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细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的动态观察

四川大学学报（医学版） 2010年第5期41卷 764-766页

作者：周必英陈雅棠李文桂杨梅重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 贵州省遵义医学院寄生虫学教研室遵义563003

目的动态观察细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的变化。方法将5×108克隆形成单位(CFU)和5×105CFU疫苗分别采用口服灌胃和鼻腔内接种免疫BALB/c鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16... 详细信息

目的动态观察细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的变化。方法将5×108克隆形成单位(CFU)和5×105CFU疫苗分别采用口服灌胃和鼻腔内接种免疫BALB/c鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18和20周各剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,用流式细胞术(FCM)检测免疫小鼠脾CD4+和CD8+T细胞亚群的百分比,同时设双歧杆菌液体培养基(MRS)对照。结果口服灌胃组的脾CD4+T细胞亚群在免疫后4~10周升高,免疫后6周达最高水平,CD8+T细胞亚群无明显变化;鼻腔内接种组脾CD4+T细胞亚群在免疫后4~8周升高,免疫后6周达最高水平,CD8+T细胞亚群无明显变化。结论 CD4+T细胞亚群在细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗诱导的小鼠免疫应答中起关键作用。

关键词：细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗脾细胞亚群流式细胞术

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细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗诱导小鼠脾细胞因子变化的研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第4期28卷 268-272页

作者：周必英陈雅棠李文桂杨梅重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 贵州省遵义医学院寄生虫学教研室遵义563003

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化。方法 56只雌性BALB/c小鼠随机均分7组,A组和B组分别皮下和肌肉注射5×106蛋白克隆形成单位(CFU)疫苗悬浮于100μl双歧杆菌液... 详细信息

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化。方法 56只雌性BALB/c小鼠随机均分7组,A组和B组分别皮下和肌肉注射5×106蛋白克隆形成单位(CFU)疫苗悬浮于100μl双歧杆菌液体培养基(MRS)、C组鼻腔内接种5×105CFU+10μlMRS、D组经口灌胃5×108CFU+100μlMRS、E组(空载体对照组)5×106CFUBb(pGEX-1λT)+100μlMRS、F组为双歧杆菌(Bb)对照组和G组为双歧杆菌液体培养基(MRS)对照组。免疫后8周各组鼠攻击感染50个Eg原头节,感染后25周剖杀小鼠,取脾,分离脾细胞,用Eg粗抗原(EgAg)刺激培养,同时设伴刀豆球蛋白A(ConA)或脂多糖(LPS)刺激对照和非刺激组。收集脾细胞培养上清液,ELISA法检测脾细胞培养上清液中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-12(IL-12)、α肿瘤坏死因子(TNF-α)和IL-10水平。结果 A、B、C和D组小鼠脾细胞培养上清液中,IFN-γ水平分别为(137.5±23.2)、(162.5±23.2)、(250.0±53.5)和(215.0±37.4)pg/ml,均高于MRS对照组(50.0±10.7)pg/ml(P<0.01);IL-12水平分别为(27.5±4.6)、(32.5±4.6)、(45.0±5.4和(35.0±5.4)pg/ml,均高于MRS对照组(15.0±5.4)pg/ml(P<0.01);TNF-α水平分别为(275.0±46.3)、(325.0±46.3)、(450.0±53.5)和(350.0±53.5)pg/ml,均高于MRS对照组(150.0±53.5)pg/ml(P<0.01);IL-10水平分别为(37.5±4.6)、(35.0±5.4)、(25.0±5.4)和(32.5±4.6)pg/ml,均低于MRS对照组(45.0±5.4)pg/ml(P<0.05或P<0.01)。结论细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗可诱导小鼠产生Th1型保护性免疫应答。

关键词：细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗细胞因子

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细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗诱导小鼠脾细胞亚群变化的研究

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中国人兽共患病学报 2010年第3期26卷 211-214页

作者：周必英陈雅棠李文桂杨梅重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 贵州省遵义医学院寄生虫学教研室贵州563003

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠的囊重抑制率及脾细胞亚群的变化。方法将细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗分别采用皮下注射、肌肉注射、鼻腔内接种和口服灌胃4种途径免疫BALB/c小... 详细信息

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠的囊重抑制率及脾细胞亚群的变化。方法将细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗分别采用皮下注射、肌肉注射、鼻腔内接种和口服灌胃4种途径免疫BALB/c小鼠,免疫后8周每鼠用50个Eg原头节攻击感染,感染后25周剖杀小鼠,分离细粒棘球蚴包囊并称重,计算囊重抑制率;取脾,分离脾细胞,流式细胞仪检测脾CD4+和CD8+T细胞亚群的百分比,同时设有空载体、Bb和MRS对照。结果以上4种疫苗接种组小鼠的囊重抑制率分别为45.33%、41.33%、70.67%和62.67%;疫苗接种组的脾CD4+和CD8+T细胞亚群显著增加,鼻腔内接种和口服免疫组的的CD4+T细胞亚群和CD4+/CD8+比值显著高于皮下和肌肉注射组。结论CD4+和CD8+T细胞亚群在疫苗诱导的保护力中起重要作用。疫苗鼻腔内接种和口服免疫是两种较好的免疫途径。

关键词：细粒棘球绦虫重组Bb—Eg95-EgA31疫苗脾细胞亚群

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铜绿假单胞菌中I类整合子及携带的耐药基因研究

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中国抗生素杂志 2010年第9期35卷 711-714页

作者：余广超徐霖袁广卿张甜陈康蒋岗姜余琴许沙沙常彦敏曹开源中山大学临床检验标准化研究中心广州510080 暨南大学附属第一医院临床检验中心广州510630 中山大学中山医学院微生物学教研室广州510080 广东省重大传染病预防和控制技术研究中心广州510080

目的了解整合子在广州地区铜绿假单胞菌中的分布状况及其主要类型,研究I类整合子的结构特征并探讨其与细菌多重耐药之间的相关性。方法采用PCR检测3类整合子整合酶的编码基因,并扩增整合子的可变区,运用DNA测序技术分析整合子可变区的... 详细信息

目的了解整合子在广州地区铜绿假单胞菌中的分布状况及其主要类型,研究I类整合子的结构特征并探讨其与细菌多重耐药之间的相关性。方法采用PCR检测3类整合子整合酶的编码基因,并扩增整合子的可变区,运用DNA测序技术分析整合子可变区的耐药基因及其排列顺序,利用生物信息学的方法对检测到的可变区基因序列进行比对分析。结果在20株产金属-内酰胺酶铜绿假单胞菌中,15株检测到I类整合子,未检测到II类和III类整合子,其中一株铜绿假单胞菌整合子全长序列含有I类整合子整合酶、AacA4氨基糖甙乙酰转移酶、IMP-25金属-内酰胺酶、OXA-30-内酰胺酶和CatB3氯霉素乙酰转移酶的编码基因及其相应的基因重组位点,GenBank登录号为EU588392,其中IMP-25为一个新的金属-内酰胺酶亚型。结论广州地区铜绿假单胞菌中存在的整合子类型是I类整合子,并且该整合子可变区携带多种耐药基因盒,其中一个是金属-内酰胺酶新亚型IMP-25,在分子水平上阐述了I类整合子参与铜绿假单胞菌对抗生素的耐药性和多重耐药性。

关键词：铜绿假单胞菌整合子金属-内酰胺酶

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钩端螺旋体病预警指标体系研究

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中国人兽共患病学报 2010年第10期26卷 891-894页

作者：马芬卢亮平王丽曾宪嘉阳波潘利万康林李辉中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院流行病学教研室北京100005 传染病预防控制国家重点实验室传染病预防控制所中国疾病预防控制中心北京102206 清华大学第一附属医院北京100016

目的建立钩端螺旋体病预警指标体系。方法首先采用文献调研和专家会议法拟订钩体病预警指标体系初始框架和指标,然后应用德尔菲法确定预警指标和指标权重,权重法比较各指标间作用的大小。结果共筛选出7个一级预警指标、27个二级预警指标... 详细信息

目的建立钩端螺旋体病预警指标体系。方法首先采用文献调研和专家会议法拟订钩体病预警指标体系初始框架和指标,然后应用德尔菲法确定预警指标和指标权重,权重法比较各指标间作用的大小。结果共筛选出7个一级预警指标、27个二级预警指标,并针对钩体病流行区及暴发流行潜在风险地区分别建立预警指标体系,同时从理论上探讨了用于征兆预警、早期预警和发布预警三级预警的指标组合模式。结论初步建立了钩端螺旋体病暴发流行预警指标体系,可对该病的预测、预警提供参考。

关键词：钩端螺旋体病预警德尔菲法

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人兽共患传染病暴发流行预警指标体系的研究

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中国人兽共患病学报 2010年第7期26卷 676-679页

作者：卢亮平马芬王丽阳波曾宪嘉潘利李辉万康林传染病预防控制国家重点实验室传染病预防控制所中国疾病预防控制中心中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院流行病学教研室北京100005 清华大学第一附属医院北京100016

目的探讨建立人兽共患传染病暴发流行预警指标体系的理论框架。方法采用文献调研和专家会议法拟订人兽共患传染病的初始框架;通过Delphi专家咨询法完成预警指标体系指标的筛选及其权重评分。结果共对55名专家进行了2轮问卷调查,确立了... 详细信息

目的探讨建立人兽共患传染病暴发流行预警指标体系的理论框架。方法采用文献调研和专家会议法拟订人兽共患传染病的初始框架;通过Delphi专家咨询法完成预警指标体系指标的筛选及其权重评分。结果共对55名专家进行了2轮问卷调查,确立了包括宿主动物及媒介、病原、气象因素、易感人群、社会环境、新发病例、发病水平等7个一级预警指标,一级指标下又包括主要宿主动物数量和/或密度等在内的22个二级预警指标的人兽共患传染病暴发流行预警指标体系。结论该预警指标体系可为人兽共患传染病的早期预警提供理论基础,但需要利用历史疫情对该指标体系的信度和效度进行评价,并在实际应用中进一步完善。

关键词：人兽共患病预警指标体系

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产多种β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的基因型研究

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中华临床感染病杂志 2010年第3期3卷 138-141页

作者：郭远瑜魏泽庆朱佩琼杜小幸杨青沈萍俞云松浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室杭州310003 浙江医学高等专科学校内科教研室

目的研究医院感染肺炎克雷伯菌的β-内酰胺酶基因型.方法连续收集从临床住院患者中分离的肺炎克雷伯菌,采用接合试验、PCR、PCR产物测序、等电聚焦试验、超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）确认试验等方法明确基因型.结果共收集75株肺炎克... 详细信息

目的研究医院感染肺炎克雷伯菌的β-内酰胺酶基因型.方法连续收集从临床住院患者中分离的肺炎克雷伯菌,采用接合试验、PCR、PCR产物测序、等电聚焦试验、超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）确认试验等方法明确基因型.结果共收集75株肺炎克雷伯菌,48株（64.0%,48/75）含β-内酰胺酶基因,其中ESBLs占52.0%（39/75）.在48株产酶菌株中,携带2种基因型的占35.4%（17/48）,携带3种基因型的占14.6%（7/48）,携带4种基因型的占10.4%（5/48）.CTX-M型β-内酰胺酶基因的检出率最高（30/48,62.5%）,其次为TEM型（26/48,54.2%）和SHV型（25/48,52.1%）.产DHA-1型AmpC酶的肺炎克雷伯菌有9株,且有8株与ESBLs并存.同时还检测到3株产KPC-2型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌.ESBLs表型确认试验结果的假阴性率为23.1%（9/39）.结论医院感染肺炎克雷伯菌的β-内酰胺基因分布复杂,临床上呈多药耐药状态.

关键词： β-内酰胺酶类基因型克雷伯菌,肺炎聚合酶链反应

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细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗诱导小鼠脾细胞增殖变化的研究

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热带医学杂志 2010年第1期10卷 1-4页

作者：周必英陈雅棠李文桂杨梅重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 遵义医学院寄生虫学教研室遵义563003

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠的囊重抑制率及脾细胞增殖的变化。方法将细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗分别采用皮下注射、肌肉注射、鼻腔内接种和口服灌胃4种途径免疫BALB/c小... 详细信息

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠的囊重抑制率及脾细胞增殖的变化。方法将细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗分别采用皮下注射、肌肉注射、鼻腔内接种和口服灌胃4种途径免疫BALB/c小鼠,免疫后8周每鼠用50个Eg原头节攻击感染,感染后25周剖杀小鼠,分离细粒棘球蚴包囊并称重,计算囊重抑制率;取脾,分离脾细胞,用Eg粗抗原(EgAg)或刀豆素A(ConA)刺激培养,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测免疫小鼠脾细胞增殖反应,同时设有空载体、Bb和MRS对照。结果以上4种疫苗接种组小鼠的囊重抑制率分别为45.33%、41.33%、70.67%和62.67%;疫苗接种组的脾细胞明显增殖;鼻腔内接种和口服免疫组的脾细胞增殖显著高于皮下和肌肉注射组。结论细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗可诱导小鼠产生特异性的细胞免疫反应。

关键词：细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗脾细胞增殖

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细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗诱导BALB/c小鼠的保护力观察

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中国病原生物学杂志 2010年第2期5卷 111-114页

作者：周必英陈雅棠李文桂杨梅重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所重庆400016 贵州省遵义医学院寄生虫学教研室贵州遵义563003

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠的囊重抑制率、抗体及其亚类的变化。方法将细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗分别采用皮下注射、肌肉注射、鼻腔内接种和口服灌胃4种途径免疫BALB/... 详细信息

目的探讨细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫和Eg原头节攻击后小鼠的囊重抑制率、抗体及其亚类的变化。方法将细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗分别采用皮下注射、肌肉注射、鼻腔内接种和口服灌胃4种途径免疫BALB/c小鼠,免疫后8周每鼠用50个Eg原头节攻击感染,感染后25周剖杀小鼠,分离细粒棘球蚴包囊并称重,计算囊重抑制率;收集血清,常规ELISA测定血清IgG及其亚类和IgE水平,试验设有空载体、Bb和MRS对照。结果皮下注射组、肌肉注射组、鼻腔内接种组和口服灌胃组免疫小鼠的囊重抑制率分别为45.33%、41.33%、70.67%和62.67%,血清IgGI、gG2aI、gG2b和IgG1水平显著升高,IgG3和IgE水平显著降低。结论接种Bb-Eg95-EgA31疫苗能诱导小鼠产生保护力,IgGI、gG2aI、gG2b和IgG1起重要作用。

关键词：细粒棘球绦虫重组Bb—Eg95 EgA31疫苗保护力

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HAART治疗的儿童艾滋病患者CD8+T细胞活化分子CD38和HLA-DR水平研究

HAART治疗的儿童艾滋病患者CD8+T细胞活化分子CD38和HLA-DR水平研...

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中国医师协会第三届感染科医师大会

作者：靳昌忠谢天胜程林芳冯婷婷李杰方美新吴南屏冯磊吴丽娟浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室 310003 浙江大学医学院病原生物学系浙江省台州学院医学院内科教研室

目的：观察HAART治疗对我国儿童艾滋病患者CD8+T细胞活化标志分子CD38和HLA-DR表达水平的影响及其与病情进展的关系.方法：对194例接受HAART治疗的儿童艾滋病患者进行横断面研究研究,用流式细胞术检测CD4+、CD8+T细胞数,以及CD3 8+/CD8+... 详细信息

目的：观察HAART治疗对我国儿童艾滋病患者CD8+T细胞活化标志分子CD38和HLA-DR表达水平的影响及其与病情进展的关系.方法：对194例接受HAART治疗的儿童艾滋病患者进行横断面研究研究,用流式细胞术检测CD4+、CD8+T细胞数,以及CD3 8+/CD8+和HLA-DR+/CD8+T细胞比例,RT-PCR检测血浆HIV RNA载量.并检测52例健康儿童CD38+/CD8+和HLA-DR+/CD8+T细胞比例作为正常对照.结果：根据病毒载量,194例儿童AIDS患者135例病毒载量＜400copies/ml,59例病毒载量≥400copies/ml组.结论：儿童艾滋病患者CDB+T细胞活化程度与病毒载量成正比，有效的HAART治疗能够显著地降低HIV感染者免疫活化程度，CD8+/CD38+和CD8+/HLA-DR十T细胞百分比可能是资源有限地区替代病毒载量检测的潜在指标。

关键词：艾滋病儿童患者 T淋巴细胞抗病毒治疗临床应用

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