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原花青素B2对H_(2)O_(2)诱导的HT22细胞铁死亡的影响及机制研究

中药药理与临床 2025年第1期41卷 77-84页

作者：苑舒文司建超陈雪齐珂杨胜昌河北中医药大学生理学教研室石家庄050091 河北省中医药结合氢医学技术创新中心石家庄050091 广州中医药大学基础医学院中西医结合基础研究中心广州510000

目的:探讨原花青素B2对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导小鼠海马神经元(HT22)细胞铁死亡的影响及机制。方法:以HT22细胞为研究对象,分为空白对照组、模型对照组、原花青素B2100μg/mL组、铁死亡诱导剂组和铁死亡诱导剂+原花青素B2100μg/mL组;... 详细信息

目的:探讨原花青素B2对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导小鼠海马神经元(HT22)细胞铁死亡的影响及机制。方法:以HT22细胞为研究对象,分为空白对照组、模型对照组、原花青素B2100μg/mL组、铁死亡诱导剂组和铁死亡诱导剂+原花青素B2100μg/mL组;CCK-8和LDH法筛选H_(2)O_(2)和原花青素B2的最佳作用浓度;试剂盒检测细胞内Fe^(2+)和总铁水平;ELISA法检测细胞内过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力或含量;透射电子显微镜观察细胞线粒体形态变化;免疫荧光法检测细胞内活性氧(ROS)积累水平;流式细胞术检测细胞线粒体膜电位变化;RT-qPCR和Western Blot检测细胞铁死亡标志物及核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)通路的mRNA和蛋白表达变化情况;确证H_(2)O_(2)能够诱导铁死亡的同时验证原花青素B2的保护作用,随后进一步探究原花青素B2改善HT22细胞铁死亡的分子机制。结果:与正常对照组相比,模型对照组细胞Fe^(2+)、总铁含量以及核受体辅活化子4(NCOA4)、环氧化酶-2(COX-2)、Nrf2、HO-1的蛋白及mRNA表达明显上调,膜铁转运蛋白l(FPN1)、铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白及mRNA表达明显下调,CAT、SOD、GSH-Px的含量明显降低,MDA含量和ROS的水平升高(P<0.05或P<0.01);与模型对照组相比,原花青素B2100μg/mL能够显著改善细胞内铁累积,增加CAT、SOD、GSH-Px的含量,降低MDA含量和ROS的水平,上调FPN1、FTH1、GPX4蛋白及mRNA的表达,下调NCOA4、COX-2蛋白及mRNA的表达,并进一步激活Nrf2、HO-1蛋白及mRNA的表达(P<0.05或P<0.01);经Fin56干预后,细胞铁死亡程度较H_(2)O_(2)组显著增强(P<0.05或P<0.01),原花青素B2处理后上述指标变化可见一定程度的改善(P<0.05或P<0.01)。结论:原花青素B2通过平衡细胞内的铁稳态和氧化应激水平,抑制脂质过氧化损伤,改善H_(2)O_(2)诱导的HT22细胞铁死亡,其作用机制可能与其激活Nrf2/HO-1通路有关。

关键词：原花青素B2 过氧化氢小鼠海马神经元细胞铁死亡氧化应激核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1通路

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基于肠道菌群及代谢组学探讨胆南星的降血脂作用机制

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中国中药杂志 2025年第6期50卷 1544-1557页

作者：张澎苏发智朱恩琳白晨曦张宝武孙延平匡海学王秋红黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室黑龙江哈尔滨150040 广东药科大学中药学院中药炮制学教研室广东广州510006 广州中医药大学针灸康复临床医学院广东广州510006

基于高脂饮食诱导的高脂血症大鼠模型组,评价胆南星的降脂作用并探讨其作用机制,以期为胆南星的临床应用提供实验依据。该研究采用生化分析法检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C... 详细信息

基于高脂饮食诱导的高脂血症大鼠模型组,评价胆南星的降脂作用并探讨其作用机制,以期为胆南星的临床应用提供实验依据。该研究采用生化分析法检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平评价胆南星的降脂活性;并采用16S rDNA测序及代谢组学技术,共同阐释胆南星的降血脂作用机制。实验结果表明,给予高剂量胆南星(PBA-H)能够显著降低模型组大鼠血清中的ALT、AST、LDL-C、TG、TC含量(P<0.01),显著升高HDL-C的含量(P<0.01),该作用与非诺贝特的作用趋势相同,并无显著性差异。此外,胆南星能显著减轻肝细胞气球样变性,缓解脂肪变性程度。16S rDNA结果表明,PBA-H明显增强模型组大鼠肠道菌群alpha多样性和beta多样性,显著增加Akkermansia菌、Subdoligranulum菌的相对丰度(P<0.01)。肝脏代谢组学分析阐明,PBA-H主要调节花生四烯酸代谢、维生素B6代谢、类固醇激素的生物合成等途径。综上所述,胆南星可显著改善高脂饮食诱导的血脂水平异常及肝脏病变,调节肝脏代谢紊乱,并改善肠道菌群丰度及结构组成,从而发挥降血脂作用,该研究的发现为胆南星的临床应用及高脂血症的治疗提供了实验依据。

关键词：胆南星高脂血症降血脂作用肠道菌群代谢组学

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不同胆汁制胆南星乙醇提取物的解热作用研究

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中国中药杂志 2025年第7期50卷 1781-1791页

作者：邹润苏发智朱恩琳白晨曦孙延平匡海学王秋红黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室黑龙江哈尔滨150040 广东药科大学中药学院中药炮制学教研室广东广州510006 广州中医药大学针灸康复临床医学院广东广州510006

该研究旨在探究不同胆汁制胆南星乙醇提取物对干酵母混悬液致发热模型大鼠的解热作用及潜在机制。通过背部皮下注射20%干酵母混悬液建立大鼠发热模型,ELISA法测定大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介... 详细信息

该研究旨在探究不同胆汁制胆南星乙醇提取物对干酵母混悬液致发热模型大鼠的解热作用及潜在机制。通过背部皮下注射20%干酵母混悬液建立大鼠发热模型,ELISA法测定大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及下丘脑组织中大鼠前列腺素E_(2)(prostaglandin E_(2),PGE_(2))、大鼠环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)的含量,采用UPLC-Q-TOF MS技术对大鼠血清和下丘脑进行代谢组学分析,以阐明不同胆汁制胆南星乙醇提取物的解热作用机制及其异同。结果显示,大鼠在造模后4 h体温显著升高,经牛胆汁制胆南星乙醇提取物高剂量(NCH)与猪胆汁制胆南星乙醇提取物高剂量(ZCH)给药后,大鼠体温显著降低(P<0.05),且NCH降温效果优于ZCH。ELISA结果表明,与模型组相比,经二者分别给药后大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α和下丘脑中PGE_(2)、cAMP等含量显著降低(P<0.01)。血清及下丘脑代谢组学结果表明,二者均能回调苯丙氨酸代谢、鞘脂代谢、花生四烯酸代谢、类固醇激素生物合成等通路。综上所述,NCH和ZCH均可对干酵母所致发热大鼠产生显著的解热作用,其作用机制可能与抑制炎症反应、调节体内代谢紊乱相关,但牛胆汁制胆南星效果更优。

关键词：胆南星不同胆汁解热作用代谢组学炎症反应

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从小儿疳证用药看《辅行诀》对《黄帝内经》脾病理论的继承与发展

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国际医药卫生导报 2025年第7期31卷 1062-1064页

作者：黄鸿凯朱凯欣古继红广州市越秀区儿童医院中医科广州511011 广州市越秀区儿童医院广州511011 广州中医药大学基础医学院内经教研室广州510000

本文运用《辅行诀》中的“汤液经法图”理论,分析小儿疳证指南中的指导方药,发现其组方都遵循辛味泻脾、甘味补脾和苦味燥脾的药物定位原则,更好地传承及丰富了《黄帝内经》的苦欲补泻理论,提示疳证及其兼证可按照五味补泻理论精简用药... 详细信息

本文运用《辅行诀》中的“汤液经法图”理论,分析小儿疳证指南中的指导方药,发现其组方都遵循辛味泻脾、甘味补脾和苦味燥脾的药物定位原则,更好地传承及丰富了《黄帝内经》的苦欲补泻理论,提示疳证及其兼证可按照五味补泻理论精简用药,为小儿其他疾病组方用药提供更客观的理论依据。

关键词：疳证辅行诀汤液经法图黄帝内经补脾儿童

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加味四逆散抗应激性抑郁效应及其海马NMDA受体通道机制的初步研究

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中国药理学通报 2007年第11期23卷 1425-1431页

作者：吴丽丽严灿丁胜元徐志伟曾纯兰金鑫广州中医药大学基础医学院中医基础理论教研室广东广州510006 广州中医药大学基础医学院生理学教研室广东广州510006

目的研究加味四逆散(JWSNS)抗应激性抑郁效应及其海马N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体通道的机制。方法采用慢性轻度不可预计应激(chronicmild unpredictable stress,CMUS)制作大鼠抑郁症模型。在造模前后测量基础糖... 详细信息

目的研究加味四逆散(JWSNS)抗应激性抑郁效应及其海马N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体通道的机制。方法采用慢性轻度不可预计应激(chronicmild unpredictable stress,CMUS)制作大鼠抑郁症模型。在造模前后测量基础糖水消耗量和体重的变化;离体海马脑片TTC染色检测各组大鼠海马损伤情况以及JWSNS含药血清的保护作用;运用细胞贴附式膜片钳记录模式检测大鼠海马NMDA受体通道开放概率和平均开放时间的变化,Tillvision图像处理系统检测海马神经元细胞内游离Ca2+浓度。结果CMUS可引起大鼠糖水偏爱度下降(P<0.01),JWSNS和MK801可提高应激性抑郁症大鼠糖水偏爱度(P<0.01,P<0.05),但对大鼠的体重无影响。JWSNS、20%JWSNS含药血清和MK801均能明显升高应激性抑郁症大鼠海马光密度值,降低海马脑片损伤百分率(P<0.05,P<0.01)。模型组大鼠海马NMDA受体通道开放概率明显增高(P<0.05),而JWSNS、MK801能明显降低海马NMDA受体通道开放概率(P<0.05,P<0.01);对NMDA受体通道平均开放时间无明显影响。JWSNS、MK801能明显降低应激性抑郁症大鼠海马神经元内升高的游离Ca2+浓度(P<0.01)。结论JWSNS具有抗抑郁作用,NMDA受体可能是其药理学作用靶点之一,调控海马神经元NMDA受体的功能状态可能是JWSNS发挥抗抑郁效应的直接作用机制之一。

关键词：应激抑郁症海马 N-甲基-D-天冬氨酸受体加味四逆散

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六味地黄丸含药血清对自杀基因治疗黑色素瘤增效作用的缝隙连接机制初探

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中国中西医结合杂志 2013年第5期33卷 651-658页

作者：杜标炎郭玉荣易华谭宇蕙吴映雅广州中医药大学基础医学院病理教研室广州510006 广西柳州市中医院科教科广西545001 广州中医药大学基础医学院生化教研室广州510006

目的探讨六味地黄丸含药血清对HSV-tk/GCV自杀基因系统杀伤小鼠黑色素细胞瘤B16细胞增效作用的缝隙连接机制。方法制备六味地黄丸含药血清(分别为2.5%、5.0%、10.0%六味血清)及10.0%对照血清。采用RT-PCR法检测六味地黄丸含药血清对B16... 详细信息

目的探讨六味地黄丸含药血清对HSV-tk/GCV自杀基因系统杀伤小鼠黑色素细胞瘤B16细胞增效作用的缝隙连接机制。方法制备六味地黄丸含药血清(分别为2.5%、5.0%、10.0%六味血清)及10.0%对照血清。采用RT-PCR法检测六味地黄丸含药血清对B16细胞株的缝隙链接蛋白(Cx)26和Cx43 mRNA的影响,Western blot法和间接免疫荧光法检测其对B16细胞Cx26和Cx43蛋白表达的影响;RT-PCR检测Cx26-309、Cx26-337、Cx26-367、Cx26-2098 SiRNA对Cx26的干扰效率,选用干扰效率最高的Cx26-2098 SiRNA干扰Cx26基因后观察六味地黄丸联合HSV-tk/GCV的旁观者效应;MTT法检测细胞间缝隙连接通讯功能(gap junctional intercellular communication,GJIC)抑制剂甘草次酸(GA)对六味地黄丸联合tk/GCV系统对B16细胞杀伤作用的影响,实验设为对照血清组,2.5%、5.0%、10.0%六味血清组(简称低、中、高剂量组)及对照血清联合GCV组,低、中、高剂量联合GCV组,低、中、高剂量联合GCV加GA组。GCV终浓度为20mol/L,GA终浓度为50mol/L。结果六味地黄丸含药血清能提高B16细胞中Cx43mRNA及蛋白的表达,且具有量效依赖关系;对Cx26 mRNA与蛋白的表达具有双向调节作用,低剂量时具有抑制作用而高剂量是能上调其表达;SiRNA干扰Cx26基因表达后,六味地黄丸联合自杀基因治疗的旁观者效应与没有干扰前比较无明显的变化;低、中、高剂量联合GCV组在GA阻断前细胞抑制率(48.75%、59.39%、69.28%)与阻断后细胞抑制率(29.14%、38.71%、58.13%)比较,显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论六味地黄丸含药血清对HSV-tk/GCV自杀基因系统杀伤恶性黑色素瘤B16细胞的增效作用与缝隙连接机制有关,可能是通过提高Cx26和Cx43等缝隙连接蛋白表达而达到协同增效作用。

关键词：恶性黑色素瘤基因治疗自杀基因六味地黄丸血清药理学缝隙连接

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HPA轴编程及其有关表观遗传修饰机制与创伤后应激障碍发病的研究进展

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中国药理学通报 2017年第1期33卷 22-27页

作者：王宣尹吴丽丽严灿广州中医药大学基础医学院中医基础理论教研室广东广州510060

全世界范围内灾难性事件的频发使得创伤后应激障碍(PTSD)已经成为一个重要的公共卫生问题。作为一种与应激有关的精神性疾病,PTSD是基因和环境(尤其是早期负性经历)共同作用的结果,表观遗传修饰发挥着重要作用。基于下丘脑-垂体-肾上腺(... 详细信息

全世界范围内灾难性事件的频发使得创伤后应激障碍(PTSD)已经成为一个重要的公共卫生问题。作为一种与应激有关的精神性疾病,PTSD是基因和环境(尤其是早期负性经历)共同作用的结果,表观遗传修饰发挥着重要作用。基于下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴在PTSD发病中的核心作用,该文对国内外近年来有关HPA轴相关基因表观遗传学与PTSD发病之间关系的研究进行综述,以期为今后PTSD的防治提供思路和理论参考。

关键词：创伤后应激障碍下丘脑-垂体-肾上腺轴早期负性经历易感基因表观遗传学 DNA甲基化

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肝主疏泄调畅情志功能的中枢神经生物学机制探讨

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中国中西医结合杂志 2005年第5期25卷 459-462页

作者：严灿徐志伟广州中医药大学基础医学院中医基础理论教研室广州510405

结合中医整体观和平衡观以及现代心理应激理论,以心理应激反应为切入点,提出研究假说:中医学肝主疏泄调畅情志的功能存在着一定的具体的中枢神经生物学机制;采用“方—证—效—脏腑功能本质”的研究思路,通过建立慢性心理应激反应模型... 详细信息

结合中医整体观和平衡观以及现代心理应激理论,以心理应激反应为切入点,提出研究假说:中医学肝主疏泄调畅情志的功能存在着一定的具体的中枢神经生物学机制;采用“方—证—效—脏腑功能本质”的研究思路,通过建立慢性心理应激反应模型模拟“肝失疏泄、情志异常”的综合病理变化过程。就已取得的研究结果进行分析认为:肝主疏泄之所谓“疏泄”,其中枢神经生物学机制在整体上与调节下丘脑-垂体-肾上腺轴有关,具体而言,可能与调节慢性心理应激反应(情志活动异常)过程中中枢多种神经递质及其合成酶、神经肽、激素、环核苷酸系统以及Fos蛋白表达的变化有关,表现出多层次、多靶点以及多环节的作用特点;作用的脑区涉及到下丘脑(包括不同核团)海马,杏仁核等。

关键词：肝主疏泄中枢机制探讨下丘脑-垂体-肾上腺轴神经生物学机制心理应激反应 Fos蛋白表达心理应激理论环核苷酸系统中医整体观研究思路功能本质肝失疏泄模型模拟病理变化情志异常神经递质情志活动作用特点

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穴位敷贴对过敏性哮喘豚鼠血浆及支气管肺泡灌洗液前列腺素F_(2α)、E_2的影响

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中国中西医结合杂志 1999年第S1期19卷 93-94页

作者：赖新生李月梅陈芝喜陈津岩广州中医药大学针灸研究所广州510407 广州中医药大学基础医学院核医学教研室

本研究采用的敷贴疗法是在总结多年的“天灸”治哮经验基础上改进而来。缘其兼具针灸、中药双重治病优势,临床疗效满意。为探索穴位敷贴的治病机制,本研究以炎性介质为指标,在造成实验性豚鼠哮喘模型的基础上,观察穴位敷贴对前列腺素介... 详细信息

本研究采用的敷贴疗法是在总结多年的“天灸”治哮经验基础上改进而来。缘其兼具针灸、中药双重治病优势,临床疗效满意。为探索穴位敷贴的治病机制,本研究以炎性介质为指标,在造成实验性豚鼠哮喘模型的基础上,观察穴位敷贴对前列腺素介质的影响。材料和方法1 敷贴药物组成及制备麻黄20g 细辛10g 防风10g延胡索加g 甘遂10g 白芥子30g,将以上各药用微型粉碎机共研为末,充分混匀,置4℃冰箱备用。称之为赖氏Ⅰ号方。2 造模及分组方法健康雄性豚鼠(具一级动物合格证书,我院动物实验中心提供)25只,体重350～400g。

关键词：前列腺素过敏性炎性介质实验性分组方法正常组变态反应穴位敷贴支气管肺泡灌洗液哮喘豚鼠

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促肾上腺皮质激素释放激素受体在应激反应中的作用研究

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中国药理学通报 2006年第5期22卷 517-520页

作者：曾纯严灿徐志伟吴丽丽广州中医药大学基础医学院中医基础理论教研室广东广州510405

促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)是应激反应中的关键调节因子,协调应激过程中内分泌、自主神经、免疫和行为反应。CRH的作用是由其受体所介导的。目前已知的CRH受体有CRH-R1、CRH-R2、CRH-R3 3种。应激时,CRH主要通过CRH-R1、CRH-R2产生... 详细信息

促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)是应激反应中的关键调节因子,协调应激过程中内分泌、自主神经、免疫和行为反应。CRH的作用是由其受体所介导的。目前已知的CRH受体有CRH-R1、CRH-R2、CRH-R3 3种。应激时,CRH主要通过CRH-R1、CRH-R2产生一系列生理、病理效应。近年来通过对转基因动物、选择性CRH受体拮抗剂和特异性CRH受体激动剂等的应用,对CRH受体在应激中作用有了更深的了解,也进一步揭示了应激机制。

关键词：促肾上腺皮质激素释放激素受体应激

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