检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖学研究 2009年第2期31卷 103-106,118页

作者：江振友李春艳叶嗣颖顾文珍施珊珊胡萍暨南大学医学院微生物与免疫学教研室广东广州510632 华中科技大学同济医学院基础医学院病原生物系微生物教研室湖北武汉430030 宁波市疾病预防控制中心浙江宁波315010

目的观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)对人食管癌Eca-109细胞增殖的影响。方法以食管癌Eca-109细胞作为***感染的体外细胞模型,将不同浓度的幽门螺杆菌菌体提取物与Eca-109细胞共培养,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖... 详细信息

目的观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)对人食管癌Eca-109细胞增殖的影响。方法以食管癌Eca-109细胞作为***感染的体外细胞模型,将不同浓度的幽门螺杆菌菌体提取物与Eca-109细胞共培养,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性,半定量RT-PCR方法分析共培养不同时间点后Eca-109细胞增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA的表达水平。结果幽门螺杆菌菌体提取物与Eca-109细胞共同孵育后对细胞增殖有促进作用;在与Eca-109细胞共培养1h后即可见PCNAmRNA表达升高,3h达高峰,约为对照组的3.0倍。结论Hpylori能诱导食管癌Eca-109细胞增殖,提示其与食管癌的发生可能存在关联。

关键词：幽门螺杆菌食管癌细胞细胞增殖增殖细胞核抗原

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CDA-2对人子宫内膜癌细胞增殖及分化的影响

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中国肿瘤临床 2008年第5期35卷 290-292页

作者：贾晋萍钟雪云林琛莅暨南大学医学院病理学教研室广州市510632

目的:研究尿多酸肽(CDA-2)对EAC人子宫内膜癌细胞增殖、分化及细胞自分泌的影响。方法:应用MTT法、集落形成实验检测CDA-2对EAC细胞增殖的影响;通过光镜观察和免疫组化鉴定细胞分化;放射免疫法检测细胞自分泌雌二醇(E2)、孕酮(P)。结果:... 详细信息

目的:研究尿多酸肽(CDA-2)对EAC人子宫内膜癌细胞增殖、分化及细胞自分泌的影响。方法:应用MTT法、集落形成实验检测CDA-2对EAC细胞增殖的影响;通过光镜观察和免疫组化鉴定细胞分化;放射免疫法检测细胞自分泌雌二醇(E2)、孕酮(P)。结果:CDA-2使EAC细胞增殖与集落形成均明显受到抑制,并呈剂量依赖性。CDA-2处理72h后:EAC出现细胞分化的形态学改变,免疫组化显示ER、PR表达阴性。EAC细胞无自分泌E2、P。结论:CDA-2不仅能抑制子宫内膜癌EAC细胞增殖,而且能诱导EAC细胞分化。

关键词：尿多酸肽子宫内膜癌增殖分化

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STAT3基因RNAi诱导肝癌细胞凋亡及对STAT3信号转导相关基因表达的影响

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癌变．畸变．突变 2009年第5期21卷 339-343页

作者：徐佳张引娟鹿刚单保恩暨南大学医学院生物化学与分子生物学教研室广州510632 山西省临汾市人民医院检验科临汾041000 河北医科大学第四医院科研中心石家庄050011

背景与目的:探讨STAT3基因RNAi对人肝癌细胞SMMC7721凋亡的影响,及对STAT3信号转导相关基因表达的影响,为STAT3信号通路的肿瘤靶向治疗提供理论依据。材料与方法:采用RNAi技术特异性沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达,通过Western blot技... 详细信息

背景与目的:探讨STAT3基因RNAi对人肝癌细胞SMMC7721凋亡的影响,及对STAT3信号转导相关基因表达的影响,为STAT3信号通路的肿瘤靶向治疗提供理论依据。材料与方法:采用RNAi技术特异性沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达,通过Western blot技术检测经RNAi作用后SMMC7721细胞STAT3蛋白表达水平的变化。采用透射电镜和流式细胞术检测经RNAi沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达后,对细胞凋亡的影响。通过半定量RT-PCR法检测细胞凋亡相关因子bcl-2和survivin基因表达的变化。结果:STAT3基因RNAi可有效沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达(P<0.05)。STAT3的表达被RNAi沉默后,SMMC7721细胞凋亡率较对照组明显增加(P<0.01),且SMMC7721细胞bcl-2和survivin mRNA的表达水平均受到明显抑制,与对照组间的差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:STAT3基因RNAi可有效沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达,诱导SMMC7721细胞凋亡,下调SMMC7721细胞bcl-2、survivin mRNA的表达。

关键词： RNA干扰 STAT3 肝癌信号转导细胞凋亡

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辛伐他汀联合5-FU对K562细胞增殖及凋亡的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2008年第6期29卷 578-582页

作者：何金花吴风云刘冠杰张小鹰廖晓丽蒋建伟暨南大学医学院生化教研室广东广州510632

目的:探讨辛伐他汀(Sim)联合5-FU对白血病K562细胞增殖及凋亡的影响,探讨其作用机制。方法:体外培养人白血病K562细胞,用MTT法观察Sim联合5-FU对细胞的增殖抑制作用,实时荧光定量RT-PCR观察对bcr/abl融合基因mRNA表达水平的影响。流式... 详细信息

目的:探讨辛伐他汀(Sim)联合5-FU对白血病K562细胞增殖及凋亡的影响,探讨其作用机制。方法:体外培养人白血病K562细胞,用MTT法观察Sim联合5-FU对细胞的增殖抑制作用,实时荧光定量RT-PCR观察对bcr/abl融合基因mRNA表达水平的影响。流式细胞术、Hoechst33258染色观察Sim与5-FU联合应用诱导细胞凋亡的作用。结果:低浓度的Sim与5-FU联合应用在抑制细胞的增殖,诱导细胞凋亡,均较各单一高浓度用药组的作用明显增强,并且下调bcr/abl融合基因mRNA表达。结论:Sim与5-FU联用具有明显的协同抑制细胞增殖的作用,其作用机制可能与诱导细胞凋亡,下调bcr/abl融合基因的表达有关。

关键词：辛伐他汀 5-氟尿嘧啶 K562细胞凋亡

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增殖细胞核抗原反义核酸联合5-FU抑制肝癌细胞生长

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2008年第6期29卷 557-561页

作者：吴志慧蒋建伟陈涛陈超丁文婷陈妙巧暨南大学医学院生化教研室广东广州510630

目的:探讨增殖细胞核抗原(PCNA)基因反义寡核苷酸(ASODN)联合5-FU对离体肝癌细胞及小鼠肝癌生长的抑制作用。方法:用5-FU、5-FU联合PCNA ASODN、5-FU联合聚乙烯亚胺(PEI)介导的PCNA ASODN(PEI-ASODN)分别转染人肝癌SMMC-7721细胞,改良MT... 详细信息

目的:探讨增殖细胞核抗原(PCNA)基因反义寡核苷酸(ASODN)联合5-FU对离体肝癌细胞及小鼠肝癌生长的抑制作用。方法:用5-FU、5-FU联合PCNA ASODN、5-FU联合聚乙烯亚胺(PEI)介导的PCNA ASODN(PEI-ASODN)分别转染人肝癌SMMC-7721细胞,改良MTT法(WST法)分析细胞生长增殖抑制效果;建立小鼠肝癌腋下移植瘤和腹水瘤模型,腋下移植瘤模型小鼠,隔日给药共5次,第13天杀小鼠,观察小鼠瘤重、瘤体积改变;腹水瘤模型小鼠,连续腹腔注射给药7次,记录小鼠平均存活天数,绘制小鼠存活曲线。结果:5-FU联合PEI-ASODN时,5-FU对肝癌细胞的IC50降低为0.165μg/mL,肝癌细胞对5-FU敏感性提高了49.7倍;肝癌腋下移植瘤小鼠各治疗组的瘤重、瘤体积均得到不同程度的抑制,其中以5-FU联合PCNA反义核酸组最高;对于腹水瘤小鼠,以5-FU和PCNA反义核酸联合治疗组平均生存时间最长。结论:5-FU联合PEI-ASODN能有效抑制肝癌细胞增殖,抑制小鼠肝癌的生长,延长小鼠存活时间。

关键词：肝癌反义核酸增殖细胞核抗原 5-氟尿嘧啶

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增殖细胞核抗原siRNA序列的设计、合成与筛选

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中国病理生理杂志 2008年第3期24卷 484-489页

作者：蒋建伟史金桃吴智慧曾慧兰严玉霞陈涛丁文婷暨南大学医学院生化教研室广东广州510632 暨南大学附属第一医院血液科广东广州510632

目的:设计并筛选能有效抑制人肝癌SMMC-7721细胞、人结肠癌Caco2细胞、人胃癌SCG-7901细胞增殖的增殖细胞核抗原(PCNA)siRNA。方法:总结以往提出的siRNA设计原则的基础上,设计4条PCNAsiRNA,体外转录合成PCNAsiRNA;并作用于3种肿瘤细胞,W... 详细信息

目的:设计并筛选能有效抑制人肝癌SMMC-7721细胞、人结肠癌Caco2细胞、人胃癌SCG-7901细胞增殖的增殖细胞核抗原(PCNA)siRNA。方法:总结以往提出的siRNA设计原则的基础上,设计4条PCNAsiRNA,体外转录合成PCNAsiRNA;并作用于3种肿瘤细胞,WST-8法检测细胞增殖活性,筛选能有效抑制肿瘤细胞增殖的siRNA序列;RT-PCR检测细胞PCNA mRNA水平;免疫细胞化学方法检测PCNA蛋白表达水平。结果:4条PCNA siRNA中,有3条序列(No.2、No.4、No.3)的siRNA能有效抑制3种肿瘤细胞的增殖;其中No.2、No.4作用效果最优,以50 nmol/L浓度作用48 h,对3种肿瘤细胞的增殖抑制率均可达到62%以上,No.2、No.4 PCNAsiRNA均能在mRNA和蛋白水平显著下调PCNA的表达。结论:PCNA siRNA能在体外有效抑制SMMC-7721细胞、Caco2细胞、SCG-7901细胞的增殖,其适宜作用浓度为50 nmol/L,适宜作用时间为48 h。

关键词：增殖细胞核抗原 siRNA 结直肠肿瘤肝肿瘤胃肿瘤

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原发性高胆固醇血症家系成员载脂蛋白B-100基因突变的检测

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中国实用内科杂志 2008年第10期28卷 853-854,857页

作者：俞锐敏周羽并冯建生蔡启陆林春兰暨南大学附属第一医院急诊科广州510632 暨南大学医学院生化教研室广州510632

目的检测原发性高胆固醇血症患者载脂蛋白B-100（apoB-100）可能存在的突变体，探讨原发性高胆固醇血症遗传背景。方法收集1996-2008年暨南大学附属第一医院住院或定期检查患者，诊断为家族性高胆固醇血症先证者及家族成员共41例，应用... 详细信息

目的检测原发性高胆固醇血症患者载脂蛋白B-100（apoB-100）可能存在的突变体，探讨原发性高胆固醇血症遗传背景。方法收集1996-2008年暨南大学附属第一医院住院或定期检查患者，诊断为家族性高胆固醇血症先证者及家族成员共41例，应用聚合酶链反应（PCR）技术扩增apoB-100基因第26外显子编码10549～10895号核苷酸DNA片段，地高辛配基标记的等位基因特异性寡核苷酸探针进行斑点杂交，单链构像多态性分析（SSCP）筛查受检者apoB-100基因是否存在3531碱基CGC—CGT突变或其他可能的突变。结果11个原发性高胆固醇血症家族的41例成员中未检出上述基因突变。结论上述基因突变在中国人群中不存在或发生率很低，可能不是引起此11个家族成员原发性高胆固醇血症的原因。

关键词：高胆固醇血症载脂蛋白B

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人NOD2基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体的构建

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现代免疫学 2008年第3期28卷 219-223页

作者：孙丽萍胡巢凤周羽竝暨南大学医学院病理生理学教研室发热研究室广州510632 暨南大学医学院生化教研室广州510632

人NOD2基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体的构建。以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD2基因启动子不同长度的4段序列,利用特定的限制性内切酶位点,以切除启动子的pEGFP-N3作为框架结构,将这4个序列片段进行酶切并插入表达载体pEGFP-N... 详细信息

人NOD2基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体的构建。以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD2基因启动子不同长度的4段序列,利用特定的限制性内切酶位点,以切除启动子的pEGFP-N3作为框架结构,将这4个序列片段进行酶切并插入表达载体pEGFP-N3中,用Vsp I和Pst I双酶切和PCR鉴定重组质粒,再将重组质粒进行DNA序列分析。构建的重组质粒经脂质体LipofectamineTM2000介导转染HTK293T细胞,转染24 h后加入TNF-α持续刺激细胞24 h或不加TNF-α刺激,在倒置荧光显微镜下观察其能否在NOD2基因启动子的调控下表达报告基因绿色荧光蛋白(green fluores-cent proteins,GFP)。结果:pEGFP-N3-NOD2(617 bp)、pEGFP-N3-NOD2(747 bp)、pEGFP-N3-NOD2(1 136 bp)、pEG-FP-N3-NOD2(1 387 bp)分别经酶切鉴定和序列测定证实目的基因已插入重组质粒;细胞转染结果表明,构建的4段重组质粒pEGFP-N3-NOD2(617 bp)、pEGFP-N3-NOD2(747 bp)、pEGFP-N3-NOD2(1 136 bp)、pEGFP-N3-NOD2(1 387 bp)转染的HTK293T均能表达绿色荧光,其中构建pEGFP-N3-NOD2(1 387 bp)重组质粒经TNF-α持续刺后激绿色荧光表达最强。4段不同长度的人NOD2基因启动子绿色荧光蛋白表达载体成功构建,这为进一步研究NOD2基因表达及调控机制奠定了良好的基础。

关键词： NOD2启动区载体基因表达

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改进酶消化法培养SD大鼠成骨细胞及其鉴定

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实用医学杂志 2008年第6期24卷 915-918页

作者：王双利查振刚刘宁杨淑野吴昊姚平张嘉晴暨南大学附属第一医院骨科广州市510632 暨南大学医学院生理教研室广州市510632 暨南大学医学院生化教研室广州市510632

目的:改进SD大鼠成骨细胞的体外分离、培养方法并进行功能鉴定。方法:将新生SD大鼠处死,无菌条件下取出颅骨,剔净骨膜后剪成1mm×1mm×1mm大小组织块。组织块经0.25%胰蛋白酶消化20min,继以0.1%Ⅱ型胶原酶消化60min,收集上清离... 详细信息

目的:改进SD大鼠成骨细胞的体外分离、培养方法并进行功能鉴定。方法:将新生SD大鼠处死,无菌条件下取出颅骨,剔净骨膜后剪成1mm×1mm×1mm大小组织块。组织块经0.25%胰蛋白酶消化20min,继以0.1%Ⅱ型胶原酶消化60min,收集上清离心,所得成骨细胞接种于培养瓶中并行"多次贴壁法"纯化。观察细胞形态学,选用碱性磷酸酶Gomori钙钴法染色,钙结节茜素红法染色及Ⅰ型胶原免疫组化染色等方法进行鉴定。结果:培养的细胞具有典型的成骨细胞形态特征,在体外培养时可维持其在体内的功能,即合成碱性磷酸酶、形成矿化结节,Ⅰ型胶原染色阳性。结论:用改进后的酶消化法分离、培养SD大鼠成骨细胞,更能减少胰蛋白酶在消化过程中对细胞造成的损伤,所获成骨细胞量多、纯度高,操作简易可行,可作为骨组织工程种子细胞常规的培养方法。

关键词：成骨细胞大鼠改进酶消化法

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不同救治模式对急性心肌梗死治疗成本和效益的影响

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中华医学杂志 2008年第20期88卷 1398-1401页

作者：曾红科方明叶珩赖欣陈纯波何楷然詹伟峰黄国华林晓军陆大祥暨南大学医学院病理生理教研室广州510632 广东省人民医院急危重症医学部广州市急救医疗指挥中心

目的探讨120-三甲医院CCU和120-二甲医院两种分流救治模式对急性心肌梗死（AMI）患者治疗成本和效益的影响。方法由广州市120急救指挥中心提供资料，纳入2003年10月至2005年12月期间分流广州市三甲医院进入CCU和分流到广州市二甲医院的... 详细信息

目的探讨120-三甲医院CCU和120-二甲医院两种分流救治模式对急性心肌梗死（AMI）患者治疗成本和效益的影响。方法由广州市120急救指挥中心提供资料，纳入2003年10月至2005年12月期间分流广州市三甲医院进入CCU和分流到广州市二甲医院的急性心肌梗死患者，并在出院后半年内进行随访，记录其住院总费用、住院期间主要干预手段、死亡、再梗死、卒中等预后情况和冠心病二级预防情况，用SF-36量表量化其健康状况。以单因素方差分析及χ^2检验比较两组间住院费用、生活质量、短期预后和冠心病二级预防的差别。结果相对120-二甲医院模式组（成功随访101例，住院费用为18943元±893元，病死率18／101，卒中率12／101），120．三甲医院CCU模式组（成功随访137例）的住院费用（33965元±963元）较高（P=0．012），出院后病死率（11／137）、卒中发生率（5／137）均较低（P=0．022，0．015），再次心肌梗死发生率两组差异无统计学意义。120-三甲医院CCU模式组的躯体功能、一般健康状况、生命力、社会功能、情感角色、心理健康、总体健康状况得分方面较高（P〈0．05）。躯体角色、肌体疼痛得分两组差异无统计学意义。120-三甲医院CCU模式组的出院后的专科门诊随访次数、戒烟率、他汀类药物使用率较高，P值分别为0．017，0．016，0．038。血管紧张素转化酶抑制剂及β受体阻滞剂使用率两组差异无统计学意义。结论120-三甲医院CCU模式能为AMI患者提供更好的治疗效率，值得120急救指挥中心借鉴。

关键词：医师医疗模式心肌梗死急性成本-效益

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