检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2024年第24期49卷 6763-6772页

作者：吴迎朝崔佳琦王慧皮大锦陈利国欧阳明子陈前军广州中医药大学第二附属医院中医证候全国重点实验室广东广州510120 暨南大学中医学院广东广州510632 广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405

该研究探讨阿霉素化疗引起神经毒性的病理机制及中医药的干预方法。选择BALB/c小鼠通过原位注射4T1三阴性乳腺癌细胞建立荷瘤小鼠模型,随机分组后进行阿霉素化疗或阿霉素化疗加开心散干预;通过病理学检测观察小鼠前额叶皮质的病变情况,... 详细信息

该研究探讨阿霉素化疗引起神经毒性的病理机制及中医药的干预方法。选择BALB/c小鼠通过原位注射4T1三阴性乳腺癌细胞建立荷瘤小鼠模型,随机分组后进行阿霉素化疗或阿霉素化疗加开心散干预;通过病理学检测观察小鼠前额叶皮质的病变情况,通过长链非编码RNA测序获取病变的信息,通过蛋白质免疫印迹和生化指标检测确定病变的发生。此外,分别利用神经母细胞瘤细胞和小胶质细胞构建体外模型,使用含药血清和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)去磷酸化抑制剂进行干预,进一步验证动物实验结果的准确性。病理结果显示开心散可以缓解阿霉素诱导的前额叶皮质神经元退行性病变,长链非编码RNA测序提示神经元病变和开心散干预过程与铁死亡、免疫性疾病、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路等相关,蛋白质印迹和生化指标检测确定此过程与激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)信号通路减轻神经元的铁死亡和胶质细胞的免疫反应直接相关。综上研究表明,开心散通过激活AMPK信号通路,减轻神经元的铁死亡和胶质细胞的免疫反应,最终缓解阿霉素诱导的神经毒性。

关键词：开心散 AMPK信号通路阿霉素神经毒性免疫反应铁死亡

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基于代谢组学探索小檗碱对APC^(min/+)小鼠结直肠腺瘤的作用机制

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中草药 2024年第22期55卷 7736-7745页

作者：杨庆万周松陈春兰张海波肖政华贵州中医药大学第二临床医学院贵州贵阳550025 广州中医药大学第二附属医院省部共建中医湿证国家重点实验室广东广州510120 贵州中医药大学第二附属医院消化内科贵州贵阳550001

目的探讨小檗碱抑制APC^(min/+)小鼠结直肠腺瘤的作用机制。方法随机取8只C57BL/6小鼠作为对照组,将APC^(min/+)小鼠随机分为模型组和小檗碱低、高(50、100 mg/kg)剂量组,每组8只,60%高脂饲料饲养,持续给药10周,观察结直肠肿瘤数量、... 详细信息

目的探讨小檗碱抑制APC^(min/+)小鼠结直肠腺瘤的作用机制。方法随机取8只C57BL/6小鼠作为对照组,将APC^(min/+)小鼠随机分为模型组和小檗碱低、高(50、100 mg/kg)剂量组,每组8只,60%高脂饲料饲养,持续给药10周,观察结直肠肿瘤数量、最大肿瘤直径;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察结直肠病理表现,免疫组化观察结直肠ki67、p53阳性率;高分辨非靶向代谢组学检测各组血清代谢物,运用正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis, OPLS-DA)筛选差异代谢物,对差异代谢物进行功能富集分析;RT-qPCR检测结直肠组织中鸟氨酸转氨甲酰酶(ornithine transcarbamylase,OTC)、精氨酸酶1/2(arginase 1/2,ARG1/2)、一氧化氮合酶2(nitric oxide synthase2,NOS2)、精氨酸代琥珀酸裂解酶(argininosuccinate lyase,ASL)m RNA表达水平。结果小檗碱可以显著减少APC^(min/+)小鼠结直肠肿瘤数量与最大肿瘤直径,改善肠道非典型增生和炎性浸润,抑制ki67和p53阳性表达率(P<0.001);代谢组学结果发现,与对照组比较,模型组小鼠有145个差异代谢物,与模型组比较,小檗碱组小鼠有51种差异代谢物,功能富集分析显示精氨酸生物合成途径代谢物DL-谷氨酸、L-瓜氨酸、N-乙酰-L-谷氨酸、N-α-乙酰-L-鸟氨酸在模型组小鼠血清中上调,小檗碱治疗后下调;RT-qPCR结果显示,与对照组比较,模型组小鼠肠道中OTC的m RNA表达水平下降(P<0.001),ARG1、ARG2、NOS2的m RNA表达升高(P<0.001);与模型组比较,小檗碱低、高(50、100 mg/kg)剂量组可以恢复OTC m RNA表达(P<0.001)、抑制ARG1、ARG2、NOS2的m RNA表达水平(P<0.001)。结论小檗碱对结直肠腺瘤的治疗作用可能与抑制血清精氨酸合成、调控精氨酸代谢关键基因表达有关。

关键词：小檗碱结直肠腺瘤 APC^(min/+)小鼠精氨酸代谢组学

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白术精油对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

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中成药 2024年第7期46卷 2365-2370页

作者：李红霞叶泽婷聂裕桐苏祖清郑广娟广州中医药大学第二附属医院省部共建中医湿证国家重点实验室广东广州510006 粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室广东广州510120 广州中医药大学第二附属医院中药药理研究实验室广东广州510006

目的探讨白术精油对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养HepG2、MHCC97-L、MHCC97-H肝癌细胞,给予不同质量浓度白术精油干预,通过MTT法检测细胞存活率,平板克隆实验检测细胞增殖活性,Hoechst33342染色观察凋亡细胞形态及数目,流式... 详细信息

目的探讨白术精油对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养HepG2、MHCC97-L、MHCC97-H肝癌细胞,给予不同质量浓度白术精油干预,通过MTT法检测细胞存活率,平板克隆实验检测细胞增殖活性,Hoechst33342染色观察凋亡细胞形态及数目,流式细胞术检测细胞凋亡率,Westernblot法检测细胞Bax、Bcl-2、cleavedcaspase-3和cleavedPARP蛋白表达。结果MTT和平板克隆实验结果显示,白术精油可剂量依赖性地降低HepG2、MHCC97-L和MHCC97-H肝癌细胞存活率和增殖能力(P<0.05,P<0.01)。Hoechst33342染色和流式细胞术结果显示,白术精油可剂量依赖性地促进HepG2和MHCC97-H肝癌细胞凋亡(P<0.05,P<0.01)。Westernblot实验结果显示,白术精油可升高HepG2和MHCC97-H肝癌细胞中cleavedcaspase-3、cleavedPARP和Bax蛋白表达(P<0.05,P<0.01),降低Bcl-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论白术精油可能通过诱导肝癌细胞凋亡,从而发挥抑制其增殖活性的作用。

关键词：白术精油肝癌细胞增殖凋亡 Bax/Bcl-2 cleavedcaspase-3

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定志小丸对卒中后认知障碍模型小鼠PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α通路的影响

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中国实验方剂学杂志 2025年第5期31卷 1-11页

作者：张晗王宇钟晓琴宁振求胡达峰邓敏贞广州中医药大学第二附属医院/广东省中医院/广东省中医药科学院中医证候全国重点实验室广州510120 广东省中医急症研究重点实验室广州510120 广州中医药大学广州510006 深圳市宝安区中医院/广州中医药大学附属宝安中医院广东深圳518100 广州医科大学附属第一医院广州510120

目的:研究定志小丸(DZXW)对卒中后认知障碍(PSCI)模型小鼠的作用机制。方法:小鼠脑缺血再灌注损伤模型建立采用大脑中动脉闭塞法。将40只C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、DZXW低剂量组(1.43 g·kg^(-1))和DZXW高剂量组(2.... 详细信息

目的:研究定志小丸(DZXW)对卒中后认知障碍(PSCI)模型小鼠的作用机制。方法:小鼠脑缺血再灌注损伤模型建立采用大脑中动脉闭塞法。将40只C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、DZXW低剂量组(1.43 g·kg^(-1))和DZXW高剂量组(2.56 g·kg^(-1)),每组10只。假手术组和模型组都进行等量的生理盐水灌胃处理,上述4组小鼠连续30 d灌胃,每天1次。采用Morris水迷宫实验评价小鼠学习记忆能力;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中淀粉样前体蛋白(APP)、淀粉样蛋白42(Aβ_(42))、乙酰胆碱酯酶(AChE)和超氧化物歧化酶(SOD)水平;原位末端标记法(TUNEL)检测小鼠海马神经元的细胞凋亡程度;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、缺氧诱导因子-1α亚单位(HIF-1α)、自噬效应蛋白1(Beclin1)、螯合体1(p62)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;普鲁士蓝染色检测海马组织的铁沉积情况;透射电镜观察小鼠海马神经元超微结构。结果:与假手术组比较,模型组的潜伏期、APP、Aβ_(42)、AChE、TUNEL阳性率、铁离子沉积、HIF-1α、Beclin1、Bax和LC3Ⅱ/Ⅰ显著增加(P<0.01),而穿越平台次数、SOD、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、p62和Bcl-2显著减少(P<0.01)。与模型组比较,DZXW各剂量组的潜伏期、APP、Aβ_(42)、AChE、TUNEL阳性率、铁离子沉积、HIF-1α、Beclin1、Bax和LC3Ⅱ/Ⅰ明显减少(P<0.05),而穿越平台次数、SOD、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、p62和Bcl-2明显增加(P<0.05)。结论:DZXW可以通过调节PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α自噬信号通路来减缓PSCI模型小鼠因氧化应激加重海马神经元损伤诱导的认知障碍。

关键词：定志小丸痴呆磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子-1α亚单位(HIF-1α)通路缺血性中风缺血再灌注

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中医扶正治疗策略对脓毒症预后影响的病例对照研究

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中华中医药杂志 2024年第12期39卷 6898-6905页

作者：叶家荣刘云涛李际强李俊广州中医药大学第二临床医学院/广州中医药大学第二附属医院/广东省中医院广州510120 广东省中医急症研究重点实验室广州510120 广州中医药大学第一附属医院广州510405

目的:探讨中医扶正治疗策略在脓毒症临床诊疗实践中的应用情况及其对脓毒症28 d预后的影响。方法:采用回顾性病例对照试验设计,以2013—2018年于广东省中医院确诊并住院的脓毒症患者为研究对象,探讨不同因素与脓毒症患者28 d预后的关系... 详细信息

目的:探讨中医扶正治疗策略在脓毒症临床诊疗实践中的应用情况及其对脓毒症28 d预后的影响。方法:采用回顾性病例对照试验设计,以2013—2018年于广东省中医院确诊并住院的脓毒症患者为研究对象,探讨不同因素与脓毒症患者28 d预后的关系。结果:脓毒症患者的年龄越大、序贯器官衰竭(SOFA)评分及Charlson并发症指数(CCI)评分越高、致病因素为呼吸系统感染、住院期间接受输血浆、无创通气、心肺复苏、肾上腺素或参附注射液等治疗的比例越高,患者28d死亡风险越大;而致病因素为泌尿生殖感染、血流感染、肝胆感染或皮肤感染、住院期间接受连续肾脏替代疗法(CRRT)或透析、补虚药或黄芪注射液等治疗的比例越高,患者的28 d死亡风险则较小。结论:早期对感染部位进行识别,并运用扶正治疗策略有助于降低脓毒症患者的病死率,改善脓毒症患者的预后。

关键词：脓毒症中医扶正治疗策略病例对照预后 Logistic分析

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天灸散穴位贴敷治疗支气管哮喘前期的随机对照研究

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中国全科医学 2025年第11期28卷 1367-1375,1382页

作者：郭鑫周明娟范斐婷肖晶旻池逸和吴蕾林琳陈远彬广州中医药大学第二临床医学院/省部共建中医湿证国家重点实验室广东省广州市510120 粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室广州中医药大学第二附属医院广东省广州市510120 广东省中医证候临床研究重点实验室广州中医药大学第二附属医院广东省广州市510120

背景支气管哮喘(以下简称哮喘)前期是哮喘的疾病前状态,研究表明此类患者可能更易发展为哮喘,然而目前尚缺乏有效的干预手段。目的评价天灸散穴位贴敷治疗哮喘前期的临床疗效与安全性,形成哮喘前期的中医治未病外治方案。方法本研究采... 详细信息

背景支气管哮喘(以下简称哮喘)前期是哮喘的疾病前状态,研究表明此类患者可能更易发展为哮喘,然而目前尚缺乏有效的干预手段。目的评价天灸散穴位贴敷治疗哮喘前期的临床疗效与安全性,形成哮喘前期的中医治未病外治方案。方法本研究采用随机、双盲、安慰剂平行对照试验设计。病例来源于2016-08-01—2019-12-31在广东省中医院就诊的123例哮喘前期患者,随机分配为试验组62例和对照组61例。观察期间试验组完成50例,脱落12例;对照组完成38例,脱落22例,剔除1例(合并支气管扩张症)。试验组(50例)给予天灸散穴位贴敷,对照组(38例)给予安慰剂穴位贴敷。疗程24周,治疗结束后随访24周。比较两组患者治疗前(V1访视)、治疗第12周(V2访视)、第24周(V3访视)及第48周随访结束(V4访视)时的主要结局指标(支气管激发/舒张试验转阴率)及次要结局指标[支气管激发/舒张试验阳性率,肺功能第1秒用力呼气末容积(FEV_(1))和小气道功能指标,中医症状积分,健康状况调查问卷(SF-36)评分,血清嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)和嗜酸性粒细胞比例(EOS%),血清总免疫球蛋白IgE(总IgE)水平]。治疗期间观察不良事件发生情况。结果V2访视、V3访视、V4访视时试验组支气管激发/舒张试验转阴率(66.1%、64.5%、58.1%)高于对照组(47.5%、44.3%、36.1%)(P<0.05);组别对支气管舒张试验FEV1变化值主效应显著(P_(组间)<0.05),V4访视时试验组支气管舒张试验FEV1变化值小于对照组(P<0.05);V2访视、V3访视时试验组呼气峰值流量(PEF)治疗前后差值大于对照组(P<0.05);V4访视时试验组SF-36的生理机能(PF)、生理职能(RP)维度评分高于对照组(P<0.05);治疗前试验组总体健康(GH)维度评分低于对照组(P<0.05),治疗后两组GH维度评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);V2访视、V3访视、V4访视时试验组中医证候总积分低于对照组,但组间差异无统计学意义(P>0.05);V1访视两组血清ECP水平组间比较,差异无统计学意义(P>0.05),V3访视时试验组血清ECP高于对照组(P<0.05),V1访视、V3访视时两组血清EOS%水平及差值、ECP差值和血清总IgE水平及差值组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组不良事件发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论天灸散穴位贴敷有效提高哮喘前期患者的支气管激发/舒张试验转阴率,增加PEF,减少支气管舒张试验后FEV1变化值,改善生活质量,且安全性好。

关键词：支气管哮喘中医外治法中药穴位贴敷随机对照试验

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定志小丸对血管性痴呆小鼠PINK1/PARKIN/MEF2D线粒体自噬通路的影响

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中药新药与临床药理 2025年第3期36卷 328-337页

作者：邓敏贞王宇宁振求胡达峰王凯王成毅孙景波程骁中医证候全国重点实验室/广州中医药大学第二附属医院广东广州510120 广东省中医急症研究重点实验室广东广州510120 广州中医药大学广东广州510006

目的研究定志小丸对血管性痴呆(VD)小鼠PTEN诱导假定激酶1(PINK1)/E3泛素连接酶PARK2(PARKIN)/肌细胞增强因子2D(MEF2D)线粒体自噬通路的影响。方法采用双侧颈总动脉夹闭再灌注方法复制VD小鼠模型。将ICR小鼠随机分为假手术组、模型组... 详细信息

目的研究定志小丸对血管性痴呆(VD)小鼠PTEN诱导假定激酶1(PINK1)/E3泛素连接酶PARK2(PARKIN)/肌细胞增强因子2D(MEF2D)线粒体自噬通路的影响。方法采用双侧颈总动脉夹闭再灌注方法复制VD小鼠模型。将ICR小鼠随机分为假手术组、模型组、盐酸多奈哌齐组(1 mg·kg^(-1),灌胃给药)、PINK1抑制剂组(20 mg·kg^(-1)环孢菌素A,腹腔注射给药)及定志小丸低、中、高剂量组(0.71、1.43、2.56 g·kg^(-1),灌胃给药),每组6只,每天1次,连续给药4周。采用Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力;ELISA法检测海马组织乙酰胆碱酯酶(AchE)、活性氧(ROS)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、紧密连接蛋白1(ZO-1)水平及血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、中枢神经特异性蛋白(S100β)水平;qRT-PCR及Western Blot法检测海马组织中PINK1、PARKIN、MEF2D、Bcl-2同源结构域蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)、螯合体1(p62)mRNA及蛋白表达水平;HE及尼氏染色法观察海马组织病理变化。结果与假手术组比较,模型组小鼠的逃逸潜伏期显著延长(P<0.01),穿越平台次数显著减少(P<0.01);海马组织AchE、ROS、IL-1β、TNF-α水平显著升高(P<0.01),GPX4、ZO-1水平显著降低(P<0.01);血清NSE、MMP9、S100β水平显著升高(P<0.01);海马组织中PINK1、PARKIN、Beclin-1、LC3B mRNA及蛋白表达显著上调(P<0.01),MEF2D、p62 mRNA及蛋白表达显著下调(P<0.01);海马CA1区神经元排列疏松,细胞核呈三角形或不规则形状,或出现溶解现象,细胞出现较为明显的变性;海马CA1区的尼氏体数量和层数明显减少,排列较为紊乱,甚至出现空泡结构。与模型组比较,各给药组小鼠的逃逸潜伏期显著缩短(P<0.01),穿越平台次数显著增加(P<0.01);海马组织AchE、ROS、IL-1β、TNF-α水平显著降低(P<0.01),GPX4、ZO-1水平显著升高(P<0.01);血清NSE、MMP9、S100β水平显著降低(P<0.01);海马组织中PINK1、PARKIN、Beclin-1、LC3B mRNA表达显著下调(P<0.01),MEF2D、p62 mRNA表达显著上调(P<0.01);小鼠海马CA1区神经元排列更为紧密,核固缩现象有所缓解,发生变性的细胞数量减少;海马CA1区的尼氏体数量均有所增加,细胞层数损失减少,排列相对紧密有序。与模型组比较,定志小丸各剂量组及PINK1抑制剂组小鼠海马组织中PINK1、PARKIN蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01);定志小丸各剂量组的Beclin-1蛋白表达显著下调(P<0.01),p62蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01);定志小丸中、高剂量组及PINK1抑制剂组的MEF2D蛋白表达显著上调(P<0.01);定志小丸中、高剂量组的LC3B蛋白表达显著下调(P<0.01)。结论定志小丸对VD小鼠具有海马神经元保护作用,能降低氧化应激和炎症反应,其机制可能与调控PINK1/PARKIN/MEF2D线粒体自噬通路相关。

关键词：定志小丸血管性痴呆 PINK1/PARKIN/MEF2D通路线粒体自噬氧化应激炎症反应小鼠

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外周血单核细胞预测老年重症流感风险模型的建立及靶向中药预测

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中草药 2024年第10期55卷 3420-3432页

作者：黎祖鸣封杰妮符珊珊陈俊旭甘考卢月陈剑坤刘云涛杨荣源李际强黄涛亮广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院) 广东广州510120 广东省中医急症研究重点实验室广东广州510120 中医证候全国重点实验室广东广州510120

目的综合分析老年流感单细胞转录组测序(single cell transcriptome sequencing,scRNA-seq)和转录组测序(transcriptome sequencing,RNA-seq)数据集,构建老年重症流感风险预测模型,并预测调控相关免疫细胞群的中药。通过统计分析中药的... 详细信息

目的综合分析老年流感单细胞转录组测序(single cell transcriptome sequencing,scRNA-seq)和转录组测序(transcriptome sequencing,RNA-seq)数据集,构建老年重症流感风险预测模型,并预测调控相关免疫细胞群的中药。通过统计分析中药的性味归经、药物分类,为中医药治疗老年流感提供理论支持。方法通过scRNA-seq和RNA-seq数据集得到具有较高预测能力的老年流感相关免疫细胞群及其关键基因。基因本体生物学过程(gene ontology biological process,GOBP)、标志性基因集(Hallmark gene set)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)和Reactome生物通路知识库富集分析揭示关键基因参与的生物过程及通路。循环算法用于构建老年重症流感风险预测模型。CTD和COREMINE数据库查找对关键基因有调控作用的化学成分及中药,并通过古今医案云平台统计高频中药的性味归经、药物分类。结果单核细胞及其相关基因对于老年流感具有较高的预测能力。老年流感单核细胞相关基因显著富集在感染、代谢和炎症免疫等生物过程及信号通路。5个基因(BCL6、PLSCR1、FCGR1A、RETN、RPL9)的组合可较为准确预测老年重症流感。根据参考文献筛选出42种化学成分,得到高频中药石斛、灵芝、地骨皮、人参、桑叶等;药性以平、寒、温为主;药味以甘、苦、辛为主;归经以肝、脾、肺经居多;以补虚药、清热药、利水渗湿药、解表药、活血化瘀药、消食药、止咳平喘药为主。结论单核细胞可能在老年流感中发挥重要作用。BCL6、PLSCR1、FCGR1A、RETN、RPL9可能是老年重症流感的潜在诊断及治疗靶标。通过生物信息学分析得出老年流感单核细胞相关基因及对应的高频中药,为治疗老年流感的中药新药开发及临床应用提供了新思路。

关键词：老年重症流感单细胞转录组转录组风险预测模型单核细胞石斛灵芝地骨皮人参桑叶

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小柴胡颗粒的化学成分及大鼠口服后的入血成分分析

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中国中药杂志 2024年第15期49卷 4078-4090页

作者：刘晓丽欧沛思林爱华刘奕明广州中医药大学第二临床医学院广东广州510006 广州中医药大学第二附属医院珠海医院广东珠海519000 广东省中医证候临床研究重点实验室广东广州510120

运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)技术及超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)对小柴胡颗粒化学成分及大鼠口服后的入血成分进行鉴定。采用CORTECS UPLC C^(+)_(18)色谱柱(2.1 mm... 详细信息

运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)技术及超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)对小柴胡颗粒化学成分及大鼠口服后的入血成分进行鉴定。采用CORTECS UPLC C^(+)_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.6μm),乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾离子源正、负离子模式下采集数据后与对照品比较保留时间、精确相对分子质量、二级离子碎片以及参照相关文献进行化学成分鉴别;通过皮下注射干酵母建立大鼠发热模型后,灌胃给予正常组及模型组大鼠小柴胡颗粒,给药后于不同时间点眼眶静脉取血,分离血浆,在多反应监测模式(MRM)下进行扫描鉴定入血成分。从小柴胡颗粒中共初步鉴定出112种化学成分,包括63种黄酮类、31种皂苷类、6种有机酸类、4种苯丙素类、3种氨基酸类以及5种其他类化合物;从血浆中鉴定得到18个入血原型成分。该研究鉴定了小柴胡颗粒化学成分及入血成分,为进一步的药效物质基础及质量控制研究奠定了基础。

关键词：小柴胡颗粒化学成分入血成分 UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS UPLC-MS/MS

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基于单细胞转录组探讨新型冠状病毒感染后慢性疲劳综合征与炎症反应、氧化应激、细胞凋亡之间分子机制及其潜在干预中药预测

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中草药 2024年第11期55卷 3774-3788页

作者：黎祖鸣封杰妮陈雪如卢月黄涛亮李际强杨荣源陈剑坤刘云涛广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 广州中医药大学第二附属医院(广东省中医院) 广东广州510120 中医证候全国重点实验室广东广州510120 广东省中医急症研究重点实验室广东广州510120

目的通过分析新型冠状病毒感染后(简称“新冠后”)慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome,CFS)患者与正常受试者的单细胞转录组数据,探讨新冠后CFS与炎症反应、氧化应激和细胞凋亡之间的分子机制,并预测调控关键基因的潜在中药,为治... 详细信息

目的通过分析新型冠状病毒感染后(简称“新冠后”)慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome,CFS)患者与正常受试者的单细胞转录组数据,探讨新冠后CFS与炎症反应、氧化应激和细胞凋亡之间的分子机制,并预测调控关键基因的潜在中药,为治疗新冠后CFS提供理论支持。方法使用R语言4.2.1中的“Seurat”包处理新冠后CFS患者与正常受试者的外周血单细胞测序数据,“CellChat”包进行细胞通讯分析,“scMetabolism”包评估细胞代谢特征,综合5种算法(AddModuleScore、AUCell、UCell、singscore和ssGSEA)计算新冠后CFS患者与正常受试者中5种免疫细胞炎症反应、氧化应激和细胞凋亡评分,并比较两者间的差异。使用“scCODE”包鉴定各类免疫细胞在正常受试者与新冠后CFS患者之间的差异表达(differential expression,DE)基因。Upset图分析得到新冠后CFS炎症反应相关基因(inflammatory response related genes,IRGs)、氧化应激相关基因(oxidative stress related genes,OSRGs)和细胞凋亡相关基因(apoptosis related genes,ARGs)。使用“ClusterProfiler”包分别对IRGs、OSRGs、ARGs进行基因本体生物学过程(gene ontology biological process,GOBP)富集分析。基于STRING数据库及Cytoscape软件构建“IRGs-OSRGs-ARGs”分子交互复杂网络,使用cytoHubba插件筛选关键基因。利用COREMINE数据库预测调控关键基因的中药,并通过古今医案云平台统计中药的性味归经、药物功效分类。结果共鉴定出5种免疫细胞,分别为B细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、NK细胞和单核细胞。相比于正常受试者,新冠后CFS患者的细胞通讯更为丰富且强度更大,两者之间并无明显差异的细胞代谢特征。新冠后CFS患者中各类免疫细胞的炎症反应、氧化应激和细胞凋亡评分普遍高于正常受试者。共得到33个IRGs、17个OSRGs和54个ARGs。“IRGs-OSRGs-ARGs”分子交互网络显示,IRGs、OSRGs和ARGs之间存在密切联系,最后鉴定出8个关键基因。干预中药药性以寒为主,温、平次之;药味以苦、辛、甘为主;归经以肝、脾、肺为主;功效分类以补虚药(甘草、人参等)、清热药(黄芩、鱼腥草等)、活血化瘀药(郁金、丹参等)为主。结论新冠后CFS患者存在异常的炎症反应、氧化应激和细胞凋亡状态,且三者之间密切关联。8个关键基因(TNF、BCL2、CTNNB1、CXCL8、IFNG、HIF1A、MCL1、CYCS)可能是新冠后CFS的潜在治疗靶标。临床治疗新冠后CFS应注重补虚药、清热药及活血化瘀等药物的配伍使用。

关键词：新型冠状病毒感染慢性疲劳综合征单细胞转录组炎症反应氧化应激细胞凋亡甘草人参黄芩鱼腥草郁金丹参

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