检索结果-内蒙古大学图书馆

广东医学 2010年第6期31卷 675-677页

作者：李岩邝枣园李明王宏敏陈伟强广州中医药大学基础医学院微生物学与寄生虫学教研室广州510006 广东药学院病理生理学教研室广州510006

目的研究黄芩苷对小鼠巨噬细胞一氧化氮(NO)生成和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,取生长良好的细胞分别加入LPS(终浓度1μg/mL)和不同浓度黄芩苷(终浓度10、50、100μmol/L)进行干预,并设空白... 详细信息

目的研究黄芩苷对小鼠巨噬细胞一氧化氮(NO)生成和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,取生长良好的细胞分别加入LPS(终浓度1μg/mL)和不同浓度黄芩苷(终浓度10、50、100μmol/L)进行干预,并设空白对照组。取培养24 h细胞上清,用Griess法检测NO生成量;取培养8 h和24 h细胞,分别提取细胞总RNA和蛋白,用RT-PCR法和Western Blot法检测iNOS基因和蛋白水平表达情况。结果与空白对照组相比,LPS明显促进了RAW 264.7细胞iNOS表达和NO的生成;加入黄芩苷可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS mRNA和蛋白表达,减少NO的生成,与LPS组差异有统计学意义。结论黄芩苷可明显降低LPS诱导的巨噬细胞iNOS表达和NO生成,这可能是其抗动脉粥样硬化斑块形成的作用机制之一。

关键词：黄芩苷巨噬细胞一氧化氮诱导型一氧化氮合酶内毒素

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胸腺嘧啶核苷双阻断法诱导SGC-7901细胞周期同步化研究

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中国病理生理杂志 2010年第11期26卷 2097-2100页

作者：朱丽红毕伟陆大祥谭宇蕙李杰芬暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632 中山大学附属第二医院神经科广东广州510120 广州中医药大学基础医学院广东广州510405

目的:探讨胸腺嘧啶核苷(TdR)双阻断法对人胃癌细胞SGC-7901细胞周期的影响。方法:取对数生长期的SGC-7901细胞,加入2mmol/L、4mmol/L和8mmol/L TdR孵育15h,去除TdR孵育10h,再次加入不同浓度的TdR孵育15h后收集各组细胞,流式细胞术分析... 详细信息

目的:探讨胸腺嘧啶核苷(TdR)双阻断法对人胃癌细胞SGC-7901细胞周期的影响。方法:取对数生长期的SGC-7901细胞,加入2mmol/L、4mmol/L和8mmol/L TdR孵育15h,去除TdR孵育10h,再次加入不同浓度的TdR孵育15h后收集各组细胞,流式细胞术分析细胞周期各时相细胞百分比。经不同浓度TdR双阻断法诱导SGC-7901细胞后,再去除TdR孵育12h,收集各组细胞分析细胞周期各时相细胞百分比。结果:SGC-7901细胞经2mmol/L、4mmol/L和8mmol/L TdR双阻断法诱导,收获G0/G1期的细胞数分别为77.3%、77.5%和77.0%。再次去除TdR培养12h后,各期细胞百分比又可恢复正常范围。结论:2mmol/L TdR双阻断法诱导SGC-7901细胞即可在短时间内获得大量的G0/G1期细胞,是一种理想的获得大量处于"基态"的细胞的方法。

关键词：胸腺嘧啶核苷双阻断法 SGC-7901细胞细胞周期

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大鼠肢体缺血再灌注肠系膜微循环的变化

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华北煤炭医学院学报 2010年第1期12卷 1-2页

作者：赵霞孙娜张连元华北煤炭医学院基础部病理生理学教研室河北唐山063000 华北煤炭医学院基础部生理学教研室河北唐山063000

①目的研究大鼠肢体缺血再灌注(IR)损伤时肠系膜微循环的变化,并探讨其意义。②方法用BI-2000医学图像分析系统对肢体缺血再灌注大鼠的肠系膜微循环进行观察,大鼠随机分为6组(每组10只),在肢体缺血前(对照组),缺血4h(I组),再灌注20min(I... 详细信息

①目的研究大鼠肢体缺血再灌注(IR)损伤时肠系膜微循环的变化,并探讨其意义。②方法用BI-2000医学图像分析系统对肢体缺血再灌注大鼠的肠系膜微循环进行观察,大鼠随机分为6组(每组10只),在肢体缺血前(对照组),缺血4h(I组),再灌注20min(IR20组),再灌注60min(IR60组),再灌注120min(IR120组),再灌注200min(IR200组)时观察和记录肠系膜微循环改变,并于上述各时间点分别测定各组动物血浆前列环素(Prostacyclin,PGI2)水平、血栓素A2(Thromboxane A2,TXA2)水平,计算前列环素/血栓素A2比值(PGI2/TXA2)。③结果各组与对照组比较,IR20组、IR60组大鼠肠系膜微动脉和微静脉管径缩小(P<0.05),IR120组、IR200组大鼠肠系膜微动脉和微静脉管径扩大(P<0.05),I组无显著性变化(P>0.05);IR20组、IR60组、IR120组、IR200组大鼠肠系膜微动脉和微静脉血流速度依次减慢(P<0.05),I组变化差异无显著性(P>0.05);再灌注期,白细胞黏附聚集、白微栓及管周出血增多。血浆中PGI2、TXA2含量均于再灌注期先升高后降低,但PGI2/TXA2比值减小。④结论大鼠肢体缺血灌注损伤时存在肠系膜微循环障碍,其发生可能与血管内皮的功能受损,PGI2/TXA2水平的平衡失调有重要关系。

关键词：肢体缺血再灌注肠系膜微循环

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构建重组质粒pEGFP-N1-ND CyclinB1及在胃癌细胞SGC-7901中的表达

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第6期31卷 555-559页

作者：朱丽红毕伟陆大祥谭宇蕙杜标炎李杰芬暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632 中山大学孙逸仙纪念医院神经科广东广州510120 广州中医药大学基础医学院广东广州510405

目的:构建真核表达载体pEGFP-N1-ND CyclinB1,并观察其在人胃癌细胞SGC-7901中的表达及对SGC-7901活性的影响。方法:通过RT-PCR法扩增不可降解CyclinB1(NDCyclinB1),将其插入到pEGFP-N1载体的XhoⅠ和BamHⅠ酶切位点,构建真核表达载体pEGFP-N1-ND CyclinB1,并以PCR、双酶切、测序鉴定。通过脂质体法转染胃癌细胞SGC-7901,进行荧光检测、Western blotting分析和流式细胞仪分析。结果:PCR、酶切及测序证明重组质粒pEGFP-N1-ND CyclinB1构建成功。转染胃癌细胞SGC-7901 24 h后,荧光显微镜下观察到绿色荧光。West-ern blotting检测到CyclinB1的表达明显增加。流式细胞仪检测重组质粒细胞组凋亡指数高于对照组,差异有显著性。结论:成功构建pEGFP-N1-ND CyclinB1荧光真核表达载体,并可在SGC-7901细胞中有效表达。

关键词：不可降解CyclinB1 细胞周期蛋白绿色荧光蛋白细胞周期肿瘤

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BMSCs移植后通过分泌神经营养因子对大鼠脑缺血神经功能改善的实验研究

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解剖学研究 2010年第1期32卷 10-16页

作者：叶伟标邓宇斌王晔蔡拓周艳芳叶美红李燕中山大学中山医学院病理生理学教研室广东广州510080 广东医学院病理生理学教研室中山大学基础医学实验教学中心

目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植改善大鼠脑缺血后神经功能及探讨其可能机制。方法采用线栓法构建大鼠永久性脑缺血动物模型,实验动物分缺血对照组和移植治疗组(n=24/组),缺血24h后移植治疗组经尾静脉移植体外培养的同种异体骨髓... 详细信息

目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植改善大鼠脑缺血后神经功能及探讨其可能机制。方法采用线栓法构建大鼠永久性脑缺血动物模型,实验动物分缺血对照组和移植治疗组(n=24/组),缺血24h后移植治疗组经尾静脉移植体外培养的同种异体骨髓间充质干细胞(2×106cells/mLPBS)。移植后14d用Nissl染色观察移植前后缺血脑组织神经元缺损变化。于移植后1、7和14d用mNSS评分检测大鼠神经功能综合评价,于移植后1、3、7和14d用ELISA方法检测缺血中心区脑组织和缺血半暗带中的海马和皮质中VEGF的表达。移植后14d用免疫荧光观察移植后缺血侧海马新生神经元的迁移。结果BMSCs移植14d后大鼠脑缺血损伤的神经功能明显改善。Nissl染色发现BMSCs移植组缺血脑组织中尼1氏体的缺损比对照组少。BMSCs移植组缺血半暗带区的海马在1和3d[(63.324±0.625)pg/mL,(60.125±1.127)pg/mL]与对照组[(31.097±0.677)pg/mL,(35.05±0.681)pg/mL]相比VEGF表达显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05),缺血半暗带区的皮质中VEGF的表达在BMSCs移植后7和14d[(36.945±0.625)pg/mL,(32.177±1.127)pg/mL],与对照组比[(31.219±0.677)pg/mL,(25.636±0.681)pg/mL]明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,第14天,BMSCs移植组能观察到缺血侧海马新生神经元的迁移。结论BMSCs移植后可使大鼠脑缺血损伤的神经功能显著改善,其作用机制可能为移植的BMSCs通过分泌VEGF等营养因子,促进内源性神经干细胞向脑缺血损伤区迁移,参与损伤修复从而改善脑缺血神经功能。

关键词：骨髓间充质干细胞脑缺血血管内皮细胞生长因子神经干细胞

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果糖激酶和脂联素对心力衰竭心脏能量代谢的影响

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心血管病学进展 2010年第4期31卷 599-602页

作者：林立廖禹林南方医科大学基础医学院病理生理学教研室广东广州510515

能量代谢与心力衰竭存在着复杂的关系。结合我们的研究成果,以6-磷酸果糖激酶2/果糖-2,6-二磷酸酶与脂联素的研究进展为重点,介绍能量代谢对心脏的影响,并对临床意义做简要探讨。

关键词：能量代谢心力衰竭 6-磷酸果糖激酶2 果糖-2,6-二磷酸酶脂联素

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抗β1肾上腺素受体自身抗体的致心律失常效应

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中国应用生理学杂志 2010年第3期26卷 257-260页

作者：马秀瑞段俊丽左琳王瑾贺忠梅燕子郑荣华杨光照刘慧荣山西医科大学生理学系山西医科大学细胞生理学省部共建教育部重点实验室山西太原030001 上海交通大学医学院附属新华医院老年医学科上海200092 首都医科大学基础医学院病理生理学教研室北京100069

目的:观察抗β1肾上腺素受体自身抗体(β1AA)在心律失常患者血清中的分布特征并探究该抗体是否具有致心律失常作用。方法:选择临床各型心律失常、冠心病患者和正常健康体检者,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中β1AA的滴度;提纯抗体... 详细信息

目的:观察抗β1肾上腺素受体自身抗体(β1AA)在心律失常患者血清中的分布特征并探究该抗体是否具有致心律失常作用。方法:选择临床各型心律失常、冠心病患者和正常健康体检者,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中β1AA的滴度;提纯抗体阳性患者血清中的IgG抗体,给予正常大鼠,动态监测心电图的变化,观察心律失常发生频率。结果:β1AA在心律失常患者血清中的阳性率为52.8%,明显高于冠心病对照组(24.0%,P<0.01)与正常对照组(5.0%,P<0.01);β1AA可引发正常大鼠发生心律失常,其中以室性心律失常多见。结论:β1AA在心律失常患者血清中的分布呈高阳性率,并可致大鼠发生心律失常。

关键词： β1肾上腺素受体自身抗体心律失常

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舟山眼镜蛇毒抗肿瘤有效组分分离及其抑瘤作用研究初探

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蛇志 2010年第3期22卷 193-197页

作者：陈劲海孔天翰广州医学院第一附属医院耳鼻咽喉-头颈外科广东广州510120 广州医学院病理生理学教研室广东广州510182

目的从舟山眼镜蛇(Naja atraCantor)蛇毒(snake venom,SV)中分离得蛇毒组分,探讨SV及其分离组分的LD50和抑制肿瘤的作用。方法采用凝胶柱层析方法从蛇毒中分离得到了前Ⅰ1、Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅱ2、Ⅲ1、Ⅲ2及Ⅳ等7种组分。采用急性毒性实验、MT... 详细信息

目的从舟山眼镜蛇(Naja atraCantor)蛇毒(snake venom,SV)中分离得蛇毒组分,探讨SV及其分离组分的LD50和抑制肿瘤的作用。方法采用凝胶柱层析方法从蛇毒中分离得到了前Ⅰ1、Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅱ2、Ⅲ1、Ⅲ2及Ⅳ等7种组分。采用急性毒性实验、MTT法,研究SV及其7种SV分离组分的LD50和抑制肿瘤的作用。结果 SV经Sephadex G-50层析,可分离为前Ⅰ、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ5个组分,根据峰面积大小排列:Ⅲ>Ⅱ>Ⅰ>Ⅳ>前Ⅰ。5个组分再经Sephadex G-25柱层析,可获得7个脱盐组分:前Ⅰ1、Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅱ2、Ⅲ1、Ⅲ2及Ⅳ。通过急性毒性实验,明确Ⅳ的毒性最大,其次为Ⅲ2及Ⅲ1,三者的LD50值均低于SV;而Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅱ2的毒性均小于SV,前Ⅰ1几乎无毒。SV组分Ⅲ2和Ⅳ的抑瘤作用最强,在高浓度(20μg/ml)时对实验中的2种人肿瘤细胞的抑制率均达到60%以上。结论从SV中分离得到了前Ⅰ1、Ⅰ1、Ⅱ1、Ⅱ2、Ⅲ1、Ⅲ2以及Ⅳ7种组分;组分Ⅳ毒性最强,依次为Ⅲ2>Ⅲ1>SV>Ⅱ2>Ⅱ1>Ⅰ1>前Ⅰ1;SV及其7种分离组分对2种人肿瘤细胞株(SGC-7901、A549)的生长抑制有一定的特异性,而不同的SV分离组分对同一肿瘤细胞抑制作用亦有差异。

关键词：舟山眼镜蛇蛇毒毒素肿瘤

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原核表达HPV16 L1蛋白ELISA方法检测血清抗体

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中国妇幼保健 2010年第3期25卷 395-397页

作者：赵丽晶王学林许多梁作文郭恒孙树民赵淑华赵雪俭郑晶莹吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021 吉林大学人兽共患病教育部重点实验室吉林大学第二医院妇产科

目的:从感染人乳头瘤病毒(HPV)的新鲜宫颈癌组织中扩增HPV16型晚期蛋白L1基因全长,构建原核表达载体,表达并纯化蛋白用于ELISA检测。方法:根据基因序列设计一对特异引物,用PCR的方法从宫颈癌组织DNA中获得L1基因,以pet28a为载体构建表... 详细信息

目的:从感染人乳头瘤病毒(HPV)的新鲜宫颈癌组织中扩增HPV16型晚期蛋白L1基因全长,构建原核表达载体,表达并纯化蛋白用于ELISA检测。方法:根据基因序列设计一对特异引物,用PCR的方法从宫颈癌组织DNA中获得L1基因,以pet28a为载体构建表达质粒,IPTG诱导表达蛋白,DEAE及葡聚糖凝胶分离纯化目的蛋白,将蛋白包被平底96孔板用于ELISA检测。结果:从宫颈癌临床标本克隆到HPV16型L1蛋白编码序列,其原核表达产物纯化后可用于ELISA检测。结论:成功获得人有抗原性的HPV16L1蛋白,可用于ELISA检测。

关键词： HPV16 L1蛋白原核表达 ELISA检测

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重度颅脑损伤引发肺组织VEGF及其受体改变的研究

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武警医学院学报 2010年第12期19卷 925-928,931页

作者：韩威宋立新张璐张永亮武警医学院训练部教务处天津300162 武警医学院基础部生理与病理生理学教研室天津300162 武警医学院科研部天津300162

【目的】研究重度颅脑损伤引发肺组织血管内皮生长因子VEGF及其受体的改变。【方法】复制Marmarou’s脑损伤大鼠模型,采用免疫组化和RT-PCR方法分别检测手术对照组和各损伤组肺组织VEGF及其受体Flk-1、Flt-1蛋白和mRNA水平。【结果】VEG... 详细信息

【目的】研究重度颅脑损伤引发肺组织血管内皮生长因子VEGF及其受体的改变。【方法】复制Marmarou’s脑损伤大鼠模型,采用免疫组化和RT-PCR方法分别检测手术对照组和各损伤组肺组织VEGF及其受体Flk-1、Flt-1蛋白和mRNA水平。【结果】VEGF和Flk-1蛋白和mRNA表达水平随损伤时间的延长而加强:VEGF蛋白表达水平在损伤后8、12、24和48 h显著升高(P<0.01),mRNA表达水平在损伤后24和48 h显著升高(P<0.01);Flk-1蛋白表达水平在损伤后24和48 h显著升高(P<0.01),mRNA水平损伤后48 h明显升高(P<0.05);Flt-1蛋白和mRNA表达水平随损伤时间的延长而降低,蛋白表达水平在损伤后24和48 h显著降低(P<0.01),mRNA水平在损伤后8、12、24和48 h组显著降低(P<0.01)。【结论】VEGF及其受体在神经源性肺水肿的发生发展过程中发挥重要作用。

关键词：神经源性肺水肿血管内皮生长因子受体

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