目的研究二甲双胍对乳牙牙髓干细胞成骨分化作用及相关分子机制。方法分离并培养SHED (stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED) p4-6代用于实验,分别加入0、10、50、100、200μM二甲双胍,1、3、5、7天CCK-8法检测SHED...
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目的研究二甲双胍对乳牙牙髓干细胞成骨分化作用及相关分子机制。方法分离并培养SHED (stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED) p4-6代用于实验,分别加入0、10、50、100、200μM二甲双胍,1、3、5、7天CCK-8法检测SHED的增殖情况,碱性磷酸酶活性定性、定量检测细胞成骨分化潜能,Real-time PCR检测SHED成骨相关基因(Ⅰ型胶原、骨钙素、碱性磷酸酶、Runx2)的表达水平,茜素红染色检测细胞矿化程度,Western blot检测SHED中AMPKα及P-AMPK(Thr172)的蛋白表达水平。结果不同浓度组的二甲双胍均不影响SHED的增殖(P>0.05),且其碱性磷酸酶活性、矿化程度、P-AMPK(Thr172)表达水平均较对照组高(P<0.05);50、100μM的二甲双胍显著增加SHED成骨分化相关基因表达(P<0.05);加入化合物C (AMPK通路抑制剂)后,二甲双胍组的P-AMPK(Thr172)及AMPKα表达受到抑制,同时碱性磷酸酶活性、成骨分化相关基因表达量、矿化程度显著降低(P<0.05)。结论二甲双胍可通过AMPK通路促进SHED成骨向分化,其中50、100μM浓度效果最佳。
目的研究掺锶生物活性玻璃（Strontium-substituted bioactive glasses,Sr-BG）对乳牙牙髓干细胞（Stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED）成牙本质向分化的作用。方法采用改良酶消化法培养SHED,第4-6代用于实验。制...
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目的研究掺锶生物活性玻璃（Strontium-substituted bioactive glasses,Sr-BG）对乳牙牙髓干细胞（Stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED）成牙本质向分化的作用。方法采用改良酶消化法培养SHED,第4-6代用于实验。制备0.5g/L的生物活性玻璃浸提液,与DMEM （Dulbecco's mimimum essential medium）混合后培养SHED。实验共分6组,5%Sr-BG组、10%Sr-BG组为实验组,0%Sr-BG组、等浓度锶离子组为阳性对照组,DMEM组为空白对照组。采用电感耦合等离子发射光谱仪检测上清液中锶、硅、钙、磷等离子的浓度,CCK-8法测定细胞增殖能力,碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,ALP）活性检测SHED的分化潜能,茜素红钙化结节染色及氯化十六烷基吡啶半定量分析检测SHED的矿化能力,Real-time PCR检测SHED成牙本质向分化相关基因的表达水平。结果 DMEM组、0%Sr-BG组、5%Sr-BG组及其等浓度SrCl组均不影响SHED增殖（P>0.05）;5%Sr-BG组在第7天的ALP活性、矿化结节含量及成牙本质相关基因的表达均高于DMEM组、BG组及SrCl组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论掺锶生物活性玻璃可促进SHED成牙本质向分化,有望发展成为新型盖髓材料。
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