该研究旨在探讨心阳片调控脂肪量和肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)/N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)信号通路改善心力衰竭(heart failure,HF)心室重构的作用机制。体内研究采用主动脉弓缩窄术(trans...
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该研究旨在探讨心阳片调控脂肪量和肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)/N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)信号通路改善心力衰竭(heart failure,HF)心室重构的作用机制。体内研究采用主动脉弓缩窄术(transverse aortic constriction,TAC)建立HF小鼠模型,随机分为假手术组,模型组,心阳片低、中、高剂量组,阳性对照药培哚普利组,每组10只。术后第3天开始灌胃,连续6周。给药结束后,使用小动物超声检测小鼠心功能,RT-qPCR检测心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、B型利钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)、心肌肌球蛋白重链亚基(β-myosin heavy chain,β-MHC)、Ⅰ型胶原蛋白alpha链(collagen typeⅠalpha chain,Col1α)、Ⅲ型胶原蛋白alpha链(collagen typeⅢalpha chain,Col3α)、α-平滑肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)、FTO的m RNA相对表达量。马松(Masson)、麦胚凝集素(wheat germ agglutinin,WGA)染色对心脏组织进行病理切片检测。免疫组化法检测Col1α、Col3α、α-SMA、FTO在心肌组织的表达水平。试剂盒检测各组小鼠心肌组织m6A修饰水平。体外实验采用血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导H9c2心肌细胞肥大模型,筛选合适小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)以抑制FTO,通过RT-qPCR检测FTO以及心室重构相关基因的m RNA相对表达量,试剂盒检测细胞m6A修饰水平,蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)法检测心肌细胞磷酸化的磷脂酰肌醇3-激酶(phosphorylated phosphatidylinositol 3-kinase,p-PI3K)/磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated serine/threonine kinase,p-Akt)/蛋白激酶B(serine/threonine kinase,Akt)比值。体内研究结果显示,与模型组相比,心阳片各组小鼠的心功能和纤维沉积得到显著改善,FTO m RNA及蛋白表达水平升高,m6A修饰水平显著降低。体外研究结果显示,心阳片含药血清可以使心肌细胞FTO m RNA表达水平显著升高,m6A修饰水平、p-PI3K/PI3K及p-Akt/Akt的比值显著降低。此外,敲低FTO可逆转心阳片含药血清对AngⅡ诱导细胞肥大模型的改善作用。综上所述,心阳片可能通过调控FTO/m6A轴抑制PI3K/Akt信号通路的激活以发挥改善心室重构的作用。
目的代偿期乙型肝炎肝硬化显著门静脉高压患者发生食管胃静脉曲张(GOV)风险较大,通过评价不同无创诊断模型对GOV的诊断价值,为早期诊断GOV提供依据。方法选取2017年11月—2023年11月广东省中医院就诊的代偿期乙型肝炎肝硬化显著门静脉高压患者108例,根据胃镜下是否伴发GOV将患者分为GOV组和非GOV组(NGOV组)。收集患者的年龄、性别、影像学、实验室指标等结果。计数资料组间比较采用χ^(2)检验;正态分布的计量资料两组间比较采用成组t检验;非正态分布的数据两组间比较采用Mann-Whitney U检验。采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)评估FIB-4、LOK指数、LPRI、APRI、AAR等5种评分模型的诊断价值;利用二元Logistic回归构建联合模型,将联合模型与5种评分模型单独应用时的ROC曲线下面积(AUC)比较;采用Delong检验对各无创诊断模型的AUC值进行两两比较。结果GOV组55例,NGOV组53例。GOV组的年龄高于NGOV组[(52.64±1.44)岁vs(47.96±1.68)岁],ALT[42.00(24.00~117.00)U/L vs 82.00(46.00~271.00)U/L]、AST[44.00(32.00~96.00)U/L vs 62.00(42.50~154.50)U/L]、PLT[100.00(69.00~120.00)×109/L vs 119.00(108.50~140.50)×109/L]低于NGOV组,差异均有统计学意义(统计值分别为3.230、−3.065、−2.351、−3.667,P值均<0.05)。ROC曲线分析显示,FIB-4、LOK指数、LPRI、AAR单独诊断GOV的AUC分别为0.667、0.681、0.730、0.639(P值均<0.05),GOV阳性诊断率分别为69.97%、65.28%、67.33%、58.86%,AUC值比较差异均无统计学意义(P值均>0.05),APRI单独应用无诊断价值(P>0.05)。利用二元Logistic回归构建联合模型LAF,AUC为0.805,GOV阳性诊断率为75.80%,明显高于FIB-4、LOK指数、LPRI、AAR单独应用时的AUC值(Z值分别为−2.773、−2.479、−2.206、−2.672,P值均<0.05)。结论FIB-4、LOK指数、LPRI、AAR对代偿期乙型肝炎肝硬化显著门静脉高压患者发生GOV诊断价值相似,APRI单独应用无诊断价值,联合模型LAF的诊断效能最佳,对临床推广和应用具有一定参考价值。
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