检索结果-内蒙古大学图书馆

癌变．畸变．突变 2015年第1期27卷 44-48页

作者：康祥锦丁悦杨洁杜红姿刘见桥黄天华广州医科大学附属第三医院生殖医学中心广东省生殖医学重点实验室广东省产科重大疾病重点实验室广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广东广州510150 汕头大学医学院生殖医学研究中心广东汕头515041

目的：探讨乙肝病毒S蛋白（HBs）诱导人精子凋亡的分子机制。方法：人精子与不同浓度（0、25、50、100μg/m L）HBs共孵育3 h后,应用Annexin V-FITC/PI双染法检测HBs对精子早期凋亡指标磷脂酰丝氨酸外翻情况,用流式细胞术检测精子细胞... 详细信息

目的：探讨乙肝病毒S蛋白（HBs）诱导人精子凋亡的分子机制。方法：人精子与不同浓度（0、25、50、100μg/m L）HBs共孵育3 h后,应用Annexin V-FITC/PI双染法检测HBs对精子早期凋亡指标磷脂酰丝氨酸外翻情况,用流式细胞术检测精子细胞内半胱氨酸蛋白酶-3、-8、-9（Caspase-3、-8、-9）活化,用TUNEL结合流式细胞术检测精子DNA的损伤。结果：人精子与25~100μg/m L HBs共孵育3 h后,Annexin V-FITC＋/PI-精子,Caspase-3、-8、-9阳性精子,TUNEL阳性精子的比率均显著高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）,且均呈剂量依赖趋势。结论：25~100μg/m L HBs可诱发人精子胞膜磷脂酰丝氨酸外翻,胞内Caspase-3、-8、-9激活和DNA损伤,从而致使人精子凋亡以影响精子的功能。

关键词： HBs 凋亡胞膜完整性精子功能

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基因编辑——单基因遗传病治疗新策略

基因编辑——单基因遗传病治疗新策略

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第十四次全国医学遗传学学术会议

作者：孙筱放广东省产科重大疾病重点实验室广东省高校生殖与遗传重点实验室广州妇产科研究所广州医科大学附属第三医院

单基因遗传病是指一对同源染色体上单个基因或一对等位基因发生突变所引起的遗传病,又称孟德尔式遗传病。已知的很多疾病都属于单基因病。如:地中海贫血,血友病A、脊髓小脑共济失调、假性肥大型肌营养不良等。基因治疗是目前研究单基因... 详细信息

单基因遗传病是指一对同源染色体上单个基因或一对等位基因发生突变所引起的遗传病,又称孟德尔式遗传病。已知的很多疾病都属于单基因病。如:地中海贫血,血友病A、脊髓小脑共济失调、假性肥大型肌营养不良等。基因治疗是目前研究单基因病的治疗的一个重要方向,但仍存在一些不足。基因治疗,通过在基因水平的改变来治疗疾病。目前主要上是通过在目的细胞内强制表达外源基因或抑

关键词：单基因遗传病新策略 CRISPR TALEN 基因治疗同源重组基因编辑基因编辑技术

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两种细胞来源的21-三体综合征诱导多能干细胞系的建立及比较

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中国细胞生物学学报 2014年第7期36卷 884-891页

作者：杜融骆玉梅王鼎孙筱放陈耀勇广东省产科重大疾病重点实验室广东省高校生殖与遗传重点实验室广州医科大学附属第三医院广州510150

21-三体综合征是染色体异常导致的疾病,通过重编程21-三体综合征患儿两种组织来源的细胞成为多能干细胞,比较两种组织来源的细胞建立21-三体综合征诱导多能干细胞(T21-iPSCs)系的效率,为进一步研究21-三体综合征发病机制提供细胞模型,... 详细信息

21-三体综合征是染色体异常导致的疾病,通过重编程21-三体综合征患儿两种组织来源的细胞成为多能干细胞,比较两种组织来源的细胞建立21-三体综合征诱导多能干细胞(T21-iPSCs)系的效率,为进一步研究21-三体综合征发病机制提供细胞模型,并为选择高效制备T21-iPSCs的组织类型提供理论依据。该实验利用慢病毒介导4种转录因子(Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc)分别诱导人21-三体综合征的羊水细胞和胎儿皮肤成纤维细胞,建立诱导多能干细胞系(Trisomy 21 human amniotic fl uid induced pluripotent stem cells,T21 hAF-iPSCs;Trisomy 21 human dermal fi broblast induced pluripotent stem cells,T21 hDF-iPSCs),T21 hAF-iPSCs及T21 hDF-iPSCs在蛋白和mRNA水平上均表达人胚胎干细胞的多能性分子标记,如Oct4、Nanog等,具有在体外及体内分化三个胚层的能力,其在培养过程中能维持异常核型并能维持自我更新状态。结果发现,利用羊水细胞建立T21-iPSCs效率高于皮肤成纤维细胞,羊水细胞可能是制备T21-iPSCs的理想细胞类型。

关键词： 21-三体综合征羊水细胞人皮肤成纤维细胞诱导多能干细胞

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辅助生殖技术中HBV携带者胚胎发育和IVF结局的回顾分析

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中山大学学报（医学科学版） 2014年第4期35卷 570-574页

作者：杜红姿刘寒艳李莉康祥锦张伟良陈欣洁广州医科大学附属第三医院生殖医学中心//广东省生殖医学重点实验室//广东省产科重大疾病重点实验室//广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广东广州510150

【目的】探讨乙肝病毒(HBV)感染以及不同感染模式的夫妇胚胎发育情况和体外授精/卵胞浆内单精子显微注射(IVF/ICSI)结局。【方法】回顾性分析行IVF/ICSI治疗,637个HBV感染患者周期与1 892个未感染者周期的基础参数以及临床结局,同时进... 详细信息

【目的】探讨乙肝病毒(HBV)感染以及不同感染模式的夫妇胚胎发育情况和体外授精/卵胞浆内单精子显微注射(IVF/ICSI)结局。【方法】回顾性分析行IVF/ICSI治疗,637个HBV感染患者周期与1 892个未感染者周期的基础参数以及临床结局,同时进一步比较不同模式HBV感染者之间的临床结局。基础参数包括女方年龄、月经第3天基础内分泌水平、不孕原因、原发还是继发不孕、不孕年限、第几次周期、卵巢刺激方案是长方案还是短方案、IVF还是ICSI。临床结局包括比较各组人群在获卵数、受精率、卵裂率、着床率、临床妊娠率、流产率方面有无差异。【结果】一方或双方感染HBV的夫妻与未感染的夫妻在基础参数方面没有显著性差异。获卵数、受精数、卵裂数、优质胚胎数、冷冻胚胎数、着床率、妊娠率以及流产率与未感染组比较没有差异(P均>0.05),不同模式的HBV感染者之间着床率、妊娠率和早期流产率均没有显著差异(P均>0.05)。【结论】HBV感染夫妇的胚胎继续发育的潜能和IVF结局与未感染者相似。不同模式的HBV感染者IVF结局相似。

关键词：辅助生殖技术体外授精胚胎移植胚胎发育流产率临床妊娠率 HBV

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植物雌激素在雌性生殖系统中的抗氧化作用

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广东医学 2014年第21期35卷 3289-3293页

作者：余波澜郑婷蒋露广州医科大学附属第三医院产科广东省产科重大疾病重点实验室广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广州510150

目的探讨植物雌激素白藜芦醇、染料木黄酮和大豆黄酮在人类宫颈癌细胞He La、乳腺癌细胞MCF7和卵巢癌细胞SK-OV-3中对抗氧化信号通路的影响。方法将抗氧化响应元件ARE报告基因转染入He La、MCF7和SK-OV-3细胞。稳定表达ARE荧光报告基因... 详细信息

目的探讨植物雌激素白藜芦醇、染料木黄酮和大豆黄酮在人类宫颈癌细胞He La、乳腺癌细胞MCF7和卵巢癌细胞SK-OV-3中对抗氧化信号通路的影响。方法将抗氧化响应元件ARE报告基因转染入He La、MCF7和SK-OV-3细胞。稳定表达ARE荧光报告基因后,细胞培养基中分别加入50、25、12.5、6.25、3.125、1.56和0μmol/L的3种植物雌激素,检测ARE诱导倍数的变化。分别检测3种植物雌激素24 h处理后诱导细胞中抗氧化基因Nrf2、SOD1、SOD2、SOD3、HO-1、GSTm、GSTp、NQO1、CAT和CLGC等的mRNA表达水平。在MCF7细胞中,检测25μmol/L的白藜芦醇和大豆黄酮对野生型Keap1蛋白抑制Nrf2-ARE表达的影响。结果在MCF7、He La和SK-OV-3细胞中,3种植物雌激素均能诱导ARE报告基因的高表达,并促进Nrf2、SOD3、GSTp、CAT和CLGC等抗氧化基因的高表达。同时,25μmol/L的白藜芦醇和大豆黄酮在MCF7细胞中能够有效淬灭Keap1蛋白对ARE表达的抑制作用。结论植物雌激素白藜芦醇、染料木黄酮和大豆黄酮能够在人类宫颈癌细胞He La、乳腺癌细胞MCF7和卵巢癌细胞SK-OV-3中诱导抗氧化信号通路。诱导效应具有剂量依赖性和组织特异性。转录调控蛋白Keap1可能参与了诱导反应机制。

关键词：植物雌激素抗氧化 Keap1

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植物凝集素刺激外周血单个核细胞增殖及分泌因子表达的变化

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中国组织工程研究 2014年第23期18卷 3707-3714页

作者：王鼎宋兵钟旋孙筱放范勇广东省产科重大疾病重点实验室广东省高校生殖与遗传重点实验室广州医科大学附属第三医院广东省广州市510150

背景:植物凝集素可以刺激外周血单个核细胞分裂并引起免疫细胞的活化,是常用的细胞增殖模型。但是全血中的非外周血单个核细胞成分(血浆和无核细胞)在植物凝集素参与的体外培养过程中起到什么作用,以及内皮分泌因子的表达情况尚不明确... 详细信息

背景:植物凝集素可以刺激外周血单个核细胞分裂并引起免疫细胞的活化,是常用的细胞增殖模型。但是全血中的非外周血单个核细胞成分(血浆和无核细胞)在植物凝集素参与的体外培养过程中起到什么作用,以及内皮分泌因子的表达情况尚不明确。目的:在体外单独培养或全血培养外周血单个核细胞过程中,观察植物凝集素对其增殖和凋亡的影响,以及相关炎症因子以及内皮分泌因子的表达变化。方法:分离正常核型成人的外周血单个核细胞,应用无植物凝集素培养基和加入植物凝集素培养基分别进行单独培养,观察细胞形态学变化。收集全血培养或不同条件单独培养的外周血单个核细胞,提取mRNA,荧光定量RT-PCR检测细胞增殖、凋亡,以及炎症因子和内皮分泌因子的表达变化,并进行统计学分析。结果与结论:外周血单个核细胞单独培养和全血培养存在差异,植物凝集素会促进外周血单个核细胞Ki67、增殖细胞核抗原、蛋白水解酶3、γ-干扰素、肿瘤坏死因子β和白细胞介素6的基因表达,抑制蛋白C表达。提示植物凝集素促进体外培养外周血单个核细胞的增殖及凋亡,促使炎症因子表达上调,部分血液生物学相关的内皮分泌因子下调。

关键词：干细胞培养植物凝集素外周血单个核细胞细胞因子细胞增殖细胞凋亡炎症因子内皮分泌因子全血培养体外培养荧光定量RT-PCR 国家自然科学基金

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高龄孕妇脐血遗传产前诊断的成功率及异常率分析

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广东医学 2014年第13期35卷 2098-2100页

作者：王鼎潘倩莹赖炜强丘文君郑育红刘海波孔舒范勇孙筱放广州医科大学附属第三医院妇产科研究所实验部广东省产科重大疾病重点实验室广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广州510150

目的应用脐血进行产前诊断,探讨高龄孕妇脐血送检染色体核型分析的成功率及异常检出率。方法对产前诊断送检的脐血样本行染色体分析。统计2008年1月至2013年10月1 120份送检脐血染色体核型分析的成功率以及异常检出率,分析高龄因素对染... 详细信息

目的应用脐血进行产前诊断,探讨高龄孕妇脐血送检染色体核型分析的成功率及异常检出率。方法对产前诊断送检的脐血样本行染色体分析。统计2008年1月至2013年10月1 120份送检脐血染色体核型分析的成功率以及异常检出率,分析高龄因素对染色体分析和异常检出率的影响。结果 2008至2011年产前诊断脐血染色体送检数量呈上升趋势,2011年后逐渐下降,但高龄孕妇所占比例无显著变化。高龄孕妇脐血染色体的成功率与总成功率相当,差异无统计学意义(P>0.05)。异常核型检出率略高于总体检出率,分别为8.33%和5.38%,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论脐血细胞遗传产前诊断的减少预示着孕早期筛查和诊断的完善,高龄孕妇的脐血染色体核型异常率略高于总体人群,但高龄因素对脐血染色体细胞遗传检查的成功率和异常检出率无明显影响。

关键词：产前诊断脐血核型分析高龄孕妇

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微阵列技术在植入前遗传学筛查领域中的应用

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生殖与避孕 2014年第9期34卷 759-764页

作者：冼业星何文茵王维华孙筱放广州医科大学附属第三医院广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广州510150

胚胎植入前遗传学筛查(preimplantation genetic screening,PGS)是一种低风险的植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)。如今各种技术方法的不断涌现并应用于临床PGD中,大大增加了诊断的准确性,降低了误诊风险。而... 详细信息

胚胎植入前遗传学筛查(preimplantation genetic screening,PGS)是一种低风险的植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)。如今各种技术方法的不断涌现并应用于临床PGD中,大大增加了诊断的准确性,降低了误诊风险。而近几年微阵列技术如阵列比较基因组杂交(aCGH)和单核苷酸多态性阵列(SNP)已应用于临床PGS研究中,该项技术突破了以往经典遗传学检测技术如FISH等的诸多限制,能够在全基因组范围内同时检测多种因染色体失衡导致的疾病、微重复、微缺失等,检测结果更加精确、敏感,并能检测到≥10%水平的嵌合体。基于其各种优点,可见微阵列技术在胚胎PGS中具有重要的应用前景。

关键词：植入前遗传学筛查(PGS) 植入前遗传学诊断(PGD) 比较基因组杂交阵列(aCGH) 单核苷酸多态性(SNP) 全基因组扩增(WGA)

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香烟烟雾提取物对小鼠精子活力的影响

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生殖医学杂志 2014年第9期23卷 754-759页

作者：余波澜蒋露郑婷周华孙筱放广东省普通高校生殖与遗传重点实验室广州医科大学附属第三医院广州市510150

目的探讨香烟烟雾中所含外源活性氧物质(ROS)对小鼠精子活力的影响。方法香烟燃点后烟雾溶于二甲亚砜,配制成高ROS含量的香烟烟雾浓缩物(CSC)。釆用4周龄C57BL/6J小鼠45只,实验设置对照组(0mg/ml CSC)、低剂量组(0.2mg/ml CSC)和高剂量... 详细信息

目的探讨香烟烟雾中所含外源活性氧物质(ROS)对小鼠精子活力的影响。方法香烟燃点后烟雾溶于二甲亚砜,配制成高ROS含量的香烟烟雾浓缩物(CSC)。釆用4周龄C57BL/6J小鼠45只,实验设置对照组(0mg/ml CSC)、低剂量组(0.2mg/ml CSC)和高剂量组(2.0mg/ml CSC)。连续饲喂含有CSC的饮用水4周,观察小鼠的生殖系统发育情况和可能的全身毒性反应,并检测肝功能指标。处死小鼠后即刻检测精子浓度和活力,检测睾丸内抗氧化酶类的表达水平,并制片观察睾丸组织病理变化。结果与对照组相比,低剂量和高剂量组小鼠精子浓度无显著变化,但高剂量组精子活力呈现显著下降。CSC低剂量组和高剂量组小鼠连续饲喂4周后精子总活动力分别为32%和19%,A级活动精子分别为13%和12%,均显著低于对照组(61%和24%)(P<0.05)。但在本实验剂量范围内,CSC对小鼠发育和生殖系统无明显毒性损伤,对睾丸抗氧化基因表达无显著影响。结论 CSC对小鼠精子活力有显著影响,但是对小鼠全身和生殖系统无明显毒性作用。CSC饲喂法可推荐用于诱导小鼠弱精子症模型。

关键词：香烟烟雾提取物精子活力活性氧物质弱精子症小鼠模型

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NRF2启动子甲基化与男性不育

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中华临床医师杂志（电子版） 2014年第5期8卷 25-28页

作者：刘丹王芳龚炜高兴成孙筱放余波澜广州医科大学附属第三医院妇产科 510150 广州医科大学附属第三医院泌尿外科 510150 广东省普通高校生殖与遗传重点实验室

目的：探讨抗氧化基因NRF2启动子上游CpG岛内408-994 bp位置处的甲基化水平与男性不育之间的关系。方法酚氯仿法手提精子DNA，建立重亚硫酸盐修饰精子DNA后克隆测序法（即 BSP-克隆测序法），选择正常男性及不育中少、弱、畸精症男性患... 详细信息

目的：探讨抗氧化基因NRF2启动子上游CpG岛内408-994 bp位置处的甲基化水平与男性不育之间的关系。方法酚氯仿法手提精子DNA，建立重亚硫酸盐修饰精子DNA后克隆测序法（即 BSP-克隆测序法），选择正常男性及不育中少、弱、畸精症男性患者每份精液样本 DNA的抗氧化基因NRF2的三个片段，每个片段选择15～20个正确的克隆结果并比较其甲基化水平。结果不育男性少、弱精组和正常精液组其抗氧化基因NRF2启动子上游408～994 bp处99%甲基化位点均为非甲基化状态，正常男性精子 DNA 第7个甲基化位点缺失率（18.14%）明显比少弱精组（24.9%）缺失率低（P＜0.05）。结论虽然正常生育男性及不育男性少、弱精患者抗氧化基因NRF2启动子上游408～994 bp区均呈现非甲基化状态但其第7个甲基化位点缺失可能与精子成熟障碍有关。

关键词：不育男(雄)性 DNA甲基化 CpG岛 NRF2启动子 BSP-克隆测序

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