检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验动物学报 2017年第3期25卷 235-240页

作者：姚敦琛潘龙陈秉钧余雨中李晟杰胡桂和马明明涂永生广州医科大学基础学院生理学教研室广州511436 广州医科大学第三临床学院广州511436 广州医科大学第一临床学院广州511436 中山大学中山医学院药理学教研室广州510080

目的通过研究三种不同"二次打击"急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)动物模型的特点,寻找较为理想的ARDS动物模型。方法将48只大鼠随机分为4组,每组12只。对照组(Control组):尾静脉先注射生理盐水... 详细信息

目的通过研究三种不同"二次打击"急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)动物模型的特点,寻找较为理想的ARDS动物模型。方法将48只大鼠随机分为4组,每组12只。对照组(Control组):尾静脉先注射生理盐水(normal saline,NS)2.5 m L/kg,30 min后注射NS 2.5 m L/kg;油酸+油酸组(OA+OA组):尾静脉先注入OA 0.05 m L/kg,30 min后继续注射OA 0.5 m L/kg;内毒素+内毒素组(LPS+LPS组):尾静脉先注入LPS 2.5 mg/kg,30 min后继续注射LPS 2.5 mg/kg;油酸+内毒素组(OA+LPS组):尾静脉先注入OA 0.05 m L/kg,30 min后注射LPS 2.5 mg/kg。5 h后处死动物采集标本,检测动脉血气,支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中白细胞总数、多形核白细胞百分比(polymorphonuclear leukocyte ratio,PMN%)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNF-α)水平、总蛋白含量,肺干湿重比(lung wet-dry weight ratio,W/D),观察肺组织病理改变并进行肺损伤评分。结果与control组比较,LPS+LPS组、OA+OA组及OA+LPS组的氧分压(Pa O2)下降(P<0.05)、二氧化碳分压(Pa CO2)、BALF中白细胞总数、PMN%、TNF-α、总蛋白含量,W/D、肺损伤评分均升高(P<0.05)。OA+LPS组总蛋白含量、W/D均高于LPS+LPS组,差异有显著性(P<0.05),而与OA+OA组比较则差异无显著性;OA+LPS组BALF中白细胞计数、PMN%、TNF-α较OA+OA组高(P<0.05),而与LPS+LPS组比较则差异无显著性;OA+LPS组肺病理改变最典型,肺损伤评分最高。结论 OA+OA、LPS+LPS和OA+LPS复合打击法均可建立"二次打击"ARDS大鼠模型,其中OA+LPS复合打击法所复制的ARDS模型与临床ARDS特点更为接近,有利于研究ARDS的病理生理过程,是一种较为理想的"二次打击"ARDS动物模型。

关键词：急性呼吸窘迫综合征 “二次打击”模型油酸内毒素

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食品防腐剂苯甲酸钠多次给药对雌性大鼠肝脏、肾脏及卵巢毒性的研究

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广东医学 2018年第3期39卷 355-358页

作者：朱沁玲余蓓蒲玟静林红霞黄钱马明义西南医科大学临床医学院四川泸州646000 西南医科大学基础医学院医学细胞生物学与遗传学教研室四川泸州646000

目的研究食品防腐剂苯甲酸钠多次给药对雌性大鼠肝脏、肾脏及卵巢的毒性效应,以期为食品安全研究提供有价值的动物水平资料。方法选取40只健康雌性SD大鼠,随机分为4组,每组10只,低、中、高剂量组苯甲酸钠每次给药的剂量依次为0.34、0.68... 详细信息

目的研究食品防腐剂苯甲酸钠多次给药对雌性大鼠肝脏、肾脏及卵巢的毒性效应,以期为食品安全研究提供有价值的动物水平资料。方法选取40只健康雌性SD大鼠,随机分为4组,每组10只,低、中、高剂量组苯甲酸钠每次给药的剂量依次为0.34、0.68、1.36 g/kg,对照组给予不含苯甲酸钠的等剂量生理盐水,每日1次,连续给药6周。处死动物后计算卵巢的脏器指数;检测血清中肝肾功生化指标;采用ELISA试剂盒检测血清中抑制素B的浓度;HE染色观察肝脏、肾脏及卵巢组织切片的病理学变化;TUNEL化学染色法检测肝脏、肾脏及卵巢组织切片中细胞的凋亡率。以上结果均行组间两两比较观察病变有无统计学意义。结果与空白组比较,苯甲酸钠低、中、高剂量组大鼠的血清学指标有明显改变(P<0.05),其中高剂量组的改变最为显著;实验组大鼠肝脏组织均有病理学改变,肾脏和卵巢组织未见明显病理学改变;高剂量组大鼠卵母细胞的凋亡率与正常对照组相比明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05);其余结果实验组与正常组对比差异无统计学意义。结论食品防腐剂苯甲酸钠多次给药对大鼠肝脏、肾脏的功能均有损害,浓度越高,毒性越大;高浓度的苯甲酸钠有明显促进大鼠卵母细胞的凋亡作用而对雌性大鼠具有生殖毒性。

关键词：苯甲酸钠毒性大鼠肝脏肾脏卵巢

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细粒棘球绦虫原头节抗原分子Eg-08002的克隆、表达及免疫反应性分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2017年第6期35卷 559-562页

作者：杨慧赵殷奇李子华赵嘉庆王浩王娅娜朱明星赵巍宁夏医科大学科技中心银川750004 宁夏医科大学包虫病实验室银川750004 宁夏医科大学基础医学院银川750004 宁夏医科大学基础医学院病原与免疫教研室银川750004 宁夏医科大学基础医学院遗传与细胞生物教研室银川750004

目的筛选细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)原头节抗原分子,并进行克隆、表达及免疫反应性分析。方法在对细粒棘球绦虫六钩蚴和原头节阶段表达的转录组测序数据进行差异分析的基础上,筛选出原头节阶段特异性表达的抗原分子。PCR... 详细信息

目的筛选细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)原头节抗原分子,并进行克隆、表达及免疫反应性分析。方法在对细粒棘球绦虫六钩蚴和原头节阶段表达的转录组测序数据进行差异分析的基础上,筛选出原头节阶段特异性表达的抗原分子。PCR扩增后克隆至p ET28a载体,构建原核表达载体pET28a-Eg-08002,转化至大肠埃希菌(Escherichia coli)JM109,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,抗His标签镍亲和层析柱纯化重组蛋白rEg-08002,快速免染聚丙烯酰胺电泳分析表达产物;蛋白质印迹(Western blotting)分析rEg-08002的免疫反应性。ELISA分析重组蛋白rEg-08002与细粒棘球蚴病患者血清和健康人血清的免疫反应性。结果筛选出了原头节中高表达的抗原分子Eg-08002,大小为612 bp,构建原核表达载体pET28a-Eg-08002。快速免染聚丙烯酰胺电泳和Western blotting分析结果显示重组蛋白rEg-08002在*** JM109中获得高效表达,在相对分子质量(Mr)约为23 000处可见重组蛋白rEg-08002条带,主要以包涵体形式存在,r Eg-08002可被感染棘球蚴的小鼠血清识别。ELISA分析结果表明,12份细粒棘球蚴病患者血清和12份健康人血清的平均吸光度(A450)值分别为1.245±0.265和0.469±0.006,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论筛选出了原头节中高表达的抗原分子Eg-08002,获得的重组蛋白rEg-08002具有较好的免疫反应性。

关键词：细粒棘球蚴克隆表达免疫反应性

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NT-3基因修饰的MSCs脑内移植对颞叶癫痫大鼠作用的研究

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华中科技大学学报（医学版） 2017年第2期46卷 180-184页

作者：王林杰谢柳马猛何嫣杜展鑫潘晓佳朱晓琴雷水生广州医科大学基础学院生理学教研室广州511436 湖南医药学院病理学教研室湖南410006 广州医科大学第二临床学院广州511436 广州医科大学附属第五医院皮肤美容科广州510700

目的观察神经营养素-3(Neurotrophin 3,NT-3)基因修饰的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)脑内移植对颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)的作用及其对大鼠海马苔藓纤维发芽(mossy fiber sprouting,MFS)的影响。方法将构建成功的LV-GFP-NT-3转染大鼠骨髓MSCs,检测转染后MSCs内NT-3的表达;建立海人酸(Kainic acid,KA)TLE大鼠模型;将NT-3基因修饰的MSCs移植至海人酸TLE大鼠侧脑室模型后,观察其对TLE大鼠行为学、脑电图的影响,并用Timm组织化学染色法观察海马结构MFS;Western blot检测细胞移植后大鼠海马组织中NT-3的表达。结果 LV-GFP-NT-3转染细胞后,MSCs中能够正确过表达NT-3;细胞移植后NT-3-MSCs组TLE大鼠的发作次数减少,发作级别减低;脑电图结果表明TLE发作痫波减少;NT-3-MSCs组大鼠海马CA3区内分子层及始层未见到或极少见到Timm染色颗粒,Timm染色颗粒较对照组和LV-MSCs组显著减少;Western blot检测结果显示NT-3-MSCs组大鼠海马组织中NT-3含量明显增高。结论 NT-3基因修饰的MSCs脑内移植对颞叶癫痫大鼠有明显的抑制作用。

关键词：神经营养素-3 间充质干细胞颞叶癫痫慢病毒载体

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细粒棘球绦虫重组抗原铁蛋白诱导小鼠骨髓树突状细胞免疫应答的机制研究

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四川大学学报（医学版） 2017年第6期48卷 834-839页

作者：王娅娜王强王婵赵巍宁夏医科大学基础学院医学遗传学与细胞生物学教研室银川750004 宁夏医科大学包虫病重点实验室银川750004 宁夏医科大学科学技术研究中心银川750004

目的探索细粒棘球绦虫重组抗原铁蛋白(***)免疫小鼠产生抵抗原头蚴感染的保护机制。方法利用***和囊液(HF)两种细粒棘球绦虫抗原与小鼠骨髓树突状细胞(BMDC)进行体外培养,共分6组:HF组(加入HF 30μg/mL)、***组(加入抗原*** 1μg/mL)均... 详细信息

目的探索细粒棘球绦虫重组抗原铁蛋白(***)免疫小鼠产生抵抗原头蚴感染的保护机制。方法利用***和囊液(HF)两种细粒棘球绦虫抗原与小鼠骨髓树突状细胞(BMDC)进行体外培养,共分6组:HF组(加入HF 30μg/mL)、***组(加入抗原*** 1μg/mL)均为单独刺激组,***+LPS组(加入抗原*** 1μg/mL和LPS 100ng/mL)和HF+LPS组(加入HF 30μg/mL和LPS 100ng/mL)为联合刺激组,LPS阳性对照组(加入LPS 100ng/mL),空白对照组(不加任何抗原)。通过电镜检测各组BMDC形态学的变化;流式细胞技术检测各组DC的表面分子表达、吞噬能力及诱导T细胞增殖能力的变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组BMDC培养上清液中所含Th1型[白介素(IL)-12p70,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]和Th2型(IL-6和IL-10)细胞因子含量。结果 ***组和***+LPS组BMDC具有成熟的形态,表面突起数目高于空白对照组、HF组和HF+LPS组(P<0.05);高表达MHCⅡ、CD80、CD86及CD40分子,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);诱导T细胞增殖能力强于空白对照组、HF组和HF+LPS组(P<0.05),吞噬能力弱于HF组;高表达IL-6、IL-12p70、TNF-α及IL-10,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ***可以刺激BMDC细胞成熟,促进T增殖,释放高含量的Th1型及Th2型细胞因子,激活Th1型或Th2型细胞,引发免疫应答。

关键词：重组抗原铁蛋白树突状细胞免疫应答

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康普瑞汀磷酸钠对U87细胞增殖和迁移的影响以及信号通路研究

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分子影像学杂志 2018年第4期41卷 483-487页

作者：郭曼岚刘蔚雯勾梦壮刘亚伟陈腾祥贵州医科大学基础医学院生理学教研室//贵州省干细胞重点实验室贵州贵阳550009 南方医科大学南方医院神经外科//精准神经外科实验室广东广州510515 南方医科大学第一临床医学院广东广州510515

目的研究药物康普瑞汀磷酸钠(CA4P)对人胶质瘤细胞U87细胞增殖迁移的影响以及相关信号通路。方法体外培养U87细胞并用不同浓度的CA4P处理,CCK8方法检测不同药物浓度对细胞活性的影响,划痕和transwell实验检测不同药物浓度对U87细胞迁移... 详细信息

目的研究药物康普瑞汀磷酸钠(CA4P)对人胶质瘤细胞U87细胞增殖迁移的影响以及相关信号通路。方法体外培养U87细胞并用不同浓度的CA4P处理,CCK8方法检测不同药物浓度对细胞活性的影响,划痕和transwell实验检测不同药物浓度对U87细胞迁移能力的影响,Western blot检测不同浓度处理后U87细胞中E-Cadherin蛋白。Path Scan对相关激活的通路进行检测。结果 CA4P能够明显抑制体外U87细胞增殖。划痕和transwell实验表明CA4P能够在体外抑制U87细胞的迁移能力,CA4P浓度为50 nmol/L和100 nmol/L能显著抑制迁移(P<0.001)。不同浓度的CA4P作用细胞24 h后,E-Cadherin的蛋白水平随着CA4P的浓度增加而增高。Path Scan结果表明,细胞内信号通路Akt, Bad, SAPK/JNK, S6 ribosomal Protein被激活。结论CA4P能够抑制人U87细胞的增殖和迁移,并且可能与Akt, Bad, SAPK/JNK的上调和S6 ribosomal Protein下调有关。

关键词： CA4P 胶质瘤增殖迁移信号通路

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稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白细胞的构建

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病毒学报 2017年第4期33卷 494-500页

作者：黄文波刘振卫周荣李潇曾军李小锋苏晓波广州医科大学生命科学学院医学遗传学与细胞生物学教研室广州511436 广州呼吸疾病研究所呼吸疾病国家重点实验室广州医科大学广州510230 广东和信健康科技有限公司广州510663

获得稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白的HEK-293-HA细胞株。采用RT-PCR方法扩增乙型流感病毒的HA基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建pcDNA3.1(+)-HA重组质粒。将已鉴定正确的pcDNA3.1(+)-HA质粒与辅助质粒PLV-EF1a-EGFP(2A)P... 详细信息

获得稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白的HEK-293-HA细胞株。采用RT-PCR方法扩增乙型流感病毒的HA基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建pcDNA3.1(+)-HA重组质粒。将已鉴定正确的pcDNA3.1(+)-HA质粒与辅助质粒PLV-EF1a-EGFP(2A)Puro通过脂质体介导法共转染HEK293细胞,经嘌呤霉素筛选后得到重组细胞株HEK293-HA,通过流式细胞术法(FCM)来检测细胞中HA的表达情况。所得到的重组细胞经扩大培养后再连续培养15代,采用间接免疫荧光法(IFA)和蛋白免疫印迹法(WB)来检测HA蛋白表达的稳定性。结果表明重组质粒pcDNA3.1(+)-HA经双酶切及测序鉴定正确;共获得3株高表达阳性细胞株。细胞扩大培养后连续传代培养15代后进行Western blot和IFA检测结果表明,重组细胞的HA蛋白得到稳定的表达。已成功获得了能稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白的HEK-293-HA细胞,可为乙型流感病毒HA蛋白的进一步研究提供良好的基础。

关键词：乙型流感病毒血凝素(HA)蛋白细胞株

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S100A4在类风湿关节炎滑膜中的表达及其对成纤维样滑膜细胞分泌VEGF促进血管生成的影响

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中国病理生理杂志 2017年第6期33卷 1119-1124页

作者：查丁胜吴昊林宏生姚平查振刚贾春宏盛超暨南大学附属第一医院骨科广东广州510630 暨南大学基础医学院生理教研室广东广州510630 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室南方医院妇产科广东广州510515

目的:研究S100钙结合蛋白A4(S100A4)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者和正常人膝关节滑膜中的表达水平,以及S100A4对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RAFLSs)促进血管生成的影响。方法:滑膜分别取自RA患者(RA组)及正常人(control组)膝关节,免疫组化法观察S100A4和VEGF蛋白在2组滑膜中的表达情况。RAFLSs分离自活动性RA滑膜;ELISA法检测S100A4刺激RAFLSs分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的作用;用rh S100A4孵育RAFLSs的条件培养基作用于人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),检测S100A4体外血管生成能力。结果:S100A4及VEGF蛋白在RA组滑膜中高表达(P<0.05),rh S100A4显著刺激RAFLSs分泌VEGF,呈时间和剂量依赖性(P<0.05);rh S100A4孵育RAFLSs的条件培养基可促进HUVECs在体外形成管腔。结论:S100A4蛋白在RA患者膝关节滑膜中高表达,S100A4可通过促进RAFLSs分泌VEGF来刺激滑膜血管生成。这些结果提示S100A4可作为治疗RA的潜在靶点。

关键词：类风湿关节炎 S100钙结合蛋白A4 成纤维样滑膜细胞血管生成

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蛇毒抗肿瘤应用及其机制的研究进展

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中国肿瘤临床 2017年第19期44卷 988-992页

作者：黄秒胡启平广西医科大学附属肿瘤医院影像学诊断中心南宁市530021 广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室

蛇毒对多种恶性肿瘤细胞有抑制增殖、诱导细胞凋亡和(或)抑制细胞迁移等作用,且呈剂量效应和(或)时间效应关系;此外,蛇毒还具有抗肿瘤血管生成作用。蛇毒抗肿瘤机制如下:1)通过阻断某些信号通路抑制肿瘤转移;2)通过激活死亡信号通路诱... 详细信息

蛇毒对多种恶性肿瘤细胞有抑制增殖、诱导细胞凋亡和(或)抑制细胞迁移等作用,且呈剂量效应和(或)时间效应关系;此外,蛇毒还具有抗肿瘤血管生成作用。蛇毒抗肿瘤机制如下:1)通过阻断某些信号通路抑制肿瘤转移;2)通过激活死亡信号通路诱导肿瘤细胞凋亡;3)通过调节抑(促)癌基因表达或阻滞细胞周期抑制肿瘤细胞生长和增殖;4)通过抑制肿瘤细胞表达血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)而抑制肿瘤血管生成。蛇毒在抗肿瘤应用方面具有较大的发展空间。本文对近年来国内外蛇毒抗肿瘤应用相关文献资料进行整理和归纳,总结了蛇毒抗肿瘤作用及其机制,以期为蛇毒抗肿瘤成分的研究、开发和应用提供参考。

关键词：蛇毒抗肿瘤机制增殖迁移凋亡血管生成

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两种酶消化法培养小鼠气道平滑肌细胞的比较

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中华生物医学工程杂志 2017年第2期23卷 122-125页

作者：陈凤英吴雄灏王念梁恒瑞陈俊邦叶润杰谢梓泓杨伊霖赵磊广州医科大学基础学院生理教研室 511436 广州医科大学南山学院广州医科大学第一临床学院

目的比较两种酶消化法原代培养小鼠气道平滑肌细胞（ASMC）的生长情况.方法取SPF级雄性昆明小鼠10只,处死后分离气管组织,分别采用Ⅰ型胶原酶消化法（单酶消化法）和链霉蛋白酶＋Ⅰ型胶原酶消化法（双酶消化法）原代培养ASMC.倒置显微... 详细信息

目的比较两种酶消化法原代培养小鼠气道平滑肌细胞（ASMC）的生长情况.方法取SPF级雄性昆明小鼠10只,处死后分离气管组织,分别采用Ⅰ型胶原酶消化法（单酶消化法）和链霉蛋白酶＋Ⅰ型胶原酶消化法（双酶消化法）原代培养ASMC.倒置显微镜下观察细胞形态,免疫荧光鉴定细胞类型.结果单酶消化法培养2~3 d可见少量细胞贴壁伸展,15 d左右可进行传代.双酶消化法培养2~3d可见较多细胞贴壁伸展,7~9d可进行传代.免疫荧光检测显示,胞质中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）呈红色阳性反应,两种方法所培养的细胞95%以上为ASMC.结论两种方法均可获得高纯度的ASMC,在细胞质量方面无明显差异.单酶消化法操作简便,但细胞培养周期较长,双酶消化法细胞生长较快但操作相对复杂.

关键词：肌细胞,平滑肌细胞培养技术小鼠原代培养气道平滑肌细胞

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