检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2017年第3期39卷 216-222页

作者：易红彭睿孙艳罗勇军彭惠民李爱玲张政重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物信息学教研室重庆400016 第三军医大学高原军事医学系军事医学地理学教研室重庆400038 重庆医科大学基础医学院实验教学中心重庆400016

目的探讨长链非编码Gm4419对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞增殖和纤维化的影响。方法荧光定量PCR检测Gm4419在糖尿病肾病肾脏组织及高糖培养的肾小球系膜细胞中的表达水平。设计合成Gm4419 siRNA,同时构建pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒... 详细信息

目的探讨长链非编码Gm4419对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞增殖和纤维化的影响。方法荧光定量PCR检测Gm4419在糖尿病肾病肾脏组织及高糖培养的肾小球系膜细胞中的表达水平。设计合成Gm4419 siRNA,同时构建pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒,并将Gm4419 siRNA和pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒分别转染至高低糖培养的肾小球系膜细胞,Ed U法检测转染后细胞的增殖能力;Western blot检测肾脏纤维标记蛋白的表达水平情况。结果 Gm4419在糖尿病肾病肾脏组织及高糖培养的肾小球系膜细胞中的表达水平较正常组及低糖组显著增高(P<0.01)。荧光定量PCR筛选出一条最佳干扰Gm4419的siRNA,转染高糖组后,与高糖mock组或对照组比较,高糖Gm4419 knockdown组细胞增殖能力减弱、纤维化标记蛋白表达减少(P<0.05)。此外,将酶切和测序结果证实构建成功的pcDNA3.1(+)-Gm4419过表达质粒转染至低糖组细胞,与低糖mock组或对照组相比,低糖Gm4419过表达组细胞增殖能力增强、纤维化标记蛋白表达水平增高(P<0.05)。结论lnc RNA-Gm4419参与糖尿病肾小球系膜增生和纤维化的调节。

关键词：长链非编码RNA Gm4419 肾小球系膜细胞增殖纤维化

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微滴式数字PCR(ddPCR)快速检测α珠蛋白基因ααα^(anti-3.7)三联体

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南方医科大学学报 2017年第9期37卷 1265-1269页

作者：龚小倩杨学煌乔伶俐陈亚军周万军广东省韶关市妇幼保健院广东韶关512026 南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室广东广州510515

目的建立一种基于微滴式数字PCR(ddPCR)技术的α珠蛋白基因αααanti-3.7快速检测方法。方法以β-actin为参比基因、α1基因X1/Y1盒之间的差异性序列为目的基因代表性扩增子,设计特异性引物和Taq Man探针,建立基于ddPCR技术的拷贝数定... 详细信息

目的建立一种基于微滴式数字PCR(ddPCR)技术的α珠蛋白基因αααanti-3.7快速检测方法。方法以β-actin为参比基因、α1基因X1/Y1盒之间的差异性序列为目的基因代表性扩增子,设计特异性引物和Taq Man探针,建立基于ddPCR技术的拷贝数定量方法;检测28例已知基因型和60例临床样本,评价此方法的灵敏度和准确性。结果采用本研究建立的方法,28例已知基因型样本的检测结果均与靶基因型结果相符;60例临床样本中检出5例αα/αααanti-3.7,与MLPA的验证结果一致;方法学评价结果显示此ddPCR体系的灵敏度与准确性均达100%。结论建立了一种α珠蛋白基因αααanti-3.7三联体ddPCR检测方法,操作简单快速、结果准确可靠,可应用于人群筛查和临床常规分子诊断。

关键词：数字PCR 珠蛋白基因多拷贝地中海贫血

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中华地鼠雌性不孕症模型的建立及其评价

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广东医学 2018年第S1期39卷 12-15页

作者：张旭东董玉霞张娟辉岳琳娜郭小元唐松山广州医科大学附属武警广东省总队医院检验科广东广州510507 武威市人民医院内分泌科甘肃武威733000 广州医科大学附属武警广东省总队医院妇产科广东广州510507 广东药科大学基础学院生物化学与分子生物学教研室广东广州510006

目的建立与人生长激素释放激素(GHRH)有93%同源性的中华地鼠不孕症模型,为研究新型人源性GHRH肽在治疗不孕症方面提供试验基础。方法 40只5周龄雌性中华地鼠,随机分为模型组[环磷酰胺组、尿促性素(h MG)组和新型GHRH组]和生理盐水组,每... 详细信息

目的建立与人生长激素释放激素(GHRH)有93%同源性的中华地鼠不孕症模型,为研究新型人源性GHRH肽在治疗不孕症方面提供试验基础。方法 40只5周龄雌性中华地鼠,随机分为模型组[环磷酰胺组、尿促性素(h MG)组和新型GHRH组]和生理盐水组,每组10只。模型组每周1次腹腔注射环磷酰胺(20 mg/kg),连续5周。从第4周开始,h MG组、新型GHRH组分别后腿肌肉注射h MG(200 U/kg)、新型GHRH肽(8 mg/kg)验证模型,每周2次,连续6周。在实验6~8周,雌鼠模型与正常雄鼠1∶1同笼交配。在实验9~10周,交配鼠分开饲养。实验鼠每周称重1次。实验结束后,实验鼠脱颈处死,计数怀孕鼠,摘取卵巢做HE和TUNEL染色。结果各组实验鼠体重差异无统计学意义(P>0.05)。卵巢HE染色,环磷酰胺组多见闭锁卵泡,少见原始卵泡和初级卵泡,未见黄体。h MG组和新型GHRH组有大量的原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡,并有黄体。TUNEL染色显示,环磷酰胺组的阳性细胞远远高于其他实验组(P<0.05,P<0.01)。环磷酰胺组总怀孕率为0,与新型GHRH组60%和h MG组50%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 20 mg/kg的环磷酰胺不会导致实验鼠体重明显改变,显示亲本动物对其子代发育和生长没有影响,该剂量环磷酰胺引起暂时性和可逆性动物不孕。

关键词：中华地鼠不孕症动物模型环磷酰胺

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程序性坏死参与油酸诱导的大鼠急性呼吸窘迫综合征的发病过程（英文）

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生理学报 2016年第5期68卷 661-668页

作者：潘龙姚敦琛余雨中陈秉钧李晟杰胡桂和奚畅王梓晖李建华龙捷涂永生广州医科大学基础学院生理教研室广州医科大学第三临床学院广州医科大学第一临床学院广州医科大学第二临床学院广州医科大学基础学院病理教研室

本研究旨在明确程序性坏死在急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)发病中的作用。通过尾静脉注射油酸(oleic acid,OA)制备大鼠ARDS模型,并观察4 h。通过动脉血气分析、肺干湿重比(lung wet-dry weight ratio,W... 详细信息

本研究旨在明确程序性坏死在急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)发病中的作用。通过尾静脉注射油酸(oleic acid,OA)制备大鼠ARDS模型,并观察4 h。通过动脉血气分析、肺干湿重比(lung wet-dry weight ratio,W/D)、肺组织HE染色及肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中总蛋白测定、白细胞计数及分类计数来评估ARDS模型。通过ELISA检测BALF中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)水平。通过免疫组化和蛋白免疫印迹观察受体相互作用蛋白激酶1(receptor interacting protein kinase 1,RIPK1)、RIPK3、mixed lineage kinase domain-like protein(MLKL)在肺组织中的表达水平。通过免疫沉淀观察RIPK1和RIPK3之间的相互作用。结果显示,OA注射4 h后,与对照组比较,OA组大鼠肺泡-动脉氧分压差[P(A-a)O2]、W/D、BALF中白细胞总数、中性粒细胞比例、蛋白浓度及TNF-α水平均显著上升,而氧合指数(Pa O2/Fi O2)下降;OA组大鼠肺组织中RIPK1、RIPK3、MLKL表达明显增加,且RIPK1与RIPK3之间的相互作用显著增强。以上结果表明,在ARDS的发生、发展过程中,TNF-α分泌增加,RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路被激活并表达上调,提示程序性坏死可能在ARDS的发病机制中发挥作用,这可能为治疗ARDS的新药开发提供新思路。型。通过ELISA检测BALF中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)水平。通过免疫组化和蛋白免疫印迹观察受体相互作用蛋白激酶1(receptor interacting protein kinase 1,RIPK1)、RIPK3、mixed lineage kinase domain-like protein(MLKL)在肺组织中的表达水平。通过免疫沉淀观察RIPK1和RIPK3之间的相互作用。结果显示,OA注射4 h后,与对照组比较,OA组大鼠肺泡-动脉氧分压差[P(A-a)O2]、W/D、BALF中白细胞总数、中性粒细胞比例、蛋白浓度及TNF-α水平均显著上升,而氧合指数(Pa O2/Fi O2)下降;OA组大鼠肺组织中RIPK1、RIPK3、MLKL表达明显增加,且RIPK1与RIPK3之间的相互作用显著增强。以上结果表明,在ARDS的发生、发展过程中,TNF-α分泌增加,RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路被激活并表达上调,提示程序性坏死可能在ARDS的发病机制中发挥作用,这可能为治疗ARDS的新药开发提供新思路。

关键词：急性呼吸窘迫综合征程序性坏死肿瘤坏死因子α 受体相互作用蛋白激酶1 受体相互作用蛋白激酶3 MLKL

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TLR4/NLRP3炎症复合体介导对比剂诱导的肾小管上皮细胞炎症和损伤

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中国病理生理杂志 2017年第12期33卷 2252-2258页

作者：林燕林佳琼谢楚莉管小凤谭学贤黄泽娜广州医科大学附属第三医院肾内科广东广州510150 广州医科大学附属第三医院病理科广东广州510150 南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室广东广州510515 中山大学中山医学院生理学教研室广东广州510080 中山大学孙逸仙纪念医院超声科广东广州510120 广东省人民医院急危重症医学部广东省医学科学院广东广州510080

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)/Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎症复合体是否介导了对比剂(CM)引起的肾小管上皮细胞炎症和损伤。方法:本研究运用碘普罗胺作用于大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E建立损伤模型。应用CCK-8法测定细胞存活率;Western blot... 详细信息

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)/Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎症复合体是否介导了对比剂(CM)引起的肾小管上皮细胞炎症和损伤。方法:本研究运用碘普罗胺作用于大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E建立损伤模型。应用CCK-8法测定细胞存活率;Western blot测定TLR4、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1和cleaved caspase-3的蛋白水平;ELISA法检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的水平;Hoechst 33258核染色法检测凋亡率;JC-1染色法测定线粒体膜电位。用小干扰RNA沉默NLRP3表达。结果:CM可降低NRK-52E细胞的存活率并上调cleaved caspase-3的蛋白水平(P<0.05);此外,CM可上调细胞TLR4/NLRP3炎症复合体的表达并促进炎症因子IL-1β和IL-18的分泌(P<0.05)。沉默NLRP3可以对抗CM诱导的炎症因子分泌;TLR4抑制剂TAK-242及沉默NLRP3能减轻CM引起的细胞凋亡和线粒体功能损伤。结论:TLR4/NLRP3炎症复合体参与了CM致急性肾损伤的发病机制,并介导了CM诱导的肾小管上皮细胞损伤和炎症。

关键词：对比剂肾损伤炎症 Toll样受体4 Nod样受体蛋白3炎症复合体

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新重组蛇毒类凝血酶r-agkihpin-1的抗血栓活性

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广东医学 2017年第21期38卷 3247-3252页

作者：余枫贤何毅强徐伟斌许莉凤玉足胡启平黄秒广西医科大学临床医学系广西南宁530021 广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室广西南宁530021 广西医科大学附属肿瘤医院影像诊断中心广西南宁530021

目的探讨重组agkihpin将来作为抗血栓药物的可能性,为将来把重组agkihpin做成抗血栓药物提供实验依据。方法用肽指纹图谱验证重组agkihpin分子;以天然agkihpin、生理盐水(NS)或肝素为对照,分别用TAME水解、纤维蛋白平板、SDS-PAGE和纤... 详细信息

目的探讨重组agkihpin将来作为抗血栓药物的可能性,为将来把重组agkihpin做成抗血栓药物提供实验依据。方法用肽指纹图谱验证重组agkihpin分子;以天然agkihpin、生理盐水(NS)或肝素为对照,分别用TAME水解、纤维蛋白平板、SDS-PAGE和纤维蛋白原凝集法检测r-agkihpin-1的精氨酸酯酶、纤溶活性、纤维蛋白原溶解和类凝血酶等生物学活性;以NS或粗毒为对照,用剪尾法和皮下注射法检测r-agkihpin-1的出血活性。结果 r-agkihpin-1中38.7%序列、8个肽段与Gen Bank中agkihpin氨基酸序列是一致的。r-agkihpin-1体外水解TAME的比活性为8.74 U/mg。4~16μg/mL剂量r-agkihpin-1可形成纤维蛋白溶圈面积0.50~1.10cm^2,NS组不形成溶圈,差异有统计学意义(P<0.01);16μg/mL剂量r-agkihpin-1可使90%α链和70%γ链分解,而NS组中纤维蛋白原不被消化,差异有统计学意义(P<0.01)。4~16μg/mL剂量r-agkihpin-1可形成凝块体积0.07~0.23 mm^3,高于NS组的0.01 mm^3,差异有统计学意义(P<0.05)。体内4~16 mg/kg体重剂量的r-agkihpin-1形成血栓干重28.01~22.46 mg/kg体重,低于NS组的35.92 mg/kg体重,差异有统计学意义(P<0.01)。上述活性均稍低于相同剂量的天然agkihpin,差异有统计学意义(P<0.05)。剪尾法、皮下注射法显示4~16 mg/kg、4~32 mg/kg体重剂量的r-agkihpin-1在小鼠中出血时间和出血活性分别为1.81~11.32 min和0.00~0.01,显著低于1 mg/kg体重剂量粗毒的30.00 min(P<0.01)和7.85(P<0.01)。结论 r-agkihpin-1就是agkihpin的重组蛋白,r-agkihpin-1将来有望成为一种新的抗血栓药物。

关键词： Agkihpin 蛇毒类凝血酶溶纤重组蛋白抗血栓

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CRISPR/Cas9无所不能？

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中国科学：生命科学 2017年第11期47卷 1127-1129页

作者：焦仁杰高彩霞广州医科大学基础科学院广州霍夫曼免疫研究所广州511436 广州医科大学第二附属医院广州510260 中国科学院生物物理研究所脑与认知科学国家重点实验室北京100101 中国科学院遗传与发育生物学研究所植物细胞与染色体工程国家重点实验室北京100101

CRISPR-Cas9（规律成簇的间隔短回文重复相关蛋白9,clustered regularly interspaced short palindromic repeats（CRISPR）-associated protein 9）是原核生物在长期演化中形成的用来对抗病毒或外源DNA入侵的适应性免疫防御机制.2013年,研究人员首次报道改造后的CRISPR/Cas9系统可实现快速、特异和高效地切割真核细胞DNA[1,2].随后,CRISPR/Cas9在多个物种中的基因编辑能力被相继证实,并经过多种巧妙的改造,为生物医学研究、临床治疗和农业等领域带来前所未有的革新．

关键词：原核生物免疫防御机制编辑能力 regularly 真核细胞抗病毒 CRISPR/Cas9 DNA repeats clustered

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长链非编码RNA与糖尿病及其并发症

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生物工程学报 2016年第3期32卷 284-291页

作者：李爱玲张政重庆医科大学基础医学院细胞与遗传学教研室重庆400016

长链非编码RNA起初被认定是基因转录"噪音",随着DNA元件百科全书的研究进展发现,lnc RNA能以RNA的形式在表观遗传、转录以及转录后水平调控基因的表达,参与多种重要的生命调控过程,与人类疾病的发生发展和预防都有着紧密联系... 详细信息

长链非编码RNA起初被认定是基因转录"噪音",随着DNA元件百科全书的研究进展发现,lnc RNA能以RNA的形式在表观遗传、转录以及转录后水平调控基因的表达,参与多种重要的生命调控过程,与人类疾病的发生发展和预防都有着紧密联系。文章介绍lnc RNA的功能和特点,结合对lnc RNA的研究思路,并在已有研究的基础上综述lnc RNA与糖尿病及其并发症的关系,这些研究进展将为进一步理解糖尿病及其发生发展的分子医学基础提供依据。

关键词：长链非编码RNA 糖尿病糖尿病并发症

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电针对脑缺血再灌注大鼠内质网应激关键因子GRP-78、caspese-12表达的影响

电针对脑缺血再灌注大鼠内质网应激关键因子GRP-78、caspese-12表...

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2017世界针灸学术大会暨2017中国针灸学会年会

作者：余琴华于涛徐建永谢天炽广州医科大学卫生职业技术学院针灸推拿教研室广东省中医院针灸科广州医科大学卫生职业技术学院生物化学教研室广州医科大学遗传与细胞生物学教研室

目的:观察电针对脑缺血再灌注不同时点模型大鼠GRP78、caspase-12水平的影响,探讨电针对神经元细胞凋亡通路分子机制的可能影响。方法:126只SD大鼠随机分为假手术组（sham组）、模型对照组（I/R组）、电针治疗组（EA组）,sham组6只,I/R... 详细信息

目的:观察电针对脑缺血再灌注不同时点模型大鼠GRP78、caspase-12水平的影响,探讨电针对神经元细胞凋亡通路分子机制的可能影响。方法:126只SD大鼠随机分为假手术组（sham组）、模型对照组（I/R组）、电针治疗组（EA组）,sham组6只,I/R组和EA组各60只。采用改良线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,对再灌注6、12、24、48、72h等不同时间点进行神经学分级评定,观察再灌注24h脑片皮质和海马CA1区的形态学改变,TUNEL法检测各组神经细胞凋亡指数。采用免疫组化和Western blotting观察不同组别不同时间点损伤区皮质、海马内GRP78、caspase-12蛋白表达的变化。结果:与I/R组比较,除再灌注6h时间点外,其余各个时间段,EA组神经学评分降低（P＜0.01）;各再灌注时点EA组的凋亡指数降低（P＜0.01）。各组比较,EA组的GRP78和caspase-12蛋白表达量均比I/R组降低（P＜O.05）。结论:电针对脑缺血再灌注后不同时间所致缺血脑神经细胞凋亡有减轻作用可能通过抑制GRP78、caspase-12的释放和激活,降低凋亡率,发挥神经保护作用。

关键词：电针脑缺血再灌注损伤细胞凋亡内质网 GRP78 caspase-12

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复制型天坛株痘苗病毒在免疫缺陷型大鼠体内的生物分布特点及其对组织病理变化的影响

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山西医科大学学报 2018年第7期49卷 779-784页

作者：彭泽旭刘甦苏王辰飞谷文达刘强刘建兵山西医科大学基础医学院细胞生物与遗传学教研室太原030001 中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室

目的研究复制型天坛株痘苗病毒(r TV)在免疫缺陷型Rag2基因敲除(Rag2-/-)大鼠体内的生物分布特点及其对组织病理变化的影响,为复制型痘苗病毒载体疫苗的应用和安全性评价提供参考。方法 r TV分别以尾静脉注射途径感染免疫缺陷型Rag2-/-... 详细信息

目的研究复制型天坛株痘苗病毒(r TV)在免疫缺陷型Rag2基因敲除(Rag2-/-)大鼠体内的生物分布特点及其对组织病理变化的影响,为复制型痘苗病毒载体疫苗的应用和安全性评价提供参考。方法 r TV分别以尾静脉注射途径感染免疫缺陷型Rag2-/-大鼠和野生型SD大鼠,以背部皮下注射途径感染免疫缺陷型Rag2-/-大鼠。利用Taq Man探针法实时荧光定量PCR检测痘苗病毒在大鼠体内的生物分布和病毒载量,比较分析两种模式动物Rag2-/-大鼠和SD大鼠感染r TV后的生物分布特点及r TV以不同途径感染Rag2-/-大鼠后的生物分布特点,并对感染过r TV的所有组织样本进行HE染色,比较分析不同分组大鼠感染r TV后的组织病理变化。结果与SD大鼠相比,r TV在免疫缺陷型Rag2-/-大鼠的生物分布范围更广;在免疫缺陷型Rag2-/-大鼠中,r TV尾静脉注射感染途径的效果要强于皮下注射的感染途径;r TV尾静脉注射途径感染Rag2-/-大鼠的心、睾丸和后爪的病毒载量显著高于尾静脉注射途径感染SD大鼠(P<0.001)和皮下注射途径感染Rag2-/-大鼠(P<0.001);与SD大鼠和皮下感染途径相比,通过尾静脉途径感染免疫缺陷型Rag2-/-大鼠的组织病理变化较明显,且均无由r TV引起的病理性损伤。结论复制型天坛株痘苗病毒在免疫缺陷型Rag2-/-大鼠体内表现出较广的组织分布、较高的表达水平及非特异性的组织病理变化,为其作为免疫缺陷类型患者的载体疫苗的应用的安全性提供了新的依据。

关键词：复制型天坛株痘苗病毒免疫缺陷 Rag2基因敲除大鼠生物分布

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