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重组质粒pIRES-EGFP-BCL 11B电转染幼稚T细胞的可视化研究

分析测试学报 2009年第12期28卷 1389-1395页

作者：龚超群郜世隽蔡继业王秋兰暨南大学生命科学技术学院化学系广东广州510632 暨南大学医学院微生物学免疫学教研室广东广州510632

将BCL11B基因插入pIRES-EGFP构建重组质粒真核表达载体pIRES-EGFP-BCL11B,采用电转染法将重组质粒转入人幼稚T细胞,转染24 h后,用原子力显微镜(AFM)观察转染前后细胞的表面形态以及生物物理性质的变化。转染72 h后,用CCK-8试剂检测幼稚... 详细信息

将BCL11B基因插入pIRES-EGFP构建重组质粒真核表达载体pIRES-EGFP-BCL11B,采用电转染法将重组质粒转入人幼稚T细胞,转染24 h后,用原子力显微镜(AFM)观察转染前后细胞的表面形态以及生物物理性质的变化。转染72 h后,用CCK-8试剂检测幼稚T细胞的增殖情况。分别对空转的幼稚T细胞组、空载体转染组(pIRES-EGFP naked plasmid)、重组载体转染组(pIRES-EGFP-BCL 11B recombinant vector)、无电转无质粒的幼稚T细胞组进行实验。结果表明,4组幼稚T细胞的体积、高度、半宽度、粗糙度、表面颗粒大小等参数发生了变化,细胞杨氏模量以及细胞硬度也呈现很大变化,CCK-8结果显示,重组质粒pIRES-EGFP-BCL11B电转染人幼稚T细胞后影响细胞的增殖。

关键词： BCL-11B基因 pIRES—EGFP载体幼稚T细胞转染原子力显微镜

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基于原子力显微镜的人外周血CD8^+T细胞形貌观察与力谱分析

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分析测试学报 2009年第10期28卷 1143-1147页

作者：黄飞程郜世隽邱思远蔡继业暨南大学化学系广东广州510632 暨南大学医学院微生物与免疫研究室广东广州510632 暨南大学第一临床医学院广东广州510632

体外分离人外周血CD8+T细胞,用植物凝结素(PHA)刺激活化,利用原子力显微镜(AFM)观察CD8+T细胞的形貌,并结合针尖修饰技术对力谱进行分析,确定了CD8抗原分子的分布。结果表明,与静息的CD8+T细胞相比,活化后的CD8+T细胞直径和高度增大,细... 详细信息

体外分离人外周血CD8+T细胞,用植物凝结素(PHA)刺激活化,利用原子力显微镜(AFM)观察CD8+T细胞的形貌,并结合针尖修饰技术对力谱进行分析,确定了CD8抗原分子的分布。结果表明,与静息的CD8+T细胞相比,活化后的CD8+T细胞直径和高度增大,细胞表面变得更粗糙;CD8抗原-抗体的相互作用力大约是非特异性黏附力的5倍,活化后的CD8+T细胞上特异性黏附力(即CD8抗原分子位置)分布不均匀,其表面的CD8抗原分子分布以纳米团簇分布为主,CD8分子聚集更为明显,CD8+T细胞上CD8抗原-抗体相互作用力不随着活化而发生明显变化,说明CD8抗原-抗体之间具有高选择性。原子力显微镜为特异性T细胞的抗原识别和活化研究提供了一种新手段,能够使T细胞抗原识别和活化的机制得到更好地阐明。

关键词：原子力显微镜 CD8+T细胞抗原分子黏附力

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姜黄素对SiO_2诱导小鼠矽肺模型TNF-α、TGF-β1表达的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第5期25卷 399-401页

作者：江振友邹林施珊珊卢燕茹董军杨春华卢业成戴国奎暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632 暨南大学医学院附属第一医院校医门诊部广东广州510632 广州市第八人民医院广东广州510060 广州市干部疗养院检验科广东广州510530

目的:研究姜黄素对SiO2所致小鼠矽肺模型血清及肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:将实验小鼠随机分为5组,即假手术组、模型组、姜黄素干预组(高、中、低剂量)。于姜黄素干预第14天、42天后... 详细信息

目的:研究姜黄素对SiO2所致小鼠矽肺模型血清及肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:将实验小鼠随机分为5组,即假手术组、模型组、姜黄素干预组(高、中、低剂量)。于姜黄素干预第14天、42天后分别每组各处死6、9只,采用ELISA法测定肺组织和血清中TNF-α、TGF-β1的含量。结果:模型组的肺组织炎症反应、纤维化程度较明显;与假手术组比较,肺组织匀浆、血清中TGF-β1、TNF-α含量均明显升高(P<0.01)。给予姜黄素干预后,可以不同程度地降低肺组织匀浆及血清中TGF-β1、TNF-α的含量(P<0.05),同时纤维化程度减轻。结论:姜黄素能降低SiO2致小鼠矽肺模型肺组织和血清中TNF-α、TGF-β1水平,可能通过下调上述细胞因子水平而发挥抗肺纤维化作用。

关键词：姜黄素肺纤维化肿瘤坏死因子-α 转化生长因子-β1

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大蒜多糖B对免疫抑制小鼠免疫活性的调节

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2009年第6期30卷 601-605页

作者：岳丽王辉黄雪松沈伟哉暨南大学医学院人体解剖学教研室广东广州510632 暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 暨南大学理工学院食品科学与工程系广东广州510632

目的:研究大蒜多糖B(GP-B)对免疫抑制小鼠体内免疫活性的调节作用。方法:用氢化可的松(HC)皮下注射制造免疫功能抑制的动物模型,以左旋咪唑作为阳性药物对照。给模型小鼠分别灌胃生理盐水、多糖溶液,连续12 d,灌胃多糖溶液质量分数分别... 详细信息

目的:研究大蒜多糖B(GP-B)对免疫抑制小鼠体内免疫活性的调节作用。方法:用氢化可的松(HC)皮下注射制造免疫功能抑制的动物模型,以左旋咪唑作为阳性药物对照。给模型小鼠分别灌胃生理盐水、多糖溶液,连续12 d,灌胃多糖溶液质量分数分别为1600、800和400 mg/kg。通过流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+的百分比,计算胸腺指数和脾脏指数,检测脾细胞增殖情况及腹腔巨噬细胞吞噬功能等实验对大蒜多糖B的免疫学活性进行研究。结果:以大蒜多糖B质量分数为800 mg/kg灌胃的小鼠CD3+CD4+T细胞百分率以及CD4+/CD8+比值明显增高(P<0.05),同时免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性显著增强(P<0.05)。但该浓度的GP-B降低了CD3+CD8+细胞百分比(P<0.05),且对脾T淋巴细胞转化率无促进作用。结论:大蒜多糖B对免疫抑制小鼠的T淋巴细胞亚群及巨噬细胞的吞噬功能具有正向调节作用。

关键词：大蒜多糖B 免疫器官指数 T细胞亚群腹腔巨噬细胞免疫调节

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海洋放线菌发酵物对肝癌细胞株生长和凋亡的影响

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广东医学 2009年第4期30卷 500-502页

作者：施珊珊江振友魏守一李春艳周光雄暨南大学医学院微生物与免疫学教研室广州510632 暨南大学生命科学技术学院生物医学工程系广州510632 暨南大学药学院生药学教研室广州510632

目的研究一株南海海洋放线菌的发酵产物对肝癌细胞生长和凋亡的影响。方法采用MTT法评定海洋放线菌的发酵产物对肝癌细胞HepG-2增殖抑制作用及对正常细胞Vero细胞的细胞毒性,经Hoechst33258(8g/L)染色进行形态学观察,应用流式细胞术检... 详细信息

目的研究一株南海海洋放线菌的发酵产物对肝癌细胞生长和凋亡的影响。方法采用MTT法评定海洋放线菌的发酵产物对肝癌细胞HepG-2增殖抑制作用及对正常细胞Vero细胞的细胞毒性,经Hoechst33258(8g/L)染色进行形态学观察,应用流式细胞术检测细胞周期、凋亡和凋亡基因Fas的表达情况。结果发酵物对HepG-2细胞的生长抑制效果明显,荧光显微镜下观察发现培养细胞中出现核固缩、凋亡小体;发酵物在诱导HepG-2细胞凋亡同时,下调Bcl-2表达水平,且均呈剂量效应关系。结论发酵物通过阻滞肿瘤细胞的生长及通过抑制Bcl-2诱导细胞凋亡等机制,对肝癌细胞的增殖有一定的抑制作用。

关键词：海洋放线菌 MTT 细胞凋亡 Bcl-2

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超抗原SEA体外对Jurkat T淋巴细胞增殖活性与表面超微结构的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2009年第6期30卷 590-594页

作者：郜世隽林晨龚超群杨力建李扬秋蔡继业田红霞高永鹏暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 暨南大学生命科学技术学院化学系广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

目的：通过显微形态观察和功能检测分析超抗原（SEA）对JurkatT淋巴细胞的影响。方法：应用CCK-8法，原子力显微镜（AFM）体外检测JurkatT淋巴细胞增殖活性、及其细胞膜超微结构的改变。结果：与对照组比较，不同浓度的SEA随着作用时间... 详细信息

目的：通过显微形态观察和功能检测分析超抗原（SEA）对JurkatT淋巴细胞的影响。方法：应用CCK-8法，原子力显微镜（AFM）体外检测JurkatT淋巴细胞增殖活性、及其细胞膜超微结构的改变。结果：与对照组比较，不同浓度的SEA随着作用时间的增加，细胞膜超微结构与R且值明显发生改变。JurkatT淋巴细胞经过质量浓度为0．1—100mg／LSEA，作用48h期间，JurkatT细胞的表面超微结构（平均粗糙度，Ra）和增殖活性（A值）变化非常明显。其中，质量浓度10mg／LSEA作用24h，JurkatT淋巴细胞表面结构变化最明显，而细胞增殖活性在48h达最强。结论：SEA作为超抗原作用于JurkatT淋巴细胞后，JurkatT淋巴细胞的活化表现出表面形态结构改变先于代谢水平的改变，较后者更灵敏。

关键词： Jurkat T细胞超抗原原子力显微镜 CCK-8 增殖活性表面结构

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玉米特异表达启动子驱动下结核esat-6抗原基因植物表达载体的构建及鉴定

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西北农业学报 2009年第3期18卷 107-110,140页

作者：李君武宋东王珊珊胡建广刘艳黄清华暨南大学医学院微生物免疫学教研室广东广州510632 广东省农业科学院作物研究所广东广州510640

以本实验室构建的pEGHLE为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Esat-6基因,连接到含有玉米特异性启动子globulin-1的pCR2.1载体上,将globulin-1-Esat6联合片断切下连到含有抗除草剂基因bar的pCAMBIA1300载体中,构建植物双元表达质粒pCAMBIA13... 详细信息

以本实验室构建的pEGHLE为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Esat-6基因,连接到含有玉米特异性启动子globulin-1的pCR2.1载体上,将globulin-1-Esat6联合片断切下连到含有抗除草剂基因bar的pCAMBIA1300载体中,构建植物双元表达质粒pCAMBIA1300GEsat-6,电击法将重组质粒转化到农杆菌LBA4404中。通过对pC1300GEsat-6质粒酶切鉴定和测序分析表明克隆的Esat-6与预期相符,酶切从农杆菌中所提的质粒,条带大小与预期结果相符合。

关键词：结核分支杆菌 Esat-6 Globulin-1

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姜黄素抑制小鼠矽肺纤维化

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中国病理生理杂志 2009年第5期25卷 976-979页

作者：江振友岳磊卢燕茹董军戴国奎杨春华卢业成暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632 广州市干部疗养院检验科广东广州510530 暨南大学附属第一医院校医门诊部广东广州510632 广州市第八人民医院广东广州510060

目的:建立小鼠矽肺动物模型,探讨姜黄素在减轻小鼠矽肺纤维化中的作用。方法:用手术方法暴露小鼠气管,定量注射二氧化硅(SiO2)悬液建立矽肺模型。建模2周后将小鼠随机分为模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组分别给药,给药2周以及6周... 详细信息

目的:建立小鼠矽肺动物模型,探讨姜黄素在减轻小鼠矽肺纤维化中的作用。方法:用手术方法暴露小鼠气管,定量注射二氧化硅(SiO2)悬液建立矽肺模型。建模2周后将小鼠随机分为模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组分别给药,给药2周以及6周后处死动物,对肺组织行病理组织学检查。结果:建立了矽肺的纤维化模型。与模型组相比,给药2周后,高剂量组矽结节大小及数量显著减小(P<0.05);给药6周后,模型组以成纤维细胞为主,同时夹杂少量的胶原纤维,而给药组仍以巨噬细胞和淋巴细胞为主的细胞性矽结节为主。结论:姜黄素能抑制矽肺纤维化进程。

关键词：矽肺姜黄素纤维化

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辅助性T细胞在慢性荨麻疹发病中的研究现状

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岭南皮肤性病科杂志 2009年第4期16卷 270-272页

作者：江振友邹林史毓杰杨健暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 广州医学院第二附属医院皮肤科广东广州510260

慢性荨麻疹是一种常见的,非常顽固的变态反应性皮肤病,其病因复杂,发病机制尚未明确。近年来,随着对辅助性T细胞及其表达的细胞因子与慢性荨麻疹关系的深入研究,其结果将有助于进一步理解慢性荨麻疹发病的细胞基础,并可能为临床治疗提... 详细信息

慢性荨麻疹是一种常见的,非常顽固的变态反应性皮肤病,其病因复杂,发病机制尚未明确。近年来,随着对辅助性T细胞及其表达的细胞因子与慢性荨麻疹关系的深入研究,其结果将有助于进一步理解慢性荨麻疹发病的细胞基础,并可能为临床治疗提供新的靶点。

关键词：荨麻疹 Th细胞细胞因子

来源：评论

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快速鉴定人肺部感染中非结核分枝杆菌的一种简单方法

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热带医学杂志 2009年第11期9卷 1241-1243页

作者： B.N.Selvakumar 田红霞林晨 A.Balasubramanian R.Vasanthakumari 暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 印度钦奈胸腔医学研究所微生物学系钦奈印度600031

目的建立一种快速鉴别结核分枝杆菌(tuberculous mycobacteria,TM)和非结核分枝杆菌(non tuberculous mycobacteria,NTM)的简单方法。方法收集165例诊断为肺结核病人的痰标本,经除污染杂菌处理后各取0.1ml的痰液沉淀物,分别加入到含不... 详细信息

目的建立一种快速鉴别结核分枝杆菌(tuberculous mycobacteria,TM)和非结核分枝杆菌(non tuberculous mycobacteria,NTM)的简单方法。方法收集165例诊断为肺结核病人的痰标本,经除污染杂菌处理后各取0.1ml的痰液沉淀物,分别加入到含不同浓度对硝基苯甲酸(para-nitro benzoicacid,PNB)的未成熟椰汁液体培养基和罗氏培养基中培养。对在含PNB的培养基中生长的阳性培养物进行烟酸检测。结果所测样本菌株中有18株在含PNB的培养基中生长,其培养物中检测不含烟酸。形态学检查18例未成熟椰汁液体培养基中阳性培养物都不同于典型的结核分枝杆菌。结论含PNB的未成熟椰汁液体培养基,可作为一种快速鉴定人肺部感染中非结核分枝杆菌的简单筛选方法。

关键词：人肺部感染非结核分枝杆菌快速鉴定对硝基苯甲酸

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