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超抗原SEA联合PML-RARα对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响

免疫学杂志 2008年第5期24卷 530-533页

作者：林晨高珂白雪陈少华杨力建李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广州510632

目的探讨超抗原SEA联合PML-RARα多肽对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响。方法分别将SEA、PML-RARα多肽以及SEA联合PML-RARα多肽与正常人外周血单个核细胞共同培养,20d后收集增殖细胞,利用RT-PCR及基因扫描技术分析诱导后增殖... 详细信息

目的探讨超抗原SEA联合PML-RARα多肽对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响。方法分别将SEA、PML-RARα多肽以及SEA联合PML-RARα多肽与正常人外周血单个核细胞共同培养,20d后收集增殖细胞,利用RT-PCR及基因扫描技术分析诱导后增殖T细胞TCRVβ亚家族的利用和克隆性增殖的特点。结果单纯SEA诱导后,T细胞表达了11个TCR Vβ亚家族,且仍为多克隆增殖。单纯PML-RARα多肽诱导后,T细胞限制性表达8个Vβ亚家族,其中Vβ13、Vβ14表现出寡克隆或寡克隆趋势。PML-RARα多肽联合SEA共同诱导,其T细胞表达TCR Vβ亚家族依然呈明显的限制性,且Vβ13、Vβ14亚家族呈寡克隆、双克隆及寡克隆趋势。结论SEA能协同PML-RARα多肽诱导的T细胞克隆性活化与增殖。

关键词：超抗原SEA PML-RARα 细胞受体克隆性

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NOD/SCID小鼠人源化TCR Vβ亚家族T细胞分布与克隆性分析

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免疫学杂志 2007年第4期23卷 376-378,382页

作者：林晨谭玉波白雪陈少华杨力健江振友李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广州510632

目的应用脐血CD34+细胞移植NOD/SCID鼠所建立的人源化SCID模型,分析人源化TCR Vβ亚家族T淋巴细胞分布与克隆性。方法磁珠分选法分离脐血中CD34+细胞,分别经尾静脉输入亚致死剂量照射的NOD/SCID小鼠。第6周处死小鼠提取外周血、骨髓、... 详细信息

目的应用脐血CD34+细胞移植NOD/SCID鼠所建立的人源化SCID模型,分析人源化TCR Vβ亚家族T淋巴细胞分布与克隆性。方法磁珠分选法分离脐血中CD34+细胞,分别经尾静脉输入亚致死剂量照射的NOD/SCID小鼠。第6周处死小鼠提取外周血、骨髓、胸腺的RNA,RT-PCR扩增人TCR Vβ亚家族基因,并用基因扫描进行T细胞克隆性分析。结果采用RT-PCR技术在模型小鼠骨髓中检测到部分人TCR Vβ亚家族基因Vβ1、2、91、3、19。经进一步基因扫描分析,发现部分TCR Vβ亚家族基因Vβ9、13、19呈寡克隆表达。结论在NOD/SCID模型可重建分化成熟的TCR Vβ亚家族T细胞。未能检测到全部人TCR VβT细胞的原因可能与免疫重建不完全或存在移植物抗宿主的反应有关。人源T淋巴细胞在模型鼠骨髓中分化成熟。

关键词：造血干细胞 NOD/SCID鼠 T细胞受体Vβ基因

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甲氰咪呱对K562细胞诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响

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第三军医大学学报 2009年第17期31卷 1637-1640页

作者：田红霞林晨陈少华杨力建江振友高珂郜世隽李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广州510632

目的研究甲氰咪呱(cimetidine)对K562细胞体外诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响。方法体外分别将甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞与正常人的脐带血单个核细胞(mononuclear cells,MNC)混合培养2周,检测诱导增殖T细胞的特... 详细信息

目的研究甲氰咪呱(cimetidine)对K562细胞体外诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响。方法体外分别将甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞与正常人的脐带血单个核细胞(mononuclear cells,MNC)混合培养2周,检测诱导增殖T细胞的特异杀伤活性,同时利用RT-PCR基因扫描技术分析培养后T细胞的TCR Vβ亚家族谱系的选择性利用和克隆性增殖情况。结果经甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞诱导培养2周后,各组均不同程度诱导细胞增殖,其中甲氰咪呱联合K562细胞诱导组的T细胞对K562细胞的特异性杀伤作用显著增强(P<0.01)。3组均呈现不同程度的T细胞TCR Vβ亚家族选择性利用,均有TCR Vβ21亚家族呈克隆性增殖。结论甲氰咪呱可协助增强bcr-abl抗原刺激的特异性抗CML T细胞作用。

关键词：甲氰咪呱 T细胞受体Vβ基因慢性粒细胞白血病脐血

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rhTGF-β1及转染TGF-β1基因对兔角膜内皮细胞增殖的影响

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中国病理生理杂志 2008年第5期24卷 915-919页

作者：马慧香徐锦堂江振友张穗梅赵松滨陈建苏暨南大学医学院眼科研究室广东广州510632 暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 暨南大学医学院病理生理教研室广东广州510632

目的:探讨不同浓度的重组人转化生长因子-β1(rhTGF-β1)及TGF-β1基因转染对体外培养兔角膜内皮细胞增殖的影响。方法:用MTT法检测不同浓度rhTGF-β1作用下角膜内皮细胞的增殖。用脂质体介导转染方法,将TGF-β1基因转移入培养的兔角膜... 详细信息

目的:探讨不同浓度的重组人转化生长因子-β1(rhTGF-β1)及TGF-β1基因转染对体外培养兔角膜内皮细胞增殖的影响。方法:用MTT法检测不同浓度rhTGF-β1作用下角膜内皮细胞的增殖。用脂质体介导转染方法,将TGF-β1基因转移入培养的兔角膜内皮细胞,HE染色法观察细胞组织形态学变化;ELISA法检测转染细胞培养上清中TGF-β1表达量;流式细胞仪检测细胞生长周期变化;DNA电泳法检测转染细胞凋亡情况。结果:MTT检测示5-20μg/LrhTGF-β1抑制角膜内皮细胞增殖;0.5-1μg/L组对增殖无影响;0.05～0.1μg/L组促进细胞增殖。TGF-β1基因转染细胞形态无明显异常,细胞培养上清中TGF-β1的浓度约为(98±3)ng/L。流式细胞仪检测示,基因转染组S期和G2/M期细胞比例减少、PI值降低,但加入EGF后细胞生长基本正常。DNA电泳检测示基因转染组未见凋亡带。结论:rhTGF-β1对角膜内皮细胞增殖的影响具有剂量依赖性;TGF-β1基因转染影响角膜内皮细胞增殖、但不诱发凋亡,其抑制作用可被外源性EGF拮抗。

关键词：转化生长因子β 基因转染角膜内皮细胞细胞增殖

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登革病毒感染患者血清IFN-γ和TNF-α的检测及意义

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中国人兽共患病杂志 2001年第2期17卷 19-21页

作者：江振友江丽芳方丹云郭辉玉暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 中山医科大学微生物学教研室

目的　探讨登革病毒感染患者血清IFN γ和TNF α在登革病毒感染致病中的作用。方法　应用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定广州地区 30例DV 1感染患者血清IFN γ和TNF α的水平。实验数据采用两样本均数t检验法处理。结果　 30例登革病毒感... 详细信息

目的　探讨登革病毒感染患者血清IFN γ和TNF α在登革病毒感染致病中的作用。方法　应用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定广州地区 30例DV 1感染患者血清IFN γ和TNF α的水平。实验数据采用两样本均数t检验法处理。结果　 30例登革病毒感染者血清IFN γ和TNF α水平比正常健康对照组明显增高 (P <0 .0 5、P <0 .0 1)。感染病程第一天 ,患者血清IFN γ水平开始升高 ,第二天达高峰 ,然后逐渐下降。患者血清TNF -α水平第 2天明显升高 ,第 3天达高峰 ,然后逐渐下降。结论　TNF γ和TNF α在登革病毒的致病与免疫过程中可能起重要作用。

关键词：登革病毒免疫学细胞因子 IFN-γ TNF-α

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登革病毒感染对血管内皮细胞ICAM-1表达的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第12期27卷 1112-1116页

作者：江振友柏志全肖瑞卢业成暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 暨南大学医学院生理学教研室广州510632 广州医学院临床技能中心广州市第八人民医院

目的探讨登革病毒2型(DV2)体外感染对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule,ICAM-1)的影响。方法原代分离培养HUVEC,用生长良好的2、3代细胞进行实验。用CCK-8法测定DV2感染前后的细胞活性。流... 详细信息

目的探讨登革病毒2型(DV2)体外感染对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule,ICAM-1)的影响。方法原代分离培养HUVEC,用生长良好的2、3代细胞进行实验。用CCK-8法测定DV2感染前后的细胞活性。流式细胞仪测定DV2感染组和对照组细胞在不同实验时间点细胞表面ICAM-1蛋白表达的情况。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和图像定量分析技术分析DV2感染组和对照组在不同实验时间点HUVEC内ICAM-1 mRNA水平。结果病毒感染HUVEC对细胞活力的影响与对照组相比差异无统计学意义。DV2感染HUVEC促进ICAM-1 mRNA转录,DV2组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。其中,正常状态下HUVEC有一定水平ICAM-1 mRNA转录,但感染后显著增加(P<0.05),24～72 h维持于高水平,与其他时间表达差异有统计学意义(P<0.05)。DV2感染HUVEC,细胞表达ICAM-1蛋白在12～72 h显著升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论DV2感染上调HUVEC的ICAM-1 mRNA水平和蛋白表达,从而诱发并加重血管内皮局部的损伤,破坏血管的屏障功能,促进血管渗漏的形成与发展。这可能是DV2感染诱发患者血管通透性升高和血浆渗漏的重要分子机制之一。

关键词：登革病毒人脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子

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湖南汉族人群HLA-DR位点等位基因多态性与鼻咽癌的相关性研究

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中国病理生理杂志 2005年第5期21卷 1014-1015,1025页

作者：王志鹏郭实士余平暨南大学医学院微生物免疫学教研室广东广州510632 中南大学湘雅医学院免疫学研究室湖南长沙410078

目的探讨湖南汉族人群HLA-DR位点等位基因多态性与鼻咽癌遗传易感性之间的关系。方法应用PCR/SSO基因分型技术对93例湖南汉族鼻咽癌患者和93例健康对照作HLA-DRB1、-DRB3、-DRB4、-DRB5基因分型,采用χ2检验比较两组各位点等位基因频率... 详细信息

目的探讨湖南汉族人群HLA-DR位点等位基因多态性与鼻咽癌遗传易感性之间的关系。方法应用PCR/SSO基因分型技术对93例湖南汉族鼻咽癌患者和93例健康对照作HLA-DRB1、-DRB3、-DRB4、-DRB5基因分型,采用χ2检验比较两组各位点等位基因频率、单倍型频率分布的差异。结果NPC组DRB11101明显低于对照组,DRB10801明显高于对照组,但P值经Bonferroni校正后,差异均无显著(Pc>0.05)。结论湖南汉族人群HLA-DR位点与鼻咽癌无明显相关。

关键词：鼻咽肿瘤 HLA-DR抗原等位基因

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SARS-CoV感染者血清IFN-γ和TNF-α的动态变化及其意义

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免疫学杂志 2004年第4期20卷 285-287页

作者：江振友周经姣方丹云晏辉钧汤云霞江丽芳暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 中山大学中山医学院微生物学教研室广东广州510089

目的　探讨SARS患者血清IFN γ和TNF α在SARS冠状病毒感染免疫中的作用。方法　应用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定广州地区 2 8例SARS冠状病毒感染患者双份血清IFN γ和TNF α的水平。实验数据采用两样本均数t检验法。结果　 2 8例SARS... 详细信息

目的　探讨SARS患者血清IFN γ和TNF α在SARS冠状病毒感染免疫中的作用。方法　应用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定广州地区 2 8例SARS冠状病毒感染患者双份血清IFN γ和TNF α的水平。实验数据采用两样本均数t检验法。结果　 2 8例SARS冠状病毒感染者急性期血清IFN γ和TNF α水平比正常健康对照组明显增高 (P <0 .0 5 ) ;恢复期血清IFN γ水平比正常健康对照组明显增高 (P <0 .0 5 )。感染病程第 1周 ,患者血清IFN γ水平达高峰 ,然后逐渐下降。SARS患者血清TNF α水平在病程第 2周达高峰 ,然后逐渐下降。结论　IFN γ和TNF

关键词：严重急性呼吸综合征 SARS冠状病毒细胞因子

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人源化NOD/SCID小鼠免疫细胞的动态变化与鉴定

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中国病理生理杂志 2007年第5期23卷 986-990页

作者：林晨谭玉波白雪陈少华杨力建江振友李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

目的:比较脐血干细胞与单个核细胞移植NOD/SCID鼠所建立的人源化SCID模型,分析人源化淋巴细胞重建。方法:磁珠分选法分离脐血中CD34+细胞,淋巴细胞分层液分离脐血单个核细胞,分别经尾静脉输入NOD/SCID小鼠。每隔2周采血至10周,流式细胞... 详细信息

目的:比较脐血干细胞与单个核细胞移植NOD/SCID鼠所建立的人源化SCID模型,分析人源化淋巴细胞重建。方法:磁珠分选法分离脐血中CD34+细胞,淋巴细胞分层液分离脐血单个核细胞,分别经尾静脉输入NOD/SCID小鼠。每隔2周采血至10周,流式细胞术动态检测人源淋巴细胞CD45、CD19、CD3抗原。第10周处死小鼠收集外周血、骨髓、胸腺组织,RT-PCR检测模型鼠组织中人β2M基因及RAG2基因。结果:两种类型细胞移植均可重建人源免疫细胞,人源淋巴细胞表达水平均在第8周达高峰。骨髓中人源淋巴细胞表达水平明显高于外周血。RT-PCR在外周血与骨髓检测到人β2M基因及RAG2基因标志。结论:CD34+细胞移植重建人源化NOD/SCID免疫系统模型效果要好于脐血单个核细胞。人源T淋巴细胞在模型鼠骨髓中分化成熟。

关键词：造血干细胞 NOD/SCID鼠 CD34^+细胞 T淋巴细胞

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TNFα和IL-10在巨细胞病毒感染人胚肺成纤维细胞中的作用

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中国病理生理杂志 2002年第3期18卷 265-268页

作者：江振友曹艳英林晨暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632

目的 :研究TNFα和IL - 1 0对人巨细胞病毒 (HCMV)感染人胚肺成纤维细胞 (HEL)的影响 ,以及感染细胞产生TNFα的变化 ,探讨有关细胞因子在HCMV感染免疫中的作用。方法 :用不同浓度的TNFα和IL - 1 0作用于HEL ,2 4h后感染病毒 ,研究TNF... 详细信息

目的 :研究TNFα和IL - 1 0对人巨细胞病毒 (HCMV)感染人胚肺成纤维细胞 (HEL)的影响 ,以及感染细胞产生TNFα的变化 ,探讨有关细胞因子在HCMV感染免疫中的作用。方法 :用不同浓度的TNFα和IL - 1 0作用于HEL ,2 4h后感染病毒 ,研究TNFα和IL - 1 0对HCMV感染HEL的影响。用HCMV感染HEL ,感染后 (4、2 4、48、72、96h)分别收集培养上清液 ,用ELISA法检测TNFα含量。结果 :在病毒感染前 ,中、高浓度TNFα或低、中浓度IL - 1 0可抑制HCMV在HEL内的增殖。HCMV感染HEL后 ,细胞产生TNFα的量无明显改变。结论 :TNFα和IL - 1 0在HCMV感染免疫过程中起作用。

关键词：巨细胞病毒细胞活素类肺成纤维细胞 TNFα IL-10

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