检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2021年第7期16卷 759-763,768页

作者：唐泽丽吴展帅余新炳黄艳中山大学中山医学院寄生虫学教研室广东广州510080 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室广西中医药大学基础医学院医学免疫学教研室广西高发传染病中西医结合转化医学重点实验室

目的探究重组表达华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CsCP)的枯草杆菌芽孢(B.s-CsCP)的保存方法,并评价其保存效果。方法制备B.s-CsCP芽孢并将其分为单蒸水重悬(液体芽孢)和冷冻干燥成粉末(冻干芽孢)两份,分别用EP管均等分装,储存在室温(RT)、4... 详细信息

目的探究重组表达华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶(CsCP)的枯草杆菌芽孢(B.s-CsCP)的保存方法,并评价其保存效果。方法制备B.s-CsCP芽孢并将其分为单蒸水重悬(液体芽孢)和冷冻干燥成粉末(冻干芽孢)两份,分别用EP管均等分装,储存在室温(RT)、4℃、-20℃及-80℃温度条件下,使用稀释平板计数法定期检测芽孢的存活率,免疫荧光法检测芽孢保存24个月后融合蛋白的表达情况。将4℃保存≥24个月的液体芽孢(B.s-CsCP-W-4)、RT保存≥24个月的冻干芽孢(B.s-CsCP-P-RT)及新鲜制备的重组芽孢分别经口免疫小鼠,ELISA及微板法测定小鼠肠黏液和胆汁中CsCP特异性sIgA水平以及肝功能指标。结果液体芽孢在4℃、-20℃及-80℃保存24个月的存活率分别为84.5%、93.5%和94.3%,冻干芽孢在RT、4℃、-20℃及-80℃保存24个月的存活率分别为84.6%、92.4%、93.8%和92.8%。除了RT,液体芽孢在其余3个温度下保存24个月均具有较高的CsCP融合蛋白表达率,冻干芽孢在4个温度条件下均高表达。B.s-CsCP-W-4和B.s-CsCP-P-RT均能显著提高小鼠肠黏液以及胆汁中特异性sIgA的水平(P<0.01),与新鲜制备的芽孢比较差异无统计学意义(P>0.05)。此外,B.s-CsCP-W-4和B.s-CsCP-P-RT对小鼠肝功能均无不良影响。结论 B.s-CsCP芽孢的低温液体和常温冻干粉剂型均能长期有效保存,其具有制作简便、安全有效及存储和运输方便等优势。

关键词：华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶枯草杆菌芽孢口服疫苗保存

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UHRF2通过PI3K/Akt信号通路促进肝细胞癌细胞的增殖和转移

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第三军医大学学报 2020年第13期42卷 1323-1330,1344页

作者：程凤娟孙菁婕方娴韵陈思圜刘尚静吴可佳李招娣蒋世铭陈勇段昌柱重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学附属第一医院肝胆外科重庆400016

目的探讨泛素样含PHD和环指域蛋白2(ubiquitin-like with PHD and RING finger domains 2,UHRF2)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)增殖和转移中的作用及其机制。方法检索TCGA数据库中HCC的基因表达谱数据和患者的临床数据,分析UHRF2的表达差异与HCC患者的预后情况,采用Cox比例风险模型探索UHRF2对HCC患者预后的独立作用;收集2018年7月至2019年12月在重庆医科大学附属第一医院确诊的20例肝癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,采用免疫组化检测UHRF2蛋白的表达,分析蛋白的表达与患者临床病理参数的关系;构建UHRF2表达质粒,通过RT-qPCR和Western blot检测转染效率,在HCC细胞系中过表达UHRF2进行划痕及平板克隆实验检测肝细胞癌细胞的迁移和增殖情况;基因富集分析探讨UHRF2与PI3K/Akt通路活化的关系,Western blot检测Akt、PI3K、p-Akt、p-PI3K的表达。结果 TCGA数据库分析显示UHRF2 mRNA在HCC组织中表达明显升高并提示预后不良;Cox多因素回归分析发现UHRF2的表达是影响患者预后的独立危险因素。免疫组化检测结果显示UHRF2蛋白在HCC中的表达明显高于癌旁组织。UHRF2的高表达与肿瘤大小(P=0.002)、肿瘤转移(P=0.002)密切相关。在迁移实验和平板克隆实验中,UHRF2过表达组的划痕愈合能力及增殖能力较对照组显著增强(P<0.01);PI3K/Akt通路在UHRF2高表达HCC患者中显著富集;Western blot检测结果显示,UHRF2过表达组的p-Akt、p-PI3K的表达水平明显上调(P<0.05)。结论 UHRF2的表达水平与HCC的预后密切相关,是影响患者预后的独立危险因素;过表达UHRF2通过PI3K/Akt信号通路促进HCC细胞的增殖和转移。

关键词：肝细胞癌 UHRF2 细胞迁移细胞增殖 PI3K/Akt信号通路

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KIF3A在单侧输尿管梗阻小鼠肾脏中的表达及意义

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南方医科大学学报 2020年第2期40卷 219-224页

作者：古文清潘文斌朱茜肖潇赵岩岩刘雅琴刘俊李明基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 中山大学孙逸仙纪念医院生物样本库广东广州510120 南方医科大学药学院广东广州510515 南方医科大学珠江医院泌尿外科广东广州510028

目的通过研究KIF3A在单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠和TGF-β1诱导的NRK-52E细胞中的表达情况,探讨KIF3A在肾间质纤维化中的作用。方法将36只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(Sham,n=18)和单侧输尿管梗阻组(UUO,n=18),分别于术后7、14、21 d处... 详细信息

目的通过研究KIF3A在单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠和TGF-β1诱导的NRK-52E细胞中的表达情况,探讨KIF3A在肾间质纤维化中的作用。方法将36只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(Sham,n=18)和单侧输尿管梗阻组(UUO,n=18),分别于术后7、14、21 d处死小鼠。苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)三色法染色和天狼星红(Sirius Red)染色观察小鼠肾间质纤维化程度,RT-PCR、免疫组织化学(IHC)和免疫印迹(Western blot)检测小鼠肾组织KIF3A的表达和分布。免疫印迹检测小鼠肾组织KIF3A、E-cadherin和α-SMA蛋白的表达。TGF-β1诱导NRK-52E细胞转分化后,免疫印迹检测KIF3A、E-cadherin、α-SMA、Wnt4和β-catenin蛋白的表达。结果与Sham组相比,UUO小鼠肾间质纤维化程度随着梗阻时间延长而增加,表明造模成功。同时,KIF3A mRNA和蛋白表达均增高,于21 d达到高峰,α-SMA蛋白表达显著上调,E-cadherin蛋白表达明显降低。NRK-52E细胞发生转分化时,KIF3A蛋白的表达增多(P<0.001),同时wnt/β-catenin信号通路中Wnt4和β-catenin蛋白表达增加(P<0.05,P<0.0001)。结论KIF3A可能通过wnt/β-catenin信号通路介导的上皮细胞-间充质转化参与肾纤维化的发生发展过程。

关键词： KIF3A 肾间质纤维化 wnt/β-catenin信号通路 EMT

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细粒棘球绦虫Eg10诱导树突状细胞产生Th2免疫反应

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中国人兽共患病学报 2020年第6期36卷 439-447页

作者：王娅娜王婵王双宁夏医科大学基础学院医学遗传学与细胞生物学教研室银川750004 宁夏医科大学包虫病重点实验室银川750004 宁夏医科大学科学技术研究中心银川750004

目的研究细粒棘球绦虫蛋白10(antigen 10 of Echinococcus granulosus Eg10)对小鼠感染细粒棘球绦虫免疫机制的影响。方法通过体外培养骨髓来源的小鼠树突状细胞(Bone marrow dendritic cell,BMDC),用不同的抗原包囊囊液(hydatid fluid ... 详细信息

目的研究细粒棘球绦虫蛋白10(antigen 10 of Echinococcus granulosus Eg10)对小鼠感染细粒棘球绦虫免疫机制的影响。方法通过体外培养骨髓来源的小鼠树突状细胞(Bone marrow dendritic cell,BMDC),用不同的抗原包囊囊液(hydatid fluid HF)、Eg10、脂多糖(lipopolysaccharide LPS)单独或联合作用DC,共6组。通过扫描电镜和透射电镜观察各组DC形态学的变化;通过流式细胞仪检测DC的吞噬能力、迁移能力的变化、刺激T细胞增殖能力的变化及DC表面分子的表达情况;利用ELISA检测DC分泌各种细胞因子的变化。结果Eg10抑制DC向成熟状态发展,与囊液对照组相比,DC表面仅增多了褶皱,两者均可提高DC吞噬能力;刺激T细胞的增殖能力很弱,但是能够提高Treg细胞的含量;同时发现Eg10组DC表面分子MHCII和CD86的表达量高于空白组,分泌高含量的IL-10,IL-6。通过给予LPS联合刺激DC形态趋于半成熟状态,细胞表面树突增加,表面分子MHCII、CD80、CD40的表达增高,CD86的表达量降低;IL-10和IL-6的含量也相应的下降。结论Eg10诱导DC产生Th2反应。

关键词：树突状细胞 Eg10 免疫应答细粒棘球绦虫

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LncRNA H2k2促进高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的研究

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中国细胞生物学学报 2020年第2期42卷 213-219页

作者：廖雨滋陈雯韵孙艳彭睿张政重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

该研究主要探讨lncRNA H2k2对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的影响,采用qRTPCR检测lncH2k2在正常及糖尿病肾病小鼠肾脏组织中的表达,以及高低糖培养的系膜细胞中的表达;FISH与qRT-PCR检测lncH2k2的亚细胞定位;qRT-PCR检测lncH2k2过表达... 详细信息

该研究主要探讨lncRNA H2k2对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的影响,采用qRTPCR检测lncH2k2在正常及糖尿病肾病小鼠肾脏组织中的表达,以及高低糖培养的系膜细胞中的表达;FISH与qRT-PCR检测lncH2k2的亚细胞定位;qRT-PCR检测lncH2k2过表达质粒及siRNA的转染效率;EdU检测转染lncH2k2过表达质粒或siRNA后系膜细胞增殖的变化。结果表明,lncH2k2在糖尿病肾病小鼠肾脏组织及高糖培养的系膜细胞中的表达升高,且lncH2k2主要分布于系膜细胞的细胞质中。在低糖培养的系膜细胞中转染lncH2k2过表达质粒后,与低糖培养的系膜细胞相比,过表达lncH2k2的低糖培养的系膜细胞增殖能力显著提高,并且将qRT-PCR检测筛选出的一条lncH2k2 siRNA转染到高糖培养的系膜细胞内,与高糖培养的系膜细胞相比,敲低lncH2k2后系膜细胞增殖能力显著降低。研究结果揭示,lncRNA H2k2在糖尿病肾病小鼠肾脏组织及系膜细胞中表达显著,lncRNA H2k2促进了系膜细胞增殖,这些结果表明,lncRNA H2k2可能参与了糖尿病肾病的发生发展。

关键词：糖尿病肾病长链非编码RNA 肾小球系膜细胞增殖

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雌二醇与ESR1靶向结合通过ERK信号通路调控软骨细胞的增殖

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南方医科大学学报 2019年第2期39卷 134-143页

作者：刘敏谢巍伟郑维尹丹旸罗瑞郭风劲重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室//发育生物学与模式动物平台重庆400016

目的探讨雌二醇(E2)/ESR1(ERα)对C28I2软骨细胞增殖的影响及可能的分子机制。方法应用Ad-Easy腺病毒包装系统构建和包装过表达腺病毒Ad-ESR1,Western blot及QPCR检测该基因在细胞中蛋白及RNA表达情况。在E2处理下,设立不同病毒感染组处... 详细信息

目的探讨雌二醇(E2)/ESR1(ERα)对C28I2软骨细胞增殖的影响及可能的分子机制。方法应用Ad-Easy腺病毒包装系统构建和包装过表达腺病毒Ad-ESR1,Western blot及QPCR检测该基因在细胞中蛋白及RNA表达情况。在E2处理下,设立不同病毒感染组处理C28I2细胞,Western blot检测各处理组C28I2细胞的自噬、凋亡相关蛋白的表达及ERK信号通路的磷酸化水平;免疫荧光实验观察细胞内自噬流的强弱;FCM检测各组细胞凋亡率及周期;QPCR检测mRNA水平增殖相关标志基因(PCNA)、细胞周期蛋白B1(CyclinB1)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达。ERK特异性抑制剂处理细胞,Western blot检测抑制ERK通路后自噬及凋亡相关蛋白表达,QPCR检测增殖相关标志基因表达。结果成功构建过表达腺病毒Ad-ESR1。过表达ESR1能够促进E2处理后LC3和ATG7的表达,促进LC3和LAMP1在细胞质中共定位,抑制cleaved caspase3、cleavedcaspase12的表达并且促进PCNA、cyclinB1和cyclinD1表达,且细胞内pERK明显减少;而干扰ESR1表达后,自噬相关蛋白表达减少,自噬流减弱,凋亡蛋白表达增加,增殖标志基因表达下调,细胞内pERK相对增加。特异性抑制剂阻断ERK活化,E2/ESR1诱导的自噬增加以及凋亡减少被抑制,增殖相关基因表达被抑制。结论 E2与ESR1的靶向结合可促进软骨细胞的增殖,其作用机制可能与抑制ERK信号通路活化从而促进自噬、抑制凋亡有关。

关键词： ESR1 自噬凋亡增殖 ERK信号通路雌二醇

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巨噬细胞mTOR活化促进小鼠机体有氧糖酵解

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赣南医学院学报 2020年第3期40卷 274-278页

作者：刘小琳柯志勇宋千成梁康檐南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515

目的:探讨巨噬细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)活性在有氧糖酵解中的调节作用。方法:对巨噬细胞特异性敲除TSC1小鼠(Lysm-Cre TSC1 flox/flox)和对照小鼠(TSC1 flox/flox)进行高脂饮食造模,通过葡萄糖糖耐量实验(IPGTT)和胰岛素耐受实... 详细信息

目的:探讨巨噬细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)活性在有氧糖酵解中的调节作用。方法:对巨噬细胞特异性敲除TSC1小鼠(Lysm-Cre TSC1 flox/flox)和对照小鼠(TSC1 flox/flox)进行高脂饮食造模,通过葡萄糖糖耐量实验(IPGTT)和胰岛素耐受实验(ITT)分析巨噬细胞mTOR活化对小鼠机体血糖的调节作用。雷帕霉素处理KO小鼠和WT小鼠的原代巨噬细胞,利用生化分析仪检测葡萄糖消耗和乳酸生成。用雷帕霉素(2 mg·g^-1)对两组小鼠灌胃处理,2周后行IPGTT实验。利用免疫荧光染色实验观察小鼠肝组织中6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-磷酸酶-3(PFKFB3)的分布。结果:通过高脂饮食造模后,小鼠体重明显增加,并出现了胰岛素抵抗。与WT小鼠比较,KO小鼠出现更加严重的胰岛素抵抗,胰岛素分泌的量也增多。雷帕霉素处理后,与WT小鼠相比,KO小鼠的原代腹腔巨噬细胞葡萄糖消耗量和乳酸生成均明显降低(P<0.05);小鼠进行雷帕霉素灌胃后,相比于WT小鼠,KO小鼠血糖值明显升高(P<0.05)。葡萄糖负荷30 min时血糖值达到最高,为21.85 mmol·L^-1。免疫荧光染色显示KO小鼠的肝组织有大量的PFKFB3蛋白表达。结论:巨噬细胞mTOR活化通过调节PFKFB3促进有氧糖酵解。

关键词：巨噬细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 6-磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-磷酸酶-3 有氧糖酵解

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巨噬细胞特异性敲除TSC1小鼠的构建

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宁夏医学杂志 2020年第5期42卷 385-387,I0001页

作者：刘小琳梁康檐南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515

目的为研究TSC1在巨噬细胞极化中的作用,拟建立巨噬细胞特异性敲除TSC1小鼠,提供稳定的动物模型。方法利用Cre-loxP系统构建巨噬细胞特异性敲除TSC1小鼠(LysM-Cre TSC1flox/flox),并通过PCR和Western-Blot鉴定模型建立是否成功。结果通... 详细信息

目的为研究TSC1在巨噬细胞极化中的作用,拟建立巨噬细胞特异性敲除TSC1小鼠,提供稳定的动物模型。方法利用Cre-loxP系统构建巨噬细胞特异性敲除TSC1小鼠(LysM-Cre TSC1flox/flox),并通过PCR和Western-Blot鉴定模型建立是否成功。结果通过PCR和Western-Blot鉴定LysM-Cre TSC1flox/flox模型建立成功,mTOR活性明显升高。结论成功构建巨噬细胞特异性敲除TSC1小鼠,为TSC1在巨噬细胞极化中的作用研究提供实验基础。

关键词：结节性硬化复合物1 巨噬细胞 mTOR 基因敲除

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EGFR及其信号通路在神经病理性疼痛中的作用

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中国神经免疫学和神经病学杂志 2020年第6期27卷 474-479页

作者：李阔韬李顺堂蓝玲唐梅龚健古谭国鹤广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室 530021 广西生物医药协同创新中心&广西再生医学重点实验室 530021 广西医科大学基础医学院人体解剖学教研室 530021 广西特色新型智库——中国-东盟脑科学创新发展研究中心 530021

神经病理性疼痛是由躯体感觉神经系统的原发性损害或功能障碍而直接引发的一系列疼痛症状总称,是一种常见而又棘手的慢性疼痛。中枢/外周敏化、离子通道表达异常、中枢去抑制、胶质细胞活化及炎性因子释放等均可诱发自发性疼痛与痛觉过... 详细信息

神经病理性疼痛是由躯体感觉神经系统的原发性损害或功能障碍而直接引发的一系列疼痛症状总称,是一种常见而又棘手的慢性疼痛。中枢/外周敏化、离子通道表达异常、中枢去抑制、胶质细胞活化及炎性因子释放等均可诱发自发性疼痛与痛觉过敏等临床表现。表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一种单链跨膜糖蛋白,属于酪氨酸激酶型受体,其激活后不仅能够刺激神经胶质细胞的增殖、分化和迁徙等过程,还可以诱导并维持不同条件下的痛敏反应,其介导的信号通路对神经病理性疼痛的发生发展具有重要作用。本文就EGFR及其信号通路在神经病理性疼痛中作用的研究进展进行综述。

关键词：神经病理性疼痛表皮生长因子受体 EGFR信号通路 EGFR抑制剂

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医学生电子邮件礼仪教育

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教育教学论坛 2020年第26期 137-138页

作者：王弘唐泽丽胡启平广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室广西南宁530021

电子邮件在正式交往中已被广泛应用,遵守电子邮件礼仪让沟通和交流更加高效,医学生学习电子邮件礼仪有助益其职业发展。本文调查研究发现,医学生在电子邮件礼仪方面所受教育不足,缺乏对电子邮件礼仪的了解及实践,期望得到电子邮件礼仪... 详细信息

电子邮件在正式交往中已被广泛应用,遵守电子邮件礼仪让沟通和交流更加高效,医学生学习电子邮件礼仪有助益其职业发展。本文调查研究发现,医学生在电子邮件礼仪方面所受教育不足,缺乏对电子邮件礼仪的了解及实践,期望得到电子邮件礼仪方面的教育。因此,本文梳理了电子邮件礼仪,对医学生使用电子邮件给出自己的建议。

关键词：医学生电子邮件礼仪教育

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