检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实用眼科杂志 2005年第7期23卷 653-656页

作者：魏海云李洪义郭向明郑辉中山大学中山医学院医学遗传学研究室广州510080 中山大学附属眼科医院小儿眼科暨南大学医学院分子生理学研究室

白化病是一组由黑色素合成相关基因突变导致的眼或眼、皮肤、毛发黑色素缺乏性遗传病,根据色素缺乏受累的部位和有无其他异常分为三种类型,分别是眼、皮肤和毛发均呈色素缺乏的眼皮肤型白化病,仅有眼色素缺乏的眼白化病,以及既有眼-皮... 详细信息

白化病是一组由黑色素合成相关基因突变导致的眼或眼、皮肤、毛发黑色素缺乏性遗传病,根据色素缺乏受累的部位和有无其他异常分为三种类型,分别是眼、皮肤和毛发均呈色素缺乏的眼皮肤型白化病,仅有眼色素缺乏的眼白化病,以及既有眼-皮肤白化病表现又有其他系统症状的白化病相关综合征.三种类型患者的共同特征是眼均存在色素的缺乏,眼发育过程中黑色素的缺乏引起眼一系列严重的功能改变和临床表现。

关键词：发生机制眼表现相关综合征基因突变色素合成眼白化病系统症状临床表现功能改变发育过程黑色素遗传病皮肤型毛发

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WT1多肽致敏树突状细胞诱导杀伤K562细胞实验研究

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中国病理生理杂志 2005年第5期21卷 923-926页

作者：林东军华佳叶付咏梅林曲黄仁魏方志刚中山大学附属第三医院血液科广东广州510630 广州医学院附属第二医院血液科广东广州510260 暨南大学医学院病理生理教研室广东广州510632

目的研究来自健康人外周血单个核细胞的树突状细胞(DC)负载WT1多肽抗原,体外诱导产生特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对K562细胞的杀伤作用。方法应用重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素4(rhIL-4)、重组人肿瘤坏... 详细信息

目的研究来自健康人外周血单个核细胞的树突状细胞(DC)负载WT1多肽抗原,体外诱导产生特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对K562细胞的杀伤作用。方法应用重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素4(rhIL-4)、重组人肿瘤坏死因子α(TNF-α)等细胞因子,自外周血单个核细胞诱导扩增,培养出DC,使DC负载WT1多肽抗原。实验分3组,WT1多肽致敏DC为实验组A,未致敏DC为实验组B,单纯自体淋巴细胞未加DC激活为对照组C,观察CTL对K562细胞的杀伤作用。结果培养出具有典型特征的DC,体外能诱导强烈的同种异体混合淋巴细胞增殖反应。在效靶比为20∶1时,实验组A诱导的CTL对K562细胞的杀伤率为86.1%±26.8%;实验组B为47.1%±20.8%;对照组C为27.7%±15.3%(P<0.05)。结论WT1多肽抗原致敏DC能促使CD8阳性淋巴细胞扩增,并诱导激活特异性CTL,对K562靶细胞具有明显的杀伤作用。

关键词：树突细胞 WT1多肽类 K562细胞细胞毒性

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猪卵透明带-3β截短型蛋白在原核系统中的表达研究

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生殖与避孕 2005年第6期25卷 323-327页

作者：孙奋勇陈小佳朱伟杰谢秋玲吴健虹徐万祥洪岸李菁暨南大学生物工程研究所广州510632 暨南大学生殖免疫研究中心广州510632 上海市计划生育科研所上海200032 暨南大学医学院病理生理教研室广州510632

目的:制备具有猪卵透明带-3β抗原活性的截短型pZP3β蛋白(tunc-pZP3β),以便对该蛋白的抗原表位区域作深入研究。方法:采用PCR方法扩增原cDNA中编码第130个氨基酸到第290个氨基酸的DNA序列。获得的tunc-pZP3β基因片段通过引入其两端的... 详细信息

目的:制备具有猪卵透明带-3β抗原活性的截短型pZP3β蛋白(tunc-pZP3β),以便对该蛋白的抗原表位区域作深入研究。方法:采用PCR方法扩增原cDNA中编码第130个氨基酸到第290个氨基酸的DNA序列。获得的tunc-pZP3β基因片段通过引入其两端的NdeⅠ和BamHⅠ酶切位点被定向插入pET-3c质粒T7强启动子下游的多克隆区,筛选出重组子,经DNA测序验证正确后,转化表达菌株BL21(DE3)pLysS,再用IPTG对重组菌体进行诱导。结果:SDS-PAGE分析表明tunc-pZP3β在大肠杆菌系统中高水平表达,且在WesternBlot免疫印迹中能被特异性抗体识别。结论:对适当的抗原表位序列进行保留而截去两端一定的氨基酸序列,所获得的截短型蛋白能够实现在大肠杆菌中高效表达,这有利于深入研究该蛋白核心区域的功能。

关键词：截短型猪卵透明带-3β 人肠杆菌表达

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非融合膜外型猪卵透明带-3β蛋白在原核系统中的表达

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生殖与避孕 2005年第5期25卷 259-262,299页

作者：陈小佳谢秋玲朱伟杰孙奋勇徐万祥洪岸李菁吴健虹暨南大学生物工程研究所广州510632 暨南大学生殖免疫研究中心广州510632 上海市计划生育科研所上海200032 暨南大学医学院病理生理教研室广州510632

目的:通过基因工程的方法在原核表达系统中表达去除了信号肽和跨膜区的膜外型猪卵透明带蛋白pZP3β。方法:设计适宜引物,采用PCR方法,在基因水平对膜外型pZP3β的翻译起始序列进行适当调整,获得的基因克隆入pET-3c载体,并进一步在大肠杆... 详细信息

目的:通过基因工程的方法在原核表达系统中表达去除了信号肽和跨膜区的膜外型猪卵透明带蛋白pZP3β。方法:设计适宜引物,采用PCR方法,在基因水平对膜外型pZP3β的翻译起始序列进行适当调整,获得的基因克隆入pET-3c载体,并进一步在大肠杆菌*** BL21(DE3) pLysS中表达。结果:得到表达率约10%的非融合膜外型pZP3β蛋白的表达,并经Western-blot鉴定为目的蛋白。结论:外源蛋白在不改变氨基酸序列条件下,在基因水平的适当调整可以有效提高其表达率。

关键词：非融合膜外型猪卵透明带基因表达

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小柴胡汤治疗大鼠子宫内膜异位症作用机制的实验研究

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标记免疫分析与临床 2005年第1期12卷 35-37页

作者：郑辉李洪义左连东暨南大学医学院生理学教研室广东广州510632 中山大学中山医院广东广州510089

通过建立大鼠子宫内膜异位症(内异症)动物模型, 利用免疫组化的方法, 观察分析各用药组在位、异位内膜Fas及Caspase 3蛋白的表达, 探讨小柴胡汤治疗大鼠内异症的作用机制。结果显示, 小柴胡汤治疗组内异症大鼠异位内膜Fas蛋白、Caspase ... 详细信息

通过建立大鼠子宫内膜异位症(内异症)动物模型, 利用免疫组化的方法, 观察分析各用药组在位、异位内膜Fas及Caspase 3蛋白的表达, 探讨小柴胡汤治疗大鼠内异症的作用机制。结果显示, 小柴胡汤治疗组内异症大鼠异位内膜Fas蛋白、Caspase 3蛋白的表达水平明显高于其在位内膜, 而对照组中却恰恰相反, 丹那唑组中两者相差不明显, 提示小柴胡汤治疗大鼠内异症的作用机制可能是通过上调Fas蛋白的表达, 促进异位内膜细胞的凋亡而实现的。

关键词：治疗大鼠小柴胡汤内异症异位内膜作用机制子宫内膜异位症表达水平细胞 Fas蛋白

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抑癌基因PTEN和FHIT在口腔鳞癌中的表达及其与cyclin D1的相关性

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第一军医大学学报 2005年第1期25卷 79-82页

作者：沈丽佳谢思明殷操阮萍姚希暨南大学医学院口腔医学系南方医科大学病理学教研室广东广州510515 广东省口腔医院

目的检测抑癌基因PTEN、FHIT在正常口腔粘膜上皮和口腔鳞癌(OSCC)中的表达情况,并探讨其与cyclinD1的关系。方法采用免疫组化SP法检测62例OSCC中FHIT、PTEN、cyclinD1蛋白表达的情况,以12例正常口腔粘膜作对照。结果在正常口腔粘膜中PTE... 详细信息

目的检测抑癌基因PTEN、FHIT在正常口腔粘膜上皮和口腔鳞癌(OSCC)中的表达情况,并探讨其与cyclinD1的关系。方法采用免疫组化SP法检测62例OSCC中FHIT、PTEN、cyclinD1蛋白表达的情况,以12例正常口腔粘膜作对照。结果在正常口腔粘膜中PTEN均为强阳性表达(12/12),在OSCC中24.2%(15/62)表现为PTEN蛋白表达的缺乏或减少;而FHIT在正常口腔粘膜中也均为强阳性表达(12/12),在OSCC中17.7%(11/62)表现为FHIT蛋白表达缺乏或减少;cyclinD1在正常口腔粘膜中91.7%(11/12)表现为阴性或弱阳性表达,在OSCC中53.2%(33/62)表现为阳性或强阳性表达;PTEN与FHIT均为阳性或强阳性表达时,37.8%(28/74)cyclinD1表现为阴性或弱阳性,其中11例为正常口腔粘膜(占正常组的91.7%)。结论PTEN、FHIT在OSCC的发生过程中起着一定的作用;PTEN/FHIT的表达与cyclinD1有关,提示PTEN、FHIT能够下调cyclinD1的表达。

关键词：抑癌基因 PTEN FHIT cyclin D1 口腔癌免疫组化

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干细胞的研究现状和应用展望

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中国处方药 2005年第9期4卷 83-86页

作者：杨默周卓妍香港中文大学儿科学系暨南大学医学院生理学教研室

成体干细胞在治疗多种难治性疾病包括中风、神经系统变性性疾病、糖尿病、心脏病,外伤等已开辟了一个新的方向。干细胞是研究细胞自我更新和分化的重要工具,并将在新药发明和药物毒性筛选中发挥作用,对成体干细胞及其分化的研究必将在... 详细信息

成体干细胞在治疗多种难治性疾病包括中风、神经系统变性性疾病、糖尿病、心脏病,外伤等已开辟了一个新的方向。干细胞是研究细胞自我更新和分化的重要工具,并将在新药发明和药物毒性筛选中发挥作用,对成体干细胞及其分化的研究必将在今后对医学及生物学领域产生极其深远的影响。

关键词：成体干细胞神经系统变性性疾病细胞自我更新难治性疾病毒性筛选糖尿病心脏病生物学分化

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射频电磁波与环境温度对单个活态红细胞膜力学性质的影响

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中国职业医学 2005年第3期32卷 11-13页

作者：姚成灿姚平唐国汉郑青李校坤黄耀熊暨南大学药学院广东广州510630 暨南大学医学院生理教研室 510630 广东省职业病防治院 510300 暨南大学生物医学工程研究所 510630

目的探讨900MHz射频电磁波和环境温度对红细胞膜力学性质的协同作用。方法利用多维显微成像技术和显微动态图像分析技术,观察和测量不同温度下不同功率密度的900MHz射频电磁波照射下单个活态人红细胞膜弯曲弹性模量(Kc)和剪切弹性模量(... 详细信息

目的探讨900MHz射频电磁波和环境温度对红细胞膜力学性质的协同作用。方法利用多维显微成像技术和显微动态图像分析技术,观察和测量不同温度下不同功率密度的900MHz射频电磁波照射下单个活态人红细胞膜弯曲弹性模量(Kc)和剪切弹性模量(μc)。结果150mW/m2和310mW/m2的900MHz射频电磁波在35℃、37℃和40℃照射30min前后,红细胞的Kc和μc都没有显著变化(P>0.05)。10000mW/m2和50000mW/m2的900MHz射频电磁波照射30min后,红细胞的Kc和μc都显著升高(P<0.05),并且在35℃和40℃时升高的幅度大于37℃时升高的幅度。结论环境温度变化和一定功率密度的射频电磁波照射对红细胞膜力学特性的影响具有相互协同增强作用。

关键词：射频电磁波温度红细胞膜力学性质弹性模量

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粒-巨噬细胞集落刺激因子与绿色荧光蛋白融合基因慢病毒载体构建

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中国病理生理杂志 2005年第7期21卷 1448-1451页

作者：李先茂沈丽佳朱梅刚李祖国赵彤南方医科大学病理学教研室广州中医药大学第一临床医院肿瘤科暨南大学医学院广东广州510632

目的:构建粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因慢病毒载体。方法:采用RT-PCR方法获得GM-CSF全外显子片段,使之克隆到带GFP慢病毒表达载体质粒FUGW中,经限制性酶切、PCR扩增和测序鉴定重组载体。在脂质体介导下... 详细信息

目的:构建粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因慢病毒载体。方法:采用RT-PCR方法获得GM-CSF全外显子片段,使之克隆到带GFP慢病毒表达载体质粒FUGW中,经限制性酶切、PCR扩增和测序鉴定重组载体。在脂质体介导下将慢病毒包装系统的包装结构基因pCMV.△8.9、包膜基因VSVG、目的基因FUGW-GM-CSF导入病毒包装细胞293T,荧光显微镜检测基因的表达,包装成病毒后,收集病毒上清,浓缩,鉴定。用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测转染FUGW-GM-CSF细胞上清液GM-CSF表达水平,电子显微镜观察293T细胞中的慢病毒。结果:限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实RT-PCR获得的GM-CSF/PCR产物与GenBank中的数据完全吻合;GM-CSF准确克隆入FUGW的多克隆位点。慢病毒的3种质粒可高效转染入293T细胞,荧光显微镜下观察可见大量绿色荧光。转染FUGW-GM-CSF包装细胞上清液GM-CSF酶联反应阳性。电子显微镜下见慢病毒颗粒位于293T细胞胞浆的内质网中。结论:成功构建了GM-CSF与GFP融合基因慢病毒载体,为诱导DC提供了适合的稳定转染的载体。

关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子绿色荧光蛋白慢病毒属

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携硒、锌、维生素E大豆磷脂脂质体对大鼠心肌细胞凋亡的影响

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中国临床康复 2005年第27期9卷 42-44页

作者：易华孙军董传仁广州中医药大学病理教研室广东省广州市510405 暨南大学水生生物研究所广东省广州市510632 武汉大学医学院病理生理教研室湖北省武汉市430071

目的:观察对生物膜具有保护作用的携硒、锌、维生素E大豆磷脂脂质体对实验性大鼠心肌缺血损伤的影响。方法:实验于2002-06/2003-09在武汉大学医学院病理生理实验室完成。实验大鼠40只,单纯心肌缺血组10只、大豆磷脂脂质体保护组10只、... 详细信息

目的:观察对生物膜具有保护作用的携硒、锌、维生素E大豆磷脂脂质体对实验性大鼠心肌缺血损伤的影响。方法:实验于2002-06/2003-09在武汉大学医学院病理生理实验室完成。实验大鼠40只,单纯心肌缺血组10只、大豆磷脂脂质体保护组10只、携硒和锌及维生素E的大豆磷脂脂质体保护组10只,皮下注射异丙基肾上腺素30mg/kg,连续3d,制成心肌缺血模型;正常对照组10只不造模,注射等量的生理盐水。造模前大豆磷脂脂质体保护组灌服大豆磷脂脂质体(150mg/kg),携硒和锌及维生素E的大豆磷脂脂质体保护组大鼠灌服携硒、锌、维生素E的大豆磷脂脂质体20d,灌胃量为10μL/g,正常对照组、单纯心肌缺血组则灌服等量的生理盐水。检测大鼠血浆磷酸肌酸激酶活性采用生化法,检测心肌细胞凋亡率应用脱氧核糖核苷末端转移酶标记法,检测细胞凋亡相关基因Bcl-2及Bax表达应用免疫组织化学法。结果:进入结果分析实验大鼠40只。①血浆磷酸肌酸激酶活性:单纯心肌缺血组比正常对照组显著增强犤(4.4±0.8),(2.2±0.4)μkat/L,P<0.01犦。大豆磷脂脂质体保护组较单纯心肌缺血组明显降低犤(3.2±1.3)μkat/L,P<0.01犦,而携硒和锌及维生素E的大豆磷脂脂质体保护组也较单纯心肌缺血组显著降低犤(2.4±0.5)μkat/L,P<0.01犦,但两处理组之间无差异。②心肌细胞凋亡率:单纯心肌缺血组明显高于正常对照组犤(31.81±5.63)%,(3.59±1.35)%,P<0.01犦,大豆磷脂脂质体保护组及携硒和锌及维生素E的大豆磷脂脂质体保护组明显低于单纯心肌缺血组犤(19.91±4.03)%,(13.33±2.79)%,P<0.01犦,且后者减少缺血心肌细胞凋亡的效应明显高于单纯大豆磷脂脂质体处理组(P<0.05)。③心肌组织Bcl-2及Bax表达(吸光度值)的比较:单纯心肌缺血组均比正常对照组表达明显增多(0.302±0.017和0.281±0.011,0.304±0.013和0.253±0.011,P<0.01或0.05);大豆磷脂脂质体保护组较单纯心肌缺血组Bax蛋白表达明显减少(0.286±0.010,P<0.01),Bcl-2蛋白表达则明显增多(0.319±0.017,P<0.01);携硒和锌及维生素E的大豆磷脂脂质体保护组较大豆磷脂脂质体保护组Bcl-2蛋白表达明显增多(0.321±0.018,P<0.01),Bax表达明显减少(0.263±0.009,P<0.01)。结论:口服携硒、锌、维生素E大豆磷脂脂质体可通过保护细胞生物膜的作用,抑制心肌细胞凋亡而发挥保护心肌缺血损伤的效应。

关键词：硒锌维生素E 心肌缺血异丙肾上腺素细胞凋亡

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