检索结果-内蒙古大学图书馆

热带作物学报 2025年第1期46卷 35-43页

作者：池珈仪刘舒璇向思诗詹若挺何瑞广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心/广州中医药大学岭南中药资源教育部重点实验室/广州中医药大学中药学院广东广州510006

毛叶芋兰(Nervilia plicata)是一种珍稀南药,目前对其有效成分及其分子调控机理鲜有报道。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)在植物基因表达分析中得到了广泛应用,但在毛叶芋兰中缺少研究,限制了相关工作的开展。在... 详细信息

毛叶芋兰(Nervilia plicata)是一种珍稀南药,目前对其有效成分及其分子调控机理鲜有报道。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)在植物基因表达分析中得到了广泛应用,但在毛叶芋兰中缺少研究,限制了相关工作的开展。在前期工作基础上,本研究从毛叶芋兰转录组数据库中筛选出Actin、GAPDH、TUA、UBC、UBQ、EF-1α、EF-1β、CYP、RPL共9个常见管家基因,以毛叶芋兰叶片、叶柄和球茎3个组织部位为材料,开展qRT-PCR内参基因的筛选工作。经过9个基因在不同组织的表达水平、稳定性和综合分析,筛选出最适合的内参基因,并选择毛叶芋兰花青素合成途径关键基因NpDFR、Np3GT进行验证。结果发现:EF-1α和CYP的表达稳定性相近,整体稳定性最好。2个内参基因单独或共同使用时,NpDFR、Np3GT在不同组织的表达情况与转录组测序结果基本一致,表明其均可用作qRT-PCR的内参基因。本研究结果为进一步开展毛叶芋兰药效相关基因的分子作用机理研究提供依据。

关键词：毛叶芋兰内参基因实时荧光定量PCR 表达稳定性

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白术多糖调节IEC-6细胞迁移活性成分的分离和表征

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高等学校化学学报 2015年第2期36卷 299-305页

作者：王一寓刘嘉炜司马贞华宋厚盼李茹柳蔡佳仲陈蔚文广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室广州510006 广州中医药大学脾胃研究所广州510405

基于药理活性导向法,利用水提醇沉、DEAE纤维素柱和Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱等分离技术从白术根部位筛选分离出1个新的多糖组分YY13008,并利用酸水解、凝胶渗透色谱-多角度激光散射联用技术、环境扫描电子显微镜、傅里叶变换红外光谱... 详细信息

基于药理活性导向法,利用水提醇沉、DEAE纤维素柱和Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱等分离技术从白术根部位筛选分离出1个新的多糖组分YY13008,并利用酸水解、凝胶渗透色谱-多角度激光散射联用技术、环境扫描电子显微镜、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、核磁共振波谱(NMR)等表征了其分子结构.表征结果表明,YY13008为线团型均一性多糖组分,绝对分子量为6546,其分子结构是由大量果糖单元以β(2→1)果糖苷键,终末端以α(1→2)葡萄糖苷键连接构成的果聚糖.体外伤口愈合细胞模型测试结果表明,白术多糖组分YY13008可使由α-二氟甲基鸟氨酸所致的IEC-6细胞迁移抑制恢复至正常水平,而其自身对IEC-6细胞迁移无明显影响.

关键词：白术多糖果聚糖细胞迁移

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虎杖根茎超临界CO_2萃取物GC/MS分析及抗细胞迁移活性评价

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质谱学报 2014年第5期35卷 420-426页

作者：李武国刘嘉炜李庆国叶玉珊司马贞华广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室广东广州510006 广州中医药大学中药学院广东广州510006

为了研究虎杖根茎的挥发性化学成分及其对人肝癌细胞Huh-7的细胞迁移活性,采用超临界CO2萃取和GC/MS方法分析鉴定虎杖根茎中的低极性化合物,并利用体外伤口愈合模型评价其抗细胞迁移活性。结果表明:从虎杖根茎超临界CO2萃取物中分离鉴定... 详细信息

为了研究虎杖根茎的挥发性化学成分及其对人肝癌细胞Huh-7的细胞迁移活性,采用超临界CO2萃取和GC/MS方法分析鉴定虎杖根茎中的低极性化合物,并利用体外伤口愈合模型评价其抗细胞迁移活性。结果表明:从虎杖根茎超临界CO2萃取物中分离鉴定了33个化合物,主要成分为莪术烯、丙二醇、醋酸、吉玛烯B、2,3-丁二醇等,质量百分比分别为41.8%、12.2%、6.9%、6.5%和5.9%;体外伤口愈合模型测试表明,虎杖根茎超临界萃取物在浓度为10mg/L,作用24h,能抑制人肝癌细胞Huh-7的细胞迁移活性,抑制率为19.85%。本实验可为阐明虎杖药效的物质基础提供参考。

关键词：虎杖挥发性成分超临界CO2萃取气质联用细胞迁移

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稀释法结合LC-MS/MS检测在10种中药材污染黄曲霉毒素高通量筛查中的应用研究

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中国中药杂志 2014年第2期39卷 273-277页

作者：郑润生徐晖彭苑霞王文丽詹若挺陈蔚文广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室广东广州510006

该研究运用稀释法，克服了基质效应对10种中药材污染黄曲霉毒素B，，B：，G，，G：的液质联用检测的影响，高、中、低3个浓度水平的基质效应检测结果在80．23％～115．5％，符合准确定量的要求。为增强检测结果的特异性和准确性，研究... 详细信息

该研究运用稀释法，克服了基质效应对10种中药材污染黄曲霉毒素B，，B：，G，，G：的液质联用检测的影响，高、中、低3个浓度水平的基质效应检测结果在80．23％～115．5％，符合准确定量的要求。为增强检测结果的特异性和准确性，研究结合保留时间窗、定量离子与定性离子的峰面积比值2个指标对83批中药材的检测进行色谱峰的辨认，并以苦杏仁为基质溶液配制的3个浓度的质控样品对检测体系的稳定性进行考察。检测结果显示医院和药店的药材污染率分别为13．89％和17．02％，其中以使君子和红枣的污染率较高。质控样品的RSD〈6．6％，表明该分析方法可用于这10种中药材的高通量的筛查和检测，具有经济、快速的优点。

关键词：液质联用技术(LC-MS MS) 中药材黄曲霉毒素真菌毒素

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青天葵实时荧光定量PCR内参基因的选择

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中草药 2013年第14期44卷 1979-1983页

作者：黄琼林梁凌玲何瑞詹若挺陈蔚文广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室广东广州510006

目的筛选合适的内参基因用于青天葵实时荧光定量PCR分析的校正。方法以毛唇芋兰3个组织(叶片、叶柄和球茎)为材料,利用实时荧光定量PCR技术探讨18S rRNA、actin、ubiquitin、EF-1α和β-tubulin 5个常用内参基因在毛唇芋兰不同组织中表... 详细信息

目的筛选合适的内参基因用于青天葵实时荧光定量PCR分析的校正。方法以毛唇芋兰3个组织(叶片、叶柄和球茎)为材料,利用实时荧光定量PCR技术探讨18S rRNA、actin、ubiquitin、EF-1α和β-tubulin 5个常用内参基因在毛唇芋兰不同组织中表达差异。利用GeNorm和NormFinder软件比较各内参基因的Ct值,以分析他们在青天葵3个组织的表达稳定性。结果 5个内参基因的表达稳定性各异,GeNorm软件分析结果表明,稳定性β-tubulin=EF-1α>ubiquitin>actin>18S rRNA;NormFinder软件结果显示β-tubulin稳定性最好,EF-1α次之,18S rRNA则最差。两个不同软件分析结果一致。结论β-tubulin可作为毛唇芋兰不同组织中基因表达差异分析的校正内参基因。

关键词：青天葵荧光定量PCR 内参基因 Ct值基因表达

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苦杏仁中黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2的液质联用检测分析

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中国中药杂志 2013年第20期38卷 3534-3538页

作者：郑润生徐晖王文丽詹若挺陈蔚文广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室广东广州510006

基质效应是影响液质联用定量准确性的一个重要因素，在方法学评价阶段中必不可少。该研究采用稀释法，并通过优化色谱和质谱条件，成功克服苦杏仁的基质效应对整个分析过程的干扰，建立了一种可对苦杏仁污染黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2进... 详细信息

基质效应是影响液质联用定量准确性的一个重要因素，在方法学评价阶段中必不可少。该研究采用稀释法，并通过优化色谱和质谱条件，成功克服苦杏仁的基质效应对整个分析过程的干扰，建立了一种可对苦杏仁污染黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2进行大量筛查及检测的液质联用方法，与Myeosep226净化柱纯化的方法相比，具有回收率高、经济、简便的特点；对11批样品进行检测发现有2批样品的黄曲霉毒素检测结果呈阳性，其中黄曲霉毒素B，的污染水平为1．590～2．340μg·k^-1，黄曲霉毒素总量（B1＋B2＋G1＋G2）的污染水平为2．340～3．304μg·k^-1，表明苦杏仁污染黄曲霉毒素这一现象应当引起重视，并且有必要对其贮藏方式进行考察，以减少黄曲霉毒素的污染。

关键词：液质联用技术中药饮片苦杏仁黄曲霉毒素真菌毒素

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两面针根和茎超临界CO2萃取物GC-MS比较分析及体外细胞毒活性评价

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中国中药杂志 2014年第4期39卷 710-714页

作者：何紫凝刘嘉炜李武国司马贞华陈蔚文广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室广东广州510006

利用GC-MS技术从两面针根和茎超临界CO_1萃取物中分别鉴定出31个和51个低极性成分,其中共有成分27个,主要为斯巴醇(根18.49%,茎26.18%)、棕榈酸(根14.24%,茎12.79%)、芳姜黄酮(根6.95%,茎8.88%)、油酸(根8.39%,茎5.71%)和己酸(根4.39%,... 详细信息

利用GC-MS技术从两面针根和茎超临界CO_1萃取物中分别鉴定出31个和51个低极性成分,其中共有成分27个,主要为斯巴醇(根18.49%,茎26.18%)、棕榈酸(根14.24%,茎12.79%)、芳姜黄酮(根6.95%,茎8.88%)、油酸(根8.39%,茎5.71%)和己酸(根4.39%,茎7.78%)等;体外MTT法测试表明两面针根和茎萃取物对人肝癌细胞Huh-7和大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6均没有明显细胞毒性。实验研究表明两面针根和茎低极性化学成分种类和含量相似,其体外细胞毒活性也相似,可为两面针充分利用野生资源和扩大药用部位提供进一步参考。

关键词：两面针低极性成分超临界CO2萃取 GC—MS 细胞毒性

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穿心莲MSAP反应体系的优化及引物筛选

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分子植物育种 2018年第12期16卷 3996-4002页

作者：卓一南曾湘达李俊仁何瑞詹若挺广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室广州510006

为建立穿心莲甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitivity amplification polymorphism,MSAP)反应体系,本研究以穿心莲叶片为材料,提取总基因组DNA,采用L25(55)正交试验对穿心莲MSAP的预扩增和选择性扩增的相关参数进行了优化,并对M... 详细信息

为建立穿心莲甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitivity amplification polymorphism,MSAP)反应体系,本研究以穿心莲叶片为材料,提取总基因组DNA,采用L25(55)正交试验对穿心莲MSAP的预扩增和选择性扩增的相关参数进行了优化,并对MSAP引物进行了筛选,以期建立穿心莲MSAP最佳反应体系。优化后的体系具有稳定的图谱,清晰丰富的条带。运用优化后的体系,在穿心莲MSAP的80对引物中筛选出8对有效引物。筛选出的引物组合特异性良好,能够用于后续穿心莲甲基化的相关研究。为其他药用植物MSAP分析提供参考。

关键词：穿心莲 MSAP 预扩增选择性扩增引物筛选

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植物器官大小相关基因研究进展（英文）

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热带亚热带植物学报 2013年第6期21卷 577-586页

作者：黄琼林何瑞詹若挺陈蔚文广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室广州510006

器官大小是植物形态的一个重要特征,而且具有严格的种属特异性。植物器官大小虽然受到外在的环境因素(如光照、营养等)的影响,但它是由内在特有的细胞数目和细胞大小决定的。许多基因能通过转录调节、蛋白合成、激素调节或松弛细胞壁等... 详细信息

器官大小是植物形态的一个重要特征,而且具有严格的种属特异性。植物器官大小虽然受到外在的环境因素(如光照、营养等)的影响,但它是由内在特有的细胞数目和细胞大小决定的。许多基因能通过转录调节、蛋白合成、激素调节或松弛细胞壁等途径作用于植物细胞繁殖和/或细胞扩张,它们的过表达或缺失表达能改变植物器官大小和加快植物生长。尽管如此,这些基因是通过相对独立的途径起作用,在植物中难以阐明一个相对整合的器官大小基因调控网络,这也是亟待解决的问题。目前,一些与器官大小相关的基因已经应用于农作物育种,并培育出显著增大的农作物品种,这也证实了利用器官大小基因进行植物品种选育的可行性。因此,通过研究药用植物器官大小的基因,在分子水平上有目的地调控器官的大小和形态,是缓解当前许多药用植物面临的资源紧缺、枯竭、濒危困境的可考虑途径之一。

关键词：植物器官大小基因细胞增殖细胞扩张

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10种中药材和3种食品污染赭曲霉毒素A的LC-MS/MS检测研究

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药物分析杂志 2015年第2期35卷 289-294页

作者：郑润生肖启衍邱薇徐晖詹若挺陈蔚文广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室广州510006

目的：通过优化液相色谱条件和质谱条件,并结合稀释法克服基质效应的影响,建立适用于10种中药材和3种食品污染赭曲霉毒素A（OTA）的LC-MS/MS检测方法。方法：样品经84%乙腈提取后,上清液用色谱甲醇复溶（稀释4倍）,直接上样检测;流动相... 详细信息

目的：通过优化液相色谱条件和质谱条件,并结合稀释法克服基质效应的影响,建立适用于10种中药材和3种食品污染赭曲霉毒素A（OTA）的LC-MS/MS检测方法。方法：样品经84%乙腈提取后,上清液用色谱甲醇复溶（稀释4倍）,直接上样检测;流动相采用4.0 mmol·L^-1醋酸铵-0.1%甲酸水溶液和甲醇,经C18色谱柱分离后注入质谱仪,在选择反应监测模式（SRM）下进行正离子检测。结果：经方法学验证,赭曲霉毒素A质量浓度在25.00～50 000 ng·L^-1范围内呈现良好的线性关系,r〉0.998 7;定量限25.0 ng·L^-1;高、中、低3个浓度水平的绝对回收率89.6%～95.2%,提取回收率84.2%～100.0%;13种样品的基质效应91.5%～118.7%。将该方法应用于实际100批样品的检测,结果显示100批样品中仅有1批的检测结果呈阳性（0.7μg·kg^-1）,表明该地区这些样品中OTA的污染情况不严重。结论：本研究建立的LC-MS/MS方法具有预处理简便、经济等优点,适用于这10种中药材及3种食品污染赭曲霉毒素A的快速检测。

关键词：液质联用中药材污染检测食品安全监测赭曲霉毒素A 真菌毒素基质效应考察稀释法方法验证

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