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miR-140-5p/BCL2L1在HFOB1.19凋亡、自噬中的作用及补肾健脾活血方的影响

中国中药杂志 2025年第3期50卷 583-589页

作者：陈桐莹付赛李小韵刘树华杨贻富杨东升曾韵杰李扬博罗丹黄宏兴万雷广州中医药大学广东广州510006 广州中医药大学岭南医学研究中心中医骨伤科学实验室广东广州510006 广州中医药大学第三附属医院广东广州510378 广州中医药大学第二附属医院广东广州510006

骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种骨重建与骨形成失衡的老年性骨病,补肾健脾活血方针对肾虚脾虚血瘀的病机,以补肾健脾活血为法,对治疗OP有显著效果,微核糖核酸(microRNA,miRNA)、B细胞淋巴瘤-2样蛋白1(B-cell lymphoma-2-like protei... 详细信息

骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种骨重建与骨形成失衡的老年性骨病,补肾健脾活血方针对肾虚脾虚血瘀的病机,以补肾健脾活血为法,对治疗OP有显著效果,微核糖核酸(microRNA,miRNA)、B细胞淋巴瘤-2样蛋白1(B-cell lymphoma-2-like protein 1,BCL2L1)与骨细胞代谢密切相关,故该研究采用双荧光素酶法、聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测miR-140-5p与BCL2L1的结合情况;沉默或过表达miR-140-5p后,流式细胞术检测、蛋白免疫印迹(Western blot)观察人胎成骨细胞(human fetal osteoblast cell line 1.19,HFOB1.19)凋亡与自噬的发生与成骨功能;大鼠灌胃补肾健脾活血方后制备含药血清,采用不同浓度的补肾健脾活血方含药血清分别干预含或不含miR-140-5p micmi的HFOB1.19,观察各组细胞的成骨蛋白表达,研究miR-140-5p/BCL2L1在HFOB1.19凋亡、自噬中的作用,并观察补肾健脾活血方对其的影响。双荧光素酶检测显示miR-140-5p与BCL2L1结合;流式细胞术检测、Western blot检测结果显示miR-140-5p促进HFOB1.19细胞凋亡且miR-140-5p抑制HFOB1.19细胞自噬;高、中、低剂量补肾健脾活血方含药血清干预HFOB1.19后,与miR-140-5p NC组相比,miR-140-5p micmic组的成骨蛋白骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)表达下降,而高剂量干预下的micmic组骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)表达无明显差别。故miR-140-5p/BCL2L1可促进HFOB1.19凋亡与抑制自噬的发生,补肾健脾活血方可通过BMP2影响miR-140-5p的抑成骨作用。

关键词：骨质疏松症补肾健脾活血方 miR-140-5p BCL2L1 凋亡自噬

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血红素氧合酶1促进氧化应激条件下神经干细胞向神经元分化

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4931-4938页

作者：于庆贺蔡子鸣田禾李翩阮烨梁金柱林淑惠林文平广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院脊柱外科广东省深圳市518118 广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院广东省深圳市518118 广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院妇科广东省深圳市518118 广州中医药大学第三临床医学院广东省广州市510006

背景:研究表明,血红素氧合酶1能增强细胞的抗氧化、抗凋亡能力,但血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞增殖和分化的影响尚不清楚。目的:探讨血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞存活和分化能力的影响。方法:(1)... 详细信息

背景:研究表明,血红素氧合酶1能增强细胞的抗氧化、抗凋亡能力,但血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞增殖和分化的影响尚不清楚。目的:探讨血红素氧合酶1过表达对氧化应激条件下神经干细胞存活和分化能力的影响。方法:(1)从新生Balb/c小鼠脊髓组织中分离培养小鼠原代神经干细胞,免疫荧光检测神经干细胞标志物Nestin的表达;(2)采用慢病毒感染神经干细胞以诱导血红素氧合酶1过表达,流式检测绿色荧光蛋白荧光强度,Western blot检测血红素氧合酶1的表达水平;(3)在慢病毒感染神经干细胞培养基中添加H_2O_2以模拟脊髓损伤后的氧化应激微环境,采用细胞增殖检测试剂盒、细胞凋亡检测试剂盒和TUNEL染色试剂盒分析血红素氧合酶1过表达对神经干细胞增殖和凋亡水平的影响;(4)采用试剂盒检测脂质氧化标志物丙二醛、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平;(5)采用流式检测细胞内的活性氧水平以及神经干细胞向星形胶质细胞和神经元分化情况;(6)光学和荧光显微镜观察血红素氧合酶1过表达对神经干细胞分化的神经元轴突生长的影响。结果与结论:(1)小鼠神经干细胞球形态稳定,生长状态良好,免疫荧光检测Nestin呈阳性;(2)Western blot检测发现血红素氧合酶1过表达组神经干细胞中血红素氧合酶1的表达显著高于空载体对照组;流式检测血红素氧合酶1过表达组和空载体对照组神经干细胞均表达绿色荧光蛋白;(3)血红素氧合酶1过表达维持了神经干细胞在氧化应激条件下的增殖活力并显著减少了细胞凋亡数量;(4)血红素氧合酶1过表达抑制了氧化应激微环境下神经干细胞的脂质过氧化,增强了维持氧化-还原稳态的相关酶类表达,降低了细胞内的活性氧水平;(5)血红素氧合酶1过表达促进了神经干细胞向神经元分化,并抑制了向星形胶质细胞分化;(6)血红素氧合酶1过表达组的神经元轴突更长并且细胞间的连接更多。上述结果表明过表达血红素氧合酶1能减轻H_2O_2诱导的神经干细胞氧化损伤,抑制神经干细胞凋亡,促进神经干细胞增殖及向神经元细胞分化。

关键词：血红素氧合酶1 神经干细胞氧化应激脊髓损伤神经元凋亡轴突

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芒柄花素抑制脂多糖诱导髓核间充质干细胞的炎症反应

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中国组织工程研究 2025年第25期29卷 5328-5334页

背景:芒柄花素具有抗炎、抗氧化能力,但其对髓核间充质干细胞是否有保护作用尚不清楚。目的:探讨芒柄花素对炎症微环境下髓核间充质干细胞的作用及机制。方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取髓核间充质干细胞,流式细胞术鉴定间充质干细胞... 详细信息

背景:芒柄花素具有抗炎、抗氧化能力,但其对髓核间充质干细胞是否有保护作用尚不清楚。目的:探讨芒柄花素对炎症微环境下髓核间充质干细胞的作用及机制。方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取髓核间充质干细胞,流式细胞术鉴定间充质干细胞表面标志;②CCK-8法检测脂多糖、芒柄花素对髓核间充质干细胞增殖活力的影响,以确定后续处理细胞应用的芒柄花素浓度;③在DMEM/F-12完全培养基中添加5μg/mL脂多糖模拟炎症微环境,然后用不同浓度芒柄花素处理髓核间充质干细胞24 h,通过Western blot、实时荧光定量PCR、免疫荧光检测炎症标志物表达,Western blot检测核因子κB信号通路蛋白水平。结果与结论:①贴壁培养的髓核间充质干细胞呈梭形,生长状态良好,流式细胞术结果显示间充质干细胞表面标志物CD29、CD44、CD90呈阳性,造血干细胞表面标志物CD34、CD45呈阴性。②12.5,25,50,100,200μmol/L芒柄花素处理24 h对髓核间充质干细胞无明显增殖抑制效果。与脂多糖组相比,12.5,25,50μmol/L芒柄花素处理24 h后髓核间充质干细胞活力显著提高,因此后续选用12.5,25,50μmol/L为芒柄花素低、中、高浓度处理髓核间充质干细胞。③与脂多糖组相比,芒柄花素低、中、高浓度组髓核间充质干细胞中基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13、肿瘤坏死因子α蛋白和mRNA表达均明显降低(P<0.05),且具有剂量依赖性。④与脂多糖组相比,芒柄花素低、中、高浓度组髓核间充质干细胞中磷酸化核因子κB和磷酸化核因子κB抑制蛋白的表达显著降低(P<0.05),且具有剂量依赖性。上述结果说明芒柄花素可能通过抑制核因子κB信号通路减轻脂多糖诱导的大鼠髓核间充质干细胞炎症。

关键词：芒柄花素髓核间充质干细胞炎症椎间盘退变核因子κB

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临床铁代谢指标与骨密度的相关性分析

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中国骨质疏松杂志 2023年第5期29卷 651-654页

作者：肖云尚奇颜先伟张鹏招文华陈桂锋张学来秦威城戴新华江晓兵程英雄陈康任辉广州中医药大学广东广州510405 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广州中医药大学第三附属医院广东广州510405 深圳平乐骨伤科医院(深圳市坪山区中医院) 广东深圳518000

目的研究临床40周岁及以上患者骨密度与铁代谢相关指标的关系。方法纳入广州中医药大学第一附属医院二骨科40周岁及以上的住院患者208例,分为骨量正常组(64例)、骨量减少组(92例)和骨质疏松组(52例),测量患者的骨密度、血红蛋白、血... 详细信息

目的研究临床40周岁及以上患者骨密度与铁代谢相关指标的关系。方法纳入广州中医药大学第一附属医院二骨科40周岁及以上的住院患者208例,分为骨量正常组(64例)、骨量减少组(92例)和骨质疏松组(52例),测量患者的骨密度、血红蛋白、血清铁、转铁蛋白、γ-谷氨酰转肽酶等,进行各变量的组间比较及其与骨密度的相关性研究和回归分析。结果血红蛋白(P<0.001)、转铁蛋白(P=0.001)、γ-谷氨酰转肽酶(P<0.001)的组间差异具有统计学意义;血红蛋白、转铁蛋白与股骨大粗隆(r=0.493,P<0.001;r=0.243,P<0.001)及股骨干骨密度(r=0.319,P<0.001;r=0.331,P<0.001)明显相关,与L_(1)~L_(4)腰椎骨密度无明显相关;有序多元Logistic回归分析结果显示,年龄、性别、BMI、血红蛋白、转铁蛋白为骨质疏松的独立影响因素(分别为OR=1.06,P<0.001;OR=3.36,P<0.001;OR=0.82,P<0.001;OR=0.97,P=0.008;OR=0.27,P=0.021)。结论人体内铁蓄积与骨密度水平负相关,血红蛋白、转铁蛋白及γ-谷氨酰转肽酶是骨质疏松发生的重要影响因素。

关键词：骨质疏松骨密度血红蛋白转铁蛋白 γ-谷氨酰转肽酶

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补肾健脾活血方对骨质疏松大鼠肝脏脂肪病变的作用

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中国骨质疏松杂志 2024年第5期30卷 631-635,642页

作者：陈桐莹林适杨彬彬东智卓玛唐子佳吴建军刘树华林贤灿付赛黄佳纯林燕平李颖姜涛万雷黄宏兴广州中医药大学广东广州510405 广州中医药大学岭南医学研究中心中医骨伤科学实验室广东广州510405 广州中医药大学第三附属医院广东广州510405 广东省第二中医院广东广州510405

目的探索骨质疏松(osteoporosis,OP)模型大鼠的肝脏脂肪病变及补肾健脾活血方的作用。方法选取3月龄SPF级雌性大鼠24只,随机分为假手术组(n=6)、模型组(n=18);去卵巢后确定造模成功,随机抽取模型组12只大鼠,使用阿仑膦酸钠(n=6)和补肾... 详细信息

目的探索骨质疏松(osteoporosis,OP)模型大鼠的肝脏脂肪病变及补肾健脾活血方的作用。方法选取3月龄SPF级雌性大鼠24只,随机分为假手术组(n=6)、模型组(n=18);去卵巢后确定造模成功,随机抽取模型组12只大鼠,使用阿仑膦酸钠(n=6)和补肾健脾活血方(n=6)灌胃12周。取材后使用双能X线骨密度仪(dual-energy X-ray absorptiometry,DXA)检测骨密度(bone mineral density,BMD);microCT观察骨微结构;测量大鼠体重、肝脏重量及计算脂肪比;生化检测血清中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST);油红O染色、HE切片观察肝组织;免疫组化观察谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)。结果与假手术组对比,模型组的ALT、AST水平升高(P<0.05),腰椎骨密度下降(P<0.05);骨小梁数量明显减少,骨微结构受破坏;体重升高,脂肪比升高;肝脏重量升高,肝脏脂肪浸润明显,肝小叶不清晰,肝索不规则,GPX4表达下降;与模型组对比,补肾健脾活血方组脂肪浸润减轻,肝小叶较模型组清晰,肝索较为规则,GPX4表达上升,P<0.05。结论OP可能导致肝的脂肪病变,补肾健脾活血方可减缓去势后大鼠肝脏脂肪病变的能力。GPX4可能在OP与肝脏脂肪病变的发生发展间产生一定的作用。

关键词：骨质疏松脂肪补肾健脾活血方非酒精性脂肪肝

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基于CT坏死区重建的股骨头坏死侧位分型及其临床验证

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中国修复重建外科杂志 2023年第4期37卷 423-430页

作者：何敏聪何晓铭林天烨肖欢何伟魏秋实广州中医药大学第三附属医院关节中心广州510378 广东省中医骨伤研究院广州510378 毕节市中医院骨伤科贵州毕节551700

目的分析股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)不同日本厚生省骨坏死研究会(JIC)分型的股骨头塌陷与手术情况,总结各分型ONFH的预后规律,并对C1型探索基于CT坏死区重建的ONFH侧位分型的临床意义并验证其临床作用。方法以... 详细信息

目的分析股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)不同日本厚生省骨坏死研究会(JIC)分型的股骨头塌陷与手术情况,总结各分型ONFH的预后规律,并对C1型探索基于CT坏死区重建的ONFH侧位分型的临床意义并验证其临床作用。方法以2004年5月—2016年12月收治的119例(155髋)ONFH患者为研究对象,JIC分型:A型34髋,B型33髋,C1型57髋,C2型31髋。各JIC分型患者的年龄、性别、侧别、ONFH类型差异均无统计学意义(P>0.05)。分析不同JIC分型的1、2、5年股骨头塌陷及手术情况,以及不同JIC分型、激素性/非激素性ONFH、无症状与有症状(疼痛时间>6个月或≤6个月)髋关节间及联合保留角(combined preserved angle,CPA)≥118.725°和CPA<118.725°髋关节间的生存率(以股骨头塌陷为终点)。选取组内手术及塌陷发生差异较大、具备研究价值的JIC C1分型,根据其坏死区在股骨头表面的位置,在CT重建侧位将其分成5个亚型,并提取坏死区轮廓线,匹配至标准股骨头模型上,对5个亚型的坏死情况进行热力图图像呈现。分析不同侧位亚型1、2、5年的股骨头塌陷和手术情况,并比较该型患者中CPA≥118.725°和CPA<118.725°髋关节间的生存率(以股骨头塌陷为终点),以及不同侧位亚型的生存率(分别以股骨头塌陷和手术为终点)。结果JIC C2型患髋1、2、5年股骨头塌陷率与手术率均明显高于其他分型(P<0.05);而C1型患髋塌陷率与手术率均高于A、B型(P<0.05)。不同JIC分型患髋的生存率差异有统计学意义(P<0.05),A、B、C1、C2型逐渐降低;无症状髋关节生存率明显高于有症状髋关节,CPA≥118.725°的髋关节生存率明显高于CPA<118.725°的髋关节,差异均有统计学意义(P<0.05)。对C1型髋关节坏死区域CT重建侧位进行进一步分型,1型12髋、2型20髋、3型9髋、4型9髋、5型7髋。随访5年时各亚型之间股骨头塌陷率及手术率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。4、5型塌陷率及手术率均为0;3型塌陷率及手术率均最高;2型塌陷率高,但手术率低于3型;1型塌陷率高,但手术率均为0。JIC C1型中,CPA≥118.725°的髋关节生存率明显高于CPA<118.725°的髋关节(P<0.05)。以股骨头塌陷为终点的随访中,4、5型患髋生存率均为100%,1、2、3型生存率均为0,差异有统计学意义(P<0.05)。以手术为终点的随访中,1、4、5型生存率均为100%,3型为0,2型为60%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论JIC A、B型可选择非手术治疗,C2型可手术保髋。通过CT侧位分型对C1型进行5个亚型分类,3型塌陷风险最高,4、5型塌陷和手术风险低,1型塌陷率高但手术风险低;2型塌陷率高,但手术率接近JIC C1型平均值,仍需开展进一步研究。

关键词：股骨头坏死热力图日本厚生省骨坏死研究会分型 CT侧位分型

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巴戟天衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用

巴戟天衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物...

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作者：赵可伟曹越徐玉坤赵清 510378 广东省广州市荔湾区龙溪大道261、263号

本发明涉及巴戟天衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用。本发明创造性地提取纯化中药巴戟天衍生的细胞外囊泡，并对其生理功效进行了研究，发现其能充分被成骨细胞内化吸收，能够促进MAPK信号通路相关蛋白... 详细信息

标准号: CN117338847A

本发明涉及巴戟天衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用。本发明创造性地提取纯化中药巴戟天衍生的细胞外囊泡，并对其生理功效进行了研究，发现其能充分被成骨细胞内化吸收，能够促进MAPK信号通路相关蛋白质的表达以及磷酸化水平，从而实现对MAPK信号通路的调控，能够促进成骨细胞的增殖活性，并且具有体内骨靶向性，其用于制备预防或治疗骨科疾病的药物具有潜力，为预防或治疗骨科疾病的方法提供了新的策略。

关键词：治疗骨科疾病成骨细胞外囊制备预防磷酸化水平中药巴戟天细胞纳米颗粒生理功效提取纯化增殖活性巴戟天靶向性体内骨内化泡样蛋白质调控吸收应用发现研究

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淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用

淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物...

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作者：赵可伟沈家雯徐玉坤赵清 510378 广东省广州市荔湾区龙溪大道261、263号

本发明涉及淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用。本发明创造性地提取纯化中药淫羊藿衍生的细胞外囊泡，并对其生理功效进行了研究，发现其能充分被血管内皮细胞内化吸收，能够提高血管内皮生长因子V... 详细信息

标准号: CN117379468A

本发明涉及淫羊藿衍生的细胞外囊泡样纳米颗粒在制备预防或治疗骨科疾病药物中的应用。本发明创造性地提取纯化中药淫羊藿衍生的细胞外囊泡，并对其生理功效进行了研究，发现其能充分被血管内皮细胞内化吸收，能够提高血管内皮生长因子VEGF的表达水平，加强血管内皮细胞血管生成能力来缓解骨质疏松，并且具有体内骨靶向性，其用于制备预防或治疗骨科疾病的药物具有潜力，为预防或治疗骨科疾病的方法提供了新的策略。

关键词：治疗骨科疾病血管内皮细胞外囊制备预防血管内皮生长因子VEGF 血管生成能力中药淫羊藿细胞表达水平骨质疏松纳米颗粒生理功效提取纯化靶向性体内骨淫羊藿内化泡样缓解吸收应用发现研究

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一种用于治疗肌少-骨质疏松症的中药合剂及其制备方法

一种用于治疗肌少-骨质疏松症的中药合剂及其制备方法

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作者：黄宏兴林燕平黄佳纯黄红张志海万雷 510000 广东省广州市荔湾区龙溪大道261、263号

本发明属于中药制剂技术领域，具体涉及一种用于治疗肌少‑骨质疏松症的中药合剂及其制备方法。本发明的用于治疗肌少‑骨质疏松症的中药合剂，由以下重量份数的原料组成：杜仲10～15份，补骨脂8～12份，巴戟天7～10份，熟地黄6～10份，... 详细信息

标准号: CN116763884B

本发明属于中药制剂技术领域，具体涉及一种用于治疗肌少‑骨质疏松症的中药合剂及其制备方法。本发明的用于治疗肌少‑骨质疏松症的中药合剂，由以下重量份数的原料组成：杜仲10～15份，补骨脂8～12份，巴戟天7～10份，熟地黄6～10份，伸筋草9～12份，金线兰6～9份，牛藤2～4份，小罗伞2～3份，赤芍4～7份，甘草1～2份。本发明提供的中药合剂，诸药合用，标本兼顾，疗效确切，能够共奏温补肾阳、补肾强骨、舒筋活络、活血化瘀之效，有效提高肌少‑骨质疏松症的治疗疗效，给肌少‑骨质疏松症提供新的治疗思路和药物选择。

关键词：骨质疏松症中药合剂治疗中药制剂技术活血化瘀舒筋活络温补肾阳药物选择原料组成重量份数巴戟天补骨脂金线兰伸筋草熟地黄小罗伞杜仲补肾赤芍强骨甘草制备标本

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玫瑰花源性细胞外囊泡样纳米颗粒在制备美白抗氧化功效的产品中的应用

玫瑰花源性细胞外囊泡样纳米颗粒在制备美白抗氧化功效的产品中的...

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作者：赵可伟周思瑞赵清吴铮婷 510378 广东省广州市荔湾区龙溪大道261、263号

本发明涉及玫瑰花源性细胞外囊泡样纳米颗粒在制备美白抗氧化功效的产品中的应用。本发明创造性地提取纯化玫瑰花源性细胞外囊泡，并对其生理功效进行了研究，发现其能够充分被黑色素瘤细胞内化吸收，显著降低黑色素瘤细胞内的黑色素含... 详细信息

标准号: CN117752564A

本发明涉及玫瑰花源性细胞外囊泡样纳米颗粒在制备美白抗氧化功效的产品中的应用。本发明创造性地提取纯化玫瑰花源性细胞外囊泡，并对其生理功效进行了研究，发现其能够充分被黑色素瘤细胞内化吸收，显著降低黑色素瘤细胞内的黑色素含量，显著减少斑马鱼胚胎体表黑色素沉着，还具有优异的抗氧化能力，并且临床试验证明其具能够降低皮肤色素，调亮肤色。将其用于制备美白抗氧化功效的产品具有潜力，为皮肤美白和皮肤抗衰提供了新的策略。

关键词：黑色素瘤细胞抗氧化功效玫瑰花美白外囊制备斑马鱼胚胎黑色素沉着抗氧化能力细胞临床试验纳米颗粒皮肤美白皮肤色素生理功效提取纯化黑色素内化泡样肤色皮肤吸收应用发现研究

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