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补中益气汤通过Nrf2/ROS通路调控内质网应激改善A549细胞、A549/DDP细胞顺铂耐药的分子机制

中华中医药学刊 2025年第3期43卷 170-174,I0034页

作者：于丹牟琪瑞高原辽宁中医药大学病理学教研室辽宁沈阳110847

目的通过对补中益气汤调控Nrf2/ROS通路对A549细胞、A549/DDP细胞内质网应激的影响,探讨补中益气汤改善非小细胞肺癌顺铂耐药的分子机制。方法制备补中益气汤含药血清并培养A549细胞、A549/DDP细胞,并进行随机分组为A组(A549细胞)、B组(... 详细信息

目的通过对补中益气汤调控Nrf2/ROS通路对A549细胞、A549/DDP细胞内质网应激的影响,探讨补中益气汤改善非小细胞肺癌顺铂耐药的分子机制。方法制备补中益气汤含药血清并培养A549细胞、A549/DDP细胞,并进行随机分组为A组(A549细胞)、B组(A549细胞+20μg/mL顺铂)、C组(A549细胞+20μg/mL顺铂+10%补中益气汤含药血清)、D组(A549/DDP细胞)、E组(A549/DDP细胞+20μg/mL顺铂)、F组(A549/DDP细胞+20μg/mL顺铂+10%补中益气汤含药血清),应用CCK-8法检测各组细胞顺铂半数抑制浓度(IC50)值,DCFH-DA荧光探针法检测各组活性氧(ROS)含量,Western blot法检测各组细胞Nrf2、P-Nrf2、PERK、P-PERK、eIF2α、P-eIF2α、IRE1、XBP1的蛋白表达量。结果在A549细胞和A549/DDP细胞中,补中益气汤均可以显著下调其对顺铂的IC50值(P<0.05);两株细胞中,顺铂均可以上调Nrf2、P-Nrf2的蛋白表达,在补中益气汤干预后,二者表达量下调(P<0.05),且二者在A549/DDP细胞中表达较A549细胞更高(P<0.05);与空白组比较,顺铂可以上调两株细胞的ROS表达量(P<0.05),在联合了补中益气汤后ROS表达量进一步上调(P<0.05),且A549细胞的ROS表达量要显著高于A549/DDP细胞(P<0.05);PERK、eIF2α在各组细胞中表达无显著差异(P>0.05),在两株细胞中,顺铂能显著上调P-PERK、P-eIF2α、IRE1、XBP1、蛋白表达,在补中益气汤干预后表达再次上调(P<0.05),且A549细胞的内质网应激蛋白表达高于A549/DDP细胞(P<0.05)。结论补中益气汤可能通过Nrf2/ROS通路调控内质网应激改善A549细胞、A549/DDP细胞顺铂耐药。

关键词：补中益气汤非小细胞肺癌 Nrf2/ROS 内质网应激顺铂耐药

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原花青素B2对H_(2)O_(2)诱导的HT22细胞铁死亡的影响及机制研究

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中药药理与临床 2025年第1期41卷 77-84页

作者：苑舒文司建超陈雪齐珂杨胜昌河北中医药大学生理学教研室石家庄050091 河北省中医药结合氢医学技术创新中心石家庄050091 广州中医药大学基础医学院中西医结合基础研究中心广州510000

目的:探讨原花青素B2对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导小鼠海马神经元(HT22)细胞铁死亡的影响及机制。方法:以HT22细胞为研究对象,分为空白对照组、模型对照组、原花青素B2100μg/mL组、铁死亡诱导剂组和铁死亡诱导剂+原花青素B2100μg/mL组;... 详细信息

目的:探讨原花青素B2对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导小鼠海马神经元(HT22)细胞铁死亡的影响及机制。方法:以HT22细胞为研究对象,分为空白对照组、模型对照组、原花青素B2100μg/mL组、铁死亡诱导剂组和铁死亡诱导剂+原花青素B2100μg/mL组;CCK-8和LDH法筛选H_(2)O_(2)和原花青素B2的最佳作用浓度;试剂盒检测细胞内Fe^(2+)和总铁水平;ELISA法检测细胞内过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力或含量;透射电子显微镜观察细胞线粒体形态变化;免疫荧光法检测细胞内活性氧(ROS)积累水平;流式细胞术检测细胞线粒体膜电位变化;RT-qPCR和Western Blot检测细胞铁死亡标志物及核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)通路的mRNA和蛋白表达变化情况;确证H_(2)O_(2)能够诱导铁死亡的同时验证原花青素B2的保护作用,随后进一步探究原花青素B2改善HT22细胞铁死亡的分子机制。结果:与正常对照组相比,模型对照组细胞Fe^(2+)、总铁含量以及核受体辅活化子4(NCOA4)、环氧化酶-2(COX-2)、Nrf2、HO-1的蛋白及mRNA表达明显上调,膜铁转运蛋白l(FPN1)、铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白及mRNA表达明显下调,CAT、SOD、GSH-Px的含量明显降低,MDA含量和ROS的水平升高(P<0.05或P<0.01);与模型对照组相比,原花青素B2100μg/mL能够显著改善细胞内铁累积,增加CAT、SOD、GSH-Px的含量,降低MDA含量和ROS的水平,上调FPN1、FTH1、GPX4蛋白及mRNA的表达,下调NCOA4、COX-2蛋白及mRNA的表达,并进一步激活Nrf2、HO-1蛋白及mRNA的表达(P<0.05或P<0.01);经Fin56干预后,细胞铁死亡程度较H_(2)O_(2)组显著增强(P<0.05或P<0.01),原花青素B2处理后上述指标变化可见一定程度的改善(P<0.05或P<0.01)。结论:原花青素B2通过平衡细胞内的铁稳态和氧化应激水平,抑制脂质过氧化损伤,改善H_(2)O_(2)诱导的HT22细胞铁死亡,其作用机制可能与其激活Nrf2/HO-1通路有关。

关键词：原花青素B2 过氧化氢小鼠海马神经元细胞铁死亡氧化应激核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1通路

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对分课堂结合情境教学在病理学教学中的应用

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基础医学教育 2025年第2期27卷 115-119页

作者：于宁王哲井欢王莹高原潘茜于丹张新宇刘春英辽宁中医药大学中西医结合学院病理学教研室沈阳110847

病理学课程旨在以病理学的理论、方法和思维模式研究和阐释人类疾病的发病原因、病理机制、形态结构变化、疾病结局和转归,解释疾病的本质,为疾病诊断、治疗和预防提供理论和实践依据,是连接基础医学与临床医学的桥梁课程。为了更好地... 详细信息

病理学课程旨在以病理学的理论、方法和思维模式研究和阐释人类疾病的发病原因、病理机制、形态结构变化、疾病结局和转归,解释疾病的本质,为疾病诊断、治疗和预防提供理论和实践依据,是连接基础医学与临床医学的桥梁课程。为了更好地促进学生对病理学知识的掌握,辽宁中医药大学病理学教学团队改革教学方法,采用对分课堂结合情境教学模式,调动学生学习热情,依次从对分课堂结合情境教学模式下的教学设计、教学模式实施和成绩评定以及该教学模式下的优势进行讨论,推动具有“两性一度”的高质量病理学课程建设,为全面夯实学生医学基础理论知识和深入拓展临床实践打下了坚实基础。

关键词：病理学情境教学对分课堂教学模式教学改革

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孝道文化融入《伤寒论》《金匮要略》课程思政路径研究

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光明中医 2025年第3期40卷 574-576页

作者：徐玲焦锟高志红王林东杨斌胡荣卫北京中医药大学东方学院中医教研室河北沧州061199 北京中医药大学东方学院病理学教研室河北沧州061199 河北东方学院思政教研室河北廊坊065001 北京中医药大学东方学院马克思主义学院河北沧州061199

在多年《伤寒论》《金匮要略》教学工作中,笔者团队发现学生们的学习动力、实践意识和能力均有待提升,将孝道文化作为思政元素融入2门课程,通过增设孝道幻灯片和视频、为父母制作中医诊查健康档案、重点分享医者诊治父母病痛的医案、撰... 详细信息

在多年《伤寒论》《金匮要略》教学工作中,笔者团队发现学生们的学习动力、实践意识和能力均有待提升,将孝道文化作为思政元素融入2门课程,通过增设孝道幻灯片和视频、为父母制作中医诊查健康档案、重点分享医者诊治父母病痛的医案、撰写综述专题讲座、开展“为孝学中医,用中医行孝”活动等路径,来实现孝道思政与《伤寒论》《金匮要略》课程的有机结合。研究发现,孝道文化的融入对提升学习动力、实践意识、实践能力均有良好效果。

关键词：《伤寒论》《金匮要略》孝道课程思政

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吴茱萸碱对人肝癌细胞HepG2的生长抑制及诱导凋亡作用

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中国药理学通报 2009年第1期25卷 68-71页

作者：朱丽红刘小东谭宇蕙李杰芬杜标炎吴映雅广州中医药大学中医基础实验室广东广州510405 广州中医药大学生化教研室广东广州510405 广州中医药大学病理学教研室广东广州510405

目的探讨吴茱萸碱对人肝癌细胞HepG2的生长抑制、诱导凋亡和对细胞周期的影响。方法体外试验MIT法测存活率,DAPI染色观察细胞凋亡形态,流式细胞术、彗星电泳技术分析药物对DNA作用。结果吴茱萸碱能抑制人肝癌细胞HepG2的生长。用64、16... 详细信息

目的探讨吴茱萸碱对人肝癌细胞HepG2的生长抑制、诱导凋亡和对细胞周期的影响。方法体外试验MIT法测存活率,DAPI染色观察细胞凋亡形态,流式细胞术、彗星电泳技术分析药物对DNA作用。结果吴茱萸碱能抑制人肝癌细胞HepG2的生长。用64、16、4、1、0.25μmol.L-1浓度的吴茱萸碱处理HepG2细胞72 h的抑制率分别为74.0%、69.0%、60.5%、44.0%、16.4%。DAPI染色后吴茱萸碱组癌细胞均表现出较为典型的细胞凋亡特征。流式细胞仪检测1μmol.L-1吴茱萸碱作用24和36 h出现亚二倍体凋亡峰,细胞周期阻滞于G2/M期。凋亡率对照组为4%,1μmol.L-1吴茱萸碱作用12、24、36 h的凋亡率分别为4.4%、18.0%、30.3%。彗星电泳显示1μmol.L-1吴茱萸碱作用24和48 h后,细胞后面形成长的拖尾,平均光密度值较阴性对照组降低,彗星尾距较阴性对照组增加,且二者的改变与作用时间相关。结论吴茱萸碱能抑制人肝癌细胞HepG2的生长及诱导其凋亡。

关键词：吴茱萸碱细胞凋亡肝癌

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丹参注射液对自杀基因tk/GCV系统的协同增效作用

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中国药理学通报 2006年第3期22卷 291-295页

作者：谭宇蕙吴映雅王慧峰岳文玲杜标炎广州中医药大学生物化学教研室广东广州510407 广州中医药大学病理学教研室广东广州510407

目的探讨丹参注射液联合自杀基因系统对大鼠肝癌细胞和小鼠移植瘤的作用。方法 ①丹参注射液以不同浓度与GCV分别或共同作用于大鼠肝癌CBRH7919的tk^-细胞，以及含5％tk^＋的tk^＋、tk^-混合细胞，MTT法检测各组存活率，用Q值（实测药... 详细信息

目的探讨丹参注射液联合自杀基因系统对大鼠肝癌细胞和小鼠移植瘤的作用。方法 ①丹参注射液以不同浓度与GCV分别或共同作用于大鼠肝癌CBRH7919的tk^-细胞，以及含5％tk^＋的tk^＋、tk^-混合细胞，MTT法检测各组存活率，用Q值（实测药效与理论药效的比值）分析中药与自杀基因系统联合的相互作用是否有协同性，0．85≤Q〈1．15为相加；Q≥1．15为协同。②把小鼠肝癌细胞H22／tk（tk^＋）与H22（tk^-）细胞按1：4混合，再按2×10^6细胞/只接种到Balb／c纯系小鼠腋下皮下组织内，随机分为模型组、丹参（注射液）组、tk／GCV组、tk／GCV联合丹参注射液治疗的联合组，n=9～11；中药治疗从d2起共15d，自杀基因系统治疗从长出肿瘤后开始共10d，进行疗效观察。结果 ①各组存活率tk／GCV组为63．10％±2．17％，GCV组为67．03％±2．81％，5ml·L^-1丹参联合tk／GCV组为26．67％±4．23％（Q=1．22），5ml·L^-1丹参＋GCV组为42．17％±5．36％（Q=1．04）；10ml·L^-1丹参联合tk／GCV组为18．10％±5．56％（Q=1．26），10ml·L^-1丹参＋GCV组为33．84％±9．84％（Q=1．06）。②接种后各组均在d7触摸到肿瘤，成瘤率100％。联合组在治疗后肿瘤生长呈现明显抑制，最终肿瘤体积（1．53±0．88）cm^3，比模型组（3．19±1．76）cm^3减少52．01％（P〈0．05）；肿留质量（1．32±0．80）g，比模型组（2．28±1．20）g减少42．11％（P〈0．05），差异有统计学意义。丹参组、tk／GCV组肿瘤体积、瘤块质量与模型组比较差异均无统计学意义。结论丹参注射液能提高自杀基因系统对大鼠肝癌细胞的杀伤力和对小鼠肝癌细胞移植瘤的抑制作用，两者联合作用的协同性提示丹参注射液能增强自杀基因旁观者效应。

关键词：丹参自杀基因旁观者效应肝肿瘤

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染色体移动复合物的结构、定位与功能

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遗传 2011年第6期33卷 576-584页

作者：戴建国郑慧华张平南京中医药大学病理学教研室南京210029 浙江中医药大学病理学教研室杭州310053

染色体移动复合物主要由蛋白激酶Aurora B、内层着丝粒蛋白、存活蛋白及蛋白Borealin组成。它在细胞分裂的不同阶段,能及时精确地定位到相关部位并作用于相应底物;具有调节染色质组蛋白磷酸化,控制姐妹染色单体的粘着、分离,参与分裂纺... 详细信息

染色体移动复合物主要由蛋白激酶Aurora B、内层着丝粒蛋白、存活蛋白及蛋白Borealin组成。它在细胞分裂的不同阶段,能及时精确地定位到相关部位并作用于相应底物;具有调节染色质组蛋白磷酸化,控制姐妹染色单体的粘着、分离,参与分裂纺锤体组装及其对染色体的捕捉,纠正动粒与微管间不适当附着,将染色体精确分配到子细胞及促进胞浆分离等重要功能。文章简要介绍了染色体移动复合物的结构成分,在染色体臂部、内层着丝粒及纺锤体中区的定位过程,及其定位在不同部位的相应功能。

关键词： Aurora B 内层着丝粒蛋白存活蛋白 Borealin 驱动蛋白胞浆分离

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山奈酚对人胃癌MGC-803细胞的生长抑制及诱导凋亡作用

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肿瘤 2010年第6期30卷 477-480页

作者：杜标炎周瑶谭宇蕙吴映雅刘晶晶刘喜娟广州中医药大学病理学教研室广州510006 广州中医药大学基础医学院研究生部广州510006 广州中医药大学生化教研室广州510006

目的:探讨山奈酚(kaempferol)对人胃癌MGC-803细胞的生长抑制作用,以及诱导细胞凋亡和对细胞周期的影响。方法:采用MTT法检测细胞存活率;DAPI染色法观察细胞的凋亡形态;彗星电泳技术和FCM检测不同浓度山奈酚对细胞中DNA的影响。结果:山... 详细信息

目的:探讨山奈酚(kaempferol)对人胃癌MGC-803细胞的生长抑制作用,以及诱导细胞凋亡和对细胞周期的影响。方法:采用MTT法检测细胞存活率;DAPI染色法观察细胞的凋亡形态;彗星电泳技术和FCM检测不同浓度山奈酚对细胞中DNA的影响。结果:山奈酚体外能明显抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖。用不同浓度(6.25、12.5、25、50和100μmol/L)的山奈酚处理MGC-803细胞72h后,细胞的生长抑制率分别为10.32%、13.95%、21.58%、35.18%和58.13%,各药物处理组与对照组比较,P值均<0.01,呈剂量效应关系。50和100μmol/L山奈酚分别作用细胞24、48、72和96h后,结果显示药物作用的时间越长,对细胞的抑制作用越强,呈时间效应关系。DAPI染色结果显示,不同浓度药物组的细胞均有明显的细胞凋亡特征。30、60和120μmol/L山奈酚作用于细胞72h后,彗星电泳检测结果显示细胞后面均呈现拖尾现象,细胞头部平均光密度值较阴性对照组降低,彗星尾距较阴性对照组增加,各药物组与对照组比较,P值均<0.01,且与药物浓度呈相关性。FCM检测结果显示,浓度为30、60和120μmol/L的山奈酚作用于细胞72h后,出现亚二倍体凋亡峰,细胞周期被阻滞于S期和G2/M期,各药物组凋亡率较阴性对照组均明显升高。结论:山奈酚能抑制人胃癌细胞MGC-803的增殖并诱导其凋亡。

关键词：胃肿瘤山奈酚类细胞凋亡 MGC-803细胞

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补肾活血泄浊汤治疗微小病变肾病的实验研究

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中国中西医结合杂志 2001年第9期21卷 692-695页

作者：张悦魏民王谦楚非严京李伯光贾旭北京中医药大学病理学教研室

目的 :探讨中药补肾活血泄浊汤对大鼠微小病变肾病的治疗作用及其机制。方法 :采用一次性尾静脉注射阿霉素法复制大鼠的微小病变肾病模型 ,分为补肾活血泄浊汤治疗组、模型组和正常组。动态观察中药补肾活血泄浊汤对肾功能、血液流变学... 详细信息

目的 :探讨中药补肾活血泄浊汤对大鼠微小病变肾病的治疗作用及其机制。方法 :采用一次性尾静脉注射阿霉素法复制大鼠的微小病变肾病模型 ,分为补肾活血泄浊汤治疗组、模型组和正常组。动态观察中药补肾活血泄浊汤对肾功能、血液流变学、肾组织β1型转化生长因子 (TGF β1)表达及肾小球基底膜阴离子位点的影响。结果 :治疗组各项指标与模型组比较 ,差异均有显著性 ,形态学观察也显示治疗组损害轻于模型组。结论 :补肾活血泄浊汤具有改善肾功能、缓解血液高凝、高粘状态 ,保护肾小球阴电荷屏障及延迟肾小球硬化发生的作用。

关键词：补肾活血泄浊汤微小病变肾病肾功能血液流变学病理变化实验研究

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脑糖原在脑能量代谢中的作用研究进展

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中国药理学通报 2013年第7期29卷 908-913页

作者：张绘宇赵玉男王中立陈琳戴建国黄玉芳南京中医药大学病理学教研室江苏南京210046 广州医科大学病理学教研室广东广州510182

脑糖原的含量远远小于肝糖原和肌糖原,但却是脑葡萄糖含量的几倍。脑糖原浓度可高达10μmol.g-1,大大超乎人们以往的认识。目前对于脑糖原的作用还不完全清楚,其含量受到神经递质、激素、神经元活动等因素影响。现阶段的研究表明,脑糖... 详细信息

脑糖原的含量远远小于肝糖原和肌糖原,但却是脑葡萄糖含量的几倍。脑糖原浓度可高达10μmol.g-1,大大超乎人们以往的认识。目前对于脑糖原的作用还不完全清楚,其含量受到神经递质、激素、神经元活动等因素影响。现阶段的研究表明,脑糖原是非常重要的脑能量储备和脑活动的物质基础。脑糖原主要储存于星形胶质细胞中,是神经元活动的主要能量来源。在睡眠和麻醉时积累脑糖原,清醒时消耗脑糖原,特别是神经元轴突活动激烈时迅速消耗脑糖原。在胰岛素诱发低血糖或脑缺血时,血源性葡萄糖供应不足,星形胶质细胞中糖原源性乳酸为神经元的活动和生存提供能量。糖原异常还可引起抑郁症、糖原贮积病、阿尔采末病、癫痫和拉福拉病等疾病。

关键词：糖原乳酸星形胶质细胞神经元脑能量储备

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