检索结果-内蒙古大学图书馆

中华整形外科杂志 2013年第3期29卷 206-210页

作者：廖农鲁峰赵伟曾位森李映桃王少晶高建华广州医学院第三附属医院整形美容科 510150 南方医科大学南方医院整形外科广州510515 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广州医学院第三附属医院妇产科

目的研究p53基因第72位密码子（codon72）多态性与剖宫产术后病理性瘢痕发生的关系。方法对广州医学院第三附属医院产科行剖宫产术的303例女性，于术后3—5d抽取外周静脉血2ml，用荧光分子信标PCR法检测其血液标本的p53基因codon72多态... 详细信息

目的研究p53基因第72位密码子（codon72）多态性与剖宫产术后病理性瘢痕发生的关系。方法对广州医学院第三附属医院产科行剖宫产术的303例女性，于术后3—5d抽取外周静脉血2ml，用荧光分子信标PCR法检测其血液标本的p53基因codon72多态性。分别于术后第3、6、12个月对所有病例进行电话随访，其中有19例随访至18个月，观察其病理性瘢痕发生情况，以及其与p53基因codon72多态性位点基因型的关系。用SPSS13．0软件进行统计学分析。结果303例产妇中发生病理性瘢痕增生30例，273例为正常愈合。2组产妇p53基因codon723种基因型（C／C、C／G和G／G）频率总体上有显著差异；病理性瘢痕增生组产妇C／C基因型频率为46．7％（14／30），高于正常组的17．6％（48／273），差异有统计学意义（P〈0．01）；在病理性瘢痕增生产妇中，C／C基因型频率显著高于C／G型（33．3％，10／30）和G／G型（20．0％，6／30），差异均有统计学意义（P〈0．01）；在病理性瘢痕增生产妇中，c等位基因频率为63．3％，也显著高于G等位基因频率（36．7％，P〈0．01），OR值为2．30。结论p53基因codon72C等位基因与剖宫产术后病理性瘢痕的发生有一定的关联性。

关键词： p53基因多态性剖宫产术瘢痕荧光分子信标PCR

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c-ski基因重组腺病毒质粒的构建及其对肿瘤相关成纤维细胞增殖的影响

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中国生物制品学杂志 2013年第12期26卷 1738-1742页

作者：王黎阳赵浏阳彭琼乐孙艳柳满然重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

目的构建携带c-ski基因的重组腺病毒质粒,并检测其对肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)增殖活力的影响。方法以pcDNA3-c-ski质粒为模板,PCR扩增c-ski基因,与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,构建重组穿梭质粒pAdT... 详细信息

目的构建携带c-ski基因的重组腺病毒质粒,并检测其对肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)增殖活力的影响。方法以pcDNA3-c-ski质粒为模板,PCR扩增c-ski基因,与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,构建重组穿梭质粒pAdTrack-c-ski,经PmeⅠ线性化后,转化感受态大肠埃希菌BJ5183,获得重组腺病毒质粒,经PacⅠ线性化后,转染HEK-293细胞,获得重组腺病毒,经扩增及纯化后测定病毒滴度。将纯化的重组腺病毒感染乳腺癌CAFs,采用Western blot法检测感染细胞中c-Ski蛋白的表达水平;MTT法和细胞计数法检测重组腺病毒对CAFs细胞增殖活力的影响。结果重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切鉴定证明构建正确;转染HEK-293细胞48 h后可见大量绿色荧光蛋白的表达,纯化的重组腺病毒的滴度为3.11×1010IFU/ml;感染重组腺病毒的乳腺癌CAFs中c-Ski蛋白的表达水平明显高于空病毒组和空白对照组(P<0.001),且增殖活力明显高于空白对照组(P<0.05)。结论成功构建了表达c-ski基因的重组腺病毒质粒,其可明显促进CAFs的增殖,为进一步研究c-Ski对CAFs增殖分化等生物学功能的影响及作用机制提供了实验依据。

关键词： c-ski基因腺病毒成纤维细胞细胞增殖

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Varp过表达降低腺病毒感染细胞效率的研究

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激光生物学报 2013年第5期22卷 436-440页

作者：王芳苏晓波张岚广州医科大学医学遗传学及细胞生物学教研室广东广州510182

目的:探讨Varp蛋白对腺病毒感染细胞效率的影响。方法:构建稳定表达Varp蛋白的HEK293细胞株,用携带EGFP基因的腺病毒载体感染细胞,通过荧光显微镜观察及Western Blotting等方法检测腺病毒对不同细胞感染效率的差别。结果:腺病毒对稳定... 详细信息

目的:探讨Varp蛋白对腺病毒感染细胞效率的影响。方法:构建稳定表达Varp蛋白的HEK293细胞株,用携带EGFP基因的腺病毒载体感染细胞,通过荧光显微镜观察及Western Blotting等方法检测腺病毒对不同细胞感染效率的差别。结果:腺病毒对稳定过表达Varp蛋白的细胞的感染效率较对照细胞明显下降。结论:Varp蛋白在细胞中稳定过表达能够降低腺病毒感染细胞的效率。

关键词： Varp 腺病毒增强型绿色荧光蛋白 HEK293细胞

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Accutase酶在精原干细胞原代分离中的应用

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中国组织工程研究 2013年第45期17卷 7904-7910页

作者：刘珊珊徐丽萍朱蔚云马宁芳广州医科大学基础学院组织学与胚胎学教研室广东省广州市510182

背景:有研究报道胰酶消化在一定程度上会破坏精原干细胞表面抗原并影响细胞活性,对后续的细胞分选及下游实验有一定影响。Accutae酶具有蛋白酶和胶原酶的双重活性,在消化结束时无需终止和清洗,有保护细胞表面抗原的特殊作用,因而被应用... 详细信息

背景:有研究报道胰酶消化在一定程度上会破坏精原干细胞表面抗原并影响细胞活性,对后续的细胞分选及下游实验有一定影响。Accutae酶具有蛋白酶和胶原酶的双重活性,在消化结束时无需终止和清洗,有保护细胞表面抗原的特殊作用,因而被应用于多种干细胞的培养及消化传代中。目的:比较Accutase酶和胰酶在原代消化分离睾丸组织获取精原干细胞中的作用。方法:新生5-7 d昆明雄鼠45只,取双侧睾丸胶原酶初步消化,混悬液定容后分为Accutase酶组、胰酶组、混合酶组(透明质酸酶+胰酶组),不同组别小鼠睾丸组织分别于酶消化1,3,5 min后显微镜下观察并拍照,比较各组不同时间点的消化状态及形成单细胞所需的时间;获取单细胞悬液后分别计算单位体积内所得细胞总数及死亡率;通过差速贴壁方法去除间质细胞及支持细胞,经包被有干细胞标志分子CD90.2的免疫磁珠进行分选,将所得CD90+及CD90-细胞用精原干细胞表面标志分子——胶质细胞源性神经营养因子受体α1标记,流式细胞仪检测不同组别CD90+及CD90-细胞群中胶质细胞源性神经营养因子受体α1精原干细胞的阳性率。结果与结论:不同类别的消化酶对小鼠睾丸的消化作用有明显差异,其中Accutase酶能更快获取单细胞悬液,其细胞团及破膜细胞明显少于胰酶组和混合酶组,其所得细胞总数高于其余2组,而细胞死亡率则低于其余2组。差速贴壁后细胞免疫磁珠分选结果显示Accutase酶组CD90+精原干细胞得率高,流式分选结果显示胶质细胞源性神经营养因子受体α1+/CD90+细胞为72.24%,高于胰酶组及混合酶组(51.16%,71.27%);而胶质细胞源性神经营养因子受体α1+/CD90-细胞比率(15.03%)则低于胰酶组及混合酶组(18.8%,24.23%)。结果表明Accutase酶在分离和获取精原干细胞实验中效果优于胰酶。

关键词：干细胞干细胞培养与分化新生鼠睾丸精原干细胞 Accutase酶胰酶透明质酸酶磁珠分选流式细胞分选 CD90 2 胶质细胞源性神经营养因子受体α1 国家自然科学基金干细胞图片文章

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布雷菲德菌素A诱导TC-1癌细胞自噬性死亡

布雷菲德菌素A诱导TC-1癌细胞自噬性死亡

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中国解剖学会第十三届全国组织学与胚胎学青年学术研讨会

作者：谢珊艳黄丽冷水龙广州医科大学基础学院人体解剖学教研室广州510182

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Rheb突变体重组腺病毒载体的构建及鉴定

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泰山医学院学报 2013年第10期34卷 721-724页

作者：赵莉邹镇洪叶永斌侯敬申广州医科大学药学院蛇毒研究所广东广州510182 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 广州医科大学附属第二医院急诊外科广东广州510260

目的构建携带野生型Rheb(WT)和Rheb突变体(持续活化型Q64L和显性失活型D60K)重组腺病毒载体,验证其携带的Rheb WT和Rheb突变基因在MCF-7细胞中的表达情况及其对血清饥饿的乳腺癌细胞MDAMB-231增殖的影响。方法采用细胞内同源重组法构建... 详细信息

目的构建携带野生型Rheb(WT)和Rheb突变体(持续活化型Q64L和显性失活型D60K)重组腺病毒载体,验证其携带的Rheb WT和Rheb突变基因在MCF-7细胞中的表达情况及其对血清饥饿的乳腺癌细胞MDAMB-231增殖的影响。方法采用细胞内同源重组法构建携带Rheb和Rheb突变体的重组腺病毒载体pacAd5CMV-Rheb,PCR法检测病毒上清;将病毒上清感染MCF-7细胞后Western blotting(WB)检测Rheb及下游产物表达。将重组腺病毒感染血清饥饿的乳腺癌细胞MDA-MB-231并观察细胞增殖情况。结果酶切、测序及PCR表明构建的重组腺病毒载体携带Rheb和Rheb突变基因。重组腺病毒体外感染MCF-7细胞,WB检测到腺病毒感染的MCF-7细胞内Rheb蛋白表达较对照组明显增高,S6及β-actin蛋白的表达在各组间没有统计学差异。转染Rheb WT和Q64L组MCF-7细胞的P-S6表达较对照组和D60K组显著增高。无血清培养条件下,感染Rheb Q64L组的乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖能力较对照组及WT组强,而转染D60K组则较其他三组(EGFP、WT和Q64L组)的细胞增殖明显减弱。结论成功构建野生型Rheb和Rheb突变体重组腺病毒质粒,为体内外进一步研究Rheb基因对乳腺癌的作用奠定了基础。

关键词：腺病毒载体乳腺癌 MCF-7 MDA-MB-231

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加强基础医学专业研究生教学能力培养的探索

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基础医学教育 2013年第8期15卷 802-804页

作者：林骏杨翠兰罗深秋南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广州510515

探索在基础医学专业研究生培养中,如何加强研究生教学能力的培养,其具体实施过程包括安排研究生参加本科生实验教学、本科生实习带教、组织中期考核的理论课试讲及定期学术汇报。加强教学能力培养是提高研究生整体素质,增加就业竞争力... 详细信息

探索在基础医学专业研究生培养中,如何加强研究生教学能力的培养,其具体实施过程包括安排研究生参加本科生实验教学、本科生实习带教、组织中期考核的理论课试讲及定期学术汇报。加强教学能力培养是提高研究生整体素质,增加就业竞争力的有效途径。

关键词：基础医学研究生教育教学能力

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一例无症状8号三体的遗传学构成初探

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分子诊断与治疗杂志 2013年第4期5卷 224-226页

作者：李佩琼刘翠娴林俊伟田琪章钧广州医科大学基础学院医学遗传学与细胞生物学教研室广东广州510182 中山大学附属第三医院产科实验室广东广州510630

目的针对一例无症状的8号染色体三体的患者,研究其8号染色体的来源机制和作用机制。方法利用患者外周血进行淋巴细胞培养及G显带技术分析,以确定淋巴细胞核型;利用患者外周血总DNA进行SNP微阵列技术分析,以确定各类有核细胞的分子核型... 详细信息

目的针对一例无症状的8号染色体三体的患者,研究其8号染色体的来源机制和作用机制。方法利用患者外周血进行淋巴细胞培养及G显带技术分析,以确定淋巴细胞核型;利用患者外周血总DNA进行SNP微阵列技术分析,以确定各类有核细胞的分子核型。结果患者外周血淋巴细胞核型为47,XX,+8;患者外周血各种有核细胞总DNA基因型为47,XX,+8。结论确诊患者外周血有核细胞的核型均为47,XX,+8,并且多出来的那条染色体可能由于第二次减数分裂不分离而导致的,尚不能明确该患者没有明显临床症状的机制。

关键词： 8号染色体三体核型分析 SNP微阵列技术分析

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PBL教学法在医学遗传学教学中的实施与探索

PBL教学法在医学遗传学教学中的实施与探索

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：张娟李莉刘铭杨建一山西医科大学基础医学院细胞生物与遗传学教研室

随着现代生物学和现代遗传学研究技术的蓬勃发展,医学模式及疾病谱的改变,新技术、新方法的不断出现,医学遗传学教学也需要不断改革以适应学科发展和学生培养的需要,应将重点转向培养学生的创新思维,提高综合素质上来。为提高医学遗传... 详细信息

随着现代生物学和现代遗传学研究技术的蓬勃发展,医学模式及疾病谱的改变,新技术、新方法的不断出现,医学遗传学教学也需要不断改革以适应学科发展和学生培养的需要,应将重点转向培养学生的创新思维,提高综合素质上来。为提高医学遗传学教学水平,切实达到培养目标,激发学生的主动刨新思维和实践能力为目标,以教学内容的设置和教学手段、方法改革为突破口积极实施教学改革。我们就医学遗传学教学进行了新的改革和探索。我们尝试运用PBL教学与经典讲授相结合的教学方法,使学生在掌握了相关的基本知识结构,获得较系统的知识框架的基础上,在课外根据PBL教学模式的特点组织活动小组教学,以"遗传性疾病"课外活动小组为突破口,将基础学科知识与临床病例联系起来,探讨了PBL教学法于《医学遗传学》教学中的运用。采用的方法是教师课前提出问题—学生查找资料—分组讨论—课堂汇报—教师总结。具体的实施过程分为下面几个环节。①课前准备根据教学大纲和教学计划的要求,结合医学院校学生学习的特点,将医学遗传学课程中涉及的有关疾病,选择白化病、苯丙酮尿症、人类红绿色盲、糖原累积症、Leber遗传性视神经病、Down综合征、猫叫综合征、先天性卵巢发育不全综合征、先天性睾丸发育不全综合征九个题目。针对2011级七年制临床医学专、每组约10人左右,组长负责组织,组员分工合作,每组选一个题目进行讨论。围绕学过的医学遗传学知识结合疾病,就疾病简介、临床症状、发病机制/病因、类型、发病率、治疗、预防等方面,查阅相关资料,利用教科书、相关书籍上信息及网络等媒体获取信息,教师因势利导分阶段提供相应指导。②课堂汇报及讨论根据收集的资料,采用PPT多媒体的形式各组报告准备的材料,之后,自由发言,讨论并提出疑问,形成师生有效互动。③教师总结由于问题设置均为医学遗传学教学过程中较常见的遗传性疾病,学生都非常感兴趣,在课堂上积极发言和参与讨论,在探讨中发展理性思维和增强对知识的理解。最后由教师综合不同组的讨沦进行小结,进一步加深对遗传病病案的理解和掌握。PBL教学模式能够激发学生学习的积檄性、主动性和创造性,能扩大学生知识面,锻炼学生自主学习能力,培养学生的团队合作能力及综合解决问题的能力。PBL教学模式还锻炼学生的表达能力,提高学生的综合素质。存在的问题是.自律性差的学生不能充分被调动主观能动性,得不到良好的学习机会;指导教师缺乏,不能及时地指导学生时论:少数基础差的学生不能适应PBL。看来,在教学叶不不能机械套用PBL,而应根据具体的教学目标、学生的特点,因人施教,以达到更好的教学效果。创立一套符合实际的教学方法是教学改革的一项长期而艰巨的任务。

关键词：医学遗传学 PBL教学教学改革

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脊髓性肌萎缩症基因诊断研究进展

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国际遗传学杂志 2013年第6期36卷 266-270页

作者：林丽钟泽艳李亮广州市南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室

脊髓性肌萎缩症是一组常染色体隐性遗传病,临床表现为进行性肌无力、肌萎缩,是导致婴儿死亡最常见的疾病之一。脊髓性肌萎缩症的致病基因被定位于染色体5q13、2,此外还发现其他多种基因与其临床表型相关。对该病进行基因诊断可以明确病... 详细信息

脊髓性肌萎缩症是一组常染色体隐性遗传病,临床表现为进行性肌无力、肌萎缩,是导致婴儿死亡最常见的疾病之一。脊髓性肌萎缩症的致病基因被定位于染色体5q13、2,此外还发现其他多种基因与其临床表型相关。对该病进行基因诊断可以明确病因,预防患儿出生。此文对该病的最新基因学及基因诊断学进展作一综述。

关键词：脊髓性肌萎缩症基因诊断

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