作和间作2种种植模式下根际土壤为处理,采用高通量测序技术研究土壤放线菌的群落结构和多样性。测序结果获得了655 221条有效序列,平均长度为40... 详细信息

为探索何首乌-穿心莲间作对何首乌根际土壤放线菌的影响,该研究以原始土壤为对照,何首乌在单作和间作2种种植模式下根际土壤为处理,采用高通量测序技术研究土壤放线菌的群落结构和多样性。测序结果获得了655 221条有效序列,平均长度为408 bp,OTU覆盖率和稀释性曲线表明该测序可以代表土壤放线菌的真实情况;由Alpha多样性分析结果可知土壤放线菌多样性的大小顺序为"原始土壤>间作土壤>单作土壤";单作和间作均显著改变了放线菌的群落结构,使优势属的相对丰度发生显著变化,其中单作改变最大;OTU主成分分析和聚类分析显示,所有土壤样本被分为具有明显区别的3组,并且原始土壤与间作土壤的相似性更高;间作还增加了北里孢菌属和分枝杆菌属等有益土壤放线菌属的相对丰度,有利于保持土壤健康,减少土传病害的发生。结果表明,何首乌-穿心莲间作可以减少何首乌单作所造成的土壤放线菌群落结构改变和多样性减小的现象,使何首乌根际土壤的放线菌群落更加接近原始土壤。

关键词：间作放线菌何首乌穿心莲群落结构多样性

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广佛手黄龙病的鉴定

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中国实验方剂学杂志 2020年第5期26卷 117-122页

作者：袁蒙潘利明周良云罗碧王浩杨全广东药科大学中药学院国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室国家中药材产业技术体系广州综合试验站广东省南药规范化种植与综合开发工程技术研究中心广州510006

目的:该文从多方面进行分析、比较,及时、准确地鉴别广佛手黄龙病,以便于及时确定病害、防控病情。方法:通过性状分析,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),酶切反应及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测多种手段相结合,对广佛手黄龙病进行... 详细信息

目的:该文从多方面进行分析、比较,及时、准确地鉴别广佛手黄龙病,以便于及时确定病害、防控病情。方法:通过性状分析,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),酶切反应及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测多种手段相结合,对广佛手黄龙病进行鉴定。结果:从性状上来看,感病广佛手有典型的叶片斑驳型黄化、果相对较小,甚至畸形的特征,但并没有发现"红鼻子果"现象,这些均可以作为田间初步判别广佛手黄龙病的依据;RT-PCR检测及酶切反应结果表明,引物为OI1/OI2c时,广佛手病株有特异性条带1160 bp,且能被Xba I酶切成520 bp和640 bp,这与其他被黄龙病侵染的柑橘属植物的检测结果一致;Real-time PCR检测结果显示,被黄龙病侵染的广佛手叶片有扩增曲线和熔解曲线,熔链温度为82℃,且Ct值在24.6~28.2,而广佛手正常株没有扩增现象出现。结论:性状分析可以在田间初步判别黄龙病,但是具有一定的主观性,RTPCR及Real-time PCR检测能进一步确定广佛手黄龙病,且q PCR检测更加灵敏,还可以定量。通过性状分析以及分子鉴定的结合,能够更加及时、准确地确定广佛手黄龙病。

关键词：广佛手黄龙病叶片性状分析田间判别

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佛手的传统应用

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中国实验方剂学杂志 2019年第4期25卷 206-211页

作者：岳玲程轩轩唐晓敏杨全广东药科大学中药学院国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室国家中药材产业技术体系广州综合试验站广东省南药规范化种植与综合开发工程技术研究中心广州510006

佛手作为传统的药食两用的中药,在我国栽培和应用历史悠久,不仅具有较高的药用、食疗价值,同时具有一定的观赏价值和经济价值。有关佛手的提取工艺、化学成分、质量标准、生物活性等现代研究报道较多,但对其本草考证的叙述较少,且古代... 详细信息

佛手作为传统的药食两用的中药,在我国栽培和应用历史悠久,不仅具有较高的药用、食疗价值,同时具有一定的观赏价值和经济价值。有关佛手的提取工艺、化学成分、质量标准、生物活性等现代研究报道较多,但对其本草考证的叙述较少,且古代本草著作中对佛手的相关记载模糊、品种来源混淆,曾出现药材混用现象。该文通过系统查阅中国古代本草、医药典籍和现代著作,对佛手的名称、原植物形态、产地、性味归经、功效及用法进行本草考证,以期正本清源。研究发现佛手在历代本草著作中常以"香橼""枸橼""柑橼""香圆"和"佛手柑"等名称出现,明清之后逐渐明确"香橼"即"枸橼",与"佛手(柑)"为不同品种,故将二者分列陈述。从古至今佛手的产地相对稳定,主产于闽、广、赣等长江以南地区。古今对于佛手性味归经和功能主治的认识基本相同,认为本品性温无毒,具有疏肝理气、和胃止痛、燥湿化痰等功效。关于佛手的炮制方法仅见"新瓦焙为末"和"蒸露",同时偶见"入药以陈久者良"的记载。该文为中药佛手的深入研究、资源开发及综合应用提供了理论依据。

关键词：佛手香橼名称原植物功效本草考证

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广东肉桂内生真菌多样性及其抗肉桂枝枯病菌初步研究

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菌物学报 2022年第3期41卷 435-449页

作者：吕佳罗碧钱家萍张嘉雯高育婷杨全广东药科大学中药学院广东广州510006 国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室国家中药材产业技术体系广州综合试验站广东省南药规范化种植与综合开发工程技术研究中心广东广州510006

本研究从广东省罗定市20年生和1年生肉桂的叶、枝、根和皮等不同器官共分离得到90株内生真菌,通过菌落特征、显微观察和ITS序列分析鉴定为2门3纲10目14科22属,其中拟盘多毛孢属Pestalotiopsis、黑孢霉属Nigrospora和间座壳属Diaporthe... 详细信息

本研究从广东省罗定市20年生和1年生肉桂的叶、枝、根和皮等不同器官共分离得到90株内生真菌,通过菌落特征、显微观察和ITS序列分析鉴定为2门3纲10目14科22属,其中拟盘多毛孢属Pestalotiopsis、黑孢霉属Nigrospora和间座壳属Diaporthe为优势属;肉桂内生真菌的分布存在明显的组织特异性和偏好性,叶中内生真菌的分布最多,有49株,分属于19个属,占分离菌株总数的54.44%。叶、枝、根和皮部内生真菌多样性指数分别为2.63、1.86、1.30和1.07,叶部多样性最高。20年生肉桂内生真菌较为丰富(H'=2.39),1年生次之(H'=2.00)。基于罗定市肉桂枝枯病害的病样,采用组织分离法得到疑似病原菌,通过形态学观察,柯赫氏法则验证及ITS、TEF和TUB序列分析,确定该病原菌为假可可毛色二胞菌Lasiodiplodia pseudotheobromae。这是***所致肉桂枝枯病的首次发现。平板对峙法对***的拮抗结果显示,共有9株内生真菌有显著抑菌效果,抑菌率均高于52%,其中Trichoderma ***-1-2抑菌率最高为68.80%,Hypoxylonvinosopulvinatum DYR-1-7抑菌带距离最大为2.5 mm,为肉桂枝枯病生物防治提供菌种资源。结果表明肉桂内生真菌多样性丰富,部分内生真菌菌株具有较强的抑菌活性,值得进一步深入研究。

关键词：肉桂内生真菌枝枯病假可可毛色二孢菌拮抗菌株

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广金钱草多糖指纹图谱的建立、含量测定及其对α-葡萄糖苷酶的抑制活性研究

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中国药房 2020年第2期31卷 183-189页

作者：程轩轩陈亮元郑诗嘉唐晓敏杨全广东药科大学中药学院/国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室/国家中药材产业技术体系广州综合试验站/广东省南药规范化种植与综合开发工程技术研究中心

目的:建立广金钱草多糖的指纹图谱,分析其单糖组成及含量,并考察广金钱草多糖对α-葡萄糖苷酶的体外抑制作用。方法:采用水提醇沉法提取广金钱草多糖,经三氟乙酸水解、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化后,采用高效液相色谱法(HPLC)建立... 详细信息

目的:建立广金钱草多糖的指纹图谱,分析其单糖组成及含量,并考察广金钱草多糖对α-葡萄糖苷酶的体外抑制作用。方法:采用水提醇沉法提取广金钱草多糖,经三氟乙酸水解、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化后,采用高效液相色谱法(HPLC)建立指纹图谱(以葡萄糖峰为参照),并进行单糖组成及含量分析。含量测定色谱柱为Phenomenex Luna C18,流动相为乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用氢氧化钠调节pH至6.8),梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,检测波长为250 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。以阿卡波糖为对照,采用对硝基苯-α-D-葡萄糖吡喃苷法考察广金钱草多糖对α-葡萄糖苷酶的体外抑制活性。结果:18批药材样品的HPLC指纹图谱有9个共有峰,其中15批药材样品的相似度大于0.90;共指认甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等7个共有峰。其中,鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖的含量分别为0.471~2.092、1.379~8.919、2.560~35.679、1.194~6.905、0.566~4.158 mg/g;以鼠李糖为基准,其余4种单糖的摩尔比分别为1.58~4.07、2.26~19.95、2.20~4.21、1.31~2.86。广金钱草多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性呈现随剂量升高而增强的趋势,其半数抑制浓度为0.70 mg/mL,低于阳性对照阿卡波糖(7.76 mg/mL)。结论:不同批次广金钱草的多糖组成均以葡萄糖为主,各单糖含量有所差异。广金钱草多糖对α-葡萄糖苷酶具有明显的体外抑制作用,且活性强于阿卡波糖。

关键词：广金钱草多糖单糖含量指纹图谱高效液相色谱法 α-葡萄糖苷酶抑制活性

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辣蓼中性多糖单糖组成分析、抗小鼠大肠杆菌性腹泻作用及其分子机制

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中国药理学与毒理学杂志 2023年第6期37卷 435-445页

作者：黎雨菲罗露香姜晓琳黄嘉欢张铭儒杨全程轩轩广东药科大学中药学院国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室国家中药材产业技术体系广州综合试验站广东省南药规范化种植与综合开发工程技术研究中心广东广州510006

目的分析辣蓼中性多糖(NPP)的单糖组成,评价其抗大肠杆菌性腹泻作用,并基于高通量转录组测序技术探讨其作用机制。方法水提醇沉法制备辣蓼粗多糖,通过反复柱色谱分离纯化得到中性多糖组分NPP,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生... 详细信息

目的分析辣蓼中性多糖(NPP)的单糖组成,评价其抗大肠杆菌性腹泻作用,并基于高通量转录组测序技术探讨其作用机制。方法水提醇沉法制备辣蓼粗多糖,通过反复柱色谱分离纯化得到中性多糖组分NPP,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化-高效液相色谱(HPLC)法分析NPP单糖组成。雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组、模型+恩氟沙星5 mg·kg^(-1)组、模型+NPP 40和80 mg·kg^(-1)组。除正常对照组外,其余各组小鼠ip给予大肠杆菌菌液(1.0×10^(12)CFU·L^(-1),10 mL·kg^(-1)),每日1次,连续8 d造摸;正常对照组小鼠注射同体积生理盐水。给药组于造模前2 d ig给药,每日2次,连续给药10 d;正常对照组和模型组小鼠ig给予等量生理盐水。HE染色观察小鼠十二指肠组织病理变化;高通量转录组测序技术分析正常对照组、模型组和模型+NPP组小鼠肠组织的差异表达基因(DEG),并对DEG进行GO功能富集和KEGG信号通路富集分析;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测DEG mRNA表达量。结果NPP主要由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖及半乳糖醛酸组成,单糖在各自浓度范围内线性关系良好(R^(2)≥0.9995),平均加样回收率为99.03%~102.41%,各单糖摩尔比为13.66∶10.33∶2.34∶1.00。HE染色结果表明,模型组小鼠十二指肠细胞水肿变性,少量细胞坏死或凋亡;模型+NPP组十二指肠组织结构清晰,仅见少量炎症细胞浸润。转录组测序结果显示,与正常对照组相比,模型组共筛选出1020个DEG;与模型组相比,模型+NPP组共筛选出960个DEG。GO功能分析显示,DEG主要富集于细胞过程、单有机体过程、代谢过程、细胞等生物学过程;KEGG通路分析显示,DEG主要富集于细胞因子-细胞因子受体相互作用通路、Toll样受体信号通路和趋化因子信号通路等炎症相关信号通路。RT-qPCR验证结果表明,选取的8个DEG的差异表达倍数趋势与转录组测序结果基本一致。结论建立的PMP-HPLC方法简单可行、重复性好,可用于NPP的分析检测及质量控制。NPP对大肠杆菌性腹泻小鼠的受损十二指肠具有明显的修复作用,其作用机制可能与调控机体的趋化因子信号通路,Toll样受体信号通路等有关。

关键词：辣蓼中性多糖单糖组成高效液相色谱大肠杆菌性腹泻转录组学

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肉桂多糖的单糖组成分析及其降血糖作用研究

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中国医院药学杂志 2022年第15期42卷 1533-1538,1582页

作者：张铭儒黄嘉欢黎雨菲杨全程轩轩广东药科大学中药学院国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室国家中药材产业技术体系广州综合试验站广东省南药规范化种植与综合开发工程技术研究中心广东广州510006

目的:分析肉桂多糖的单糖组成,并探讨其对糖尿病小鼠糖脂代谢的影响。方法:采用PMP-HPLC法分析肉桂多糖的单糖组成。采用腹腔注射链脲佐菌素的方法建立糖尿病小鼠模型,将成模小鼠随机分成5组:模型组,二甲双胍组,肉桂多糖低、中、高剂量... 详细信息

目的:分析肉桂多糖的单糖组成,并探讨其对糖尿病小鼠糖脂代谢的影响。方法:采用PMP-HPLC法分析肉桂多糖的单糖组成。采用腹腔注射链脲佐菌素的方法建立糖尿病小鼠模型,将成模小鼠随机分成5组:模型组,二甲双胍组,肉桂多糖低、中、高剂量组。给药4周后检测各组小鼠的空腹血糖值(FBG)、血清生化指标、血清胰岛素(INS)、肝糖原和肌糖原含量;HE染色法观察胰腺病理学特征;qRT-PCR法检测GLUT2、PEPCK、GCK mRNA表达量;Western blot检测PEPCK、GCK蛋白表达量。结果:肉桂多糖主要由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,各单糖摩尔比依次为1.00∶2.79∶24.30∶2.12∶2.19。与模型组相比,各给药组的FBG和LDL-C水平显著下降,肝糖原和肌糖原水平显著上升;肉桂多糖高剂量组的TC、TG和LDL-C水平显著下降,HDL-C和INS水平显著上升。高剂量肉桂多糖可显著上调糖尿病小鼠肝脏中GCK、GLUT2的表达量,显著下调PEPCK表达量。结论:建立的PMP-HPLC分析方法操作简单可行,准确性、重复性良好。肉桂多糖对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠具有降血糖作用,其降糖机制可能与调节糖脂代谢有关。

关键词：肉桂多糖单糖组成糖尿病降血糖糖脂代谢

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