检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2013年第15期35卷 1552-1557页

作者：幸宇邓世雄陈俊霞重庆医科大学基础医学院法医生物信息学研究室 400016 重庆医科大学基础医学院:细胞生物学及遗传学教研室分子医学与肿瘤研究中心 400016

目的研究沉默整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因表达,对人舌鳞癌细胞生长、侵袭和转移能力的影响。方法通过用ILK mRNA的特异性siRNA表达载体和无同源性的对照载体,在脂质体介导下稳定转染人舌鳞癌TCA8113细胞,分为TCA811... 详细信息

目的研究沉默整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因表达,对人舌鳞癌细胞生长、侵袭和转移能力的影响。方法通过用ILK mRNA的特异性siRNA表达载体和无同源性的对照载体,在脂质体介导下稳定转染人舌鳞癌TCA8113细胞,分为TCA8113组、TCA8113 vector组和TCA8113 siILK组,通过筛选鉴定后,用MTT法、划痕试验和Transwell法分别检测细胞生长、迁移和侵袭能力,用Western blot分析细胞中ILK、p-Akt、p-GSK3β及Snail等的表达。结果沉默ILK基因表达显著抑制了细胞的生长、迁移和侵袭能力,接种的第48、72、96、120小时,TCA8113 siILK组的抑制率分别为17%、29%、25%、42%,迁移能力较TCA8113组和TCA8113 vector组分别下降67%和66%,侵袭能力则较两个对照组下降了67%和68%,p-Akt、p-GSK3β及Snail的表达较TCA8113组和TCA8113 vector组分别降低了45%和53%,57%和61%,74%和73%。结论抑制ILK基因的表达可通过Akt/GSK3β/Snail途径,显著抑制人舌鳞癌TCA8113细胞的生长、迁移和侵袭潜能,可作为治疗人舌鳞癌的靶蛋白。

关键词：整合素连接激酶人舌鳞癌细胞肿瘤生长转移侵袭

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p53基因第72位密码子多态性与剖宫产术后病理性瘢痕的相关性

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中华整形外科杂志 2013年第3期29卷 206-210页

作者：廖农鲁峰赵伟曾位森李映桃王少晶高建华广州医学院第三附属医院整形美容科 510150 南方医科大学南方医院整形外科广州510515 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广州医学院第三附属医院妇产科

目的研究p53基因第72位密码子（codon72）多态性与剖宫产术后病理性瘢痕发生的关系。方法对广州医学院第三附属医院产科行剖宫产术的303例女性，于术后3—5d抽取外周静脉血2ml，用荧光分子信标PCR法检测其血液标本的p53基因codon72多态... 详细信息

目的研究p53基因第72位密码子（codon72）多态性与剖宫产术后病理性瘢痕发生的关系。方法对广州医学院第三附属医院产科行剖宫产术的303例女性，于术后3—5d抽取外周静脉血2ml，用荧光分子信标PCR法检测其血液标本的p53基因codon72多态性。分别于术后第3、6、12个月对所有病例进行电话随访，其中有19例随访至18个月，观察其病理性瘢痕发生情况，以及其与p53基因codon72多态性位点基因型的关系。用SPSS13．0软件进行统计学分析。结果303例产妇中发生病理性瘢痕增生30例，273例为正常愈合。2组产妇p53基因codon723种基因型（C／C、C／G和G／G）频率总体上有显著差异；病理性瘢痕增生组产妇C／C基因型频率为46．7％（14／30），高于正常组的17．6％（48／273），差异有统计学意义（P〈0．01）；在病理性瘢痕增生产妇中，C／C基因型频率显著高于C／G型（33．3％，10／30）和G／G型（20．0％，6／30），差异均有统计学意义（P〈0．01）；在病理性瘢痕增生产妇中，c等位基因频率为63．3％，也显著高于G等位基因频率（36．7％，P〈0．01），OR值为2．30。结论p53基因codon72C等位基因与剖宫产术后病理性瘢痕的发生有一定的关联性。

关键词： p53基因多态性剖宫产术瘢痕荧光分子信标PCR

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c-ski基因重组腺病毒质粒的构建及其对肿瘤相关成纤维细胞增殖的影响

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中国生物制品学杂志 2013年第12期26卷 1738-1742页

作者：王黎阳赵浏阳彭琼乐孙艳柳满然重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

目的构建携带c-ski基因的重组腺病毒质粒,并检测其对肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)增殖活力的影响。方法以pcDNA3-c-ski质粒为模板,PCR扩增c-ski基因,与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,构建重组穿梭质粒pAdT... 详细信息

目的构建携带c-ski基因的重组腺病毒质粒,并检测其对肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)增殖活力的影响。方法以pcDNA3-c-ski质粒为模板,PCR扩增c-ski基因,与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,构建重组穿梭质粒pAdTrack-c-ski,经PmeⅠ线性化后,转化感受态大肠埃希菌BJ5183,获得重组腺病毒质粒,经PacⅠ线性化后,转染HEK-293细胞,获得重组腺病毒,经扩增及纯化后测定病毒滴度。将纯化的重组腺病毒感染乳腺癌CAFs,采用Western blot法检测感染细胞中c-Ski蛋白的表达水平;MTT法和细胞计数法检测重组腺病毒对CAFs细胞增殖活力的影响。结果重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切鉴定证明构建正确;转染HEK-293细胞48 h后可见大量绿色荧光蛋白的表达,纯化的重组腺病毒的滴度为3.11×1010IFU/ml;感染重组腺病毒的乳腺癌CAFs中c-Ski蛋白的表达水平明显高于空病毒组和空白对照组(P<0.001),且增殖活力明显高于空白对照组(P<0.05)。结论成功构建了表达c-ski基因的重组腺病毒质粒,其可明显促进CAFs的增殖,为进一步研究c-Ski对CAFs增殖分化等生物学功能的影响及作用机制提供了实验依据。

关键词： c-ski基因腺病毒成纤维细胞细胞增殖

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Varp过表达降低腺病毒感染细胞效率的研究

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激光生物学报 2013年第5期22卷 436-440页

作者：王芳苏晓波张岚广州医科大学医学遗传学及细胞生物学教研室广东广州510182

目的:探讨Varp蛋白对腺病毒感染细胞效率的影响。方法:构建稳定表达Varp蛋白的HEK293细胞株,用携带EGFP基因的腺病毒载体感染细胞,通过荧光显微镜观察及Western Blotting等方法检测腺病毒对不同细胞感染效率的差别。结果:腺病毒对稳定... 详细信息

目的:探讨Varp蛋白对腺病毒感染细胞效率的影响。方法:构建稳定表达Varp蛋白的HEK293细胞株,用携带EGFP基因的腺病毒载体感染细胞,通过荧光显微镜观察及Western Blotting等方法检测腺病毒对不同细胞感染效率的差别。结果:腺病毒对稳定过表达Varp蛋白的细胞的感染效率较对照细胞明显下降。结论:Varp蛋白在细胞中稳定过表达能够降低腺病毒感染细胞的效率。

关键词： Varp 腺病毒增强型绿色荧光蛋白 HEK293细胞

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加强基础医学专业研究生教学能力培养的探索

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基础医学教育 2013年第8期15卷 802-804页

作者：林骏杨翠兰罗深秋南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广州510515

探索在基础医学专业研究生培养中,如何加强研究生教学能力的培养,其具体实施过程包括安排研究生参加本科生实验教学、本科生实习带教、组织中期考核的理论课试讲及定期学术汇报。加强教学能力培养是提高研究生整体素质,增加就业竞争力... 详细信息

探索在基础医学专业研究生培养中,如何加强研究生教学能力的培养,其具体实施过程包括安排研究生参加本科生实验教学、本科生实习带教、组织中期考核的理论课试讲及定期学术汇报。加强教学能力培养是提高研究生整体素质,增加就业竞争力的有效途径。

关键词：基础医学研究生教育教学能力

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一例无症状8号三体的遗传学构成初探

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分子诊断与治疗杂志 2013年第4期5卷 224-226页

作者：李佩琼刘翠娴林俊伟田琪章钧广州医科大学基础学院医学遗传学与细胞生物学教研室广东广州510182 中山大学附属第三医院产科实验室广东广州510630

目的针对一例无症状的8号染色体三体的患者,研究其8号染色体的来源机制和作用机制。方法利用患者外周血进行淋巴细胞培养及G显带技术分析,以确定淋巴细胞核型;利用患者外周血总DNA进行SNP微阵列技术分析,以确定各类有核细胞的分子核型... 详细信息

目的针对一例无症状的8号染色体三体的患者,研究其8号染色体的来源机制和作用机制。方法利用患者外周血进行淋巴细胞培养及G显带技术分析,以确定淋巴细胞核型;利用患者外周血总DNA进行SNP微阵列技术分析,以确定各类有核细胞的分子核型。结果患者外周血淋巴细胞核型为47,XX,+8;患者外周血各种有核细胞总DNA基因型为47,XX,+8。结论确诊患者外周血有核细胞的核型均为47,XX,+8,并且多出来的那条染色体可能由于第二次减数分裂不分离而导致的,尚不能明确该患者没有明显临床症状的机制。

关键词： 8号染色体三体核型分析 SNP微阵列技术分析

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Rheb突变体重组腺病毒载体的构建及鉴定

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泰山医学院学报 2013年第10期34卷 721-724页

作者：赵莉邹镇洪叶永斌侯敬申广州医科大学药学院蛇毒研究所广东广州510182 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 广州医科大学附属第二医院急诊外科广东广州510260

目的构建携带野生型Rheb(WT)和Rheb突变体(持续活化型Q64L和显性失活型D60K)重组腺病毒载体,验证其携带的Rheb WT和Rheb突变基因在MCF-7细胞中的表达情况及其对血清饥饿的乳腺癌细胞MDAMB-231增殖的影响。方法采用细胞内同源重组法构建... 详细信息

目的构建携带野生型Rheb(WT)和Rheb突变体(持续活化型Q64L和显性失活型D60K)重组腺病毒载体,验证其携带的Rheb WT和Rheb突变基因在MCF-7细胞中的表达情况及其对血清饥饿的乳腺癌细胞MDAMB-231增殖的影响。方法采用细胞内同源重组法构建携带Rheb和Rheb突变体的重组腺病毒载体pacAd5CMV-Rheb,PCR法检测病毒上清;将病毒上清感染MCF-7细胞后Western blotting(WB)检测Rheb及下游产物表达。将重组腺病毒感染血清饥饿的乳腺癌细胞MDA-MB-231并观察细胞增殖情况。结果酶切、测序及PCR表明构建的重组腺病毒载体携带Rheb和Rheb突变基因。重组腺病毒体外感染MCF-7细胞,WB检测到腺病毒感染的MCF-7细胞内Rheb蛋白表达较对照组明显增高,S6及β-actin蛋白的表达在各组间没有统计学差异。转染Rheb WT和Q64L组MCF-7细胞的P-S6表达较对照组和D60K组显著增高。无血清培养条件下,感染Rheb Q64L组的乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖能力较对照组及WT组强,而转染D60K组则较其他三组(EGFP、WT和Q64L组)的细胞增殖明显减弱。结论成功构建野生型Rheb和Rheb突变体重组腺病毒质粒,为体内外进一步研究Rheb基因对乳腺癌的作用奠定了基础。

关键词：腺病毒载体乳腺癌 MCF-7 MDA-MB-231

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广西地区散发性乳腺癌BRCA1突变及其相关临床、组织病理特征的研究

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广西医科大学学报 2013年第4期30卷 496-499页

作者：刘军杰陈圆圆李智贤曾健袁志刚张海添廖新红丁雪明罗丹王斯达广西医科大学第一附属医院超声科南宁530021 广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科南宁530021 广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室南宁530021

目的:探讨广西地区散发性乳腺癌BRCA1基因的突变情况,及其与乳腺癌的临床、组织病理特征。方法:采用PCR联合基因直接测序法检测广西地区235例乳腺癌患者(包括155例汉族及80例壮族乳腺癌患者)BRCA1基因的突变情况,同时采用免疫组化方法... 详细信息

目的:探讨广西地区散发性乳腺癌BRCA1基因的突变情况,及其与乳腺癌的临床、组织病理特征。方法:采用PCR联合基因直接测序法检测广西地区235例乳腺癌患者(包括155例汉族及80例壮族乳腺癌患者)BRCA1基因的突变情况,同时采用免疫组化方法检测乳腺癌组织中ER、PR及CerbB-2的表达情况。结果:①235例乳腺癌患者BRCA1突变率为8.5%(20/235);其中汉族与壮族乳腺癌患者BRCA1突变率分别为7.1%(11/155)、11.3%(9/80),两者比较差异无统计学意义(χ2=1.169,P=0.280)。②20例BRCA1突变乳腺癌中CerbB-2阴性表达率为65.0%,三阴性乳腺癌(TNBC)检出率为35.0%;而无BRCA1突变乳腺癌中CerbB-2阴性表达率为30.0%,TNBC检出率为14.8%,两组比较CerbB-2阴性表达率及TNBC检出率差异有统计学意义(χ2=10.031,P=0.002;χ2=4.018,P=0.045)。结论:广西地区散发性乳腺癌BRCA1基因突变率相对较低,汉族与壮族乳腺癌患者BRCA1突变率无明显差异;BRCA1突变乳腺癌CerbB-2阴性表达率高,与三阴性乳腺癌关系密切,提示预后可能较差。

关键词：乳腺癌 BRCA1基因突变病理三阴性乳腺癌

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小鼠载脂蛋白E基因的组织表达谱分析

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广西医科大学学报 2013年第6期30卷 847-849页

作者：赖青鸟畅荣妮袁广之马军杨益金陆俊佳侯伟舒伟袁志刚广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室南宁530021 广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科南宁530021 广西医科大学第三附属医院检验科南宁530031

目的:探讨小鼠载脂蛋白E(apoE)基因的组织表达特点。方法:提取小鼠的肝、脑和心等17个组织的RNA,采用RTPCR的方法对apoE基因在上述组织中的表达进行研究。结果:apoE基因在肝组织表达最强,其次是脊髓和脑,肺、肾、心、脾、胸腺、小肠、... 详细信息

目的:探讨小鼠载脂蛋白E(apoE)基因的组织表达特点。方法:提取小鼠的肝、脑和心等17个组织的RNA,采用RTPCR的方法对apoE基因在上述组织中的表达进行研究。结果:apoE基因在肝组织表达最强,其次是脊髓和脑,肺、肾、心、脾、胸腺、小肠、胃、膀胱、血液、肾上腺、子宫、胰腺和主动脉也有不同程度的表达,但在腹肌中几乎不表达。结论:小鼠的apoE基因组织表达谱与人的apoE基因组织表达谱有较高的一致性,与猪的相比差异也不大。

关键词：小鼠载脂蛋白E 组织表达谱

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双歧杆菌表达的重组人GrB-VRB融合蛋白诱导KDR阳性细胞凋亡

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南方医科大学学报 2012年第7期32卷 1059-1063页

作者：陈蕾曾位森郑航南方医科大学南方医院肿瘤科广东广州510515 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515

目的在双歧杆菌中表达重组人颗粒酶B-血管内皮生长因子结合肽(GrB-VRB)融合蛋白并研究其对血管内皮生长因子受体I(IKDR)阳性细胞的作用。方法采用电穿孔法将重组表达载体转入双歧杆菌,以ELISA和免疫印迹鉴定表达产物,以细胞增殖试验和TU... 详细信息

目的在双歧杆菌中表达重组人颗粒酶B-血管内皮生长因子结合肽(GrB-VRB)融合蛋白并研究其对血管内皮生长因子受体I(IKDR)阳性细胞的作用。方法采用电穿孔法将重组表达载体转入双歧杆菌,以ELISA和免疫印迹鉴定表达产物,以细胞增殖试验和TUNEL法分析其对KDR阳性细胞的影响。结果工程化化双歧杆菌培养物的上清和菌体中均有重组产物,重组人GrB-VRB能有效抑制KDR阳性如人脐静脉血管内皮细胞株HUVEC、小鼠结肠癌细胞株CT-26细胞增殖、细胞死亡,这种死亡的机制是细胞凋亡;但对KDR阴性细胞则无这些作用。结论工程化双歧杆菌能分泌性表达重组GrB-VRB融合蛋白,其在VRB的靶向作用下,GrB可有效地诱导KDR阳性细胞凋亡。

关键词：颗粒酶B 血管内皮生长因子受体结合肽双歧杆菌细胞凋亡

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