检索结果-内蒙古大学图书馆

微滴式数字PCR(ddPCR)快速检测α珠蛋白基因ααα^(anti-3.7)三联体

南方医科大学学报 2017年第9期37卷 1265-1269页

作者：龚小倩杨学煌乔伶俐陈亚军周万军广东省韶关市妇幼保健院广东韶关512026 南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室广东广州510515

目的建立一种基于微滴式数字PCR(ddPCR)技术的α珠蛋白基因αααanti-3.7快速检测方法。方法以β-actin为参比基因、α1基因X1/Y1盒之间的差异性序列为目的基因代表性扩增子,设计特异性引物和Taq Man探针,建立基于ddPCR技术的拷贝数定... 详细信息

目的建立一种基于微滴式数字PCR(ddPCR)技术的α珠蛋白基因αααanti-3.7快速检测方法。方法以β-actin为参比基因、α1基因X1/Y1盒之间的差异性序列为目的基因代表性扩增子,设计特异性引物和Taq Man探针,建立基于ddPCR技术的拷贝数定量方法;检测28例已知基因型和60例临床样本,评价此方法的灵敏度和准确性。结果采用本研究建立的方法,28例已知基因型样本的检测结果均与靶基因型结果相符;60例临床样本中检出5例αα/αααanti-3.7,与MLPA的验证结果一致;方法学评价结果显示此ddPCR体系的灵敏度与准确性均达100%。结论建立了一种α珠蛋白基因αααanti-3.7三联体ddPCR检测方法,操作简单快速、结果准确可靠,可应用于人群筛查和临床常规分子诊断。

关键词：数字PCR 珠蛋白基因多拷贝地中海贫血

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

三重实时荧光PCR相对定量法快速诊断21和X染色体数目异常

引用

第三军医大学学报 2010年第13期32卷 1479-1481页

作者：刘彦慧吴亚敏黎丽芬李超强周万军中山大学附属东莞东华医院医学遗传学实验室广东东莞523110 南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室广州510515

目的建立三重TaqMan实时荧光定量PCR体系,快速诊断21、X染色体数目异常。方法选取21号染色体唐氏综合征特异区域(DSCR3)和X染色体1113KDNA序列范围分别作为21号和X染色体目的基因,同时选择12号染色体上磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)为参... 详细信息

目的建立三重TaqMan实时荧光定量PCR体系,快速诊断21、X染色体数目异常。方法选取21号染色体唐氏综合征特异区域(DSCR3)和X染色体1113KDNA序列范围分别作为21号和X染色体目的基因,同时选择12号染色体上磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)为参比基因,分别设计引物和TaqMan探针,经PCR反应体系优化,采用单管三重及2-ΔΔCt相对定量数据分析,根据基因拷贝数变化诊断21号和X染色体数目异常,并进行方法学应用评价。结果通过优化,模板量在5～30ng/μl时3个基因都可以得到有效扩增,目的基因和参照基因扩增效率基本一致,均接近100%。采用上述体系检测24例正常标本和20例异常标本(包括血液和羊水标本),正常标本的21号2-ΔΔCt值均为2,而唐氏综合征患者均为3;正常男性的X染色体2-ΔΔCt值均为1,而正常女性均为2。其临床标本检测结果的敏感性、特异性均达100%。结论建立的三重TaqMan实时荧光PCR相对定量法快速诊断21和X染色体数目异常方法 ,稳定性、可靠性和实用性均较好。

关键词：荧光定量PCR 拷贝数染色体数目异常

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

加尾引物多重PCR技术检测Y染色体微缺失

引用

第三军医大学学报 2015年第18期37卷 1901-1904页

作者：邹德亮温晓君张雪莲吴晓伟周万军吴英松南方医科大学生物技术学院广州510515 南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室广州510515 南方医科大学华银医学检验中心广州510515

目的设计加尾引物多重PCR策略,并采用此技术建立一种快速检测Y染色体15个STS位点微缺失的多重PCR方法。方法以Y染色体无精子因子(azoospermia factor,AZF)区域15个特异性序列标签位点(sequence-tagged site,STS)为扩增子,根据加尾引物多... 详细信息

目的设计加尾引物多重PCR策略,并采用此技术建立一种快速检测Y染色体15个STS位点微缺失的多重PCR方法。方法以Y染色体无精子因子(azoospermia factor,AZF)区域15个特异性序列标签位点(sequence-tagged site,STS)为扩增子,根据加尾引物多重PCR策略设计5'端加尾引物,建立一种Y染色体微缺失多重PCR体系;并检测18例已知样本和112例临床样本观察其灵敏度与准确性。结果基于此策略的多重PCR体系优化过程简单快速,建立的多重PCR检测体系稳定可靠,各目的条带的电泳分析亮度基本一致;18例已知样本的检测结果与靶值相符;112例临床样本的检测结果也与对照方法一致。结论本研究设计的加尾引物策略可提高多重PCR扩增效率,简化优化过程,为其他多重PCR检测体系的设计与建立提供参考和借鉴;建立的Y染色体AZF15个STS位点微缺失多重PCR检测方法结果稳定,可供临床样本的快速检测。

关键词：多重PCR Y染色体微缺失

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

四重TaqMan实时荧光PCR检测α地中海贫血——^(SEA)、—α^(3.7)和—α^(4.2)缺失

引用

临床检验杂志 2014年第6期32卷 401-404页

作者：赵学峰王格周万军南方医科大学附属南海人民医院检验科广东佛山528200 南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室广州510515

目的建立并评价一种基于珠蛋白基因拷贝数相对定量技术的α地中海贫血(α地贫)--SEA、-α3.7和-α4.2缺失基因型快速检测方法。方法建立四重TaqMan实时荧光PCR体系结合2-ΔΔCt数据分析的方法,同时检测ψα、α2和α1基因相对拷贝数,快... 详细信息

目的建立并评价一种基于珠蛋白基因拷贝数相对定量技术的α地中海贫血(α地贫)--SEA、-α3.7和-α4.2缺失基因型快速检测方法。方法建立四重TaqMan实时荧光PCR体系结合2-ΔΔCt数据分析的方法,同时检测ψα、α2和α1基因相对拷贝数,快速诊断α地贫缺失基因型;以此方法检测28例已知α地贫缺失基因型标本和309例临床标本,并与gap-PCR平行对比检测,评价该方法的准确性与实用性。结果建立的检测体系扩增效率均接近100%;28例已知基因型及309例临床标本的检测结果显示其准确性达到100%,且能有效消除微量或少量外源污染导致的假阴性和假阳性。结论本研究建立的基于珠蛋白基因拷贝数相对定量技术的α地贫--SEA、-α3.7和-α4.2缺失基因型检测方法,操作简单快速,结果准确可靠,适合大规模人群筛查和常规分子诊断。

关键词：地中海贫血检测拷贝数荧光PCR 缺失

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

一个遗传性牙本质发育不全家系DSPP基因的突变分析

引用

中华医学遗传学杂志 2018年第4期35卷 511-514页

作者：胡爱勤李晓聪陈丹娜卢婷黄瑾徐湘民陈栋熊符南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室广州510515 郑州大学第一附属医院口腔科 450052

目的对1个遗传性牙本质发育不全家系进行临床表型分析和牙本质涎磷蛋白（dentin sialophosphoprotein，DSPP）基因突变检测。方法对家系成员进行全身基本情况及口腔专科检查，拍摄口内照、牙片及全景片；采集外周静脉血并提取DNA，用PC... 详细信息

目的对1个遗传性牙本质发育不全家系进行临床表型分析和牙本质涎磷蛋白（dentin sialophosphoprotein，DSPP）基因突变检测。方法对家系成员进行全身基本情况及口腔专科检查，拍摄口内照、牙片及全景片；采集外周静脉血并提取DNA，用PCR扩增DSPP基因的启动子及外显子，之后采用Sanger测序进行突变筛查，随后用PolyPhen-2和SIFT软件进行突变有害性预测，同时用Swiss-Port软件预测DSPP蛋白的三级结构。结果患者DSPP基因第2外显子存在C．50C〉T（P．P17L）杂合错义突变，其父亲也有此杂合突变，正常人群筛查未发现有突变者；该突变位于蛋白的高度保守区，有害性预测结果显示为有害，导致蛋白三级结构发生改变。结论DSPP基因突变是导致该家系发病的分子基础，这一结果拓展了DSPP基因的突变谱，同时为该遗传性牙本质发育不全Ⅱ型家系的遗传咨询和产前诊断提供了理论依据。

关键词：牙本质发育不全牙本质涎磷蛋白基因突变

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中国汉族人群ABCB1基因SNPs与单倍型频率分析

引用

实用医学杂志 2011年第21期27卷 3831-3834页

作者：李亮李川江江海霞李忠海南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室广州市510515 南方医院器官移植科南方医院检验科

目的:分析中国汉族人群中ABCB1基因SNPs频率与单倍型频率。方法:采用DNA直接测序法对130例汉族人ABCB1基因-129T>C,1236C>T,2677G>T/A和3435C>T测序并构建单倍型,分析各个SNPs频率与单倍型频率。结果:突变位点-129C、1236T... 详细信息

目的:分析中国汉族人群中ABCB1基因SNPs频率与单倍型频率。方法:采用DNA直接测序法对130例汉族人ABCB1基因-129T>C,1236C>T,2677G>T/A和3435C>T测序并构建单倍型,分析各个SNPs频率与单倍型频率。结果:突变位点-129C、1236T、2677T、2677A和3435T频率分别为4.62%、64.23%、35.00%、12.69%和35.38%;单倍型T-T-T-T和C-T-T-T频率分别为31.15%和0.77%。结论:汉族人群中ABCB1基因功能性的SNP突变位点与单倍型频率较高,对相关SNPs和单倍型进行基因分型可以指导临床上P-糖蛋白相关药物的安全有效使用。

关键词：多态性,单核苷酸 ABCB1基因单倍型频率

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

由HbH病和重型β地中海贫血引起的一个罕见中间型地中海贫血病例及其产前诊断应用

引用

南方医科大学学报 2008年第1期28卷 16-19页

作者：李强李莉艳莫秋华冯晓勤徐湘民南方医科大学产前诊断和遗传病诊断技术中心基础医学院医学遗传学教研室南方医科大学南方医院产前诊断与遗传病诊断技术中心南方医科大学南方医院小儿科广东广州510515

目的分析1例中间型地中海贫血(地贫)患者的基因型与表型的关系,探索进行重症β地贫复合血红蛋白H病这类复杂基因型组合方式的产前诊断临床实践。方法表型检测采用标准的血液学分析技术测量红细胞参数和血红蛋白组分。采用反向点杂交技... 详细信息

目的分析1例中间型地中海贫血(地贫)患者的基因型与表型的关系,探索进行重症β地贫复合血红蛋白H病这类复杂基因型组合方式的产前诊断临床实践。方法表型检测采用标准的血液学分析技术测量红细胞参数和血红蛋白组分。采用反向点杂交技术诊断β地贫基因突变,采用缺口聚合酶链反应技术检测α地贫缺失突变。通过基于家系调查的表型与基因型分析探讨该病例的发病机制。利用羊水细胞DNA对该家系1例地贫高风险胎儿进行产前基因诊断。结果先证者诊断为β0/β+地贫(βCD17A>T/βIVS2-654C>T)双重杂合子复合血红蛋白H病(--SEA/-α4.2)的偏重的中间型地贫患儿,其父母分别为β地贫杂合子合并轻型α地贫和β地贫杂合子合并静止型α地贫个体。在此基础上,我们对该家庭的地贫高风险胎儿进行了产前基因诊断,结果显示胎儿的基因型为重症β地贫合并静止型α地贫,通过遗传咨询实施了中止妊娠。结论首次报道罕见中间型地贫案例,为国内外产前诊断提供可借鉴的临床经验。

关键词：中间型地中海贫血聚合酶链反应反向斑点杂交产前诊断

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

囊胚细胞WGA结合短片段Gap-PCR的α-地贫SEA突变快速植入前遗传学诊断

引用

南方医科大学学报 2018年第10期38卷 1250-1254页

作者：徐惠玲刘彦慧晏平何怡秦佳纯娄季武周万军南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室广东广州510515 广东省东莞市妇幼保健院广东东莞523122 南方医科大学南方医院惠侨医疗中心广东广州510515

目的建立一种基于囊胚细胞全基因组扩增(WGA)结合目的序列短片段Gap-PCR基因分型技术的α-地中海贫血东南亚型(SEA)缺失突变快速植入前遗传学诊断新方法。方法以多重置换扩增(MDA)WGA技术为基础,建立以管家基因GAPDH和β-actin为目的序... 详细信息

目的建立一种基于囊胚细胞全基因组扩增(WGA)结合目的序列短片段Gap-PCR基因分型技术的α-地中海贫血东南亚型(SEA)缺失突变快速植入前遗传学诊断新方法。方法以多重置换扩增(MDA)WGA技术为基础,建立以管家基因GAPDH和β-actin为目的序列的WGA产物双重荧光PCR质检体系,以及突变和正常序列短片段Gap-PCR的α-地中海贫血SEA缺失基因分型体系,通过对不同细胞数SEA携带者淋巴细胞样本的检测进行灵敏度与准确性评价,对12例囊胚活检样本的检测进行应用评价。结果应用本研究建立的方法,不同淋巴细胞数样本的结果显示3细胞时即未出现等位基因脱扣,4细胞时目标模板的WGA产物量趋于稳定;10例WGA成功的囊胚活检样本的基因分型结果分别为--SEA/αα(5例)和αα/αα(5例),与验证基因型相符。结论本研究建立的方法为一个完整检测流程,即以4～6个囊胚活检细胞为检材,对MDA产物进行WGA质检及相对浓度评估后,以短片段Gap-PCR体系而实现α-地贫SEA缺失的PGD快速基因分型;此方法简单快速、结果准确、检测成本低而适合临床常规应用。

关键词： α-地中海贫血多重置换扩增植入前遗传学诊断基因分型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

CYP3A5~＊3多态性对合并乙型肝炎肾移植患者他克莫司代谢的影响

引用

广东医学 2011年第24期32卷 3201-3203页

作者：李亮李川江江海霞李忠海南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室广州510515 南方医科大学南方医院器官移植科广州510515 南方医科大学南方医院检验科广州510515

目的分析CYP3A5不同基因型对携带乙肝病毒的肾移植患者术后14 d内早期(1～3 d)、中期(6～8 d)、晚期(12～14 d)他克莫司(FK506)血药浓度剂量比的影响。方法采用DNA直接测序法对38例携带乙肝病毒的肾移植患者CYP3A5基因进行分型。采用独... 详细信息

目的分析CYP3A5不同基因型对携带乙肝病毒的肾移植患者术后14 d内早期(1～3 d)、中期(6～8 d)、晚期(12～14 d)他克莫司(FK506)血药浓度剂量比的影响。方法采用DNA直接测序法对38例携带乙肝病毒的肾移植患者CYP3A5基因进行分型。采用独立样本t检验法分析CYP3A5表达组(CYP3A5*1/*1和CYP3A5*1/*3)与不表达组(CYP3A5*3/*3)术后早期、中期与晚期他克莫司浓度剂量比差异,同时分别分析两组在这3个时期临床生化指标的差异。结果 CYP3A5不表达组术后中期与晚期他克莫司浓度剂量比显著高于CYP3A5表达组(P<0.05),在术后早期两组之间他克莫司浓度剂量比差异无统计学意义(P>0.05)。术后中期CYP3A5不表达组AST数值显著高于CYP3A5表达组(P<0.05),两组之间其他各数值差异无显著性(P>0.05)。结论 CYP3A5的表达水平对携带乙肝病毒的肾移植患者术后晚期他克莫司浓度剂量比具有显著影响。

关键词： CYP3A5基因型肾移植他克莫司浓度剂量比

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

常染色体显性多囊肾病家系PKD1基因突变分析

引用

中华医学杂志 2022年第31期102卷 2441-2445页

作者：陈丹娜刘国辉朱梓年熊符张拔山东莞市人民医院检验科东莞523059 东莞市人民医院肾内科东莞523059 南方医科大学基础医学院医学遗传学教研室广州510515

目的对1个常染色体显性多囊肾病(ADPKD)家系进行临床表型分析和致病基因突变检测。方法本研究先证者因“左上颌骨根尖囊肿”于2017年10月10日在东莞市人民医院住院治疗。通过临床表现、影像检查和生化指标等对先证者确诊。采集家系成员... 详细信息

目的对1个常染色体显性多囊肾病(ADPKD)家系进行临床表型分析和致病基因突变检测。方法本研究先证者因“左上颌骨根尖囊肿”于2017年10月10日在东莞市人民医院住院治疗。通过临床表现、影像检查和生化指标等对先证者确诊。采集家系成员及150名健康对照者外周血,通过高通量测序(NGS)法筛选先证者全外显子组突变基因;应用PCR及Sanger测序验证先证者及其家系成员候选突变基因位点,并进一步筛查健康对照者;应用ExAC、dbSNP、HGMD、1000 genomes、ClinVar、PKDB、Mutation Taster和PhyloP数据库及软件进行突变人群频率和生物信息学分析。结果先证者,男,46岁,高血压,尿潜血阳性,血肌酐升高。B超及CT示双侧多囊肾伴左肾结石,多囊肝。测序显示先证者及其二弟、妹妹、女儿和侄女皆存在PKD1基因c.11017-10C>A杂合剪接突变,且150名健康对照者中均未发现该突变。c.11017-10C>A已被dbSNP、ClinVar、HGMD、PKDB和Mutation Taster数据库收录,有害性预测结果为有害,可能导致产生多囊蛋白1(polycystin1,PC1)截短蛋白。结论在中国人群ADPKD家系发现PKD1致病基因突变c.11017-10C>A,拓展了该基因的突变谱。

关键词：常染色体显性遗传多囊肾病 PKD1基因高通量测序剪接突变

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：