检索结果-内蒙古大学图书馆

中成药 2014年第5期36卷 990-994页

作者：梁小银林文华严萍苏碧茹詹若挺陈蔚文广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心、岭南中药资源教育部重点实验室广东广州510006 广州白云山中一药业有限公司广东广州510530

目的建立新胃乃安片（黄芪、三七、红参、人工牛黄和珍珠层粉）的质量标准。方法采用薄层色谱法对处方中的黄芪、红参和三七中的多种指标成分进行同时鉴别;采用薄层色谱法对人工牛黄进行鉴别;采用HPLC-ELSD法对方中黄芪的黄芪甲苷进行... 详细信息

目的建立新胃乃安片（黄芪、三七、红参、人工牛黄和珍珠层粉）的质量标准。方法采用薄层色谱法对处方中的黄芪、红参和三七中的多种指标成分进行同时鉴别;采用薄层色谱法对人工牛黄进行鉴别;采用HPLC-ELSD法对方中黄芪的黄芪甲苷进行测定。结果薄层色谱特征明显,在同一薄层板上能同时鉴别黄芪、红参和三七药材;黄芪甲苷在1.539～15.39μg（r=0.999 8）范围内呈良好的线性关系,其平均回收率（n=6）为97.0%（RSD=1.5%）。结论建立的薄层色谱和HPLC定量测定方法简便、重复性好,专属性强,可用于新胃乃安片的质量控制。

关键词：新胃乃安片黄芪红参三七黄芪甲苷质量标准

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氯化钠对白木香离体根生长、生理和化学成分的影响

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中药新药与临床药理 2018年第4期29卷 502-507页

作者：李文月潘晓琪马新业詹若挺广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室广东广州510006 广州中医药大学中药学院广东广州510006

目的以白木香离体根为材料,研究NaCl浓度及处理时间对白木香离体根的生长、生理和化学成分的影响,为白木香耐盐性研究提供参考。方法通过次代根的生根率、侧根条数、侧根根长和侧根直径考察盐胁迫对白木香离体根生长的影响,通过脯氨酸... 详细信息

目的以白木香离体根为材料,研究NaCl浓度及处理时间对白木香离体根的生长、生理和化学成分的影响,为白木香耐盐性研究提供参考。方法通过次代根的生根率、侧根条数、侧根根长和侧根直径考察盐胁迫对白木香离体根生长的影响,通过脯氨酸和抗氧化酶含量考察盐胁迫下的生理变化,利用GC-MS分析不同盐处理下化学成分的变化情况。结果随NaCl浓度的增加,次代根的生根率和侧根条数下降,侧根直径和侧根根长呈增加趋势。脯氨酸含量随处理浓度的增加先增后降,抗氧化酶含量在低浓度时随处理时间增加而升高,中高浓度时则呈现先增后降的趋势。化学成分分析显示,与对照组相比,处理组产生了6种新物质。结论低浓度NaCl处理能促进白木香离体根侧根的生长,使脯氨酸和抗氧化酶的含量升高并产生新的化合物;高浓度NaCl严重影响离体根的再生。

关键词：盐胁迫白木香离体根气相色谱-质谱联用

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应用rbcL条形码鉴别高良姜及其伪品大高良姜

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中国调味品 2017年第2期42卷 122-124,133页

作者：黄琼林詹若挺陈蔚文广东医科大学广东湛江524023 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室广州510006

研究采用基于rbcL基因的DNA条形码鉴别高良姜及其伪品大高良姜,为其资源合理利用和开发提供分子依据。采用试剂盒提取不同采集地高良姜样品的基因组DNA,以及rbcL通用引物进行PCR扩增和测序;并从Genbank数据库获取大高良姜的rbcL基因序... 详细信息

研究采用基于rbcL基因的DNA条形码鉴别高良姜及其伪品大高良姜,为其资源合理利用和开发提供分子依据。采用试剂盒提取不同采集地高良姜样品的基因组DNA,以及rbcL通用引物进行PCR扩增和测序;并从Genbank数据库获取大高良姜的rbcL基因序列。采用DNAMAN、ClustalX软件进行序列比对分析,MEGA软件构建聚类树。结果表明:获取的rbcL序列均为521bp,平均GC含量为43%,高良姜与其伪品大高良姜的rbcL序列存在3处碱基差异,分别是121位的G-A,172位的T-G和502位的T-C变异。基于rbcL基因的聚类树能较好地区分高良姜和大高良姜。

关键词：高良姜大高良姜 rbcL条形码鉴别

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南药青天葵转录组SSR位点信息分析

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北方园艺 2015年第12期 76-79页

作者：黄琼林何瑞詹若挺陈蔚文广东医学院广东湛江524023 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心教育部岭南中药资源重点实验室广东广州510006

以青天葵全转录组测序获得的142 220条unigene为试材,采用MicroSAtellite(MISA)软件分析青天葵简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)的分布频率和重复基元的类型等特征,利用Primer 5.0对符合鉴定要求的SSR基元进行引物设计,并通过S... 详细信息

以青天葵全转录组测序获得的142 220条unigene为试材,采用MicroSAtellite(MISA)软件分析青天葵简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)的分布频率和重复基元的类型等特征,利用Primer 5.0对符合鉴定要求的SSR基元进行引物设计,并通过SSRFinder校验SSR引物,以期为青天葵遗传多样性分析、分子标记辅助育种、遗传图谱绘制等种质资源研究提供参考依据。结果表明:在青天葵转录组共检测到分布在5 223条unigene上的5 684个SSR位点,SSR发生频率为3.67%,分布密度为1/13kb。二核苷酸重复为青天葵SSR主要基元类型,其中AG/CT和AT/AT基序出现频率最高,占SSR总数的52.9%。设计筛选得到2 486条SSR引物。青天葵转录组SSR位点出现频率高、类型丰富、多态性潜能较高。

关键词：青天葵 SSR 位点信息转录组

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中药青天葵黄酮醇合成酶基因的克隆与生物信息学分析

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西南农业学报 2018年第10期31卷 2030-2035页

作者：黄琼林卓一南曾湘达何瑞詹若挺广东医科大学广东湛江524023 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心广东广州510006 岭南中药资源教育部重点实验室广东广州510006

【目的】克隆中药青天葵黄酮化合物生物合成途径的关键调控酶—黄酮醇合成酶(flavonol synthase,FLS)基因并分析其序列特征及编码蛋白的功能。【方法】在前期青天葵转录组测序获得的FLS基因序列片段的基础上,通过cDNA末端快速扩增技术(R... 详细信息

【目的】克隆中药青天葵黄酮化合物生物合成途径的关键调控酶—黄酮醇合成酶(flavonol synthase,FLS)基因并分析其序列特征及编码蛋白的功能。【方法】在前期青天葵转录组测序获得的FLS基因序列片段的基础上,通过cDNA末端快速扩增技术(RACE-PCR)克隆FLS基因的cDNA全长及其编码区;利用生物信息学方法对其编码蛋白进行同源性比对和功能分析。【结果】青天葵FLS基因cDNA全长1268 bp,其中包含993 bp的开放阅读框,编码331个氨基酸。编码蛋白的氨基酸序列预测显示,青天葵FLS蛋白为酸性、亲水性蛋白,分子量约为37.3 kDa;不含有信号肽、转运肽和跨膜结构域,可能定位于细胞质中;具有黄酮醇合成酶保守功能域,与铁皮石斛等同科植物FLS蛋白的同源性可达82%。【结论】成功克隆了青天葵黄酮醇合成酶基因,为后续的基因功能鉴定和生物合成调控,进而提高青天葵黄酮类药效成分积累奠定了基础。

关键词：黄酮醇合成酶青天葵克隆生物信息学分析

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连作对穿心莲基因组DNA甲基化的影响

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中国实验方剂学杂志 2018年第15期24卷 65-71页

作者：李俊仁陈秀珍曾湘达卓一南何瑞詹若挺广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室国家中成药工程技术研究中心南药研发实验室

目的：探究连作条件下穿心莲基因组DNA的甲基化水平及模式变化情况。方法：结合甲基化敏感扩增多态性（methylation-sensitive amplified polymorphism,MSAP）技术和液相色谱-质谱（LC-MS/MS）法对3个连作年限（0,1,2年）穿心莲基因组DN... 详细信息

目的：探究连作条件下穿心莲基因组DNA的甲基化水平及模式变化情况。方法：结合甲基化敏感扩增多态性（methylation-sensitive amplified polymorphism,MSAP）技术和液相色谱-质谱（LC-MS/MS）法对3个连作年限（0,1,2年）穿心莲基因组DNA的甲基化水平及模式进行分析。结果：LC-MS/MS测定的连作0-2年穿心莲基因组DNA甲基化水平为13.91%,12.72%,10.26%,MSAP测定的结果则为10.16%,9.64%,8.98%,两者均表明穿心莲基因组DNA的甲基化水平与连作年限呈现负相关,即DNA甲基化水平随着连作时间的延长而逐渐下降。MSAP技术对DNA甲基化模式分析也显示,穿心莲基因组DNA的CCGG位点在连作过程中主要发生了去甲基化。结论：连作条件下,穿心莲基因组DNA的甲基化水平和模式发生改变并以此来响应连作胁迫。

关键词：穿心莲 DNA甲基化连作甲基化敏感扩增多态性液相色谱-质谱法

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大黄等5味中药及单体成分对临床多重耐药菌的抑制作用

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中国实验方剂学杂志 2014年第22期20卷 103-107页

作者：彭苑霞刘晓强温羚玲詹若挺陈蔚文徐晖广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源科学教育部重点实验室广州510006 中山大学孙逸仙纪念医院广州510006

目的：研究大黄、丁香、蒲公英、姜黄、金银花5味中药及大黄素、芦荟大黄素、丁香酚、咖啡酸、绿原酸和姜黄素对临床多重耐药菌的抑制作用。方法：用微量稀释法测定各药物的最小抑菌浓度（MIC）。记录细菌连续24 h的吸光度A595,绘制生... 详细信息

目的：研究大黄、丁香、蒲公英、姜黄、金银花5味中药及大黄素、芦荟大黄素、丁香酚、咖啡酸、绿原酸和姜黄素对临床多重耐药菌的抑制作用。方法：用微量稀释法测定各药物的最小抑菌浓度（MIC）。记录细菌连续24 h的吸光度A595,绘制生长曲线,用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析细菌可溶性蛋白质。结果：大黄的抑菌效果显著,MIC在6.25-12.50g·L^-1;丁香的抑菌谱最广,对所有实验菌株均有抑菌作用,MIC在3.13-25.00 g·L^-1,蒲公英、金银花和姜黄在本实验中未见抑菌活性;6种单体药物在实验中对铜绿假单胞菌均没有抑菌效果;大黄素、芦荟大黄素和丁香酚对金黄色葡萄球菌的抑菌效果优于其他临床耐药菌株;大黄素的抑菌效果显著,MIC在1.95-15.63 mg·L^-1;芦荟大黄素的抑菌效果稍弱,MIC在2.34-75.00 mg·L^-1;丁香酚是唯一对鲍曼不动杆菌有抑菌活性的单体化合物,MIC在5.32-10.64 mg·L^-1;姜黄素、咖啡酸、绿原酸在实验中未显示抑菌活性。大黄素作用下,金黄色葡萄球菌的生长及可溶性蛋白表达发生明显改变。结论：大黄和丁香以及大黄素和芦荟大黄素、丁香酚对金黄色葡萄球菌等多种临床多重耐药菌具有显著的抑制效果。大黄素、芦荟大黄素和丁香酚分别是大黄和丁香发挥抑菌作用的主要成分,其具体作用机制有待于深入研究。

关键词：单体化合物抑菌活性临床多重耐药菌

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青天葵1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶基因片段的鉴定和分析

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北方园艺 2015年第22期 114-117页

作者：黄琼林何瑞詹若挺广东医学院广东湛江524023 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室广东广州510006

1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶(1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate synthase,DXS)是植物萜类MEP生物合成途径的第一个限速关键酶,提高其编码基因的表达可提高植物萜类化合物的含量。该研究在青天葵全转录组测序数据中获取青天葵DXS基因片... 详细信息

1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶(1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate synthase,DXS)是植物萜类MEP生物合成途径的第一个限速关键酶,提高其编码基因的表达可提高植物萜类化合物的含量。该研究在青天葵全转录组测序数据中获取青天葵DXS基因片段序列,利用生物信息学方法对其系统发育进化、保守功能域、理化性质、亲/疏水性、跨膜结构域、信号肽等进行分析和预测,并采用RPKM法分析其在青天葵叶片和球茎的表达量,为后期利用DXS基因调控青天葵萜类成分的生物合成提供理论依据。结果表明:NfDXS基因片段序列长度为2 154bp,编码含有718个氨基酸、分子量约为77.45kDa的亲水性蛋白,与其它DXS同源性可达80%。NfDXS具有1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶功能域,没有信号肽和跨膜结构域,二级结构表现为混合型结构蛋白质。NfDXS基因在青天葵中的表达趋势为:叶片>球茎。

关键词：青天葵 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶生物信息学表达量

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青天葵甲羟戊酸激酶基因的编码蛋白预测和表达分析

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热带作物学报 2015年第6期36卷 1099-1104页

作者：黄琼林何瑞詹若挺广东医学院广东湛江524023 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心广东广州510006 岭南中药资源教育部重点实验室广东广州510006

甲羟戊酸途径(mevalonic acid,MVA)是植物三萜类化合物生物合成的主要途径,而甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase,MVK)是MVA途径中的关键限速酶之一。根据前期获得的青天葵[Nervilia fordii(Hance)Schltr.]转录组数据,采用生物信息学方法... 详细信息

甲羟戊酸途径(mevalonic acid,MVA)是植物三萜类化合物生物合成的主要途径,而甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase,MVK)是MVA途径中的关键限速酶之一。根据前期获得的青天葵[Nervilia fordii(Hance)Schltr.]转录组数据,采用生物信息学方法对青天葵MVK基因编码蛋白的理化特性、功能结构域、二级结构、信号肽、跨膜结构域等进行预测,并采用RPKM法分析该基因在青天葵球茎和叶片的表达量。结果表明,Nf MVK基因编码含有383个氨基酸的稳定型亲水性、酸性蛋白质,与其他植物MVK蛋白同源性可达70%。Nf MVK蛋白分子量为41.29 ku,含有甲羟戊酸激酶功能域,归属于GHMP_Kinase超级家族。该蛋白没有任何信号肽、转运肽和跨膜结构域,二级结构为混合型结构的蛋白质。Nf MVK基因在青天葵中的表达趋势为:球茎>叶片。该结果可为后续利用MVK基因调控青天葵三萜类活性成分的合成提供理论依据。

关键词：青天葵甲羟戊酸激酶生物信息学表达量

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首乌藤配方颗粒的HPLC指纹图谱

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中国实验方剂学杂志 2017年第10期23卷 50-54页

作者：肖宗崇卢识礼郑晓英张辉潘杰沈彩红严萍詹若挺广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心岭南中药资源教育部重点实验室广州510006 华润三九医药股份有限公司广东深圳518110

目的:建立首乌藤配方颗粒的HPLC指纹图谱,并对其主要的共有峰进行成分归属,为其质量控制提供科学依据。方法:采用HPLC方法,测定了不同厂家的15批首乌藤配方颗粒的HPLC指纹图谱,色谱条件:Waters XBridge^(TM)shield RP18 C_(18)色谱柱,... 详细信息

目的:建立首乌藤配方颗粒的HPLC指纹图谱,并对其主要的共有峰进行成分归属,为其质量控制提供科学依据。方法:采用HPLC方法,测定了不同厂家的15批首乌藤配方颗粒的HPLC指纹图谱,色谱条件:Waters XBridge^(TM)shield RP18 C_(18)色谱柱,流动相乙腈-0.1%乙酸水溶液,流速1.0 m L·min^(-1),柱温30℃,检测波长271 nm,进样量15μL。结果:建立了首乌藤配方颗粒的指纹图谱,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"计算处理,通过HPLC指纹图谱分析,确定了首乌藤配方颗粒8个共有峰,并确认6个特征峰,分别为没食子酸,原儿茶酸,儿茶素,2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,大黄素,大黄素甲醚。对照指纹图谱色谱峰丰富,分离度高,匹配确定了主要特征峰,15批首乌藤配方颗粒样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度均>0.86,相似度高,可实现首乌藤配方颗粒化学成分全面和整体的评价,能较好控制首乌藤配方颗粒的质量。结论:该方法简单、准确、重复性好,可以为首乌藤配方颗粒质量控制和评价提供参考。

关键词：首乌藤配方颗粒高效液相色谱指纹图谱 2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷

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