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眼科新进展 2008年第9期28卷 674-675页

作者：李晓娟朱晓谦吴静李东亮新乡医学院生理学与神经生物学教研室河南省新乡市453003 新乡医学院第三附属医院眼科河南省新乡市453003 暨南大学医学院眼科广东省广州市510632

目的通过检测血清孕酮含量,了解孕酮与前部缺血性视神经病变发病的相关性。方法收集前部缺血性视神经病变患者32例32眼为病变组,选取同期非缺血性视神经病变患者30例30眼为对照组。ELISA方法检测2组患者血清孕酮的含量,并进行统计学分... 详细信息

目的通过检测血清孕酮含量,了解孕酮与前部缺血性视神经病变发病的相关性。方法收集前部缺血性视神经病变患者32例32眼为病变组,选取同期非缺血性视神经病变患者30例30眼为对照组。ELISA方法检测2组患者血清孕酮的含量,并进行统计学分析。结果病变组血清孕酮的含量为(0.41±0.15)μg.L-1,明显低于正常对照组(1.13±0.12)μg.L-1,差异有统计学意义(P<0.05)。病变组血清孕酮含量与视力的相关分析示,2者正相关(r=0.808,P<0.05),表明血清孕酮含量越低,视力损害越重。结论前部缺血性视神经病变患者血清中孕酮含量减少,对视神经的保护作用减弱,可能是缺血性视神经病变的主要发病机制之一。

关键词：孕酮前部缺血性视神经病变 ELISA法

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广东省首例W135群流脑的病原学分析

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华南预防医学 2008年第3期24卷 26-28页

作者：刘美真管大伟邓小玲梁剑梁宏周海广东省疾病预防控制中心广东广州510300 暨南大学医学院流行病与卫生统计学教研室中山市疾病预防控制中心

目的对2007年5月广东中山发现的1例W135流脑病例进行病原学分析。方法标本进行常规鉴定、乳胶凝集、PCR鉴定、测序等,同时对菌株进行药敏试验。结果该病例证实为W135群脑膜炎奈瑟菌引起的脑膜炎病例,采用多位点测序分型(MLST)对该株菌... 详细信息

目的对2007年5月广东中山发现的1例W135流脑病例进行病原学分析。方法标本进行常规鉴定、乳胶凝集、PCR鉴定、测序等,同时对菌株进行药敏试验。结果该病例证实为W135群脑膜炎奈瑟菌引起的脑膜炎病例,采用多位点测序分型(MLST)对该株菌的基因组7个管家基因进行DNA测序,其序列型为ST-2960,属于ST-11/ET-37complex序列群。该菌株对头孢噻肟、氨苄青霉素、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑等药物均敏感。结论该病例为广东省自20世纪70年代以来首次从脑脊液分离到病原菌的W135群流脑病例,提示我们要加强流脑病原学监测。

关键词：流行性脑脊髓膜炎奈瑟球菌,脑膜炎 W135群病原学

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SR-AⅡ和CD36的表达水平与AGEs及糖尿病并发症的相关性研究

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中国病理生理杂志 2007年第1期23卷 168-172页

作者：陈万群骆婕彭锐锐吴颜晖莫宏波冯烈李菊香刘誉暨南大学医学院生化教研室暨南大学医学院临床医学系暨南大学医学院附属华侨医院广东广州510632

目的:分析糖尿病患者白细胞中清道夫受体SR-AⅡ和CD36的表达水平与血浆晚期糖基化终产物(AGEs)浓度以及糖尿病并发症之间的相关性。方法:收集具有合并症的糖尿病患者抗凝血78例,用荧光分光光度法测定血浆AGEs浓度。用Trizol法提取白细胞... 详细信息

目的:分析糖尿病患者白细胞中清道夫受体SR-AⅡ和CD36的表达水平与血浆晚期糖基化终产物(AGEs)浓度以及糖尿病并发症之间的相关性。方法:收集具有合并症的糖尿病患者抗凝血78例,用荧光分光光度法测定血浆AGEs浓度。用Trizol法提取白细胞RNA,再以RT-PCR法测定SR-AⅡ和CD36的相对表达水平。结果:在测定的糖尿病各合并症中,SR-AⅡ在糖尿病性肾病中表达水平最高,在脂肪肝患者中最低;CD36在脂肪肝患者中最高,在冠心病患者中最低。在高血压患者中这2种受体的表达水平均比较高,但在白内障患者中2种受体的表达相对较低。血浆AGEs浓度与白细胞中CD36表达水平呈负相关(r=-0.89,P<0.01),但与SR-AⅡ的表达为正相关(r=0.82,P<0.05)。结论:血浆高浓度AGEs刺激白细胞中SR-AⅡ表达增加,糖尿病性肾病和脂肪肝分别与SR-AⅡ、CD36的表达增加有密切关系,部分糖尿病患者CD36的表达较低可能是导致他们血浆AGEs水平过高的原因之一。

关键词： CD36 糖尿病糖基化终产物高级受体清道夫

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人骨髓间质干细胞体外培养及诱导成骨的鉴定

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广东医学 2007年第2期28卷 199-201页

作者：张利查振刚姚平吴昊张嘉晴刘宁黄春华林宏生王国普暨南大学附属第一医院骨科广州510630 暨南大学医学院生理教研室广州510630 暨南大学医学院生化教研室广州510630

目的优化人骨髓间质干细胞(human bone marrow mesenchym alstem cells,hBMSCs)体外分离培养方法,对hBMSCs体外培养及诱导成骨能力进行鉴定。方法密度梯度离心法分离hBMSCs,流式细胞分析法(FACS)对细胞表面抗原、细胞活力、细胞周期进... 详细信息

目的优化人骨髓间质干细胞(human bone marrow mesenchym alstem cells,hBMSCs)体外分离培养方法,对hBMSCs体外培养及诱导成骨能力进行鉴定。方法密度梯度离心法分离hBMSCs,流式细胞分析法(FACS)对细胞表面抗原、细胞活力、细胞周期进行检测。以含地塞米松(1×10-7mmol/L)、β-甘油磷酸钠(10 mmol/L)、抗坏血酸(35.22 mg/L)的DMEM培养液对hBMSCs进行诱导分化,相差显微镜和透视电镜观察细胞形态,Gomori钙钴法进行碱性磷酸酶染色(ALP),免疫组化检测Ι型胶原,茜素红法进行钙结节染色。结果hBMSCs可在体外分离扩增,表达CD44、CD105和CD106,不表达CD34和CD45,细胞活力为92.3%,G0-G1细胞占94.2%。经成骨培养液诱导后细胞形态由长梭形向多边形转变,ALP染色、Ι型胶原染色及钙结节染色均为强阳性。结论hBMSCs可在体外长期、稳定培养,具有向成骨细胞分化的潜能。

关键词：骨髓间质干细胞细胞培养诱导成骨

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PTEN基因对人脑胶质瘤细胞生长的影响

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中华肿瘤杂志 2007年第4期29卷 245-248页

作者：李平钟雪云何丽珍林琛莅暨南大学医学院病理教研室广州510632 广州市肿瘤医院

目的通过增强型绿色荧光蛋白（EGFP）与PTEN融合蛋白真核表达载体的构建和表达，观察PTEN基因对人脑胶质瘤细胞生长的影响。方法（1）以RT—PCR方法扩增人的PTEN基因，经T—A亚克隆筛选后连入真核表达载体pEGFP—N1，构建融合蛋白表... 详细信息

目的通过增强型绿色荧光蛋白（EGFP）与PTEN融合蛋白真核表达载体的构建和表达，观察PTEN基因对人脑胶质瘤细胞生长的影响。方法（1）以RT—PCR方法扩增人的PTEN基因，经T—A亚克隆筛选后连入真核表达载体pEGFP—N1，构建融合蛋白表达载体。采用阳离子聚合物转染试剂，将重组质粒DNA瞬时转染至SHG-44细胞，检测融合蛋白的表达。（2）G418筛选出稳定转染的细胞（SHG-44-Z），并扩增培养，通过细胞形态学、生长曲线观察PTEN基因对细胞形态和增殖的影响，免疫组织化学法检测对胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的影响。结果（1）重组质粒阳性克隆的测序结果与GenBank报告序列一致。瞬时转染的SHG-44细胞于荧光显微镜下可见绿色荧光，流式细胞仪可检测到荧光表达量为17．8％，免疫细胞化学法检测到外源PTEN蛋白表达。证实pEGFP—PTEN融合蛋白表达载体构建成功，并在胶质瘤细胞得以正确表达。（2）转染组SHG-44-Z细胞株的生长增殖受到明显抑制，第7天细胞计数为未转染组细胞数的27．8％，且GFAP表达上调。结论携带绿色荧光蛋白的PTEN基因真核表达载体的构建，为进一步研究PTEN的作用机理及抑癌效应奠定了基础。

关键词：抑癌基因PTEN 绿色荧光蛋白基因克隆胶质瘤

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广州市医务人员HIV职业暴露防护认知现状及影响因素的研究

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中华流行病学杂志 2007年第11期28卷 1148-1149页

作者：董晓梅陈雄飞王声湧彭云姚海燕黄建宇何思扬肖昕王自能暨南大学医学院流行病学教研室广州510632 广州市疾病预防控制中心暨南大学医学院艾滋病基因与疫苗研究中心暨南大学医学院妇产科学教研室

目前我国艾滋病的流行已经处于快速增长期。而医务人员在从事艾滋病防治工作甚至普通医疗工作的过程中，经常接触到被病毒污染的血液、体液或被污染的针具刺破皮肤，具有被艾滋病病毒（HIV）感染的可能性。作为艾滋病高发的广州市医务人... 详细信息

目前我国艾滋病的流行已经处于快速增长期。而医务人员在从事艾滋病防治工作甚至普通医疗工作的过程中，经常接触到被病毒污染的血液、体液或被污染的针具刺破皮肤，具有被艾滋病病毒（HIV）感染的可能性。作为艾滋病高发的广州市医务人员HIV职业暴露防护知识水平如何，存在哪些影响因素，哪些是今后培训的重点人群，都是值得关注与探讨的问题。

关键词： HIV+/AIDS 职业暴露自我防护

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登革病毒感染对血管内皮细胞ICAM-1表达的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第12期27卷 1112-1116页

作者：江振友柏志全肖瑞卢业成暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 暨南大学医学院生理学教研室广州510632 广州医学院临床技能中心广州市第八人民医院

目的探讨登革病毒2型(DV2)体外感染对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule,ICAM-1)的影响。方法原代分离培养HUVEC,用生长良好的2、3代细胞进行实验。用CCK-8法测定DV2感染前后的细胞活性。流... 详细信息

目的探讨登革病毒2型(DV2)体外感染对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule,ICAM-1)的影响。方法原代分离培养HUVEC,用生长良好的2、3代细胞进行实验。用CCK-8法测定DV2感染前后的细胞活性。流式细胞仪测定DV2感染组和对照组细胞在不同实验时间点细胞表面ICAM-1蛋白表达的情况。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和图像定量分析技术分析DV2感染组和对照组在不同实验时间点HUVEC内ICAM-1 mRNA水平。结果病毒感染HUVEC对细胞活力的影响与对照组相比差异无统计学意义。DV2感染HUVEC促进ICAM-1 mRNA转录,DV2组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。其中,正常状态下HUVEC有一定水平ICAM-1 mRNA转录,但感染后显著增加(P<0.05),24～72 h维持于高水平,与其他时间表达差异有统计学意义(P<0.05)。DV2感染HUVEC,细胞表达ICAM-1蛋白在12～72 h显著升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论DV2感染上调HUVEC的ICAM-1 mRNA水平和蛋白表达,从而诱发并加重血管内皮局部的损伤,破坏血管的屏障功能,促进血管渗漏的形成与发展。这可能是DV2感染诱发患者血管通透性升高和血浆渗漏的重要分子机制之一。

关键词：登革病毒人脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子

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重组人酸性成纤维细胞生长因子关节腔注射预防骨关节炎软骨退行性变

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第32期11卷 6394-6396页

作者：吴昊姚平刘宁林宏生张利侯辉歌查振刚暨南大学附属第一医院骨科广东省广州市510630 暨南大学医学院生理教研室广东省广州市510630

目的:验证重组人酸性成纤维细胞生长因子关节腔内注射对兔实验性早中期骨关节炎软骨退行性变的防治作用。方法:实验于2005-10/2006-04在暨南大学附属第一医院中心实验室完成。选用健康新西兰大白兔30只,切断膝关节前、后交叉韧带建立兔... 详细信息

目的:验证重组人酸性成纤维细胞生长因子关节腔内注射对兔实验性早中期骨关节炎软骨退行性变的防治作用。方法:实验于2005-10/2006-04在暨南大学附属第一医院中心实验室完成。选用健康新西兰大白兔30只,切断膝关节前、后交叉韧带建立兔骨关节炎模型后,按随机数字表法分为3组,空白组、透明质酸钠组和重组人酸性成纤维细胞生长因子组。重组人酸性成纤维细胞生长因子组术后第8周起于手术侧膝关节腔内注射人酸性成纤维细胞生长因子8000IU/(只·周),透明质酸钠组关节腔内注射透明质酸钠1mL/(只·周)。空白组不进行干预。术后第16周空气栓塞法处死动物,大体观察及手术显微镜下观察软骨表面分级;取股骨髁负重面软骨标本进行苏木精-伊红、沙黄染色及骨关节炎组织病理学评分(正常为0～1,重度为10分以上)、分级。结果:30只动物全部进入结果分析。①重组人酸性成纤维细胞生长因子组和透明质酸钠组标本股骨髁负重软骨有轻度粗糙,关节软骨可见浅表溃疡形成。空白组标本股骨髁负重面软骨有轻～中度溃疡形成。②3组动物关节软骨表面分级差异有显著性意义(χ2=22.97,P=0.000)。③3组动物骨关节炎软骨的组织病理学分级差异有显著性意义(χ2=16.84,P=0.005),透明质酸钠组和重组人酸性成纤维细胞生长因子组的骨关节炎组织病理学评分均显著低于空白组(P<0.05)。结论:关节腔注射重组人酸性成纤维细胞生长因子可以较好的延缓兔膝骨关节炎软骨退行性变和预防骨关节炎的发展。

关键词：骨关节炎成纤维细胞生长因子,酸性软骨,关节

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结核分枝杆菌融合基因Hsp65-Esat6荧光表达载体的构建及表达(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第29期11卷 5836-5839页

作者：李君武黄泽棋姚翠婵周曙光李晓栋宋东黄清华暨南大学医学院微生物免疫学教研室广东省广州市510632

背景:Hsp65和Esat6之间的Linker编码一段疏水性多肽,其具有良好的柔顺性和折叠性,有利于翻译成融合蛋白时融合蛋白之间的空间折叠,使融合蛋白保持与两个天然蛋白空间构象的一致性,从而形成正确的构型而提高它们的免疫原性。目的:从结核... 详细信息

背景:Hsp65和Esat6之间的Linker编码一段疏水性多肽,其具有良好的柔顺性和折叠性,有利于翻译成融合蛋白时融合蛋白之间的空间折叠,使融合蛋白保持与两个天然蛋白空间构象的一致性,从而形成正确的构型而提高它们的免疫原性。目的:从结核分枝杆菌(MTB)H37Rv株中克隆目的融合基因Hsp65-Esat6,与报告基因EGFP一起构建真核表达载体pEGHsp65-Esat6,通过免疫组织化学法分别检测细胞中Hsp65蛋白和ESAT-6蛋白的表达。设计:单一样本实验。单位:暨南大学医学院微生物免疫学教研室。材料:质粒pVAE由华南理工大学曹以诚教授惠赠,MTBH37Rv株、大肠杆菌DH5α、表达质粒pEGFP-C1为本实验室保存,Hela细胞由本教研室胡萍博士惠赠。方法:实验于2005-09/2006-06在暨南大学医学院微生物与免疫教研室和中心实验室完成。以MTB全基因组为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65基因(不含终止子),与pEGFP-C1载体进行重组,构建pEGHsp65(不含终止子)重组质粒。再以pVAE质粒为模板,经PCR扩增出Linker-Esat6基因,与pEGHsp65质粒(不含终止子)进行重组,构建真核表达载体pEGHsp65-Esat6。通过限制性内切酶图谱测定pEGHsp65-Esat6融合质粒大小;对质粒pEGFP-C1的多克隆位点内的DNA序列进行序列分析鉴定;将质粒转染Hela细胞,观察荧光的表达情况及转染效率,通过免疫组织化学法分别检测细胞中Hsp65蛋白和ESAT-6蛋白的表达。主要观察指标:①pEGHsp65-Esat6融合质粒大小。②pEGFP-C1DNA序列分析。③转染后Hela细胞的荧光表达情况。④细胞中Hsp65蛋白和ESAT-6蛋白的免疫组织化学结果。结果:①质粒pEGFP-C1的大小约为4.7kb,而pEGHsp65为6.4kb,融合质粒pEGHsp65-Esat6约为6.7kb,在琼脂糖凝胶电泳图上可以分辨出泳动速度的差异。②结果与结核分支杆菌H37Rv株的Hsp65和Esat6的基因序列完全相同。③转染融合质粒24h后,使用共聚焦显微镜可观察到有部分细胞表达荧光蛋白,说明融合质粒转染成功,转染率约为30%。未转染的Hela细胞则无荧光表达。④通过免疫组织化学法证实融合质粒在Hela细胞内能正确表达出具有生物学活性的Hsp65与ESAT-6蛋白。结论:采用Hsp65和Esat6搭配作为免疫原,成功克隆并构建了结核分枝杆菌融合基因Hsp65-Esat6荧光真核表达质粒。

关键词：结核分枝杆菌 Hsp65 Esat6 融合基因 DNA疫苗

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血管内皮细胞骨架及其与心血管疾病的关系

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中国循环杂志 2007年第5期22卷 394-396页

作者：彭红艳常青暨南大学医学院组织学与胚胎学教研室广东省广州市510632

内皮细胞骨架由微丝、微管和中间纤维组成,是细胞形态维持、细胞迁移、物质运输和跨膜信息传递的重要结构基础。已发现内皮细胞骨架重排与心血管疾病的发生、发展过程有密切联系,故阐明内皮细胞骨架与心血管疾病的关系无疑对心血管疾病... 详细信息

内皮细胞骨架由微丝、微管和中间纤维组成,是细胞形态维持、细胞迁移、物质运输和跨膜信息传递的重要结构基础。已发现内皮细胞骨架重排与心血管疾病的发生、发展过程有密切联系,故阐明内皮细胞骨架与心血管疾病的关系无疑对心血管疾病的防治有重要意义。本文拟从内皮细胞骨架的分布、结构特点、信号传导途径及其与心血管疾病的关系等方面,对目前的研究现状进行综述。

关键词：内皮,血管细胞骨架心血管疾病

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