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广东省环境诱变剂学会、广东省预防医学会卫生毒理专业委员会2010年学术会议

作者：吴赤蓬陈秉方昌勇江淑仪叶蔚云钟雪云暨南大学医学院公共卫生教研室广东药学院公共卫生学院暨南大学医学院病理学与病理生理学系

目的研究甲基叔丁基醚(MTBE)诱导人支气管上皮细胞(16HBE)产生细胞增殖的毒物兴奋效应(Hormesis)的剂量范围及其毒理学意义。方法采用MTT法检测MTBE对16HBE细胞增殖的影响及其剂量-效应关系;采用单细胞凝胶电泳(SCGE)试验检测MTBE在能诱... 详细信息

目的研究甲基叔丁基醚(MTBE)诱导人支气管上皮细胞(16HBE)产生细胞增殖的毒物兴奋效应(Hormesis)的剂量范围及其毒理学意义。方法采用MTT法检测MTBE对16HBE细胞增殖的影响及其剂量-效应关系;采用单细胞凝胶电泳(SCGE)试验检测MTBE在能诱导16HBE细胞产生细胞增殖的Hormesis的剂量(Hormetic Zone)下对细胞DNA的损伤效应;采用相同剂量范围的MTBE亚慢性染毒昆明小鼠3个月后,检测小鼠全血细胞DNA的损伤效应。结果 MTBE在1 mg/ml～20mg/ml的剂量范围内能促进16HBE细胞增殖,表现出Hormesis;当剂量大于5mg/ml时,MTBE对体外培养的16HBE细胞的DNA具有明显损伤作用;剂量为2.5mg/ml和5.0mg/ml的MTBE亚慢性染毒昆明小鼠3个月,可造成小鼠全血细胞DNA的损伤。结论 MTBE诱导16HBE细胞增殖的Hormesis与其诱导DNA损伤的Hormesis的剂量范围不相同,其诱导细胞增殖的Hormesis的剂量并不安全,具有损伤细胞DNA的作用,增加致突变、致癌的风险。

关键词：甲基叔丁基醚毒物兴奋效应细胞增殖

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携带HGF基因的重组腺病毒表达载体的构建

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广东医学 2010年第13期31卷 1662-1664页

作者：刘薇薇陈娟刘移民李素梅余卫陈嘉榆张成陈运贤林琛莅钟雪广东省广州市第十二人民医院 510620 暨南大学医学院病理学教研室广州510632 中山大学附属第一医院血液科广州510080

目的构建携带肝细胞生长因子HGF的重组腺病毒表达载体。为研究HGF的功能、作用机制及临床应用奠定基础。方法以pcDNA3.0-HGF为模板,经PCR扩增得到HGF基因,将其插入到带有绿色荧光蛋白基因的穿梭载体pAdTrack-CMV-GFP中,得到重组质粒pAdT... 详细信息

目的构建携带肝细胞生长因子HGF的重组腺病毒表达载体。为研究HGF的功能、作用机制及临床应用奠定基础。方法以pcDNA3.0-HGF为模板,经PCR扩增得到HGF基因,将其插入到带有绿色荧光蛋白基因的穿梭载体pAdTrack-CMV-GFP中,得到重组质粒pAdTrack-CMV-HGF-GFP。将线性化的pAdTrack-CMV-HGF-GFP与pAdEasy-1质粒共转化BJ5183感受态细胞,进行同源重组,得到重组腺病毒质粒,经PacI线性化后,转染AD293细胞。结果得到重组腺病毒,转染重组腺病毒DNA的AD293细胞经荧光显微镜能观察到AD293细胞内有绿色荧光,且出现细胞病变反应(cytopathic effects,CPE),对传代的Ad-HGF进行PCR分析证实得到目的基因,感染CHL细胞,通过western blotting分析HGF蛋白表达量,从而证实重组腺病毒载体构建成功。结论腺病毒制备简便,成本低,周期短,毒性小,产量高,感染率及蛋白表达率高,成功构建Ad-HGF为进一步研究HGF并最终使其在临床应用中更为方便提供实验基础。

关键词：重组腺病毒肝细胞生长因子基因治疗

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热休克大鼠小脑中小脑肽1和孤独谷氨酸受体2表达变化及其与血管活性物质相关性研究

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武汉大学学报（医学版） 2010年第5期31卷 613-615,618页

作者：彭森唐忠志武汉大学医学院病理生理学教研室湖北武汉430071 中国人民解放军广州军区武汉总医院急诊科湖北武汉430070

目的:探讨热休克大鼠小脑小脑肽1(Cbln1)和孤独谷氨酸受体-2(Glud2)表达的变化及意义。方法:60只SD大鼠随机分为3组:空白组,休克早期组和休克晚期组。大鼠置于恒温恒湿箱模拟湿热天气。生理记录仪检测大鼠生命体征。ELISA检测小脑组织中... 详细信息

目的:探讨热休克大鼠小脑小脑肽1(Cbln1)和孤独谷氨酸受体-2(Glud2)表达的变化及意义。方法:60只SD大鼠随机分为3组:空白组,休克早期组和休克晚期组。大鼠置于恒温恒湿箱模拟湿热天气。生理记录仪检测大鼠生命体征。ELISA检测小脑组织中Cbln1和血清中降钙素基因相关肽(CGRP)含量,流式细胞仪检测Glud2表达,放射免疫分析法检测血清中肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、血管紧张素-Ⅱ(AngⅡ)、肾素(RA)浓度。结果:休克早期组和休克晚期组Cbln1和Glud2含量显著高于空白组(P<0.05);休克晚期组Cbln1和Glud2含量显著高于休克早期组(P<0.05);相关性分析显示Cbln1、Glud2分别与E、NE、AngⅡ、RA呈正相关(P<0.05);Cbln1和Glud2与CGRP无明显相关性(P>0.05)。结论:热休克大鼠Cbln1和Glud2表达增加,它们可能是自身抗休克机制之一。

关键词：小脑肽1 孤独谷氨酸受体-2 热休克

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脑震荡后综合征大鼠海马的神经损伤及磁共振波谱分析

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江汉大学学报（自然科学版） 2010年第1期38卷 74-78页

作者：舒细记柳威周红艳熊魏鹏艾永循赵虎江汉大学医学院病理学与病理生理学教研室湖北武汉430056 江汉大学武汉神经科学与药物研究所湖北武汉430056 中山大学医学院法医系广东广州510080

目的:探讨脑震荡损伤对大鼠海马区代谢物水平的影响及其病理机制.方法:将25只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(n=10)和PCS组(n=15),采用Marmarou改良法复制大鼠脑震荡损伤模型,对脑震荡24h大鼠及对照组大鼠进行1H-MRS扫描后处死,对脑组织... 详细信息

目的:探讨脑震荡损伤对大鼠海马区代谢物水平的影响及其病理机制.方法:将25只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(n=10)和PCS组(n=15),采用Marmarou改良法复制大鼠脑震荡损伤模型,对脑震荡24h大鼠及对照组大鼠进行1H-MRS扫描后处死,对脑组织进行免疫组织化学和免疫荧光染色观察海马CA1区的残存锥体细胞和凋亡细胞的数量.结果:1H-MRS扫描结果显示,PCS组大鼠左侧海马区NAA/Cr水平(0.824±0.17)明显低于正常对照组(1.299±0.12),P<0.01;PCS组大鼠右侧海马NAA/Cr水平(0.792±0.17)明显低于正常对照组(1.287±0.18),P<***组大鼠海马CA1区小血管扩张淤血,锥体细胞呈代偿肥大与凋亡并存状态.免疫组织化学结果显示,PCS组大鼠海马CA1区NeuN阳性细胞数量(176.17±26.92)较正常对照组(228.33±26.34)明显减少,P<0.05;免疫荧光实验结果显示,PCS组海马CA1区凋亡细胞的数量(48.03±5.46)较正常对照组(35.49±7.75)明显增多,P<0.01.结论:脑震荡后大鼠双侧海马区神经细胞的代谢物水平均下降,海马CA1区残存锥体细胞数量减少和凋亡细胞增多,后者可能是代谢物水平变化的病理基础.

关键词：脑震荡后综合征质子磁共振波谱海马 NeuN 凋亡

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低渗诱导高分化鼻咽癌细胞CNE-1容积激活性氯电流

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中国病理生理杂志 2009年第6期25卷 1094-1097页

作者：朱林燕左婉红张海峰陈丽新王立伟暨南大学医学院药理学教研室广东广州510632 暨南大学医学院生理学教研室广东广州510632

目的:研究细胞外低渗诱导的高分化鼻咽癌细胞CNE-1的容积激活性氯电流。方法:全细胞膜片钳记录氯电流,通过应用氯通道阻断剂、离子置换和改变细胞容积方法研究该电流的特性。结果:当细胞在等渗环境中背景电流微弱且稳定,细胞外给予47%... 详细信息

目的:研究细胞外低渗诱导的高分化鼻咽癌细胞CNE-1的容积激活性氯电流。方法:全细胞膜片钳记录氯电流,通过应用氯通道阻断剂、离子置换和改变细胞容积方法研究该电流的特性。结果:当细胞在等渗环境中背景电流微弱且稳定,细胞外给予47%低渗刺激后电流迅速增大,呈外向优势,对阴离子通透性的大小为:I->Br->Cl->葡萄糖酸。氯通道阻断剂ATP和NPPB可逆性地抑制此电流,ATP的抑制作用在外向电流显著强于内向电流。此电流对细胞容积改变敏感,细胞肿胀时被激活,细胞发生皱缩时则被抑制。结论:细胞外低渗诱导CNE-1细胞产生氯电流,此电流对细胞容积的改变敏感,在CNE-1细胞容积调节中起重要作用。

关键词：鼻咽肿瘤 CNE-1细胞氯化物通道膜片钳术

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人参茎叶皂苷对小鼠脂肪肝的作用及机制研究

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中国药理学通报 2009年第5期25卷 663-667页

作者：胡巢凤陆大祥孙丽萍覃莉暨南大学医学院病理生理学教研室广州510632 暨南大学医学院发热研究室广州510632 暨南大学医学院组织学与胚胎学教研室广东广州510632

目的探讨人参茎叶皂苷对小鼠脂肪肝的作用及机制。方法小鼠分为正常对照组(NC)和模型组。喂高脂饲料复制脂肪肝模型,12 wk后证实造模成功后,模型组小鼠随机分为高脂组(HF);正常饮食治疗组(NT);人参茎叶皂苷小剂量组(GSL1);人参茎叶皂苷... 详细信息

目的探讨人参茎叶皂苷对小鼠脂肪肝的作用及机制。方法小鼠分为正常对照组(NC)和模型组。喂高脂饲料复制脂肪肝模型,12 wk后证实造模成功后,模型组小鼠随机分为高脂组(HF);正常饮食治疗组(NT);人参茎叶皂苷小剂量组(GSL1);人参茎叶皂苷大剂量组(GSL2)。除HF组饲高脂饲料外,其余各组饲基础饲料。GSL1组给予GSL50 ***-1.d-1灌胃,GSL2组给予GSL 100 ***-1.d-1灌胃,其余各组以同等容积蒸馏水灌胃。灌胃2wk后处死所有动物,检测血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、ALT含量;并观察肝指数和肝组织TC、TG、SOD、MDA含量,肝脏病理形态学改变及氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、细胞色素P450 2E1(CYP2E1)的表达。结果GSL2组可以明显降低肝指数、血脂、肝脂和MDA含量,增加SOD活性,改善小鼠肝脏病理形态学改变,增加肝组织PPARαmRNA水平、降低CYP2E1 mRNA水平。NT组脂肪肝有一定的改善作用,但效果不理想;GSL1组各项指标与NT组相比差异无显著性。结论人参茎叶皂苷可能通过增加肝组织PPARαmRNA表达,降低血脂和肝脂水平;并且通过降低CYP2E1 mRNA表达,抑制脂质过氧化反应,发挥治疗脂肪肝的作用。

关键词：人参茎叶皂苷脂肪肝氧化物酶体增殖物激活受体小鼠

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钙依赖性钾通道在鼻咽癌细胞调节性容积回缩中起重要作用

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生理学报 2009年第5期61卷 485-492页

作者：和树同朱林燕杨林杰何斯纯毛建文王立伟陈丽新暨南大学医学院生理学系暨南大学医学院药理学系广东药学院生物学教研室

本研究采用膜片钳全细胞记录技术记录低渗诱发的人低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)钾电流,用图像分析技术测量细胞容积,探讨不同类型K+通道在调节性容积回缩(regulatory volume decrease,RVD)中的作用。结果显示,细胞外灌流160mOsm/L低渗液诱... 详细信息

本研究采用膜片钳全细胞记录技术记录低渗诱发的人低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)钾电流,用图像分析技术测量细胞容积,探讨不同类型K+通道在调节性容积回缩(regulatory volume decrease,RVD)中的作用。结果显示,细胞外灌流160mOsm/L低渗液诱发CNE-2Z细胞产生容积激活性钾电流和RVD,中等电导钙依赖性钾通道阻断剂clotrimazole(100μmol/L)几乎完全抑制低渗诱发的钾电流和RVD。去除细胞外液的Ca2+后,低渗刺激不能诱发钾电流,RVD显著减弱。电压依赖性钾通道阻断剂4-aminopyridine(4-AP,5mmol/L)部分抑制低渗诱发的钾电流。上述结果提示,钙依赖性钾通道是低分化鼻咽癌细胞容积激活性钾通道的主要类型;钙依赖性钾通道在鼻咽癌细胞RVD中发挥了关键性作用,而电压依赖性钾通道在其中起部分作用。

关键词：鼻咽肿瘤低渗溶液细胞大小钾离子通道

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甘氨酰谷氨酰胺在大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤中的保护作用研究

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中国病理生理杂志 2009年第5期25卷 853-858页

作者：戚仁斌熊怡陆大祥王彦平付咏梅暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

目的:研究甘氨酰谷氨酰胺对缺血再灌注大鼠离体心脏的保护作用。方法:应用Langendorff离体心脏灌注系统建立心肌缺血再灌注模型。30只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(control)、甘氨酰谷氨酰胺对照组(Gly-Gln)、缺血再灌注组(I/R)、缺血... 详细信息

目的:研究甘氨酰谷氨酰胺对缺血再灌注大鼠离体心脏的保护作用。方法:应用Langendorff离体心脏灌注系统建立心肌缺血再灌注模型。30只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(control)、甘氨酰谷氨酰胺对照组(Gly-Gln)、缺血再灌注组(I/R)、缺血/再灌注+甘氨酰谷氨酰胺组(I/R+Gly-Gln)。I/R组及I/R+Gly-Gln组分别灌注30min后,全心停灌20min,再灌注40min,I/R+Gly-Gln组于再灌注时在灌流液中加入Gly-Gln;正常对照组连续灌流90min,Gly-Gln对照组灌流液中加入Gly-Gln。记录各组灌注时,左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP)、左室压力最大变化速率(±dp/dtmax)、心率(HR)及心肌细胞单相动作电位(MAP);同时在相应的时点分别测定冠脉流出液中的乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性。结果:离体大鼠心脏缺血20min,再灌注40min,导致严重的心功能抑制,表现为LVEDP升高,LVDP、±dp/dtmax降低;再灌注液中加入Gly-Gln后,LVEDP降低,LVDP、±dp/dtmax明显升高(P<0.01)。I/R+Gly-Gln组冠脉流出液中LDH、CK活性明显低于I/R组(均P<0.01)。结论:Gly-Gln能有效减轻缺血再灌注引起的左室功能下降,减少心肌细胞LDH、CK的释出,表明Gly-Gln对缺血再灌注损伤的大鼠离体心脏具有保护作用。

关键词：甘氨酰谷氨酰胺缺血/再灌注损伤离体心脏

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ERK_(1,2)抑制剂联合5-FU对B16细胞增殖和凋亡的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2009年第6期30卷 606-609页

作者：谭雪梅郑辉洪学军暨南大学医学院生理学教研室广东广州510632

目的:观察ERK1,2抑制剂联合5-FU对B16细胞增殖和凋亡的影响,并探讨作用机制。方法:用MTT法观察ERK1,2抑制剂、5-FU和联合用药对细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡率,用RT-PCR观察ERK1,2抑制剂、5-FU和联合用药对bcl-2和caspas... 详细信息

目的:观察ERK1,2抑制剂联合5-FU对B16细胞增殖和凋亡的影响,并探讨作用机制。方法:用MTT法观察ERK1,2抑制剂、5-FU和联合用药对细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡率,用RT-PCR观察ERK1,2抑制剂、5-FU和联合用药对bcl-2和caspase-9的表达的影响。结果:ERK1,2抑制剂联合5-FU组在抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,均较对照组、单独用药组作用增强,并且下调bcl-2和上调caspase-9的表达。结论:ERK1,2抑制剂联合5-FU有协同抑制B16细胞增殖,促进凋亡的作用,其机制可能与诱导细胞凋亡,下调bcl-2和上调caspase-9的表达有关。

关键词：丝裂原活化蛋白激 5-氟尿嘧啶凋亡细胞外调节蛋白激酶

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小檗碱抑制去甲肾上腺素诱导心肌细胞凋亡的机制研究

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中国病理生理杂志 2010年第A10期26卷 1974-1974页

作者：吕秀秀王华东余小慧暨南大学医学院病理生理学系中西医结合研究所国家中医药管理局病理生理重点实验室广东广州510632

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