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分子植物育种 2024年

作者：赵景岳黄秋怡詹若挺马新业广州中医药大学中药学院岭南中药资源教育部重点实验室国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心

利用新一代高通量测序技术获得野菊花蕾、初花、盛花三个时期的高质量转录组数据，通过比较样品间转录组差异，探讨野菊花传统采摘最适期的基因表达内涵。联合趋势分析显示KEGG显著富集结果中通路ko00061 (脂肪酸的生物合成)、ko01040 ... 详细信息

利用新一代高通量测序技术获得野菊花蕾、初花、盛花三个时期的高质量转录组数据，通过比较样品间转录组差异，探讨野菊花传统采摘最适期的基因表达内涵。联合趋势分析显示KEGG显著富集结果中通路ko00061 (脂肪酸的生物合成)、ko01040 (不饱和脂肪酸的生物合成)、ko00940 (苯丙素的生物合成)、ko00941 (黄酮类化合物的生物合成)、ko00909 (倍半萜和三萜生物合成)、ko00900 (萜类骨架生物合成)相关基因在花蕾时期高表达，发育过程中整体表达下降；通路ko01100 (代谢途径)、ko01200 (碳代谢)、ko00190 (氧化性磷酸化)、ko00040 (戊糖和葡萄糖醛酸的相互转化)、ko00592 (α-亚麻酸代谢)等相关基因则在花蕾时期低表达，发育过程中整体表达增加。野菊花中黄酮类、脂肪酸类、萜类成分和绿原酸合成相关基因在花蕾时期高表达，在发育进程中表达整体下降；而在发育进程中与能量代谢相关的基因表达整体增加，趋势与次生代谢活动相反。关键次生代谢和能量代谢基因的表达模式表明传统野菊花最佳采摘时期经验有其遗传学依据。

关键词：野菊花花期转录组趋势分析差异表达基因

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阳春砂单萜合酶基因AvTPS1载体构建和原核表达

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时珍国医国药 2017年第10期28卷 2524-2527页

作者：王腾王虹蒋研风羊周梅玲吴旻歆马东明杨锦芬广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室(广州中医药大学)国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室广东广州510006 广州中医药大学中药学院广东广州510006

目的构建AvTPS1的原核表达载体并进行蛋白表达,为该基因在原核表达系统中的功能鉴定奠定基础。方法用In-Fusion方法构建AvTPS1截掉转运肽的表达载体;用Gateway方法构建AvTPS1包含完整阅读框的表达载体;两种表达载体分别转化至大肠杆菌BL... 详细信息

目的构建AvTPS1的原核表达载体并进行蛋白表达,为该基因在原核表达系统中的功能鉴定奠定基础。方法用In-Fusion方法构建AvTPS1截掉转运肽的表达载体;用Gateway方法构建AvTPS1包含完整阅读框的表达载体;两种表达载体分别转化至大肠杆菌BL21(DE3)和BL21DE3plys中进行诱导表达,用变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)以及Western杂交检测蛋白的表达情况。结果构建了原核表达载体pET-32a(+)-(-tp)AvTPS1和pDEST17-AvTPS1;这两个表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)和BL21DE3plys中均没有表达出明显的相应蛋白,但是这两个载体在大肠杆菌BL21(DE3)中大量表达后,用Western杂交检测有蛋白存在。结论成功构建了阳春砂单萜合酶基因AvTPS1的表达载体和工程菌。

关键词：阳春砂单萜合酶载体构建原核表达

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顶空-气质联用法比较不同品种橘红胎挥发性成分差异

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中药新药与临床药理 2023年第2期34卷 241-248页

作者：莫穗芬方媛杨惠琳倪晨詹若挺严萍广州中医药大学中药学院广东广州510006 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心、岭南中药资源教育部重点实验室(广州中医药大学) 国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室广东广州510006 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东茂名525099

目的建立快速分析橘红胎中挥发性成分的方法,比较不同品种橘红胎挥发性成分的差异。方法采用静态顶空-气质联用(HS-GC-MS)技术分析橘红胎样品。采用质谱标准库(NIST17、WILEY275)检索,确定不同品种橘红胎中挥发性成分并比较差异,通过... 详细信息

目的建立快速分析橘红胎中挥发性成分的方法,比较不同品种橘红胎挥发性成分的差异。方法采用静态顶空-气质联用(HS-GC-MS)技术分析橘红胎样品。采用质谱标准库(NIST17、WILEY275)检索,确定不同品种橘红胎中挥发性成分并比较差异,通过主成分分析、聚类分析对不同品种橘红胎进行归类。结果共鉴定出橘红胎中49个挥发性成分,包括有烯类、醛类、醇类等,其中以烯类成分含量最高,超过总挥发性成分50%。副毛橘红胎中含有较高的乙酸龙脑酯,此成分在以柚类作为砧木的密叶红肉正毛、密叶黄龙正毛橘红胎中亦有检出,但含量较低。主成分分析和聚类分析均可将橘红胎按品种区分,两者的结果相一致。结论不同品种的橘红胎挥发性成分有较大差异。所建立的HS-GC-MS分析方法稳定可靠,可用于橘红胎中挥发性成分的测定。

关键词：橘红胎挥发性成分顶空-气相色谱-质谱联用主成分分析聚类分析品种差异

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橘红胎商品规格等级评价

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中成药 2023年第1期45卷 148-154页

作者：方媛杨惠琳莫穗芬袁丽娴严萍詹若挺广州中医药大学中药学院广东广州510006 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室(广州中医药大学)国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室广东广州510006 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东茂名525099

目的对橘红胎的性状特征及黄酮类成分进行测定,为制定橘红胎商品规格等级划分提供参考。方法收集54批样品,观察其果实形状特征,测定总黄酮、柚皮苷、野漆树苷、柚皮素含量。通过相关性分析、主成分分析、聚类分析探究橘红胎状特征与其... 详细信息

目的对橘红胎的性状特征及黄酮类成分进行测定,为制定橘红胎商品规格等级划分提供参考。方法收集54批样品,观察其果实形状特征,测定总黄酮、柚皮苷、野漆树苷、柚皮素含量。通过相关性分析、主成分分析、聚类分析探究橘红胎状特征与其黄酮类成分的相关性。结果K-均值聚类分析可将橘红胎分为一等、二等、三等,其中一等品果实直径<20.00 mm,质量<5.00 g,总黄酮、柚皮苷、柚皮素、野漆树苷含量分别大于38.00%、35.00%、1.12%、0.09%;二等品果实直径20.00~50.00 mm,质量5~25 g,4种成分含量分别为38.00%~30.00%、35.00%~25.00%、1.12%~0.99%、0.09%~0.08%;三等品果实直径>50.00 mm,果实质量>25.00 g,4种成分含量分别为30.00%~10.00%、25.00%~7.49%、0.99%~0.47%、0.08%~0.04%。结论本实验将橘红胎形状特征与黄酮类成分含量相结合,可为该药材商品等级评价提供参考。

关键词：橘红胎商品规格等级形状特征黄酮

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4种溪黄草药材基原植物种子状果实形态特征的比较

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分子植物育种 2021年第4期19卷 1337-1344页

作者：刘洋孟爽爽叶姿王德勤刘军民詹若挺广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室广州510006 广州中医药大学中药学院广州510006 广州白云山和记黄埔中药有限公司广州510515

本研究采用体视镜和扫描电镜相结合的方法,对4种溪黄草药材基原植物种子状果实的形态特征进行观察比较。线纹香茶菜、纤花香茶菜及长叶香茶菜种子状果实的形状特征相似,呈卵型,大小为0.88~1.17 mm×0.54~0.77 mm,大小顺序依次为线... 详细信息

本研究采用体视镜和扫描电镜相结合的方法,对4种溪黄草药材基原植物种子状果实的形态特征进行观察比较。线纹香茶菜、纤花香茶菜及长叶香茶菜种子状果实的形状特征相似,呈卵型,大小为0.88~1.17 mm×0.54~0.77 mm,大小顺序依次为线纹香茶菜>纤花香茶菜>长叶香茶菜;表面具有网状纹饰,但网壁隆起高度不同,高度依次为线纹香茶菜>纤花香茶菜>长叶香茶菜;遇水后出现粘液质,其中线纹香茶菜与纤花香茶菜的果实均具有较多粘液质,长叶香茶菜只有少数果实具有粘液质,且量多少不一。溪黄草种子状果实形态特征与上述3种植物明显不同,呈阔卵圆型,大小为1.24~1.60 mm×0.89~1.33 mm;种子状果实表面的网状纹饰粗糙且多皱缩,具有散在的腺点和白色非腺毛,多分布于顶端,由1~3个细胞组成;遇水后无粘液质出现。结果表明,上述4种植物种子状果实在形状、大小、表面纹理及粘液质有无等方面存在较为明显的差异。种子状果实形态特征的差异可为4种植物提供一定的分类依据。

关键词：溪黄草药材种子状果实体视镜扫描电镜

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具胁迫“记忆”特征的白木香离体根的转录组分析

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分子植物育种 2023年

作者：刘雪洁秦雪莲李文月詹若挺马新业广州中医药大学中药学院中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室(广州中医药大学)国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心

为探究白木香离体根在连续三代盐胁迫下的胁迫响应机制，本研究以白木香离体根为材料，对一代、二代、三代盐胁迫下处理组和对照组的离体根进行脯氨酸含量测定和转录组测序。结果表明，离体根中脯氨酸的含量在连续三代盐胁迫下持续上升... 详细信息

为探究白木香离体根在连续三代盐胁迫下的胁迫响应机制，本研究以白木香离体根为材料，对一代、二代、三代盐胁迫下处理组和对照组的离体根进行脯氨酸含量测定和转录组测序。结果表明，离体根中脯氨酸的含量在连续三代盐胁迫下持续上升，尤其是在第三代具有极显著的上升趋势，说明白木香离体根在连续三代盐胁迫下具有胁迫“记忆”。转录组分析表明，白木香离体根在一代、二代、三代盐胁迫处理下分别获得11 422、10 815、11 799个差异表达基因。GO富集分析表明，差异基因显著富集在细胞壁、细胞外围、胞外区域和氧化还原酶活性等GO条目。KEGG富集分析表明，白木香离体根通过激素信号转导网络、谷胱甘肽代谢和脯氨酸代谢途径来响应连续三代的盐胁迫，其中脯氨酸的积累通过脯氨酸合成相关酶基因的上调和脯氨酸羟基酶基因的下调实现。本研究探讨了具胁迫“记忆”特征的白木香离体根在连续三代盐胁迫下的分子响应机制，为明确白木香的胁迫防御机制奠定基础。

关键词：白木香脯氨酸胁迫记忆转录组差异表达基因

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基于植物代谢组学和网络药理学分析预测鸡骨草药材的质量标志物

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世界科学技术-中医药现代化 2023年第6期25卷 1972-1986页

作者：徐月阳史军杰彭丽华方碧烟陈炜璇成金乐广州中医药大学中药学院广州510006 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心/岭南中药资源教育部重点实验室广州510006 国家中成药工程技术研究中心、南药研发实验室广州510006 中山市中智药业集团有限公司中山528437

目的基于植物代谢组学分析鸡骨草药材的次生代谢产物,并结合多元统计学和网络药理学预测分析鸡骨草药材的质量标志物(Q-Marker)。方法建立UPLC-Q-TOF-MS分析方法,分析11批次鸡骨草药材的化学成分,确定其共有成分。通过聚类分析(HCA)、... 详细信息

目的基于植物代谢组学分析鸡骨草药材的次生代谢产物,并结合多元统计学和网络药理学预测分析鸡骨草药材的质量标志物(Q-Marker)。方法建立UPLC-Q-TOF-MS分析方法,分析11批次鸡骨草药材的化学成分,确定其共有成分。通过聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)确认造成11批次鸡骨草药材分类的主要差异成分,再运用网络药理学构建“核心成分-核心靶点-核心通路”网络,筛选预测鸡骨草药材的潜在Q-Marker,并进行分子对接验证其活性。结果11批次鸡骨草药材中含有39个共有成分,主要为三萜皂苷类、黄酮类、生物碱类等。经聚类分析和主成分分析显示11批次鸡骨草药材分为4类,后经偏最小二乘判别分析发现其中9个化学成分在分类中起重要作用。网络药理学分析结果表明,以上9个成分为活性成分,作用于166个靶点,通过蛋白质互作(PPI)筛选得到29个核心靶点,其中4个化学成分相思子碱、下箴刺桐碱、大豆皂苷Ⅰ、精氨酸与核心靶点的关联度高,结合QMarker理念及分子对接结果,初步预测相思子碱和下箴刺桐碱为鸡骨草药材的Q-Marker。结论利用植物代谢组学结合多元统计学和网络药理学预测分析鸡骨草药材的Q-Marker,为鸡骨草药材的质量控制与评价提供数据参考,为进一步科学开发鸡骨草药材提供研究思路。

关键词：鸡骨草药材质量标志物植物代谢组学网络药理学相思子碱下箴刺桐碱

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四倍体和二倍体野菊茎的miRNA比较分析

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分子植物育种 2022年

作者：秦雪莲刘雪洁马东明韩正洲詹若挺马新业广州中医药大学中药学院中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室(广州中医药大学)国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心华润三九医药股份有限公司

利用生物信息学手段分析两种倍型野菊茎的miRNA差异表达信息。使用EASYspin Plus植物快速提取试剂盒提取四倍体、二倍体野菊茎的总RNA，利用Illumina HiSeqTM2000二代高通量测序平台进行Small RNA测序。对测序结果进行注释和筛选，得到...

利用生物信息学手段分析两种倍型野菊茎的miRNA差异表达信息。使用EASYspin Plus植物快速提取试剂盒提取四倍体、二倍体野菊茎的总RNA，利用Illumina HiSeqTM2000二代高通量测序平台进行Small RNA测序。对测序结果进行注释和筛选，得到两样品中的已知miRNA和未知miRNA。筛选差异表达的miRNA，并对差异表达miRNA的靶基因进行生物信息学分析，探究其主要的生物学功能和可能参与的信号通路。四倍体样品中共鉴定出321个已知miRNA和74个未知miRNA；二倍体样品中共鉴定出228个已知miRNA和66个未知miRNA。两样品中差异表达的miRNA为98个，差异miRNA靶基因70个。GO功能注释和KEGG Pathway富集分析显示，差异miRNA靶基因主要参与了细胞过程、代谢过程、细胞、细胞部分、结合和催化等生物学过程，涉及次生代谢产物的生物合成、植物病原相互作用、核糖体等生物代谢和信号转导途径。本实验以茎为对象探讨了四倍体、二倍体野菊的种内miRNA表达差异，丰富了野菊种内多样性理解。

关键词：

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岗梅种苗质量分级标准研究

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种子 2016年第3期35卷 115-118页

作者：李俊仁陈秀珍梁凌玲张振山邢建永詹若挺何瑞广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室广东广州510006 右江民族医学院药学院广西百色533000 华润三九医药股份有限公司研发中心广东深圳518029

目的：研究岗梅种苗质量分级标准。方法：测量1年生岗梅种子实生苗的株高、株径、根长等参数,通过多种方法进行分级获得分级标准,以不同级别存活苗分布情况来评价3种质量分级方法。结果：确定以种苗参数K-聚类法进行质量分级,将岗梅种... 详细信息

目的：研究岗梅种苗质量分级标准。方法：测量1年生岗梅种子实生苗的株高、株径、根长等参数,通过多种方法进行分级获得分级标准,以不同级别存活苗分布情况来评价3种质量分级方法。结果：确定以种苗参数K-聚类法进行质量分级,将岗梅种苗分为三级,其中一级种苗株高≥59cm,根长≥22cm,株径≥6.96mm;二级种苗株高43～59cm,根长18～22cm,株径4.88～6.96mm;三级种苗株高15.5～43cm,根长10～18cm,株径2.18～4.88mm。结论：建立了适用于生产实践的岗梅种苗质量分级标准。

关键词：岗梅种苗分级标准聚类分析

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响应面法优化三叉苦黄酮提取工艺及抗氧化活性分析

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食品与药品 2022年第1期24卷 1-6页

作者：罗桂花林翠清肖鸬华方媛莫穗芬杨惠琳严萍詹若挺广州中医药大学中药学院广东广州510006 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室(广州中医药大学)国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室广东广州510006

目的采用星点设计-响应面法优化三叉苦总黄酮提取工艺,并考察抗氧化活性。方法在单因素考察结果的基础上,对三叉苦总黄酮提取工艺中乙醇体积分数(%)、液料比(ml/g)、加热回流提取时间(min)3个因素进行优化,得到较优的总黄酮提取工艺。... 详细信息

目的采用星点设计-响应面法优化三叉苦总黄酮提取工艺,并考察抗氧化活性。方法在单因素考察结果的基础上,对三叉苦总黄酮提取工艺中乙醇体积分数(%)、液料比(ml/g)、加热回流提取时间(min)3个因素进行优化,得到较优的总黄酮提取工艺。通过测定三叉苦总黄酮DPPH和ABTS自由基清除能力评价其抗氧化活性。结果三叉苦总黄酮最佳提取工艺:乙醇体积分数90%,液料比10 ml/g,提取时间30 min,该条件下实际的提取率2.99%,与预测值3.25%偏差较小,清除DPPH和ABTS自由基能力较强。结论运用响应面设计得到的方法稳定可靠,可用于三叉苦总黄酮的提取。三叉苦有显著的抗氧化能力,为其进一步开发和应用提供一定依据,在功能食品和药品开发方面具有较好前景。

关键词：三叉苦总黄酮星点设计-响应面法加热回流法抗氧化活性

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