检索结果-内蒙古大学图书馆

实用医学杂志 2010年第6期26卷 912-914页

作者：罗惠莉卢晓晔暨南大学医学院组织胚胎学教研室广州市510632

目的:探讨hMSH2/hMLH1蛋白表达与慢性血吸虫病并结直肠癌之间的相关性及其可能的作用机制。方法:应用免疫组化SP法检测67例慢性血吸虫病并结直肠癌患者癌变组织及癌旁正常组织中hMSH2/hMLH1蛋白的表达情况。结果:慢性血吸虫病并结直肠... 详细信息

目的:探讨hMSH2/hMLH1蛋白表达与慢性血吸虫病并结直肠癌之间的相关性及其可能的作用机制。方法:应用免疫组化SP法检测67例慢性血吸虫病并结直肠癌患者癌变组织及癌旁正常组织中hMSH2/hMLH1蛋白的表达情况。结果:慢性血吸虫病并结直肠癌患者癌变组织中hMSH2/hMLH1蛋白表达丢失率为28.4%,而癌旁正常结直肠组织中表达丢失率为1.5%(P=0.000);在黏液腺癌中hMSH2/hMLH1蛋白表达明显减低(P<0.05);逐步回归法进行Logistic多因素分析结果显示组织学分型是hMSH2/hMLH1表达缺失的唯一危险因素(OR=3.333,95%CI1.096～10.141,P=0.034)。结论:hMSH2/hMLH1蛋白缺失与结直肠癌组织学分型有关;hMSH2/hMLH1蛋白缺失在慢性血吸虫病并结直肠癌中起重要作用,微卫星不稳定性可能参与了慢性血吸虫肠病发展为结直肠癌的恶性转化过程。

关键词：结直肠肿瘤 hMLH1/hMSH2 血吸虫病免疫组织化学

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经卡介苗刺激后结核性胸腔积液中记忆性γδT细胞的细胞因子水平及其受体表达

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中华结核和呼吸杂志 2010年第10期33卷 775-778页

作者：李丽乔丹劳穗华陈少华李扬秋吴长有中山大学医学院免疫学教研室热带传染病教育部重点实验室广州510080 广州市胸科医院暨南大学医学院血液病研究所

目的观察卡介苗刺激后结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞中γδ T细胞的细胞因子及细胞受体表达,了解γδ T细胞在结核病局部细胞免疫应答中的作用.方法分离结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞,经卡介苗刺激后检测γδ T细胞的细胞因子分... 详细信息

目的观察卡介苗刺激后结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞中γδ T细胞的细胞因子及细胞受体表达,了解γδ T细胞在结核病局部细胞免疫应答中的作用.方法分离结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞,经卡介苗刺激后检测γδ T细胞的细胞因子分泌、细胞亚群、细胞表型及细胞受体表达特征,并提取mRNA,利用3种Vγ和8种Vδ引物,经逆转录PCR扩增cDNA,将PCR产物进行基因扫描分析γδ T细胞各亚家族克隆性.结果卡介苗刺激胸腔积液细胞后,CD4＋和γδ T细胞分泌γ-干扰素的阳性率分别为0.38%和5.35%,且γδ T细胞分泌γ-干扰素的阳性率远高于CD4＋ T细胞,分泌γ-干扰素的γδ T细胞主要表达白细胞共同抗原（CD45RO）,其阳性率为73.5%.此外,δ2细胞也分泌γ-干扰素（11.1%）和肿瘤坏死因子-α（25.5%）.与未刺激者相比,卡介苗选择性扩增δ2细胞,由多克隆或双克隆转变为寡克隆.结论卡介苗刺激结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞能诱导记忆性γδT细胞分泌细胞因子,卡介苗体外扩增γδT细胞后,基因扫描显示Vδ2出现寡克隆性.

关键词：受体,抗原,T细胞,γ-δ 细胞因子类卡介苗

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生存素反义核酸抑制肝癌细胞增殖及对5-FU的增敏作用

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南方医科大学学报 2010年第2期30卷 304-307,310页

作者：吴风云黄光胜蒋建伟王芳徐向东彭单依暨南大学医学院生化教研室广东广州510630 南方医科大学中医药学院教学实验中心广东广州510515

目的探讨生存素反义核酸抑制肝癌细胞增殖及对5-FU的增敏作用。方法WST法、台盼蓝拒染法、克隆形成抑制实验检测聚乙烯亚胺携带生存素反义核酸(PEI-ASODN)对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用。建立小鼠肝癌腋下移植瘤和腹水瘤模型,检测PEI-A... 详细信息

目的探讨生存素反义核酸抑制肝癌细胞增殖及对5-FU的增敏作用。方法WST法、台盼蓝拒染法、克隆形成抑制实验检测聚乙烯亚胺携带生存素反义核酸(PEI-ASODN)对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用。建立小鼠肝癌腋下移植瘤和腹水瘤模型,检测PEI-ASODN联合5-FU对肝癌移植瘤小鼠瘤重、瘤体积的改变,对肝癌腹水瘤小鼠平均存活天数的影响。结果不同浓度的PEI-ASODN作用于SMMC-7721细胞48h后,0.75μmol/L的PEI-ASODN分别作用细胞24、48、72和96h后,均能对细胞产生明显的抑制作用;PEI-ASODN对细胞的克隆形成也有显著的抑制作用,与细胞对照组相比有显著的统计学差异(P<0.01)。肝癌腋下移植瘤小鼠,各治疗组的瘤重、瘤体积均得到不同程度的抑制,其中以联合用药组(5-FU+PEI-ASODN)最明显,瘤重抑瘤率高达56.91%,瘤体积抑制率高达57.83%;肝癌腹水瘤小鼠模型,联合用药组生命延长率为94.09%,与生理盐水组相比,具有显著性差异(P<0.01)。结论聚乙烯亚胺携带生存素反义核酸(PEI-ASODN)可显著抑制肝癌细胞生长,并可提高荷肝癌小鼠对5-FU的敏感性。

关键词：生存素反义核酸肝癌 5-FU

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靶向Bcl-2、Bcl-xl、Mcl-1、Bcl-w、A1反义核酸抑制消化系肿瘤细胞增殖效果的差异

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中国药理学通报 2010年第8期26卷 1093-1098页

作者：蒋建伟吴风云何金花廖晓莉王威吴志慧暨南大学医学院生化教研室广东广州510630 浙江省温州市平阳县人民医院浙江温州325400 广东省广州市番禺区中心医院检验科广东广州511440

目的比较靶向Bcl-2、Bcl-xl、Mcl-1、Bcl-w、A1反义核酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASO)对消化系统肿瘤细胞(肝癌HepG2细胞、胃癌MGC-803细胞、结肠癌Lovo细胞)的增殖抑制作用和致凋亡作用的差异。方法分别合成靶向Bcl-2、Bcl-xl、Mcl-1、Bcl-w、A1的反义核酸和随机序列反义核酸(randomolig odeoxynucleotide,RODN),采用脂质体Li-pofectamineTM 2000转染细胞,WST法检测相同浓度的5种ASOs对肝癌HepG2细胞、胃癌MGC-803细胞、结肠癌Lovo细胞的增殖抑制作用和致凋亡作用。结果 Bcl-2、Bcl-xl、Mcl-1、Bcl-w、A1等5种ASOs中,不论是对细胞增殖抑制还是致凋亡作用,均以Bcl-xlASO、Mcl-1ASO的作用效果较好。结论在Bcl-2、Bcl-xl、Mcl-1、Bcl-w、A1等5种ASOs中,Bcl-xlASO、Mcl-1ASO可明显抑制消化系肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡。

关键词：反义核酸 Bcl-2 Bcl-xl Mcl-1 增殖凋亡肿瘤细胞

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CpG ODN对ZP^(121-140)表位合成肽诱导的免疫应答和免疫避孕效应影响

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中国免疫学杂志 2010年第1期26卷 46-50页

作者：秦卫兵王一峰蒋敏蒋建伟苗竹林欧汝强广东省计划生育科学技术研究所广州510600 暨南大学医学院生化教研室广州510632

目的:探讨CpGODN对透明带(ZP)抗原表位ZP121-140合成肽诱导的免疫应答和免疫避孕效应影响。方法:应用人工合成ZP2121-140表位肽,与20μgCpGODN或等量完全弗氏佐剂(CFA)混悬后左胫前肌免疫雌性BALB/c小鼠,初次免疫后2、4、6周各加强免疫... 详细信息

目的:探讨CpGODN对透明带(ZP)抗原表位ZP121-140合成肽诱导的免疫应答和免疫避孕效应影响。方法:应用人工合成ZP2121-140表位肽,与20μgCpGODN或等量完全弗氏佐剂(CFA)混悬后左胫前肌免疫雌性BALB/c小鼠,初次免疫后2、4、6周各加强免疫一次,共免疫四次。在每次加强免疫前和末次免疫后两周断尾取血,分离血清,分析特异性IgG抗体及非特异性细胞因子IFN-γ、TNF-α及IL-10水平;收集小鼠阴道冲洗液,离心取上清,分析特异性IgA抗体水平。免疫小鼠生育实验结束后,取卵巢组织行病理学分析。结果:CpGODN组诱导的特异性IgG和IgA水平较CFA组有增高趋势,但无显著性差异(P>0.05)。CpGODN组诱导的非特异性IFN-γ和TNF-α水平明显高于CFA组(P<0.05);而CpGODN组诱导的IL-10水平显著低于CFA组(P<0.05)。两种佐剂对小鼠的受孕率影响没有显著性差异,但CpGODN组孕鼠每胎产仔数明显低于CFA组(P<0.05)。病理学分析显示实验小鼠卵巢组织无病理性变化。结论:CpGODN对ZP121-140合成肽诱导的免疫应答和免疫避孕效应略优于CFA,更适合用于避孕疫苗佐剂研究。

关键词： CpG ODN 透明带合成肽免疫避孕

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B细胞非霍奇金淋巴瘤患者TCR ζ基因的表达特点

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肿瘤防治研究 2010年第5期37卷 547-550页

作者：李菊香陈少华杨力建林春兰李扬秋暨南大学附属第一医院临床医学检验中心广州510632 暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院生化教研室暨南大学再生医学教育部重点实验室

目的分析B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者外周血中T细胞信号转导分子TCRζ基因的表达特点。方法采用SYBRGreenⅠ实时定量RT-PCR和相对定量分析法检测17例B-NHL患者外周血单个核细胞(PBMCs)中TCRζ基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M... 详细信息

目的分析B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者外周血中T细胞信号转导分子TCRζ基因的表达特点。方法采用SYBRGreenⅠ实时定量RT-PCR和相对定量分析法检测17例B-NHL患者外周血单个核细胞(PBMCs)中TCRζ基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算TCRζ基因的相对mRNA表达量,17例健康成人作为对照。结果全部B-NHL样本均全部表达TCRζ基因,但其表达水平显著低于对照组(P=0.000),健康人PBMCs的TCRζ基因mRNA的表达水平为B-NHL患者的3.26倍。B-NHL患者TCRζ基因表达水平与患者的年龄无相关性。结论 B-NHL患者中TCRζ基因的mRNA表达水平明显下调,可能是其细胞免疫功能缺陷的原因之一。

关键词： TCRζ基因非霍奇金淋巴瘤实时定量RT-PCR

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骨髓间充质样干细胞和骨髓单个核细胞影响博莱霉素诱导肺纤维化的比较

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第36期14卷 6672-6676页

作者：陈娟刘薇薇刘移民李素梅余卫陈嘉榆张成林琛莅唐丽娟方茅钟雪云暨南大学医学院病理学教研室广东省广州市510632 广东省广州市第十二人民医院广东省广州市510632

背景:有报道指出,骨髓间充质样干细胞和骨髓单个核细胞在多种疾病中被证明有疗效,骨髓间充质样干细胞在肺纤维化模型中也有应用。目的:比较骨髓间充质样干细胞和骨髓单个核细胞对博莱霉素A5所致大鼠肺泡炎和早期纤维化的治疗作用。方法... 详细信息

背景:有报道指出,骨髓间充质样干细胞和骨髓单个核细胞在多种疾病中被证明有疗效,骨髓间充质样干细胞在肺纤维化模型中也有应用。目的:比较骨髓间充质样干细胞和骨髓单个核细胞对博莱霉素A5所致大鼠肺泡炎和早期纤维化的治疗作用。方法:收集Wistar雄性幼鼠的骨髓间充质样干细胞、骨髓单个核细胞并分别进行DAPI标记。21只Wistar雌性大鼠气管内注入博莱霉素A5制作肺损伤模型,随机均分为骨髓间充质样干细胞治疗组、骨髓单个核细胞治疗组和模型组。造模后第7天处死大鼠,取肺组织病理切片观察炎症和纤维化情况;荧光显微镜下检测DAPI标记细胞;ELISA法检测肺组织匀浆羟脯氨酸和肿瘤坏死因子的含量。结果与结论:①在骨髓间充质样干细胞治疗组、骨髓单个核细胞治疗组肺组织冰冻切片中均见到DAPI标记的外源细胞。②模型组肺泡炎最严重,骨髓间充质样干细胞治疗组肺泡炎最轻,各组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。③模型组肺组织匀浆中羟脯氨酸和肿瘤坏死因子α含量最多,骨髓间充质样干细胞治疗最少,各组比较差异有显著性意义(P<0.05)。提示骨髓间充质样干细胞和骨髓单个核细胞均可定植于损伤肺组织,并能有效阻止博莱霉素A5诱导的大鼠肺泡炎和早期纤维化,前者作用更为显著。

关键词：骨髓单个核细胞骨髓间充质样干细胞细胞移植肺纤维化肿瘤坏死因子α

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Klotho:与FPC蛋白相互作用的蛋白质分子

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中国病理生理杂志 2010年第3期26卷 518-523页

作者：孙丽萍张欣洲胡巢凤暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院肾内科广东深圳518020 暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

目的:利用酵母双杂交技术筛选与纤囊素相互作用的蛋白质,为进一步探讨纤囊素(FPC)在常染色体隐性遗传多囊肾病(ARPKD)发生、发展中的作用机制提供依据。方法:利用酵母双杂交系统以质粒pG-BKT7-FPC为"诱饵",在人类胚肾cDNA文... 详细信息

目的:利用酵母双杂交技术筛选与纤囊素相互作用的蛋白质,为进一步探讨纤囊素(FPC)在常染色体隐性遗传多囊肾病(ARPKD)发生、发展中的作用机制提供依据。方法:利用酵母双杂交系统以质粒pG-BKT7-FPC为"诱饵",在人类胚肾cDNA文库中筛选与FPC蛋白C末端相互作用宿主蛋白的基因,再通过一对一回交试验验证两者之间的相互作用。结果:酵母双杂交筛选得到相互作用的蛋白分子Klotho(后简称KL),回交试验再次确认KL能够与FPC蛋白相互作用。结论:FPC的C末端能够与KL相互作用,它们之间的相互作用可能为研究FPC在ARPKD发病中的功能及作用机制提供新途径。

关键词：常染色体隐性多囊肾病纤囊素酵母双杂系统

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靶向增殖细胞核抗原shRNA的构建及其对HepG2细胞增殖与凋亡的影响

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生物化学与生物物理进展 2010年第3期37卷 278-287页

作者：张小鹰吴风云何金花廖晓莉王威蒋建伟暨南大学医学院生化教研室广州510630 广东省佛山市南海区妇幼保健院检验科佛山528200 浙江省温州市平阳县人民医院温州325400 广东省广州市番禺区中心医院检验科番禺511440

为了探讨抑制增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响,将前期筛选出的最佳siRNA序列转化为能表达其小发夹结构RNA(smallhairpinRNAs,shRNA)的DNA序列,并与pSilencer2.0-U6质粒定向连接,构建靶向PCNA基因的siRN... 详细信息

为了探讨抑制增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响,将前期筛选出的最佳siRNA序列转化为能表达其小发夹结构RNA(smallhairpinRNAs,shRNA)的DNA序列,并与pSilencer2.0-U6质粒定向连接,构建靶向PCNA基因的siRNA真核表达载体pShPCNA,经DNA测序证实与设计完全一致.随后采用WST法及克隆形成抑制观察细胞增殖抑制情况、划痕实验来观察细胞迁移能力,流式细胞术、Hoechest33258染色、细胞线粒体膜电位改变检测细胞凋亡.在转染HepG2细胞48h后,pShPCNA组细胞PCNAmRNA表达明显下调,并出现明显的增殖抑制作用,明显抑制细胞克隆的形成和细胞的迁移力,且呈剂量-效应关系.流式细胞术检测发现:pShPCNA组细胞明显阻滞于G0/G1期,并出现明显的亚二倍体凋亡峰,出现明显的早期凋亡细胞群.荧光显微镜检测表明,细胞线粒体膜电位降低,并且细胞出现核固缩、凋亡小体等凋亡形态学变化.上述结果表明,成功构建了靶向PCNA基因的siRNA真核表达载体pShPCNA,pShPCNA转染HepG2细胞48h后,能够显著抑制细胞的生长增殖、诱导细胞凋亡、细胞周期阻滞于G0/G1期.

关键词： RNA干扰增殖细胞核抗原真核细胞表达载体 HepG2细胞肝癌

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HBV感染胎盘P-gp的表达与IL-6的相关性

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广东医学 2010年第12期31卷 1567-1569页

作者：梁慧超王自能广东省广州市妇女儿童医疗中心广州市妇婴医院妇产科 510180 暨南大学医学院妇产科教研室广州510632

目的探讨P-糖蛋白(P-gp)在HBV感染胎盘组织中的表达及其与IL-6的相关性。方法选取HBV感染足月胎盘20例为乙肝组;选择无HBV感染足月胎盘20例作为正常对照组。RT-PCR分别检测两组胎盘中P-gp mRNA的表达。蛋白免疫印迹法分别检测两组胎盘中... 详细信息

目的探讨P-糖蛋白(P-gp)在HBV感染胎盘组织中的表达及其与IL-6的相关性。方法选取HBV感染足月胎盘20例为乙肝组;选择无HBV感染足月胎盘20例作为正常对照组。RT-PCR分别检测两组胎盘中P-gp mRNA的表达。蛋白免疫印迹法分别检测两组胎盘中P-gp的表达。ELISA分别检测两组胎盘中IL-6的表达。结果 P-gp mRNA的相对表达量为:乙肝组0.454±0.398,正常组0.086±0.099,两组相比,差异有统计学意义(P<0.001)。P-gp表达量为:乙肝组0.406±0.303,正常组0.167±0.136,两组相比,差异有统计学意义(P<0.005)。胎盘中IL-6的表达为:乙肝组(221.117±188.870)pg/mL,正常组(115.975±83.127)pg/mL,两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关分析,IL-6与P-gp mRNA和P-gp表达呈正相关(r=0.870,0.861,P=0.000)。结论 P-gp在HBV感染胎盘组织中表达的升高,可能与乙型肝炎病毒感染胎盘组织中IL-6表达的升高有关。

关键词：乙型肝炎胎盘 P-糖蛋白白细胞介素-6 荧光定量PCR 蛋白免疫印迹酶联免疫吸附试验

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