目的为研究UQCRB(ubiquinol-cytochrome c reductase binding protein)与中药的作用机制,本实验室进行了UQCRB基因的克隆、原核表达和纯化。方法提取人肝癌SMMC-7721细胞总RNA,反转录后采用特异引物进行PCR扩增获取UQCRB基因全长,产物...
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目的为研究UQCRB(ubiquinol-cytochrome c reductase binding protein)与中药的作用机制,本实验室进行了UQCRB基因的克隆、原核表达和纯化。方法提取人肝癌SMMC-7721细胞总RNA,反转录后采用特异引物进行PCR扩增获取UQCRB基因全长,产物纯化后连入T载体测定正确,克隆经NheI、XhoI双酶切后连入PET28a(+)载体,构建PET28a(+)-UQCRB原核表达质粒。在BL21(DE3)宿主菌中表达超声处理后,应用Amicon○R Pro Affinity Concentration Kit-Ni-NTA纯化,表达及纯化产物用westernblot验证。结果构建了PET28a(+)-UQCRB表达质粒,经过酶切鉴定和测序鉴定正确。重组UQCRB在BL21(DE3)中的最优表达条件为IPTG 1mM诱导5h。Westernblot证实了表达和纯化结果。结论重组UQCRB的原核表达和纯化成功,为进一步研究UQCRB的作用奠定了基础。
目的鼻咽癌患者生存质量量表从研制以来,在临床得到了广泛的应用。本研究采用国际标准化的程序,研制该量表的简短版量表(quality of life scale for nasopharyngeal carcinoma,QOL-NPC13)。方法研究步骤包括成立核心讨论组、确定理论模...
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目的鼻咽癌患者生存质量量表从研制以来,在临床得到了广泛的应用。本研究采用国际标准化的程序,研制该量表的简短版量表(quality of life scale for nasopharyngeal carcinoma,QOL-NPC13)。方法研究步骤包括成立核心讨论组、确定理论模型、语言调试、筛选条目、预实验和现场调查。采用横断面调查的方法开展现场调查。选择2014-06-01-2014-10-31在中山大学肿瘤防治中心接受治疗并经病理确诊的鼻咽癌患者为研究对象,调查患者的人口学资料、QOL-NPC13和FACT量表,1周左右用QOL-NPC13量表再次调查。评价QOL-NPC13的信度和效度。结果共纳入206例患者,平均年龄(43.8±11.6)岁,中位年龄为43.0岁。男性占74.3%,已婚占90.8%,74.8%患者来自广东。QOL-NPC13包括身体机能、心理精神状况、社会关系和毒副作用4个领域。所有条目都只有低比例的缺失。条目与自己领域得分的相关系数>0.6,差异有统计学意义,P<0.001。整个量表的α系数和分半信度系数>0.8,所有领域的组内相关系数≥0.9。模型的近似误差均方根为0.080,范拟和指数、非范拟和指数及相对拟和指数均>0.9。除了毒副作用领域(0.48),其他领域的校标系数均>0.7。不同放疗阶段患者的领域得分差异均有统计学意义,P<0.05。结论QOL-NPC13量表的内容效度能较好反映量表所要测量的内容,具有良好的信度和效度,可用于评价鼻咽癌患者的生存质量。
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