检索结果-内蒙古大学图书馆

中华结核和呼吸杂志 2013年第6期36卷 441-446页

作者：马碧蔓刘朝晖梁志科关丽君汪新龙广州医学院附属广州市第一人民医院呼吸内科 510180

目的研究蛋白酶体抑制剂MG-132抑制烟草烟雾所致慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）大鼠模型骨骼肌萎缩的可能机制。方法采用反复烟草烟雾暴露联合气管内注入脂多糖法成功制备成年雄性sD大鼠慢阻肺模型，分为非十预组、高剂量组（MG-132 0... 详细信息

目的研究蛋白酶体抑制剂MG-132抑制烟草烟雾所致慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）大鼠模型骨骼肌萎缩的可能机制。方法采用反复烟草烟雾暴露联合气管内注入脂多糖法成功制备成年雄性sD大鼠慢阻肺模型，分为非十预组、高剂量组（MG-132 0．1mg·kg^-1·d^-1）和低剂量组（MG-1320．05mg·kg^-1·d^-1），每组12只，另设对照组。各组分别于实验1周和4周处死6只大鼠，分离大鼠膈肌并称重，采用酶联免疫吸附试验法测定大鼠血清和膈肌中肿瘤坏死因子-α（TNF—α）的表达，逆转录-PCR法和Western blot法检测大鼠膈肌内的肌萎缩F—box蛋白（MAFbx）、核因子-κB p65和抑制性因子κB—α（IKB-α）mRNA和蛋白表达。多组间比较采用方差分析，两组问比较采用t检验，相关性检验采用Pearson直线相关性分析。结果实验1周和4周非干预组[（0．83±0．09）mg和（1．01±0．06）mg]、高剂量组[（0．85±0．02）mg和（1．11±0．06）mg]及低剂量组[（0．83±0．03）mg和（1．04±0．02）mg]大鼠的膈肌重量均低于对照组[（0．99±0．06）mg和（1．20±0．04）mg]，高剂量组和低剂量组大鼠膈肌重量下降程度均小于非干预组，高剂量组干预4周时更明显；实验4周时在高剂量组和低剂量组膈肌中TNF-α含量[（106±8）ng／L和（122±7）ng／L]显著低于非干预组[（143±24）ng／L]，高剂量组膈肌中核因子-κBp65和MAFbx蛋白表达水平（1．13±0．04和1．27±0．05）及mRNA含量（2．17±0．42和1．74±0．14）显著低于非干预组（1．32±0．04和1．44±0．07及2．81±0．31和4．87±0．34），IKB—α基因和蛋白表达水平（0．96±0．08和0．83±0．06）显著高于非干预组（0．25±0．02和0．58±0．06），差异均有统计学意义（t值为1．57—24．9，P〈0．05）。各组大鼠血清和膈肌中TNF-α表达水平与膈肌中核因子-κBp65蛋白和mRNA表达水平呈显著正相关（r值为0．672～0．875，均P〈0．01），与IκB—α蛋白和mRNA表达水平呈显著负相关（r值为-0．656～-0．927，均P〈0．01）。结论蛋白酶体抑制剂MG-132可能通过抑制IκB—α的泛素化降解，从而稳定核因子-κB活性，抑制泛素蛋白酶体途径介导的慢阻肺大鼠膈肌萎缩。

关键词：肺疾病,慢性阻塞性呼吸肌蛋白酶体抑制剂

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肝豆状核变性基因表达产物及基因突变的研究

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中华医学遗传学杂志 2001年第3期18卷 165-168页

作者：侯国庆梁秀龄陈嵘杨春水黄帆闫振文徐评议王莹广州医学院附属广州市第一人民医院神经内科 510180 中山医科大学附属第一医院神经科

目的　探讨肝豆状核变性 (Wilson's disease,WD)的发病机理。方法　将活检获得的 WD患者肝标本体外分离、培养肝细胞 ,应用 Western印迹法对 WD患者肝细胞 WD蛋白进行检测 ,同时扩增其基因组 DNA并直接测序。结果　 3例 WD患者中有 ... 详细信息

目的　探讨肝豆状核变性 (Wilson's disease,WD)的发病机理。方法　将活检获得的 WD患者肝标本体外分离、培养肝细胞 ,应用 Western印迹法对 WD患者肝细胞 WD蛋白进行检测 ,同时扩增其基因组 DNA并直接测序。结果　 3例 WD患者中有 2例出现肝细胞 WD蛋白特异条带密度降低 ,DNA测序发现其中一例患者存在 ATP7B778位点 CGG→ CTG(Arg778L eu)杂合突变及 770位点 CTC→ CTG改变。结论　WD基因在 WD患者肝细胞的蛋白表达存在异常 ,可能与 ATP7B基因突变有关。

关键词：肝豆状核变性 P型ATP酶 ATP7B基因基因表达基因突变

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RNA干扰对活化的小鼠巨噬细胞肿瘤坏死因子α表达的影响

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中华医学杂志 2007年第30期87卷 2140-2143页

作者：谭兵李瑜元聂玉强杜艳蕾广州医学院附属广州市第一人民医院消化内科 510180

目的观察靶向小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因的小干扰 RNA(siRNA)在体外对小鼠巨噬细胞系 RAW264.7表达TNF-α的抑制作用。方法采用化学法合成针对 TNF-α mRNA 不同位点设计的3条 siRNA 序列(siRNA1～3)和1条带有荧光标记的 BLOCK-IT^... 详细信息

目的观察靶向小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因的小干扰 RNA(siRNA)在体外对小鼠巨噬细胞系 RAW264.7表达TNF-α的抑制作用。方法采用化学法合成针对 TNF-α mRNA 不同位点设计的3条 siRNA 序列(siRNA1～3)和1条带有荧光标记的 BLOCK-IT^(TM)荧光 Oligo(修饰的荧光标记的 dsRNA,siRNA4)通过脂质体包裹后将其分别转染至小鼠巨噬细胞系 RAW264.7,同时设立1个无任何靶基因的 siRNA 作为阴性对照(siRNA4)。荧光显微镜下观察 siRNA 的转染效率;用实时荧光定量 PCR 和酶联免疫吸附实验(ELISA)法分别检测 siRNA 对 TNF-α的 mRNA 和蛋白表达的抑制作用。结果内毒素刺激后6 h,巨噬细胞表达TNF-α mRNA 和合成分泌的 TNF-α量均增加,于9～12 h 达高峰。利用荧光标记的 Oligo 观察到 siRNA 转染效率达72%～80%。siRNA1～4转染巨噬细胞后,siRNA2、3可见内毒素刺激的 TNF-α mRNA(0.158±0.030、0.114±0.028)和 TNF-α蛋白表达[(1355±348)pg/ml、(817±138)pg/ml]均明显少于未转染组[TNF-α mRNA 0.294±0.147,蛋白(2104±32)pg/ml,均 P<0.05],其中 siRNA3的抑制率非常显著,达61.2%(P<0.01)。阴性对照siRNA4对细胞基因及蛋白表达无影响。结论内毒素可刺激小鼠巨噬细胞 TNF-α的合成。化学合成 siRNA 转染小鼠巨噬细胞能有效抑制 TNF-α mRNA 及蛋白的表达。

关键词：巨噬细胞肿瘤坏死因子小干扰RNA

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帕金森病患者非运动症状的发生及对日常生活能力的影响

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中华神经科杂志 2010年第4期43卷 273-276页

作者：王荣飞邵明陈玲张素平秦琴保刘晓加祁风广州医学院第一附属医院神经内科 510000 中山大学附属第一医院神经内科广州市红十字会医院神经内科南方医科大学附属南方医院神经内科广州市第一人民医院神经内科广州医学院荔湾医院神经内科

目的研究帕金森病（PD）患者非运动症状（NMS）的发生情况，及其对PD患者日常生活能力（ADL）的影响。方法对107例PD患者进行NMS问卷（NMSQuest）调查，分析NMS的分布状况及临床特征，并采用统一PD评定量表（UPDRS）、Hoehn—Yahr分期... 详细信息

目的研究帕金森病（PD）患者非运动症状（NMS）的发生情况，及其对PD患者日常生活能力（ADL）的影响。方法对107例PD患者进行NMS问卷（NMSQuest）调查，分析NMS的分布状况及临床特征，并采用统一PD评定量表（UPDRS）、Hoehn—Yahr分期、左旋多巴等效剂量、ADL问卷、MMSE评分进行评估，采用多元逐步线性回归探讨NMS对ADL的影响。结果97．2％（104／107）的PD患者伴发不同程度的NMS，其发生数平均（8±5）个，其中尿频、便秘、记忆力下降最常见，发生率均超过50％；UPDRS-Ⅲ评分（28．0±16．4）分，能解释ADL总分变化的48．1％（R2=0．481，P=0．000），引入NMS分值后，ADL分值可被解释的部分增加到51．1％。结论PD患者普遍伴发NMS，而影响患者的ADL。PD可能是由NMS和运动症状共同组成的多系统神经变性疾病。PD患者的NMS在临床上应引起同样的重视，运动症状与NMS同治，才能提高疗效和ADL。

关键词：帕金森病日常生活活动问卷调查

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小干扰RNA沉默巨噬细胞移动抑制因子基因对肝癌细胞p27表达的影响

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中华肝脏病杂志 2009年第2期17卷 102-106页

作者：夏金堂李雯伍兆锋赵杰王花李瑜元广州医学院附属广州市第一人民医院肝胆外科 510180 广州医学院附属广州市第一人民医院消化内科 510180 中山大学附属第一医院外科实验中心广州

目的观察巨噬细胞移动抑制因子（MIF）和细胞周期调控因子p27在肝细胞癌中表达的相互关系，探讨小干扰RNA（siRNA）沉默MIF基因对肝癌细胞p27表达的影响。方法免疫组织化学法和荧光定量PCR法检测MIF、p27的蛋白和mRNA在肝癌及其癌旁组... 详细信息

目的观察巨噬细胞移动抑制因子（MIF）和细胞周期调控因子p27在肝细胞癌中表达的相互关系，探讨小干扰RNA（siRNA）沉默MIF基因对肝癌细胞p27表达的影响。方法免疫组织化学法和荧光定量PCR法检测MIF、p27的蛋白和mRNA在肝癌及其癌旁组织中的表达情况。化学合成MIF siRNA和对照siRNA，脂质体法转染肝癌细胞PLC和Hep3B，荧光定量PCR法检测MIF和p27 mRNA在实验组及对照组中的表达情况。根据不同资料分别采用x。检验、Logistic回归分析或单因素方差分析。结果MIF蛋白及其mRNA在肝癌组织中过表达，在癌旁组织中低表达；p27蛋白及其mRNA在癌组织中低表达，在癌旁组织中高表达。Logistic回归分析提示MIF为肝癌发生的危险因素，p27为保护因素。MIF mRNA在肝癌细胞株中过表达（F=61．036，P〈0．01），p27 mRNA在正常肝细胞L02中高表达（F=529．853，P〈0．01）。经MIFsiRNA转染后，MIF mRNA在PLC及Hep3B中的表达水平降低，并且呈剂量依赖关系（F值分别为320．1和201．2，尸值均〈0．01）；p27 mRNA伴随MIFmRNA的降低而增加（F值分别为419．4和459．9，P值均〈0．01）。结论MIF在肝细胞癌中过表达，MIF siRNA能特异性抑制其在肝癌细胞中的表达；MIF可能参与了p27基因表达的调控。

关键词：癌,肝细胞 RNA干扰周期素依赖激酶抑制剂p27 巨噬细胞移动抑制因子

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siRNA沉默巨噬细胞移动抑制因子基因对肝癌细胞血管内皮生长因子表达的影响

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中华肝脏病杂志 2008年第8期16卷 622-623页

作者：夏金堂伍兆锋李雯傅新晖毕熲陈连周李瑜元广州医学院附属广州市第一人民医院肝胆外科 510180 广州医学院附属广州市第一人民医院消化内科 510180 中山大学附属第一医院外科实验中心

巨噬细胞移动抑制因子（MIF）是最早发现的炎症因子之一。近年来的研究结果显示MIF在多种肿瘤细胞中过表达，参与肿瘤的发生及进展。MIF蛋白和mRNA于肝硬化组织和肝细胞癌（HCC）癌细胞的胞质中过表达，重组的MIF可促进肝癌细胞分泌血... 详细信息

巨噬细胞移动抑制因子（MIF）是最早发现的炎症因子之一。近年来的研究结果显示MIF在多种肿瘤细胞中过表达，参与肿瘤的发生及进展。MIF蛋白和mRNA于肝硬化组织和肝细胞癌（HCC）癌细胞的胞质中过表达，重组的MIF可促进肝癌细胞分泌血管内皮生长因子（VEGF）。本研究比较了10对HCC的癌及癌旁组织中MIF和VEGF的蛋白质和mRNA表达差异，进一步应用化学合成特异性的小干扰RNA，阻断MIF基因在肝癌细胞株PLC、HEN32细胞表达并探讨MIF对VEGF表达的影响。

关键词：癌,肝细胞 RNA干扰巨噬细胞移动抑制因子血管内皮生长因子

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小剂量阿米替林对健康志愿者胃肠功能影响的随机双盲交叉对照研究

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中华消化杂志 2013年第6期33卷 361-365页

作者：黄微贾林江舒曼黄耀星龚艳媚王桂芹广州医学院附属广州市第一人民医院消化内科 510180 广州医学院附属广州市第一人民医院影像科 510180 广州医学院附属广州市第一人民医院统计室 510180

目的探讨小剂量阿米替林对健康志愿者胃肠功能的影响及其不良反应.方法采用随机、双盲、交叉、对照试验设计,将28名健康志愿者分为阿米替林＋安慰剂组（14名）和安慰剂＋阿米替林组（14名）,前者第1阶段服用阿米替林7d,中间有14 d洗脱... 详细信息

目的探讨小剂量阿米替林对健康志愿者胃肠功能的影响及其不良反应.方法采用随机、双盲、交叉、对照试验设计,将28名健康志愿者分为阿米替林＋安慰剂组（14名）和安慰剂＋阿米替林组（14名）,前者第1阶段服用阿米替林7d,中间有14 d洗脱期,第2阶段服用安慰剂7d;后者服用顺序相反.服药剂量为每次12.5 mg,每天3次.服药前,服药第1、2阶段的第7～8天对受试者分别进行饮水超声试验和乳果糖氢呼气试验.采用两阶段交叉设计资料的方差分析、符号秩和检验和卡方检验等进行统计分析.结果饮水超声试验显示,阿米替林和安慰剂在受试者饮水200、400、600和800 mL时的近端胃横截面面积差异均无统计学意义（P均＞0.05）,在饮水800 mL后第5、10分钟的近端胃液体排空率差异均无统计学意义（P均＞0.05）；阿米替林在受试者饮水600、800 mL时的饱感度视觉模拟评分（VAS）显著低于安慰剂[（2.98±0.85）分比（3.57±0.94）分,Z=4.412,P＜0.01；（4.57±0.98）分比（5.57±0.82）分,Z=4.170,P＜0.01].乳果糖氢呼气试验显示,阿米替林的口-盲肠传输时间显著长于安慰剂[（109.29±29.68） min比（96.61±23.90） min,F=9.918,P＜0.01].常见不良反应为嗜睡、口苦、口干,程度均较轻.结论小剂量阿米替林可显著延长口-盲肠传输时间和改善胃敏感性,但对近端胃容受性和胃液体排空无显著影响,不良反应轻,安全性好.

关键词：阿米替林胃排空胃肠活动饮水胃肠通过试验呼气试验

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胎儿骨髓基质细胞与细胞因子支持人脐血单个核细胞体外扩增的研究

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中国实验血液学杂志 2005年第3期13卷 422-428页

作者：毛平王彩霞林秀梅杜庆华广州医学院附属广州市第一人民医院血液内科

为了探讨胎儿骨髓基质细胞(FBMSC)联合细胞因子对脐血单个核细胞(MNC)体外扩增作用的影响及比较扩增前后脐血(CB)CD34+细胞上细胞表面趋化因子受体CXCR4和黏附分子CD49d+(VLA4)的表达情况,将从新鲜CB标本中分离出的MNC分别接种于已建立... 详细信息

为了探讨胎儿骨髓基质细胞(FBMSC)联合细胞因子对脐血单个核细胞(MNC)体外扩增作用的影响及比较扩增前后脐血(CB)CD34+细胞上细胞表面趋化因子受体CXCR4和黏附分子CD49d+(VLA4)的表达情况,将从新鲜CB标本中分离出的MNC分别接种于已建立的无血清培养体系,该体系分4组:A组为培养过程中不加细胞因子和基质细胞;B组为单用胚胎骨髓基质细胞支持;C组为单用细胞因子支持;D组为细胞因子和胚胎骨髓基质细胞联合支持。在0、6、10及14天检测细胞总数、CD34+细胞数及集落形成单位(CFU)数,同时检测CD34+细胞上CD49d+及CXCR4的表达数。结果表明:在体外14天培养过程中,各时间点D组CD34+细胞、CFU数及CD34+CXCR4+细胞和CD34+CD49d+细胞扩增数均高于A、B、C组(P<0.05);B、C和D组在各时间点各测量指标与A组比较具显著性差异(P<0.05);6天后,B组各测量指标与C组比较具显著性差异(P<0.05)。结论:胚胎骨髓基质细胞联合外源性细胞因子不仅可以支持脐血MNC的有效扩增,而且扩增后与趋化作用和与粘附作用相关的造血细胞亦较扩增前明显增加。单用细胞因子扩增会造成造血细胞的耗竭,单用基质细胞支持可扩增或维持造血细胞的量,但难以实现造血细胞的大量扩增,FBMSC联合外源性细胞因子可能是扩增造血干祖细胞的较理想方案。

关键词：胎儿骨髓基质细胞细胞因子单个核细胞脐血

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骨桥蛋白基因沉默对肝癌侵袭转移的抑制作用

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中华肝脏病杂志 2009年第6期17卷 422-425页

作者：林帆李瑜元夏金堂温敏杰赖越元蔡文松伍兆锋范少峰广州医学院附属广州市第一人民医院肝胆外科、消化内科 510180

目的探讨应用小干扰RNA（siRNA）沉默骨桥蛋白（OPN）基因的表达对人肝癌细胞株侵袭转移的抑制作用。方法于体外化学合成针对OPN序列特异性的双链RNA（dsRNA），转染人肝癌细胞株（HCC—LM3），用实时定量PCR和Westernblot检测OPNmRNA... 详细信息

目的探讨应用小干扰RNA（siRNA）沉默骨桥蛋白（OPN）基因的表达对人肝癌细胞株侵袭转移的抑制作用。方法于体外化学合成针对OPN序列特异性的双链RNA（dsRNA），转染人肝癌细胞株（HCC—LM3），用实时定量PCR和Westernblot检测OPNmRNA水平和蛋白表达。通过生长曲线、克隆形成和Matrigel侵袭实验，观察肝癌细胞生物学行为的指标。统计学方法采用SPSS11．5软件进行q检验，计数资料用z。检验。结果与空白组相比，siRNA特异性转染HCC—LM3细胞OPNmRNA水平下降84．7％，蛋白水平下降81％（P〈0．05）；细胞克隆形成数目下降（1．91个对比5．40个，P〈0．01）；穿过人工基底膜的细胞数减少（13．5个对比33．4个，P〈0．05），阴性对照组的OPNmRNA与空白对照组差异无统计学意义（29．7个对比33．4个，P〉0．05）。结论沉默OPN基因表达可在体外阻遏肝癌侵袭。

关键词：癌,肝细胞骨桥蛋白 RNA干扰侵袭转移

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人骨髓基质细胞支持脐血单个核细胞体外扩增

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中华器官移植杂志 2005年第10期26卷 616-618页

作者：王彩霞毛平林秀梅杜庆华广州医学院附属广州市第一人民医院血液内科 510180

目的探讨人骨髓基质细胞(HBMSC)对脐血(CB)单个核细胞(MNC)体外扩增的支持作用及寻找最佳的收获时机。方法将从CB标本中分离出的MNC接种于已建立的无血清培养体系(含或不含HBMSC及细胞因子支持),在0、6、10及14d检测MNC数、CD34+细胞数... 详细信息

目的探讨人骨髓基质细胞(HBMSC)对脐血(CB)单个核细胞(MNC)体外扩增的支持作用及寻找最佳的收获时机。方法将从CB标本中分离出的MNC接种于已建立的无血清培养体系(含或不含HBMSC及细胞因子支持),在0、6、10及14d检测MNC数、CD34+细胞数及集落形成单位(CFU)数。结果在体外培养过程中,各时间点相同条件下,有HBMSC层支持组的各项测量指标均较其他组高(P<0.05),其中HBMSC联合外源性细胞因子组扩增效果最佳。体外培养6～10d时,以上各项指标基本上达到最高值。结论HBMSC联合外源性细胞因子能实现CB在体外的有效扩增,此体系可能是扩增造血干、祖细胞的较理想方案。体外培养6～10d是收获的最佳时间。

关键词：骨基质干细胞因子胎血脐血单个核细胞体外扩增人骨髓基质细胞外源性细胞因子集落形成单位 CD34^+ 体外培养最佳时间

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