目的:探讨外源性降钙素基因相关肽(Calcitonin gene related peptide,CGRP)对大鼠成骨细胞中骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)表达的影响。方法:使用胶原酶消化法培养大鼠原代成骨细胞并对成骨细胞进行细胞学鉴定,鉴定方法包括细胞形态学鉴定...
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目的:探讨外源性降钙素基因相关肽(Calcitonin gene related peptide,CGRP)对大鼠成骨细胞中骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)表达的影响。方法:使用胶原酶消化法培养大鼠原代成骨细胞并对成骨细胞进行细胞学鉴定,鉴定方法包括细胞形态学鉴定,碱性磷酸酶染色及茜素红染色鉴定。采用CCK-8细胞增殖实验筛选CGRP的最适作用浓度。将合适浓度的CGRP作用于成骨细胞,使用q PCR和Western Blot检测OPNm RNA及蛋白的表达。结果:CGRP作用浓度为10-9M时,大鼠成骨细胞的增殖活性最强。使用10-9M浓度的CGRP作用于成骨细胞,成骨细胞中OPN m RNA及蛋白的表达在第3天明显上调(P<0.05)。结论:CGRP可以促进成骨细胞中骨桥蛋白OPN的表达。
目的探讨LASP-1在人舌鳞状细胞癌细胞中的表达,并应用sh RNA沉默人舌鳞状细胞癌细胞SCC9中LASP-1基因,研究LASP-1对SCC9细胞增殖和迁移能力的影响。方法构建携带绿色荧光蛋白的LASP-1 sh RNA质粒及阴性对照组质粒LASP-1 sh NC,通过脂质...
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目的探讨LASP-1在人舌鳞状细胞癌细胞中的表达,并应用sh RNA沉默人舌鳞状细胞癌细胞SCC9中LASP-1基因,研究LASP-1对SCC9细胞增殖和迁移能力的影响。方法构建携带绿色荧光蛋白的LASP-1 sh RNA质粒及阴性对照组质粒LASP-1 sh NC,通过脂质体转染SCC9细胞,采用MTT法检测细胞增殖;RT-PCR法检测细胞LASP-1 m RNA表达;Western blot检测细胞LASP-1蛋白的表达;运用Transwell小室实验检测细胞迁移能力。结果 LASP-1在舌鳞状细胞癌细胞中高表达;实验组和阴性对照组分别转染相应质粒48 h后细胞均有绿色荧光蛋白表达,表明质粒转染成功;实验组SCC9细胞LASP-1 m RNA和LASP-1蛋白表达明显降低;与空白对照组相比,实验组细胞培养48 h和72 h细胞存活率分别降低了(51.23±1.47)%和(50.07±2.11)%;Transwell实验结果显示,LASP-1基因被沉默后细胞迁移能力明显下降,比对照组降低约43%。结论 LASP-1在舌鳞状细胞癌细胞中高表达,下调LASP-1基因表达可抑制SCC9细胞的增殖和迁移。
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